重慶市人民醫(yī)院組織包埋技術(shù)考核一、選擇題（每題2分，共20題）1題：根據(jù)組織包埋技術(shù)要求，下列哪種組織固定液最適合用于神經(jīng)組織的固定？A.10%中性緩沖甲醛溶液B.95%乙醇溶液C.Bouin's液D.Helly液2題：在制備石蠟包埋切片時(shí)，組織塊在脫水過程中，正確的乙醇濃度梯度順序是？A.50%→70%→90%→100%B.100%→90%→70%→50%C.70%→50%→30%→0%D.0%→30%→50%→70%3題：組織包埋過程中，以下哪項(xiàng)操作可能導(dǎo)致組織變形或結(jié)構(gòu)破壞？A.組織塊大小適宜（0.5cm3以下）B.固定時(shí)間過長（超過24小時(shí)）C.石蠟熔點(diǎn)控制在52℃左右D.包埋前組織充分脫水4題：HE染色中，蘇木精的作用主要是？A.裂解細(xì)胞核DNAB.使細(xì)胞質(zhì)呈紅色C.固定組織結(jié)構(gòu)D.染色體顯帶5題：用于冷凍包埋的組織，其預(yù)處理方法不包括？A.置于純丙酮中速凍B.直接置于冰醋酸中固定C.緩沖液浸泡30分鐘D.石蠟重新包埋6題：電鏡超薄切片包埋材料通常使用？A.石蠟B.脂肪包埋劑（如Epon）C.明膠D.甘油7題：包埋過程中，以下哪項(xiàng)操作可能影響切片的透明度？A.石蠟純度低（含雜質(zhì)）B.組織塊過小C.石蠟熔點(diǎn)過高D.固定液濃度合適8題：病理科常用的包埋技術(shù)中，最適合觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的是？A.石蠟包埋切片B.冷凍包埋切片C.脂肪包埋超薄切片D.膠姆糖包埋9題：組織包埋時(shí)，若發(fā)現(xiàn)組織收縮明顯，可能的原因是？A.固定液濃度過高B.脫水不充分C.石蠟溫度過低D.組織塊過大10題：重慶市人民醫(yī)院病理科常用的包埋材料中，哪種適用于骨組織？A.石蠟B.脂肪包埋劑C.明膠D.低熔點(diǎn)蠟二、填空題（每空1分，共10空）1.組織包埋前，需進(jìn)行______、______和______三個(gè)步驟。2.HE染色中，蘇木精染色的pH值通?？刂圃赺_____左右。3.冷凍包埋切片適用于觀察______和______的形態(tài)。4.石蠟包埋過程中，組織塊在60%乙醇中浸泡的目的是______。5.電鏡超薄切片的包埋劑需具備______和______的特性。6.組織固定時(shí)，Bouin's液適用于______組織的染色。7.包埋前組織塊大小一般控制在______范圍內(nèi)。8.脂肪包埋超薄切片常用的包埋劑是______。9.石蠟包埋切片的厚度通常為______μm。10.組織包埋時(shí)，若發(fā)現(xiàn)組織變硬，可能的原因是______。三、簡答題（每題5分，共4題）1題：簡述石蠟包埋切片的制作流程。2題：冷凍包埋切片與石蠟包埋切片的優(yōu)缺點(diǎn)比較。3題：電鏡超薄切片包埋的技術(shù)要點(diǎn)有哪些？4題：重慶市人民醫(yī)院病理科在組織包埋過程中常見的問題及解決方法。四、論述題（每題10分，共2題）1題：詳細(xì)說明組織固定液的選擇原則及其對染色效果的影響。2題：結(jié)合重慶市人民醫(yī)院病理科的實(shí)際情況，分析不同包埋技術(shù)在臨床應(yīng)用中的選擇依據(jù)。答案與解析一、選擇題答案與解析1.A解析：神經(jīng)組織富含脂質(zhì)，需用10%中性緩沖甲醛溶液固定，避免脂質(zhì)溶解。B項(xiàng)乙醇易使神經(jīng)纖維收縮變形；C項(xiàng)Bouin's液適用于肌肉和神經(jīng)組織，但染色偏堿性；D項(xiàng)Helly液主要用于血細(xì)胞固定。2.A解析：石蠟包埋脫水需逐步增加乙醇濃度，防止組織變形。梯度順序?yàn)?0%→70%→90%→100%。B項(xiàng)順序錯(cuò)誤；C項(xiàng)為純乙醇梯度；D項(xiàng)為逆向梯度。3.B解析：固定時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致組織蛋白過度交聯(lián)，結(jié)構(gòu)破壞。A項(xiàng)組織塊大小適宜；C項(xiàng)石蠟熔點(diǎn)合適；D項(xiàng)充分脫水是前提。4.A解析：蘇木精為堿性染料，使細(xì)胞核DNA染成藍(lán)色。B項(xiàng)為伊紅作用；C項(xiàng)固定液作用；D項(xiàng)顯帶染色需特殊處理。5.B解析：冷凍包埋需快速冷凍，B項(xiàng)直接冰醋酸固定會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凍裂。A項(xiàng)丙酮速凍；C項(xiàng)緩沖液浸泡；D項(xiàng)石蠟包埋是后續(xù)步驟。6.B解析：電鏡超薄切片需高分辨率包埋劑，Epon是常用選擇。A項(xiàng)石蠟分辨率低；C項(xiàng)明膠不適用于超薄切片；D項(xiàng)甘油僅作透明劑。7.A解析：石蠟純度低會(huì)導(dǎo)致切片混濁，影響透明度。B項(xiàng)組織塊過小易切片破碎；C項(xiàng)高溫熔解；D項(xiàng)脫水充分是基礎(chǔ)。8.C解析：超微結(jié)構(gòu)觀察需高分辨率包埋劑。A項(xiàng)石蠟切片厚度不均；B項(xiàng)冷凍切片冰晶偽影；D項(xiàng)膠姆糖包埋較少用。9.D解析：組織塊過大導(dǎo)致滲透壓差大，收縮明顯。A項(xiàng)高濃度固定液使組織硬化；B項(xiàng)脫水不充分導(dǎo)致空泡；C項(xiàng)低溫包埋影響硬化。10.B解析：骨組織富含鈣質(zhì)，需用脂肪包埋劑（如Epon）固定。A項(xiàng)石蠟易使骨鈣溶解；C項(xiàng)明膠軟化效果差；D項(xiàng)低熔點(diǎn)蠟分辨率低。二、填空題答案與解析1.固定、脫水、包埋解析：組織包埋前需固定組織結(jié)構(gòu)、脫水去除水分、包埋硬化。2.2.0-2.5解析：蘇木精在弱酸性條件下染色效果最佳，pH值控制在2.0-2.5。3.細(xì)胞器、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)解析：冷凍包埋能保存細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)，適用于電鏡觀察。4.去除組織水分解析：60%乙醇浸泡可加速脫水，防止組織收縮變形。5.高分子量、高硬度解析：超薄切片包埋劑需耐切片機(jī)研磨且分辨率高。6.神經(jīng)解析：Bouin's液對神經(jīng)組織染色效果較好，但背景染色深。7.0.5cm3以下解析：過大的組織塊難均勻固定，影響切片質(zhì)量。8.Epon解析：Epon是常用的電鏡超薄切片包埋劑，能良好固定蛋白質(zhì)。9.4-5解析：石蠟切片厚度通常為4-5μm，適合常規(guī)病理觀察。10.固定液濃度過高解析：高濃度固定液使組織蛋白過度硬化，影響切片。三、簡答題答案與解析1題：流程：固定→脫水（30%→50%→70%→90%→100%乙醇各1小時(shí)）→透明（二甲苯2次，各30分鐘）→浸蠟（石蠟52℃熔解，逐級(jí)浸蠟，24小時(shí)）→包埋（模具中澆注石蠟，冷卻）→切片→貼片→烤片。2題：優(yōu)點(diǎn)：冷凍切片能保存細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)，適用于電鏡觀察；石蠟切片操作簡便，染色效果穩(wěn)定。缺點(diǎn)：冷凍切片易產(chǎn)生冰晶偽影；石蠟切片分辨率低，不適用于超微結(jié)構(gòu)。3題：技術(shù)要點(diǎn)：快速冷凍（液氮或冷凍臺(tái)）、預(yù)冷包埋劑（低溫處理）、超薄切片機(jī)操作、低濃度固定液（如戊二醛）。4題：問題：組織收縮、染色背景深、切片易碎。解決：固定時(shí)間適宜、包埋前脫水充分、選擇合適包埋劑（如骨組織用脂肪包埋劑）。四、論述題答案與解析1題：固定液選擇原則：①組織類型（如神經(jīng)用甲醛，肌肉用Bouin's）；②滲透壓（高濃度乙醇加速滲透）；③固定時(shí)間（過長易交聯(lián)硬化）。影響：固定不徹底導(dǎo)致染色