1T/5115YBAPSXX-2025仙茅組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了仙茅組織培養(yǎng)育苗技術(shù)的術(shù)語(yǔ)和定義、外植體采集與消毒、培養(yǎng)基配制、培養(yǎng)程序、煉苗與移栽、出圃、生產(chǎn)建檔。本文件適用于宜賓市仙茅組織培養(yǎng)育苗。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1仙茅CurculigoorchioidesGaertn.石蒜科仙茅屬多年生草本植物，根狀莖圓柱狀，直生；葉線形或披針形，兩面有柔毛或無(wú)毛；花莖長(zhǎng)6cm～7cm，被柔毛；花黃色，花被片長(zhǎng)圓狀披針形，子房窄長(zhǎng)，附著有疏毛；漿果近紡錘狀?；ü?月～9月。3.2外植體explant從鮮活健壯植株上獲取的用于植物組織培養(yǎng)的組織或器官。4外植體采集與消毒4.1外植體采集需在連續(xù)3d晴天后，剪取葉片表面無(wú)露水、生長(zhǎng)健壯且無(wú)病蟲害的仙茅幼嫩葉片。4.2外植體消毒4.2.1表面清潔2T/5115XXX0XX—2025用肥皂液清洗葉片表面的泥土和雜質(zhì)，流水沖洗1h~2h。4.2.2消毒外植體消毒按以下步驟進(jìn)行：a)在超凈工作臺(tái)上，用無(wú)菌水洗凈外植體浮水，75%酒精浸泡30s，無(wú)菌水沖洗3次～5次；b)將外植體轉(zhuǎn)移至0.1%的升汞溶液中浸泡5min~10min，如有氣泡需要攪拌，無(wú)菌水沖洗5次～7次；c)用無(wú)菌濾紙吸干外植體表面水分備用。5培養(yǎng)基配制5.1培養(yǎng)基配方5.1.1誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA0.2mg/L～1.5mg/L+NAA0.2mg/L~0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.5g/L，pH值5.8。5.1.2增殖分化培養(yǎng)基MS+6-BA0mg/L～0.5mg/L+NAA0mg/L~0.2mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.5g/L，pH值5.8。5.1.3生根培養(yǎng)基MS+NAA0mg/L～0.3mg/L+活性炭1g/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.5g/L，pH值5.8。5.2培養(yǎng)基滅菌按5.1配置溶液，分裝至組培瓶中，每瓶倒入液體約2cm～3cm厚，置于高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)滅菌，121℃滅菌20min。5.3培養(yǎng)基保存滅菌后的培養(yǎng)基放入接種室，應(yīng)避免陽(yáng)光直射，在18℃~25℃條件下存放。6培養(yǎng)程序6.1誘導(dǎo)培養(yǎng)在超凈工作臺(tái)上將消毒好的仙茅葉片剪切成1cm左右的小段，平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，材料充分接觸培養(yǎng)基，均勻分布。接種后放入培養(yǎng)室培養(yǎng)，培養(yǎng)30d~40d后能形成愈傷組織和少量不定苗。6.2增殖分化培養(yǎng)將形成的愈傷組織剪切成0.5cm2左右的小塊接種至增殖分化培養(yǎng)基，均勻分布。接種后放入培養(yǎng)室培養(yǎng)，誘導(dǎo)形成不定苗。培養(yǎng)周期為30d~40d。6.3生根培養(yǎng)將培養(yǎng)得到的叢生苗剪切成單苗接種至生根培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)生根。培養(yǎng)周期為30d左右。由生根培養(yǎng)后得到的仙茅完整植株一部分用于煉苗移栽，一部分可用于組培擴(kuò)繁的無(wú)菌外植體材料。T/5115YBAPSXX-202536.4接種操作接種過(guò)程中應(yīng)做到無(wú)菌操作，減少材料污染，具體步驟參照NY/T2306中10規(guī)定執(zhí)行。6.5培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度（25±1）℃,相對(duì)濕度65%～70%，光照強(qiáng)度1100lx～1200lx，光照時(shí)間12h。應(yīng)定期清潔培養(yǎng)室，及時(shí)清除污染材料。7煉苗與移栽7.1煉苗當(dāng)植株生長(zhǎng)健壯，苗高10cm以上、有根3根以上可進(jìn)行煉苗。將組培瓶瓶口打開，放置在培養(yǎng)室中2d～3d，然后再將敞口組培瓶放于移栽棚內(nèi)煉苗2d～3d，期間保持瓶?jī)?nèi)濕潤(rùn)，避免高溫和強(qiáng)光直射灼燒瓶苗。7.2移栽7.2.1基質(zhì)配制以泥炭土、壤土、珍珠巖配比為1:1混合作為移栽基質(zhì)，移植前2d對(duì)基質(zhì)用50%的多菌靈可濕性粉劑1000倍液淋透殺菌。7.2.2洗苗取出瓶苗，用清水將根系處培養(yǎng)基洗凈。7.2.3移栽方式于春秋兩季進(jìn)行移栽，移栽株行距為（5cm～10cm）×10cm，栽后澆透水。7.3苗期管理7.3.1遮蔭搭建遮蔭棚，透光率為40%～50%，秋冬季可揭開遮陰棚。7.3.2水份管理保持苗床濕潤(rùn)，視情況澆水，雨季注意排澇。7.3.3施肥管理瓶苗移栽后15d左右施薄肥，每隔10d左右用0.1%復(fù)合肥（N2-P2O5-K2O=15-15-15）水溶液噴施；移植60d左右，采用0.3%（N2-P2O5-K2O=15-15-15）水溶液噴施，每15d左右1次。肥料使用應(yīng)符合NY/T496要求。7.3.4病蟲害防治常見黑斑病，采用75%百菌清600倍液或65%代森錳鋅500倍液交替使用，每15d噴施1次。偶有地下害蟲啃食幼苗，發(fā)現(xiàn)蟲害后用90%晶體敵百蟲500倍液澆灌，或2.5%氯氟氰菊酯乳油1500倍～2000倍液噴施。T/