蛋白表達(dá)課件單擊此處添加副標(biāo)題XX有限公司匯報(bào)人：XX目錄01蛋白表達(dá)基礎(chǔ)02原核生物表達(dá)系統(tǒng)03真核生物表達(dá)系統(tǒng)04蛋白表達(dá)技術(shù)05蛋白表達(dá)的挑戰(zhàn)與對(duì)策06蛋白表達(dá)的應(yīng)用實(shí)例蛋白表達(dá)基礎(chǔ)章節(jié)副標(biāo)題01蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)由氨基酸組成，結(jié)構(gòu)多樣決定其功能復(fù)雜性。結(jié)構(gòu)多樣性參與催化、運(yùn)輸、信號(hào)傳導(dǎo)等生命活動(dòng)，功能廣泛而重要。功能廣泛性表達(dá)系統(tǒng)的分類利用大腸桿菌等原核生物進(jìn)行蛋白表達(dá)，成本低，產(chǎn)量高。原核表達(dá)系統(tǒng)01利用酵母、昆蟲細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等真核生物，可進(jìn)行翻譯后修飾。真核表達(dá)系統(tǒng)02表達(dá)載體的選擇原核表達(dá)載體如pET系列，適用于大腸桿菌，成本低，適合大規(guī)模生產(chǎn)。真核表達(dá)載體如pPICZ系列，適用于酵母，可對(duì)蛋白進(jìn)行復(fù)雜修飾，接近天然結(jié)構(gòu)。原核生物表達(dá)系統(tǒng)章節(jié)副標(biāo)題02大腸桿菌表達(dá)特點(diǎn)大腸桿菌快速生長(zhǎng)，分裂周期短，能實(shí)現(xiàn)高表達(dá)量。快速繁殖高產(chǎn)培養(yǎng)基簡(jiǎn)單，成本低，易于大規(guī)模生產(chǎn)和控制。成本低易培養(yǎng)表達(dá)優(yōu)化策略誘導(dǎo)條件調(diào)整優(yōu)化IPTG濃度、溫度及時(shí)間，提升蛋白可溶性。密碼子優(yōu)化針對(duì)目標(biāo)蛋白優(yōu)化密碼子，提高翻譯效率。0102表達(dá)產(chǎn)物的純化利用Ni-NTA樹脂純化His標(biāo)簽蛋白親和層析法透析去雜質(zhì)，超濾裝置濃縮蛋白透析與濃縮真核生物表達(dá)系統(tǒng)章節(jié)副標(biāo)題03酵母表達(dá)系統(tǒng)操作簡(jiǎn)便成本低系統(tǒng)優(yōu)勢(shì)畢赤酵母等種類主要宿主應(yīng)用領(lǐng)域生物制藥等廣泛昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)翻譯后修飾加工真核表達(dá)特點(diǎn)可達(dá)細(xì)胞蛋白總量50%高表達(dá)量?jī)?yōu)勢(shì)藥物開發(fā)疫苗生產(chǎn)應(yīng)用領(lǐng)域廣泛哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)翻譯后修飾完善表達(dá)系統(tǒng)特點(diǎn)質(zhì)粒與病毒載體常用載體類型重組蛋白藥物生產(chǎn)主要應(yīng)用方向蛋白表達(dá)技術(shù)章節(jié)副標(biāo)題04基因克隆技術(shù)限制性內(nèi)切酶關(guān)鍵技術(shù)DNA片段重組擴(kuò)增技術(shù)原理轉(zhuǎn)錄調(diào)控技術(shù)通過調(diào)控RNA聚合酶活性改變基因轉(zhuǎn)錄速率。調(diào)控RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄因子與順式元件互作，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)轉(zhuǎn)錄調(diào)控。轉(zhuǎn)錄因子作用蛋白翻譯后修飾修飾由酶調(diào)節(jié)，可添加或去除，調(diào)控細(xì)胞活動(dòng)。動(dòng)態(tài)可逆過程包括磷酸化、糖基化等，影響蛋白功能。修飾類型多樣蛋白表達(dá)的挑戰(zhàn)與對(duì)策章節(jié)副標(biāo)題05表達(dá)量低的問題調(diào)整密碼子匹配宿主偏好，提升蛋白表達(dá)量。密碼子優(yōu)化使用融合標(biāo)簽增強(qiáng)蛋白表達(dá)，改善溶解性。融合標(biāo)簽策略蛋白質(zhì)折疊與活性正確折疊確保蛋白活性折疊正確性錯(cuò)誤折疊致蛋白失活折疊錯(cuò)誤影響優(yōu)化條件，使用伴侶應(yīng)對(duì)策略表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)化根據(jù)蛋白特性，選擇或調(diào)整表達(dá)系統(tǒng)，如原核、真核等，以提升表達(dá)效率。系統(tǒng)選擇調(diào)整01優(yōu)化培養(yǎng)條件、誘導(dǎo)時(shí)間等參數(shù)，減少蛋白降解，提高表達(dá)量和純度。條件參數(shù)優(yōu)化02蛋白表達(dá)的應(yīng)用實(shí)例章節(jié)副標(biāo)題06藥物研發(fā)中的應(yīng)用利用高效表達(dá)系統(tǒng)，加速藥物蛋白生產(chǎn)，提升生產(chǎn)效率與產(chǎn)品質(zhì)量。生物制藥無細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)加速疫苗研發(fā)，建立高通量抗體篩查系統(tǒng)。疫苗研發(fā)疫苗開發(fā)中的應(yīng)用利用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)疫苗，如馬鈴薯、番茄表達(dá)系統(tǒng)。植物表達(dá)疫苗VLP技術(shù)高效表達(dá)病毒外殼蛋白，自組裝成安全免疫原性顆粒。VLP技術(shù)應(yīng)用生物技術(shù)產(chǎn)品開發(fā)01診斷試劑開發(fā)利用蛋白表達(dá)技術(shù)生產(chǎn)抗體，用于疾病診斷試