《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)》實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱

一、課程基本信息

課程代碼：B0411002

課程名稱(chēng)：醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)

課程性質(zhì)：專(zhuān)業(yè)必修課

適用專(zhuān)業(yè)和年級(jí)：五年制臨床醫(yī)學(xué)，四年制護(hù)理及公共事業(yè)專(zhuān)業(yè)（區(qū)內(nèi)，外）

開(kāi)課學(xué)期：秋季學(xué)期

課程總學(xué)時(shí)；45學(xué)時(shí)（理論；30學(xué)時(shí)；實(shí)臉；15學(xué)時(shí)）

課程簡(jiǎn)介：本課程針對(duì)醫(yī)學(xué)本科一年級(jí)的學(xué)生，開(kāi)設(shè)了顯微鏡的使用、細(xì)胞的生理、細(xì)胞的組織化學(xué)、細(xì)胞器的認(rèn)

識(shí)、細(xì)胞周期、細(xì)胞的培養(yǎng)和和染色體技術(shù)等一系列實(shí)驗(yàn)課程，使學(xué)生通過(guò)本課程的學(xué)習(xí)，掌握和了解細(xì)胞生物學(xué)

的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，提高實(shí)驗(yàn)技能，激發(fā)實(shí)驗(yàn)研究興趣，探索細(xì)胞生命活動(dòng)的本質(zhì)和基本規(guī)律，為本科生的其它醫(yī)學(xué)

課程學(xué)習(xí)以及將來(lái)的研究工作奠定良好的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。

推薦教材：

1.結(jié)合我校實(shí)際編寫(xiě)的《醫(yī)學(xué)細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（單行本）；

參考書(shū)目：

1.章靜波主編.《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)及習(xí)題集》.第1版.人民衛(wèi)生出版社2004年：

2.《西安交通人學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（單行本）

二、課程總目標(biāo)

《細(xì)胞牛.物學(xué)》既是生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科乂是前沿科學(xué)，它依理論知識(shí)都是以客觀的科學(xué)實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)，揭示細(xì)胞

生命活動(dòng)的規(guī)律，因而具有獨(dú)特的目的要求：

1、通過(guò)實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生了解細(xì)胞生物學(xué)知識(shí)和理論的由來(lái)，建立感性認(rèn)識(shí)，加深對(duì)理論知識(shí)的理解。

2、通過(guò)具體的實(shí)驗(yàn)操作，使學(xué)生r解細(xì)胞生物學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)方法和技能，鍛煉學(xué)生的動(dòng)手能力。

3、通過(guò)實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生觀察、比較、分析、綜合的科學(xué)思維能力以及獨(dú)立的工作能力和實(shí)事求是的科學(xué)作風(fēng)。

4、使學(xué)生掌握書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、生物繪圖、制衣等方面的基本知識(shí)。

5、培養(yǎng)良好的科學(xué)研究習(xí)慣和團(tuán)隊(duì)合作精神。

三、大綱內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)一動(dòng)物細(xì)胞基本形態(tài)和結(jié)構(gòu)的觀察

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1.掌握低倍鏡、高倍鏡的正確使用方法。

2.熟悉臨時(shí)裝片的制作方法。

3.了解普通顯微鏡構(gòu)造及成像原理。

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

1.細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的觀察：

2.制作人口腔粘膜上皮細(xì)胞（臨時(shí)裝片）：

【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】

1.普通光學(xué)顯微鏡

2.實(shí)驗(yàn)裝片（動(dòng)物細(xì)胞永久裝片等）

3我玻片

4.蓋玻片

5擦鏡紙

6鏡子

7吸管

8消毒牙簽

9吸水紙

10生理鹽水

11.教學(xué)投影儀及教學(xué)錄像資料

12.電腦

【作業(yè)】

1.撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，畫(huà)一個(gè)觀察到的動(dòng)物細(xì)胞簡(jiǎn)圖。

2.怎樣區(qū)分低倍、高倍和油鏡？

3.一般情況卜，使用高倍鏡時(shí)要用小調(diào)節(jié)器，為什么？當(dāng)小調(diào)節(jié)翳不能向上或向卜.轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)怎么辦？

形式：

填寫(xiě)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)；

實(shí)驗(yàn)二細(xì)胞化學(xué)

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1.掌握用細(xì)胞化學(xué)方法進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)DMA、RNA、酸性蛋白和堿性蛋R等生物大分子的定性和定位顯示技術(shù)與原理。

掌握螳蛛血涂片技術(shù)

2..熟悉細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的檢測(cè)方法

3.了解其他細(xì)胞化學(xué)知識(shí)

【實(shí)驗(yàn)原理】

1、蟾蛛紅細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白和堿性蛋白的顯示

蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸，它們同時(shí)具有氨基和粉基（在溶液中主要以一陽(yáng)一-C00式存在），

而自由氨基和按基的游離取決于溶液的閉值，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于酸性溶液時(shí)，由于該溶液中正離子（1「）多，

從而抑制蛋白質(zhì)中的C00H電離，于是造成蛋白質(zhì)帶正電荷多：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于堿性溶液時(shí)，由于該溶液中

負(fù)離子（0H）多，從而促使蛋白質(zhì)中的C00H都電離成C00,于是造成蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷多；當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于

某一種pH溶液時(shí)，它恰好帶有相等的正負(fù)電荷（呈兼性離子）。此時(shí)的pH值稱(chēng)為等電點(diǎn)（pL）,由于蛋白質(zhì)

除了末端氨基和末端竣基之外，還具有許多側(cè)鏈，其上的許多基團(tuán)在溶液中也都可以電離，因此，一個(gè)蛋

白質(zhì)分子表面四周都有電荷。不同蛋白質(zhì)分子所帶有的堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)的數(shù)量不等，故它們的筆電點(diǎn)

也不一樣。因此蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷取決于：（1）分子中堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)含量。（2）所處溶液的

川位，如在生理?xiàng)l件下，整個(gè)蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷多。為酸性蛋白質(zhì)（等電點(diǎn)偏向酸性）：帶正電荷多，為堿

性蛋白質(zhì)（等電點(diǎn)偏向堿性）。據(jù)此，可將標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處埋后，用不同pH的固綠染液（?種弱酸性染

料，本身帶負(fù)電荷）予以染色，可分別顯示細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白。

2、細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的顯示

細(xì)胞經(jīng)甲基綠一哌洛寧染液處理后，其中DYA和RNA出現(xiàn)不同的呈色反應(yīng)（Brachef反應(yīng)），一般認(rèn)

為這是由于帶有陰電荷的核酸叮堿性染料哌洛寧及甲基綠具有不同的親和力而進(jìn)行選擇性染色。甲基綠可

使聚合程度較高的DNA染成藍(lán)綠色，而哌洛寧與聚合程度較低的RNA結(jié)合，呈淺紅色，因此可達(dá)到對(duì)細(xì)胞

內(nèi)的DNA與RNA進(jìn)行定位定性分析。

3、液泡系的活體染色觀察（選做，充分利用蟾蛛）

在動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，凡是由膜所包圍的小泡和液泡除線粒體外都居于液泡系，包括高爾基器、溶醯體、微體、消化

泡、自噬小體、殘?bào)w、胞飲液泡和吞噬泡，都是由一層單位膜包圍而成。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)

的高爾基復(fù)合體，能合成與分泌軟骨粘蛋白及膠原纖維等，因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅是液泡系特殊的活體染色劑，

只將液泡系染成紅色，在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí)，細(xì)胞質(zhì)及核不被雜色，中他紅染色可能與液泡中的蛋白有關(guān).

【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】

1.顯微鏡

2.餃子剪子載玻片

3.70%乙醇5/三氯醋酸

4.0.1%酸性固綠染液(1/150NHC1pH=2.0-2.5)

5.0.1%堿性固綠染液(0.025%Na2C03,pll=8.0-8.5)

6.染色瑞皿

7.水浴箱

8.甲基綠-哌羅寧混合液

9.純丙酮

10.螭蛛

11.吸管

12.Ringer試液

13.1/3000中性紅等

【實(shí)驗(yàn)步驟】

1、螭蛛紅細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白和堿性蛋白的顯示

1.1操作：取材制片-同定一三氯醋酸處理一染色和鏡檢

1.2結(jié)果觀察

用pH2.0-2.5酸性固綠染液染色結(jié)果，整個(gè)細(xì)胞質(zhì)和核仁中蛋白質(zhì)均被染成綠色，此即酸性

蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布，而胞核中染色質(zhì)并不染上色(但時(shí)間太長(zhǎng)可能染上色)。用pH8.0—8.5堿性固綠

染液染色結(jié)果，只有細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)被染綠色，此即堿性蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布，而胞質(zhì)及核仁并不染

色。

2.細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的顯示

2.1操作：制作血涂片同定一染色和鏡檢

2.2結(jié)果觀察：細(xì)胞質(zhì)被桀成淺紅色，細(xì)胞核被染成藍(lán)綠色，而其中核仁被染成紫紅色。

3、液泡系的活體染色觀娶(選做，充分利用蝠蛛)

3.1步驟：取材一染色一沖洗一觀察

3.2結(jié)果觀察：顯微鏡二觀察，可見(jiàn)軟骨細(xì)胞為橢圓形，如胞核周圖有許多染成玫瑰紅色。大小不

一的小泡，即軟骨細(xì)胞液泡系。

【注意事項(xiàng)】

1.嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟操作；

【作業(yè)】

作業(yè)內(nèi)容：

1.撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，用鉛筆繪出Brachcf反應(yīng)的鏡下所見(jiàn)。

2.說(shuō)明著色的堿性蛋白可能是什么物質(zhì)？

形式：

紙質(zhì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

實(shí)驗(yàn)三細(xì)胞膜的生理

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1.掌握對(duì)細(xì)胞膜吞噬活動(dòng)和通透性的觀察，掌握細(xì)胞膜的牛.理特性

2.熟悉觀察細(xì)胞生理的一般方法

3.了解細(xì)胞吞噬運(yùn)動(dòng)

【實(shí)驗(yàn)原理】

1.吞噬運(yùn)動(dòng)

大小兩類(lèi)吞噬細(xì)胞（即巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞），專(zhuān)司吞噬作用，成為非特異免疫功能的重要組成

部分。巨噬細(xì)胞由骨髓干細(xì)胞分化生成，然后進(jìn)入血液到達(dá)各組織內(nèi)，并進(jìn)一步分化為各種巨噬細(xì)胞。當(dāng)

病原微生物或其它異物侵入機(jī)體時(shí)，能招引巨噬細(xì)胞，而巨噬細(xì)胞乂有趨化性，能響應(yīng)招引因子的招引，

產(chǎn)生活躍的變形運(yùn)動(dòng)，主動(dòng)向病原體和異物移行，在接觸到病原體或異物時(shí)，即伸出偽足，將之包國(guó)并內(nèi)

吞入胞質(zhì)，形成吞噬泡，繼而細(xì)胞質(zhì)中的初級(jí)溶酶體與吞噬泡發(fā)生融合，形成吞噬溶雨體，通過(guò)其中水解

酹等作用將病原體殺死，消化分解，最后將不能消化的殘?jiān)懦黾?xì)胞外。

2、溶血作用與紅細(xì)胞的通透性實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障.它是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)

胞。各種物質(zhì)出入細(xì)胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶劑，水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透

壓低的一側(cè)通過(guò)細(xì)胞膜向滲透壓高的一側(cè)擴(kuò)散，這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。

將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞及破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明

的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這種現(xiàn)象稱(chēng)為溶血’將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于

紅細(xì)胞膜對(duì)各種溶質(zhì)的通透性不同，膜兩側(cè)的滲透壓平衡會(huì)發(fā)生改變，也會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象。因此，發(fā)生溶

血現(xiàn)象所需時(shí)間長(zhǎng)短可作為測(cè)量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo),本實(shí)驗(yàn)選用紅細(xì)胞作為細(xì)胞膜透性的實(shí)

驗(yàn)材料，將其放入不同的介質(zhì)溶液中，觀察紅細(xì)胞的變化。

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

I.吞噬運(yùn)動(dòng)

1.1.小白鼠預(yù)處理一小白鼠注射1%雞紅細(xì)胞懸液1ml一處死小鼠一取小鼠腹腔液一制片觀察

1.2結(jié)果

調(diào)節(jié)集光器使顯微鏡視野中光線稍暗些。在高倍鏡下，先分辨清雞紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。雞紇細(xì)胞

是一些淡黃色、橢圓形有核的細(xì)胞；而數(shù)量較多，較大的圓形或不規(guī)則的細(xì)胞，其表面具有許多似刺

毛狀的小突起（偽足），胞質(zhì)中含有數(shù)量不等的藍(lán)色顆粒（為吞入的含臺(tái)盼藍(lán)的淀粉肉湯形成的吞噬

泡），即為巨噬細(xì)胞.慢慢移動(dòng)玻片標(biāo)本，仔細(xì)觀察巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的過(guò)程。可見(jiàn)有的雞紅細(xì)

胞（1-多個(gè)）緊附于巨噬湘胞表面；有的巨噬細(xì)胞已將I?數(shù)個(gè)紅細(xì)胞部分吞入；有的巨噬細(xì)胞已吞入

1個(gè)或幾個(gè)紅細(xì)胞在胞質(zhì)中剛形成橢圓形的吞噬泡：有的巨噬細(xì)胞內(nèi)的吞噬泡體積縮小，并呈圓形，

這是已與初級(jí)溶解體發(fā)生融合，泡內(nèi)物正在被消化分解。

2、溶血作用與紅細(xì)胞的通透性實(shí)驗(yàn)

2.1操作

取血保存一配30%的雞紅細(xì)胞（CRBC）懸液一取11支試管，按附表中所示測(cè)試溶液，分別取樣

各3m],作出標(biāo)記后，各管均加入紅細(xì)胞懸液2滴一觀察

2.2結(jié)果

2.2.1試管內(nèi)液體分兩層：上層淺黃色透明，下層紅色不透明為不溶血（一），鏡檢紅細(xì)胞完好呈

雙凹盤(pán)狀。

2.2.2如果試管內(nèi)液體混濁，上層帶紅色者，稱(chēng)不完全溶血（+或++），鏡檢有部分紅細(xì)胞呈碎

片。

2.2.3如果試管內(nèi)液體變紅而透明者，稱(chēng)完全溶血（+++）,鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部呈碎片。

【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】

1.雞血細(xì)胞

2.普通顯微鏡、

3.普通離心機(jī)

4.扭力天平

5.10ml試管

6.10ml刻度離心管

7.試管架

8.2nli注射器（無(wú)需針頭）或5ml移液管

9.洗耳球

10.滴管

11.載玻片

12.擦鏡紙

13.記號(hào)筆

14.解剖盤(pán)

15.螞刀

16.鏡子

17.載玻片

18.蓋玻片

19.注射器

20.吸管

21.吸水紙

22.小白鼠

試劑一

1.0.85%生理鹽水

2.4%臺(tái)盼藍(lán)染液

3.6%淀粉肉湯（含臺(tái)盼藍(lán)染液）

4.1%雞紅細(xì)胞懸液

試劑二

1.A1sever溶液

2.0.128mol/LNaCl溶液

3.0.05mol/LNaCl溶液

4.0.4mol/LNaCl溶液

5.0.128mol/LNH4C1溶液

6.0.128mol/LNHiAC溶液

7.0.128mol/LNaN8溶液

8.0.32mol/L葡萄糖

9.0.32mol/L甘油

10.0.32mol/L乙醇

11.0.32mol/L丙酮

12.蒸鐳水

【注意事項(xiàng)】

1.雞血在離心時(shí)，試管均需在扭力天平上平衡。

2.目測(cè)紅細(xì)胞體積或置于帶刻度的離心管中，加入生理鹽水配成30%的紅細(xì)胞懸液。

3.試管中有紅細(xì)胞和測(cè)試溶液時(shí)，不應(yīng)強(qiáng)力搖晃，以免造成人為的紅細(xì)胞破裂.

【作業(yè)】

作業(yè)內(nèi)容：

1在高倍鏡下繪出處在不同吞噬階段的巨噬細(xì)胞圖各一個(gè)（如雞紅細(xì)胞附于巨噬細(xì)胞表面、部分吞入

紅細(xì)胞、吞入形成吞噬泡和吞噬泡已開(kāi)始被消化分解等），示吞噬過(guò)程。

2將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄下表

試管編是否發(fā)生溶血現(xiàn)

試劑種類(lèi)溶血時(shí)間結(jié)果分析

號(hào)象

11120

20.17Mol氯化鈉

30.17Mol氯化鉉

40.17Mol硝酸鈉

50.12Mol硫松鈉

60.12Mol草酸核

70.17Mol醋酸鉉

80.32Mol葡萄糖

90.32Vol乙醇

100.32Mol丙醇

110.32Mol丙三醇

形式：

填寫(xiě)在報(bào)告上，隨堂檢查

實(shí)驗(yàn)四細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器的觀察

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1掌握細(xì)胞骨架的光鏡臨時(shí)裝片標(biāo)本的制作方法.

2掌握光鏡下動(dòng)物細(xì)胞器的形態(tài)特征。

3.掌握細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)特征

4.熟悉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)電鏡照片的識(shí)別。

5.了解電子顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)原理。

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

1、.細(xì)胞骨架的觀察

1.1步驟

取材一去垢處理一沖洗一固定一沖洗一染色一制片一觀察

1.2結(jié)果

顯微鏡下，可見(jiàn)口腔上皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有被染成藍(lán)色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，即為細(xì)胞骨架，結(jié)構(gòu)清晰。

2、其它細(xì)胞器的觀察：

2.1高爾基體的觀察（貓神經(jīng)節(jié)切片）

2.2線粒體的觀察（鼠肝切片）

2.3中心體的觀察（馬蛔以子宮切片）

3、細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)

細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)指在電子顯微鏡下呈現(xiàn)的細(xì)胞內(nèi)小于0.2um的細(xì)微結(jié)構(gòu)。本實(shí)驗(yàn)主要是通過(guò)電境照

片、幻燈片，分析和識(shí)別細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)特點(diǎn)。觀看細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的多媒體照片。

3.1細(xì)胞膜

3.2內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

3.3線粒體

3.4高爾基體復(fù)合體

3.5溶酶體

3.6中心粒

3.7核糖體

3.8細(xì)胞骨架

3.9核仁

3.10核膜和核孔

3.11染色質(zhì)

【主要實(shí)驗(yàn)儀器叮器材】

1.普通光學(xué)顯微鏡

2.實(shí)驗(yàn)裝片（鼠肝切產(chǎn)、貓神經(jīng)節(jié)切片、馬蛔蟲(chóng)子宮切片等永久切片）

3.教學(xué)投影儀及教學(xué)錄像資料

4.電腦

5.載玻片

6.吸水紙

7.吸管

8.鍍子

9.剪刀

10.試管

11.表面皿

12.滴管

13.消毒牙簽

14.M緩沖液

15.1%TritonX-100-PBS

16.0.2%考馬斯亮旅

17.生理鹽水

18.試管

19.3%戊二醛

20.PBS

21.水浴箱

【注意事項(xiàng)】

嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

【作業(yè)】

作業(yè)內(nèi)容：

1、動(dòng)物超微結(jié)構(gòu)的范圍是什么？

形式：

隨堂提問(wèn)

實(shí)驗(yàn)五細(xì)胞的有絲分裂和減數(shù)分裂

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1掌握動(dòng)、植物細(xì)胞行絲分裂各期的主要特征。

2掌握蝗蟲(chóng)精巢壓片，掌握減數(shù)分裂各期的主要形態(tài)特征

3.了解動(dòng)物細(xì)胞無(wú)絲分裂的形態(tài)特征。

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

1、動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂各期的觀察

細(xì)胞周期：指細(xì)胞從第一次分裂結(jié)束產(chǎn)生新細(xì)胞到第二次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過(guò)程，分為間

期與分裂期兩個(gè)階段。有絲分裂：真核細(xì)胞的染色質(zhì)凝集成染色體、復(fù)制的姐妹染色單體在紡池絲

的牽拉下分向兩極，從而產(chǎn)生兩個(gè)染色體數(shù)和遺傳性相同的子細(xì)胞核的一種細(xì)胞分裂類(lèi)型。通常劃分

為前期、前中期、中期、后期和末期五個(gè)階段。

2.植物細(xì)胞有絲分裂的觀察（示教）

3.無(wú)絲分裂的觀察（示教）

4、觀察各個(gè)發(fā)育時(shí)期生殖細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)

性細(xì)胞分裂時(shí)，染色體只復(fù)制一次，細(xì)胞連續(xù)分裂兩次，染色體數(shù)目減半的一種特殊分裂方式。減數(shù)

分裂不僅是保證物種染色體數(shù)目穩(wěn)定的機(jī)制，而且也是物種適應(yīng)環(huán)境變化不斷進(jìn)化的機(jī)制。

4.1精原細(xì)胞

4.2初級(jí)精母細(xì)胞

4.3次級(jí)精母細(xì)胞、精細(xì)胞：第一次成熟分裂和第二次成熟分裂

4.4精子：經(jīng)過(guò)變形期形成精子，精子可分為頭、中段和尾三部分

【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】

1.顯微鏡

2.永久裝片（有絲分裂、減數(shù)分裂）

3.擦鏡紙

4.電腦

5.投影儀

6.教學(xué)錄像資料

【作業(yè)】

作業(yè)內(nèi)容：

1.有絲分裂和減數(shù)分裂的異同點(diǎn)？

形式：

隨堂提問(wèn)

實(shí)驗(yàn)六細(xì)胞培養(yǎng)（選做）

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1.掌握細(xì)胞凋亡特點(diǎn)

2.了解細(xì)胞培養(yǎng)的一般方法

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

1、細(xì)胞培養(yǎng)步驟和注意事項(xiàng)（錄像）

了解原代細(xì)胞培養(yǎng)的一般方法和步驟及培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌操作技術(shù)，原代培養(yǎng)細(xì)胞的觀察方法。了

解細(xì)胞凍存的方法。

2、細(xì)胞凋亡.的過(guò)程和特點(diǎn)（錄像）

2.1細(xì)胞凋亡的過(guò)程：自然狀態(tài)下，細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過(guò)程口L凋亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同。正常

機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞，無(wú)論生長(zhǎng)、分裂或分化，還是凋亡都在機(jī)體的精確調(diào)控之中。

2.2細(xì)胞凋亡的特點(diǎn)：細(xì)胞變圓，染色質(zhì)凝聚、分塊，胞質(zhì)皺縮。之后整個(gè)細(xì)胞通過(guò)發(fā)芽、起泡等方式

形成一些球形的突起，并在其基部絞斷而脫落形成大小不等內(nèi)含胞質(zhì)、細(xì)胞器及核碎片的凋亡小體，

然后被周?chē)?xì)胞吞噬。其他特征：1由基因控制：2不引遠(yuǎn)炎癥；3質(zhì)膜不破裂：4染色質(zhì)

DNA的有控裂解。

3.觀察永久切片

【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】

1.顯微鏡

2.永久裝片（細(xì)胞凋亡）

3.擦鏡紙

4.電腦

5.投賬儀

6.教學(xué)錄像資料

【作業(yè)】

作業(yè)內(nèi)容：

1、凋亡細(xì)胞的特點(diǎn)是什么？

形式：

隨堂提問(wèn)

實(shí)驗(yàn)七染色體的制備（選做）

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?/p>

1了解人體外周血培養(yǎng)和染色體標(biāo)本的制備技術(shù)。

2熟悉小白鼠細(xì)胞染色體制作方法和觀察小白鼠染色體的形態(tài)和數(shù)EI.

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

1、了解人體外周血培養(yǎng)和染色體標(biāo)本的制備技術(shù)（錄像）

2、學(xué)習(xí)小白鼠細(xì)胞染色體制作方法和觀察小白鼠染色體的形態(tài)和數(shù)目

2.1步驟：處死小鼠-取股骨-剪去骨兩端少許-用注射器注射PBS入骨髓腔-收集骨髓-制作小白鼠細(xì)胞染色體玻片

2.2結(jié)果觀察：在顯微鏡觀察小白鼠染色體的形態(tài)和數(shù)目

［主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材］

1.小白鼠

2.注射瓶（1ml,5ml）

3.剪刀

4.鐐子

5.玻璃吸管

6.10ml刻度的離心管

7.離心機(jī)

8.我玻片

9.蓋玻片

10.顯微鏡

11.濾紙

12.擦鏡紙

13.紗布

14.恒溫水浴鍋

15.0.01%秋水仙素

16.0.075MKC1

17.固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）

18.2%檸檬酸鈉

19.Giemsa染液

【注意事項(xiàng)】

記數(shù)染色體時(shí)觀察細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)為：

1.細(xì)胞完整，輪廓清晰，染色體分布在同一水平面上。

2.染色體形態(tài)和分布良好，計(jì)數(shù)為40條。

3.最好無(wú)重疊，即使有個(gè)別亙疊，也要能明確辯認(rèn)，以免差錯(cuò)。

4.所觀察的細(xì)胞處于同一有絲分裂階段，即染色體螺旋化程度或染色體長(zhǎng)短大致一樣。在所觀察的細(xì)胞周?chē)瑳](méi)有離

散的單個(gè)或多個(gè)染色體存在，以免影響計(jì)數(shù)。

【作業(yè)】

作業(yè)內(nèi)容：

1小鼠的染色體為多少條？

2撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，繪出公鼠的染色體簡(jiǎn)圖。

形式：

書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

四、主要實(shí)驗(yàn)教材（指導(dǎo)書(shū)）及參考用書(shū)

.主要實(shí)驗(yàn)教材：

1.自編的《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（單行本）

參考用書(shū)；

1.章靜波主編.《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)》.第4版.北京.人民衛(wèi)生出版社.

2.章靜波主編.《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)及習(xí)題集》.第4版..北京.人民衛(wèi)生出版社.

備注：授課結(jié)束后，明確以下內(nèi)容

五、考核方式及成績(jī)?cè)u(píng)定

本課程采用平時(shí)考核、期末適量筆試來(lái)綜合評(píng)定學(xué)生的實(shí)驗(yàn)成績(jī)，著重考查學(xué)生對(duì)基本實(shí)驗(yàn)技能的掌

握程度（尤其是對(duì)普通光學(xué)顯微鏡的應(yīng)用能力）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)癰度、靈活運(yùn)用所學(xué)知識(shí)技能分析表達(dá)的

能力。平時(shí)考核主要體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。教師也可當(dāng)堂對(duì)某個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行考核，對(duì)于操作得當(dāng)、觀察認(rèn)真和

實(shí)驗(yàn)結(jié)果優(yōu)良的學(xué)生還可以給予加分鼓勵(lì)（一般是加570分，累加計(jì)入當(dāng)次實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)中）。實(shí)驗(yàn)報(bào)

告的成績(jī)實(shí)行Ef分制，每次成績(jī)都