1抗雞球蟲(chóng)中藥制劑藥效評(píng)價(jià)規(guī)范GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和《中華人民共和國(guó)獸藥典》2015年版二部（收載球蟲(chóng)散等抗球蟲(chóng)中藥制劑（traditionalChinesemedi治疾病的制劑。在本文件中特指用于防治雞球4符號(hào)和縮略語(yǔ)OPG：卵囊數(shù)量（oocystspergram）;LS：腸道病變記分（LesionScore）;ACI：抗球蟲(chóng)指數(shù)（AnticoccidialIndex）;4.1主要技術(shù)內(nèi)容4.1.1基礎(chǔ)試驗(yàn)要求4.1.1.1試驗(yàn)動(dòng)物規(guī)定試驗(yàn)所用雞只應(yīng)品種統(tǒng)一、來(lái)源明確、健康狀況良好。選擇對(duì)球蟲(chóng)易），有試驗(yàn)雞只應(yīng)在相同的標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)條件下飼養(yǎng)，以盡量減少環(huán)境因素對(duì)試驗(yàn)的干24.1.1.2雞球蟲(chóng)感染模型采用統(tǒng)一的方法建立雞球蟲(chóng)病感染模型。推薦選擇雞艾美耳球蟲(chóng)中具有代表性的致病性球蟲(chóng)蟲(chóng)株（如柔嫩艾美耳球蟲(chóng)Eimeriatenella等）制備孢子化卵囊備用。按照標(biāo)準(zhǔn)方法培通過(guò)以上措施建立穩(wěn)定的球蟲(chóng)感染模型：感染對(duì)照組應(yīng)在攻蟲(chóng)后4～7天內(nèi)出現(xiàn)明顯的臨4.1.1.3試驗(yàn)分組規(guī)定隨機(jī)化原則、對(duì)照組設(shè)置（至少包括健康對(duì)照組、感染不給藥對(duì)照組、受試），組合藥物商品名建議用途地克珠利DiclazurilPremix中藥制劑陽(yáng)性對(duì)照組首選尼卡巴嗪+馬杜拉霉素銨Nicarbazin+Maduramicin復(fù)方對(duì)照，可增強(qiáng)抗球蟲(chóng)譜氨丙啉+磺胺類Amprolium+Sulfaquinoxaline常用于急性治療組設(shè)置4.1.1.4給藥方案明確受試中藥制劑的給藥程序。包括給藥劑量的確定（應(yīng)包含制劑計(jì)劃用于臨床4.1.2評(píng)價(jià)指標(biāo)4.1.2.1抗雞球蟲(chóng)效果（1）卵囊排出情況通過(guò)檢測(cè)雞球蟲(chóng)卵囊數(shù)量變化來(lái)評(píng)價(jià)。包括感染后不同時(shí)間點(diǎn)（如感染后第5-8（3）抗球蟲(chóng)指數(shù)(AnticoccidialIndex,ACI)(相對(duì)增4.1.2.2對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響（1）體重增長(zhǎng)情況：定期測(cè)量各組雞只體重（如每2天稱重一次），計(jì)算整個(gè)試與感染對(duì)照組的相對(duì)增重率，可判斷制劑在多大3（2）飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）：記錄試驗(yàn)期間各組飼料消耗總量和體重增重總量，計(jì)算每增長(zhǎng)1公斤于感染對(duì)照組并接近健康對(duì)照組水平，說(shuō)明制劑改善接近100%，感染對(duì)照組由于球蟲(chóng)致病作用可能出現(xiàn)一定死亡。若受試制劑組存活率明顯高于感染對(duì)照4.1.2.3腸道損傷修復(fù)作用通該指標(biāo)用4.1.2.4安全性觀察并記錄試驗(yàn)動(dòng)物在使用制劑過(guò)程中的健康狀況及不良反應(yīng)，以評(píng)估制劑的安全4.1.3評(píng)價(jià)方法4.1.3.1樣本采集與處理按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)規(guī)定的時(shí)間點(diǎn)從各組采集所需樣本。對(duì)于糞便樣本，應(yīng)在感4.1.3.2卵囊檢測(cè)采用病原學(xué)檢查方法，如卵囊的鏡檢、計(jì)數(shù)等。使用顯微鏡對(duì)處理后的樣本進(jìn)行4.1.3.3生長(zhǎng)性能監(jiān)測(cè)定期對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物據(jù)此計(jì)算各階段增重、相對(duì)增重率和FCR等生長(zhǎng)性能指標(biāo)，監(jiān)控球蟲(chóng)感染對(duì)生長(zhǎng)的影響及受4.1.3.4腸道病變?cè)u(píng)分在試驗(yàn)預(yù)定的剖檢時(shí)間點(diǎn)，對(duì)各組試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行剖檢檢查腸道。根據(jù)選定的4.1.3.5安全性觀察整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，每日觀察記錄動(dòng)物的精神狀態(tài)、飲食攝入、糞便情況等一般束時(shí)，通過(guò)臨床病理學(xué)檢查（血常規(guī)、生化）和組織病理檢查進(jìn)一步評(píng)估制劑的安全性。4.1.4結(jié)果判定球蟲(chóng)效果。參考范圍：ACI<120為無(wú)效；120≤ACI<160為低效；160≤ACI<180為中效；ACI≥180對(duì)照組進(jìn)行比較，以評(píng)估受試制劑相對(duì)于現(xiàn)有化學(xué)藥物的相對(duì)療效水平和臨床實(shí)用價(jià)值。4以及陽(yáng)性對(duì)照組〔若有〕）在增重、相對(duì)增重率、FCR等生長(zhǎng)指標(biāo)上的差異，判斷受照組無(wú)顯著差異，則表明制劑對(duì)生長(zhǎng)性能無(wú)4.1.4.3腸道損傷修復(fù)判定根據(jù)腸道病變?cè)u(píng)分進(jìn)行判定。如果受試藥物組的腸道病變平均評(píng)分顯著4.1.4.4安全性判定綜合分析整個(gè)試驗(yàn)期間記錄的動(dòng)物健康數(shù)據(jù)和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的檢查結(jié)果，對(duì)制劑），5料中以約1mg/kg（即1ppm）劑量混飼使用，可有效預(yù)防和治療雞球蟲(chóng)病。由常將其與飼料充分拌勻后投喂。需注意連續(xù)用藥時(shí)應(yīng)嚴(yán)格拌料均勻，并考慮輪換用藥以防耐免疫機(jī)能。實(shí)際應(yīng)用中，含0.5%有效成分的地克珠利預(yù)混劑可按每噸飼料添加2相當(dāng)于飼料中有效藥物濃度約1mg/kg（即1ppm）[1,2]。由于地克珠利難溶于水，因此一般采用拌料方性對(duì)照，例如氯苯胍（克球粉）在球蟲(chóng)疫苗評(píng)價(jià)中常作為挑戰(zhàn)注：在某些研究中，也可考慮采用具明確抗球蟲(chóng)活性的中藥提取物單體作為參考對(duì)照，如常山堿A.2其他化藥組合為陽(yáng)性對(duì)照。例如：“尼卡巴嗤+馬杜拉霉素銨”復(fù)方預(yù)混劑就是臨床上加強(qiáng)防控多種球常用方案。其中尼卡巴嗤（Nicarbazin）通常按100～125mg/kg飼料的劑量添加，馬杜拉霉素銨（MaduramicinAmmoni可顯著降低球蟲(chóng)卵囊排出并提高抗球蟲(chóng)指數(shù)。又如在球蟲(chóng)病急性暴發(fā)情況下，可采用鹽酸7天，磺胺喹噁啉鈉（SulfaquinoxalineSodium）可按首次0.04%、維持有陽(yáng)性對(duì)照用藥須與受試制劑組同期給藥，以保證結(jié)果可A.3制備方法示例6藥物推薦劑量范圍配制與給藥要點(diǎn)地克珠利預(yù)混劑0.5-1.0mg/kg飼料（混飼）與飼料充分拌勻，連用期間不間斷供藥尼卡巴嗪+馬杜拉霉素銨尼卡巴嗪100mg/kg+馬杜拉霉素4mg/kg飼料聯(lián)合拌料預(yù)防各型球蟲(chóng)，注意高溫季節(jié)避免尼卡巴嗪過(guò)量氨丙啉+磺胺喹噁啉（飲水）氨丙啉0.012%水溶液+磺胺喹噁啉鈉0.04%首劑急性暴發(fā)時(shí)飲水給藥，氨丙啉阻斷第一代，磺胺作用于后期世代7抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI)計(jì)算：ACI作為評(píng)價(jià)雞球蟲(chóng)病綜合療效的核心指標(biāo)，定義為“相對(duì)增重率+存活 指各組存活雞只比例；“病變值”和“卵囊值”則根據(jù)8一般地，試驗(yàn)組ACI值越高，表明綜合抗球蟲(chóng)效果越好。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)判定準(zhǔn)則，常將ACI劃分為不同效力等級(jí)：ACI＜120為無(wú)效，120-159為低效，160-179為中效，ACI≥180為高效抗球蟲(chóng)作用。例如，9近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外針對(duì)雞球蟲(chóng)病的中藥防治研究取得了豐富成果。表3概述了部分具有代表性的研究案例，包括研究地域、所針對(duì)的球蟲(chóng)種類、采用的中藥及研究類型，以及主要藥效研究國(guó)家/地區(qū)對(duì)象及球蟲(chóng)種類中藥及制劑類型研究類型主要成果摘要耳球蟲(chóng)）常山、檳榔、地榆、黃芩、青蒿復(fù)方（提取液）體內(nèi)預(yù)防試驗(yàn)復(fù)方中藥預(yù)處理能有效提高雛雞增重，顯著降低卵囊排出量和病變?cè)u(píng)分；高、中劑量組抗球蟲(chóng)指數(shù)分別達(dá)183.01和183.83，顯示出良好預(yù)防效果[3]。耳球蟲(chóng)感染）青蒿、常山、仙鶴草、地榆復(fù)方（原粉混合）體內(nèi)治療試驗(yàn)自擬復(fù)方中藥對(duì)球蟲(chóng)病有顯著治療效達(dá)170.41；相對(duì)未治療感染組，受損盲腸組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)加快[4]。耳球蟲(chóng)）桉樹(shù)油+黃酮苷+丁香酚組合（植物提取物制劑）體內(nèi)治療及安全性評(píng)估復(fù)合植物提取物制劑的抗球蟲(chóng)指數(shù)最高達(dá)169.3，高于單一提取物組；高劑量組效果最佳（ACI≈169.2顯著減輕盲腸病變并減少卵囊排出。安全性試驗(yàn)表明按推薦劑量1倍、3倍、6倍給藥對(duì)肉雞無(wú)明顯毒性作用，耐受性良好[5]。具有不同程度的抑蟲(chóng)作用[6-8]。相較化學(xué)藥物，中藥及植物源制劑在耐藥性和殘留方面具優(yōu)勢(shì)，但單一液在臨床試驗(yàn)中取得了與化藥相當(dāng)?shù)寞熜ВˋCI達(dá)166-174），且具促生長(zhǎng)和高安全性。綜上所述，中藥制劑抗球蟲(chóng)研究在國(guó)內(nèi)外均展現(xiàn)出良好前景，為雞球蟲(chóng)病防控提供了多樣化選擇。廣東農(nóng)業(yè)科學(xué).2020;47(11):171