秦皇島市人民醫(yī)院免疫組化技術(shù)考核一、單選題（每題2分，共20題）1.免疫組化技術(shù)中，用于固定組織樣本的最佳方法是？A.甲醛溶液B.乙醇溶液C.丙酮溶液D.戊二醛溶液2.在免疫組化染色中，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)通常使用哪種物質(zhì)？A.蛋白質(zhì)AB.牛血清白蛋白（BSA）C.免疫球蛋白GD.聚乙二醇3.以下哪種抗體在免疫組化中常用于檢測(cè)細(xì)胞增殖？A.CD3B.Ki-67C.CD20D.HER24.免疫組化中，若染色背景過強(qiáng)，可能的原因是？A.抗體濃度過高B.組織固定時(shí)間過長(zhǎng)C.封閉不充分D.所有以上選項(xiàng)均可能5.二抗的作用是？A.直接識(shí)別抗原B.結(jié)合一抗C.顯色D.固定組織6.免疫組化中，DAPI染色的主要用途是？A.染色細(xì)胞核B.染色細(xì)胞質(zhì)C.顯示血管結(jié)構(gòu)D.顯示細(xì)胞骨架7.以下哪種方法常用于提高免疫組化染色的特異性？A.升溫孵育B.降低抗體濃度C.使用多克隆抗體D.優(yōu)化抗原修復(fù)條件8.免疫組化中，若染色不均勻，可能的原因是？A.抗體稀釋比例不當(dāng)B.組織切片過厚C.孵育時(shí)間過長(zhǎng)D.所有以上選項(xiàng)均可能9.免疫組化中，熒光免疫組化（FISH）屬于哪種技術(shù)？A.免疫組化B.分子雜交C.電子顯微鏡技術(shù)D.流式細(xì)胞術(shù)10.免疫組化中，抗原修復(fù)的主要目的是？A.提高抗體結(jié)合效率B.減少背景染色C.保持組織結(jié)構(gòu)完整性D.所有以上選項(xiàng)均正確二、多選題（每題3分，共10題）1.免疫組化技術(shù)中，影響染色結(jié)果的因素包括？A.抗體質(zhì)量B.組織固定方法C.溫度控制D.顯色劑選擇2.免疫組化中，常用的顯色劑包括？A.DABB.HRPC.FITCD.BCIP/NBT3.免疫組化中，以下哪些情況會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果？A.抗體交叉反應(yīng)B.封閉不充分C.組織固定過度D.顯色時(shí)間過長(zhǎng)4.免疫組化中，以下哪些指標(biāo)可用于評(píng)估染色質(zhì)量？A.染色強(qiáng)度B.染色均勻性C.背景染色程度D.細(xì)胞形態(tài)完整性5.免疫組化中，常用的抗體類型包括？A.單克隆抗體B.多克隆抗體C.膠體金標(biāo)記抗體D.熒光標(biāo)記抗體6.免疫組化中，以下哪些方法可用于減少背景染色？A.優(yōu)化抗體稀釋比例B.使用封閉劑C.降低孵育溫度D.短時(shí)孵育7.免疫組化中，常用的組織固定劑包括？A.甲醛B.乙醇C.戊二醛D.丙酮8.免疫組化中，以下哪些情況會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果？A.抗體濃度過低B.組織固定不當(dāng)C.孵育時(shí)間過短D.抗原降解9.免疫組化中，熒光免疫組化（FISH）的優(yōu)勢(shì)包括？A.高靈敏度B.可檢測(cè)RNAC.可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)D.成本較低10.免疫組化中，以下哪些操作步驟需嚴(yán)格避光？A.顯色過程B.熒光抗體孵育C.封閉過程D.試劑配制三、判斷題（每題1分，共20題）1.免疫組化技術(shù)只能檢測(cè)蛋白質(zhì)。2.免疫組化中，抗原修復(fù)只是加熱處理。3.免疫組化中，熒光抗體比酶標(biāo)抗體更靈敏。4.免疫組化中，背景染色越少越好。5.免疫組化中，抗體稀釋比例越高，染色越強(qiáng)。6.免疫組化中，DAPI染色的主要用途是顯示細(xì)胞核。7.免疫組化中，抗原修復(fù)時(shí)間越長(zhǎng)越好。8.免疫組化中，熒光免疫組化（FISH）只能檢測(cè)DNA。9.免疫組化中，組織切片越薄，染色效果越好。10.免疫組化中，一抗和二抗不能同時(shí)使用。11.免疫組化中，封閉不充分會(huì)導(dǎo)致背景染色增強(qiáng)。12.免疫組化中，抗體交叉反應(yīng)只會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性。13.免疫組化中，HRP標(biāo)記的抗體需要氧化劑顯色。14.免疫組化中，熒光抗體孵育時(shí)需避光操作。15.免疫組化中，抗原修復(fù)只能使用熱修復(fù)法。16.免疫組化中，多克隆抗體比單克隆抗體特異性更高。17.免疫組化中，顯色時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致背景染色增強(qiáng)。18.免疫組化中，熒光免疫組化（FISH）只能檢測(cè)細(xì)胞核。19.免疫組化中，組織固定不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致抗原降解。20.免疫組化中，抗體稀釋比例過高會(huì)導(dǎo)致染色減弱。四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述免疫組化技術(shù)的基本原理。2.列舉三種減少免疫組化背景染色的方法。3.說明免疫組化中抗原修復(fù)的重要性。4.比較免疫組化與熒光免疫組化（FISH）的優(yōu)缺點(diǎn)。五、論述題（每題10分，共2題）1.結(jié)合秦皇島市人民醫(yī)院的實(shí)際工作場(chǎng)景，論述免疫組化技術(shù)在腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值。2.分析免疫組化技術(shù)中常見的問題，并提出相應(yīng)的解決措施。答案與解析一、單選題答案1.A（甲醛溶液是常用的固定劑，能更好地保存組織抗原性。）2.B（BSA可封閉非特異性位點(diǎn)，減少背景染色。）3.B（Ki-67是細(xì)胞增殖標(biāo)志物，常用于免疫組化檢測(cè)。）4.D（多種因素可能導(dǎo)致背景過強(qiáng)，需綜合排查。）5.B（二抗用于結(jié)合一抗，放大信號(hào)。）6.A（DAPI專一性染細(xì)胞核。）7.D（優(yōu)化抗原修復(fù)條件可提高特異性。）8.D（多種因素可能導(dǎo)致染色不均，需綜合排查。）9.B（FISH屬于分子雜交技術(shù)。）10.D（抗原修復(fù)需兼顧抗體結(jié)合和組織結(jié)構(gòu)。）二、多選題答案1.A、B、C、D（抗體質(zhì)量、組織固定、溫度、顯色劑均影響結(jié)果。）2.A、B、C（DAB、HRP、FITC是常用顯色劑。）3.A、B、C、D（多種因素可能導(dǎo)致假陽(yáng)性。）4.A、B、C、D（綜合評(píng)估染色質(zhì)量需考慮多個(gè)指標(biāo)。）5.A、B、C、D（單克隆、多克隆、膠體金、熒光抗體均常用。）6.A、B、C、D（多種方法可減少背景。）7.A、B、C、D（甲醛、乙醇、戊二醛、丙酮均常用。）8.A、B、C、D（多種因素可能導(dǎo)致假陰性。）9.A、C（FISH靈敏度高，可多靶點(diǎn)檢測(cè)。）10.B、D（熒光抗體孵育需避光，試劑配制需避光。）三、判斷題答案1.×（免疫組化也可檢測(cè)糖蛋白等。）2.×（抗原修復(fù)還包括酶修復(fù)等。）3.×（熒光抗體靈敏度取決于儀器，未必更高。）4.×（背景染色需適度，過低可能掩蓋信號(hào)。）5.×（過高可能抑制信號(hào)。）6.√7.×（過長(zhǎng)可能導(dǎo)致抗原降解。）8.×（FISH可檢測(cè)RNA。）9.×（過薄可能導(dǎo)致結(jié)構(gòu)破壞。）10.×（可同時(shí)使用。）11.√12.×（交叉反應(yīng)可導(dǎo)致假陰/陽(yáng)性。）13.√14.√15.×（還包括酶修復(fù)等。）16.×（單克隆特異性更高。）17.√18.×（FISH可檢測(cè)細(xì)胞核外結(jié)構(gòu)。）19.√20.√四、簡(jiǎn)答題答案1.免疫組化基本原理：利用抗體與特定抗原的特異性結(jié)合，通過標(biāo)記的二抗或酶顯色，在組織切片上定位抗原。2.減少背景染色方法：優(yōu)化抗體稀釋比例、使用封閉劑（BSA）、降低孵育溫度、短時(shí)孵育。3.抗原修復(fù)重要性：恢復(fù)或暴露抗原表位，提高抗體結(jié)合效率，是影響染色效果的關(guān)鍵步驟。4.免疫組化與FISH比較：-免疫組化：檢測(cè)蛋白質(zhì)，操作簡(jiǎn)便，成本較低，但特異性相對(duì)較低。-FISH：檢測(cè)核酸，靈敏度更高，可多靶點(diǎn)檢測(cè)，但操作復(fù)雜、成本高。五、論述題答案1.免疫組化在腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值：秦皇島市人民醫(yī)院腫瘤科常用免疫組化檢測(cè)標(biāo)志物（如HER2、Ki-67），輔助診斷、預(yù)后評(píng)估及指導(dǎo)靶向治療。例如，HER2陽(yáng)性乳