高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1廣東省廣州市三校2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期期中聯(lián)考一、選擇題：本題共16小題，共40分。第1～12小題，每小題2分；第13～16小題，每小題4分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.生態(tài)足跡指在現(xiàn)有技術(shù)條件下，維持某一人口單位生存所需的生產(chǎn)資源和吸納廢物的土地及水域的面積。下列活動(dòng)不利于降低生態(tài)足跡的是（）A.國(guó)家實(shí)施“三北”和長(zhǎng)江中下游地區(qū)重點(diǎn)防護(hù)林建設(shè)、退耕還林還草B.減少石油、天然氣的使用，大力發(fā)展太陽能、風(fēng)能等新能源C.在日常飲食中，減少植物性食物的比例，多攝入肉類食物D.減少私家車出行，提倡自行車或步行等綠色出行方式【答案】C〖祥解〗生態(tài)足跡，又叫生態(tài)占用，是指在現(xiàn)有技術(shù)條件下，維持某一人口單位（一個(gè)人，一個(gè)城市、一個(gè)國(guó)家或全人類）生存所需的生產(chǎn)資源和吸納廢物的土地及水域的面積。例如，一個(gè)人的糧食消費(fèi)借可以轉(zhuǎn)換為生產(chǎn)這些糧食所需要的耕地面積，而他所排放的二氧化碳總量可以轉(zhuǎn)換成吸收這些二氧化碳所需要的森林、草地或農(nóng)田的面積。因此，生態(tài)足跡可以被形象地理解為一只負(fù)載人類和人類所創(chuàng)造的城市、耕地、鐵路等的巨“足”踏在地球上時(shí)留下的足印。生態(tài)足跡的值越大，代表人類所需的資源越多，對(duì)生態(tài)和環(huán)境的影響就越大?！驹斘觥緼、退耕還林還草，增加綠化面積能為人類提供更多林地資源和碳吸收用地，有利于減少生態(tài)足跡，A不符合題意；B、太陽能、風(fēng)能等新能源利用減少化石能源使用，有利于減少維持某一人口單位生存所需的生產(chǎn)資源，有利于減少生態(tài)足跡，B不符合題意；C、在日常飲食中，減少植物性食物的比例，多攝入肉類食物，會(huì)增加生態(tài)足跡，C符合題意；D、減少私家車出行，提倡自行車或步行等綠色出行方式，可以減少生態(tài)足跡，D不符合題意。故選C。2.天津市針對(duì)甘肅古浪縣水資源短缺現(xiàn)狀，實(shí)施“農(nóng)業(yè)水利現(xiàn)代化與智慧灌溉技術(shù)幫扶項(xiàng)目”，通過水肥一體化智慧灌溉和高標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)田建設(shè)，助力落實(shí)國(guó)家“藥肥雙減”目標(biāo)，實(shí)現(xiàn)鄉(xiāng)村全面振興。項(xiàng)目需遵循一定生態(tài)學(xué)原理。下列原理有誤的是（）A.人工生態(tài)系統(tǒng)具有一定自我調(diào)節(jié)能力B.項(xiàng)目實(shí)施可促進(jìn)生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)與能量循環(huán)C.對(duì)人類利用強(qiáng)度較大的生態(tài)系統(tǒng)，應(yīng)給予相應(yīng)的物質(zhì)投入D.根據(jù)實(shí)際需要，合理使用水肥【答案】B〖祥解〗提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的措施：(1)控制對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的干擾程度。(2)實(shí)施相應(yīng)的物質(zhì)、能量投入，保證生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)與功能的協(xié)調(diào)關(guān)系。【詳析】A、生態(tài)系統(tǒng)具有一定的自動(dòng)調(diào)節(jié)能力，但這種自動(dòng)調(diào)節(jié)能力有一定限度，人工生態(tài)系統(tǒng)也具有一定自我調(diào)節(jié)能力，A正確；B、能量流動(dòng)是單向的，逐級(jí)遞減的，不是循環(huán)的，因此不能促進(jìn)能量的循環(huán)，B錯(cuò)誤；C、對(duì)人類利用強(qiáng)度較大的生態(tài)系統(tǒng)，應(yīng)實(shí)施相應(yīng)的物質(zhì)、能量投入，保證生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)與功能的協(xié)調(diào)，C正確；D、植物不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期所需的水和無機(jī)鹽是不同的，因此要根據(jù)實(shí)際需要，合理使用水肥，D正確。故選B。3.獼猴桃蘋果復(fù)合果醋發(fā)酵工藝：獼猴桃、蘋果→榨汁→混合→酶解→巴氏殺菌→加入酵母菌→酒精發(fā)酵→過濾→加入醋酸菌→醋酸發(fā)酵→離心→調(diào)配→灌裝→巴氏殺菌→成品。下列關(guān)于發(fā)酵過程中細(xì)胞代謝的敘述，正確的是（）A.酵母菌加入到發(fā)酵液后只進(jìn)行厭氧呼吸產(chǎn)生乙醇B.酵母菌在發(fā)酵中持續(xù)增殖導(dǎo)致其數(shù)量不斷增多C.醋酸菌進(jìn)行需氧發(fā)酵支持生命活動(dòng)，主要在線粒體內(nèi)進(jìn)行D.氧氣能將乙醇氧化成醋酸是醋酸發(fā)酵不能密閉的原因之一【答案】D〖祥解〗（1）果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。（2）醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！驹斘觥緼、酵母菌加入到發(fā)酵液后，初期氧氣充足時(shí)進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，氧氣減少后才進(jìn)行厭氧呼吸產(chǎn)生乙醇，并非只進(jìn)行厭氧呼吸，A錯(cuò)誤；B、在發(fā)酵后期，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少、酒精濃度升高、pH變化等因素，酵母菌的繁殖會(huì)受到抑制，數(shù)量不會(huì)持續(xù)增多，B錯(cuò)誤；C、醋酸菌是原核生物，沒有線粒體，其需氧發(fā)酵是在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行的，C錯(cuò)誤；D、醋酸菌是好氧菌，且醋酸發(fā)酵時(shí)，氧氣能將乙醇氧化成醋酸，所以醋酸發(fā)酵不能密閉，D正確。故選D。4.滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是（）A.可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌B.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌C.微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染D.動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行【答案】A〖祥解〗使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程?！驹斘觥緼、可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，A正確；B、一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，D錯(cuò)誤。故選A。5.平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物C.平板劃線法既可用于分離菌株又可用于計(jì)數(shù)D.接種后未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄【答案】B〖祥解〗平板接種微生物有兩種常用方法：一種是平板劃線法，一種是稀釋涂布平板法，前者只能分離微生物，后者即可以分離微生物，也可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)?！驹斘觥緼、有些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，如固氮菌，所以不含氮源的平板也可能用于某些特殊微生物的培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、只有能夠合成脲酶微生物才能在以尿素為唯一氮源的平板上生長(zhǎng)，因?yàn)檫@些微生物產(chǎn)生的脲酶可以將尿素分解為氨，從而為自身提供氮源，所以利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物，B正確；C、平板劃線法主要用于分離菌株，由于劃線過程中菌落的分布不均勻，難以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，稀釋涂布平板法可用于計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、接種后未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基可能含有雜菌等，不能直接丟棄，需要進(jìn)行滅菌處理后再丟棄，防止污染環(huán)境，D錯(cuò)誤。故選B。6.研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線（如下圖）和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是（）A.第0.5天時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基B.第1天時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基C.第2天時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基D.第4天時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基【答案】D〖祥解〗在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基作用的原理是在培養(yǎng)基中加入某一化學(xué)物質(zhì)或改變某一理化性質(zhì)，使某種微生物正常生長(zhǎng)，而其他微生物則被殺滅或生長(zhǎng)受到抑制，從而選出所需要的微生物。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標(biāo)菌種變成優(yōu)勢(shì)種群，從而提高該種微生物的篩選效率?！驹斘觥緼、第0.5天時(shí)堆肥溫度較低，嗜熱菌可能還未大量繁殖，且蛋白胨氮源培養(yǎng)基不能篩選出能降解角蛋白的目標(biāo)菌，A錯(cuò)誤；B、第1天時(shí)堆肥溫度仍不是很高，嗜熱菌數(shù)量可能相對(duì)較少，同時(shí)蛋白胨氮源培養(yǎng)基無法針對(duì)降解角蛋白的功能進(jìn)行篩選，B錯(cuò)誤；C、第2天時(shí)堆肥溫度雖在上升，但還未達(dá)到較高溫度，嗜熱菌的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)可能不明顯，且沒有利用以角蛋白為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，C錯(cuò)誤；D、第4天時(shí)堆肥溫度較高，適合嗜熱菌生長(zhǎng)繁殖，此時(shí)取樣能獲得較多嗜熱菌；使用角蛋白氮源培養(yǎng)基，只有能高效降解角蛋白的嗜熱菌才能利用角蛋白作為氮源生長(zhǎng)，可篩選出目標(biāo)菌，D正確。故選D。7.甘薯病毒病造成了薯類品種保種難的問題，因此脫毒技術(shù)被廣泛應(yīng)用于薯類品種防病毒、防退化。下列有關(guān)甘薯脫毒技術(shù)的說法，正確的是（）A.培育脫毒苗的外植體要依次用酒精和次氯酸鈉消毒B.一般應(yīng)選用植物成熟的組織作為外植體進(jìn)行組織培育C.植株脫毒率主要取決于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比D.可通過接種病毒在個(gè)體水平檢測(cè)是否成功獲得脫毒苗【答案】A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的流程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，經(jīng)再分化形成芽、根或胚狀體，進(jìn)而形成完整植株。【詳析】A、植物組織培養(yǎng)應(yīng)注意無菌操作，需要將外植體用酒精和次氯酸鈉溶液依次浸泡并用無菌水沖洗，A正確；B、植物頂端分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，故應(yīng)選用分生區(qū)無病毒或病毒極少的組織接種，B錯(cuò)誤；C、植株脫毒率與生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比無關(guān)，C錯(cuò)誤；D、脫毒苗直接檢測(cè)性狀就行，抗毒苗需要通過接種病毒進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，D錯(cuò)誤。故選A。8.某團(tuán)隊(duì)通過多代細(xì)胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細(xì)胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí)，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體，可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育【答案】A〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：（1）充足的營(yíng)養(yǎng)供給—微量元素、無機(jī)鹽、糖類、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、血清等。（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（3）無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2．O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！驹斘觥緼、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí)，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞也會(huì)發(fā)生接觸抑制，A錯(cuò)誤；B、XO胚胎干細(xì)胞中丟失了Y染色體，因而該細(xì)胞的獲得過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異，B正確；C、XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化，即細(xì)胞的功能發(fā)生了特化，因而發(fā)生了細(xì)胞分化，C正確；D、若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體，可用該法，即獲得有功能的卵母細(xì)胞，進(jìn)而用于繁育，實(shí)現(xiàn)瀕危物種的保護(hù)，D正確。故選A。9.甘加藏羊是甘肅高寒牧區(qū)的優(yōu)良品種，是季節(jié)性發(fā)情動(dòng)物，每年產(chǎn)羔一次，每胎一羔，繁殖率較低。為促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展，研究人員通過體外受精、胚胎移植等胚胎工程技術(shù)提高藏羊的繁殖率，流程如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.藏羊甲需用促性腺激素處理使其卵巢卵泡發(fā)育和超數(shù)排卵B.剛采集到的藏羊甲的卵母細(xì)胞需到特定時(shí)期才能與藏羊乙的獲能精子受精C.胚胎移植前可采集滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢測(cè)D.胚胎移植入受體母藏羊丙前需對(duì)丙用免疫抑制劑進(jìn)行處理【答案】D〖祥解〗胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的．這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)．這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響?！驹斘觥緼、對(duì)母藏羊甲用促性腺激素處理，可促使其卵巢卵泡發(fā)育，實(shí)現(xiàn)超數(shù)排卵，A正確；B、剛采集的母藏羊甲的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期等特定時(shí)期，才具備與公藏羊乙獲能精子受精的能力，B正確；C、胚胎移植前，可采集囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢測(cè)，以了解胚胎的遺傳信息等情況，C正確；D、受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以胚胎移植入受體母藏羊丙前，無需對(duì)丙用免疫抑制劑進(jìn)行處理，D錯(cuò)誤。故選D。10.在太空環(huán)境中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)是空間生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的重要部分。在微重力環(huán)境中，組織細(xì)胞可以均勻懸浮，在三維方向自由生長(zhǎng)，不會(huì)因密度的不同而導(dǎo)致沉降速度不同，從而影響彼此間的接觸與溝通，故細(xì)胞有望生長(zhǎng)出三維、立體的離體細(xì)胞或組織器官。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.組織細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖B.懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)可用離心法收集細(xì)胞C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要加入動(dòng)物血清且置于充滿CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)D.進(jìn)行原代培養(yǎng)前可使用機(jī)械法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等處理動(dòng)物組織【答案】B〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH：哺乳動(dòng)物多以36.5℃為宜，最適pH為7.2-7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）?！驹斘觥緼、組織細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂增殖，但增殖一定時(shí)間后會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，A錯(cuò)誤；B、在微重力環(huán)境中，組織細(xì)胞可以均勻懸浮，因此進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)可用離心法收集細(xì)胞，B正確；C、培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)需要的氣體條件為95%空氣和5%CO2，C錯(cuò)誤；D、進(jìn)行原代培養(yǎng)制備細(xì)胞懸液的過程，可用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理的方法獲得細(xì)胞懸液，不能用胃蛋白酶，D錯(cuò)誤。故選B。11.下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作正確的是（）A.配制PCR反應(yīng)體系時(shí)，加入等量的4種核糖核苷酸溶液作為擴(kuò)增原料B.利用添加核酸染料的凝膠對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳后，在紫外燈下觀察結(jié)果C.將配制的酵母培養(yǎng)基煮沸并冷卻后，在酒精燈火焰旁倒平板D.將接種環(huán)燒紅，迅速蘸取酵母菌液在培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，獲得單菌落【答案】B〖祥解〗PCR的原理是DNA復(fù)制，DNA的單體是脫氧核糖核苷酸。瓊脂糖凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，利用添加核酸染料的凝膠對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳后，在紫外燈下觀察結(jié)果?！驹斘觥緼、PCR的原理是DNA復(fù)制，DNA的單體是脫氧核糖核苷酸，配制PCR反應(yīng)體系時(shí)，加入4種脫氧核糖核苷酸的等量混合液作為擴(kuò)增原料，A錯(cuò)誤；B、瓊脂糖凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來，B正確；C、將配制的酵母培養(yǎng)基高壓滅菌并冷卻到不燙手（50℃左右）后，在酒精燈火焰旁倒平板，C錯(cuò)誤；D、將接種環(huán)燒紅，待冷卻后（避免菌種被燙死），蘸取酵母菌液在培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，獲得單菌落，D錯(cuò)誤。故選B。12.新型蛋白質(zhì)進(jìn)化模型EVOLVEpro可以利用氨基酸序列，僅通過少量學(xué)習(xí)和最低限度的實(shí)驗(yàn)測(cè)試來預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，從而獲得新型高活性蛋白質(zhì)改造方案。下列有關(guān)說法正確的是（）A.預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)需要依據(jù)肽鏈中肽鍵的結(jié)構(gòu)、氨基酸的物理性質(zhì)與結(jié)構(gòu)B.氨基酸發(fā)生替換一定使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變C.EVOLVEpro在蛋白質(zhì)工程廣泛應(yīng)用后將不再需要借助基因工程手段改造蛋白質(zhì)D.通過EVOLVEpro得到的蛋白質(zhì)還需要進(jìn)一步的功能檢測(cè)實(shí)驗(yàn)才可以投入生產(chǎn)【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或者制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)生活需求?！驹斘觥緼、對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)應(yīng)從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，對(duì)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)，A錯(cuò)誤；B、氨基酸是蛋白質(zhì)的基本單位，氨基酸發(fā)生替換后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能可能沒有發(fā)生改變，尤其個(gè)別氨基酸的改變可能沒有影響，B錯(cuò)誤；C、EVOLVEpro可以利用氨基酸序列，蛋白質(zhì)工程仍需要基因修飾或基因合成等手段，EVOLVEpro在蛋白質(zhì)工程廣泛應(yīng)用后還需要借助基因工程手段改造蛋白質(zhì)，使得產(chǎn)品更優(yōu)良，C錯(cuò)誤；D、通過EVOLVEpro得到的蛋白質(zhì)還需要進(jìn)行進(jìn)一步的功能檢測(cè)實(shí)驗(yàn)才可以投入生產(chǎn)，以確保該蛋白質(zhì)對(duì)人體安全沒有副作用，D正確。故選D。13.下表是幾種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)（Y=C或T，R=A或G）。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）限制酶HindⅡAluIBamHISau3AI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'A.能被BamHI識(shí)別切割的序列也能能被Sau3AI識(shí)別并切割B.有些限制酶能識(shí)別一種序列，有些限制酶能識(shí)別多種序列C.AluI切割后的DNA片段只可用E.coliDNA連接酶連接D.BamHI和Sau3AI切割形成的片段進(jìn)行重組后，能被Sau3AI識(shí)別并切割【答案】C〖祥解〗限制酶的特點(diǎn)：識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、觀察BamHI的識(shí)別序列和Sau3AI的識(shí)別序列，可以發(fā)現(xiàn)BamHI識(shí)別序列中包含了Sau3AI的識(shí)別序列，所以能被BamHI識(shí)別切割的序列也能被Sau3AI識(shí)別并切割，A正確；B、從HindⅡ的識(shí)別序列可以看出，它能識(shí)別多種序列，而AluI限制酶能識(shí)別一種序列，所以有些限制酶能識(shí)別一種序列，有些限制酶能識(shí)別多種序列，B正確；C、AluI切割后產(chǎn)生平末端，而E.coliDNA只能將具有互補(bǔ)黏性末端的DNA片段連接起來，不能連接具有平末端的DNA片段，而T4DNA連接酶既可以連接平末端也可以連接黏性末端，C錯(cuò)誤；D、BamHI切割形成的片段和Sau3AI切割形成的片段具有相同的黏性末端，進(jìn)行重組后的片段為5'-GGATC-3'，互補(bǔ)鏈為3'-GATCC-5'，會(huì)含有Sau3AI的識(shí)別序列，能被Sau3AI識(shí)別并切割，D正確。故選C。14.HER-2（一種跨膜糖蛋白）高表達(dá)通常只出現(xiàn)于胎兒期，正常人體組織中其表達(dá)量極低，在乳腺細(xì)胞中高表達(dá)可加速細(xì)胞分裂，使其增殖、分化過程失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槿橄侔??？贵w-藥物偶聯(lián)物T-DMI由曲妥珠單抗和藥物DMI連接而成，對(duì)HER-2有很強(qiáng)的靶向性。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）A.胎兒期HER-2高表達(dá)可能與胚胎發(fā)育有關(guān)B.成人HER-2含量高可為乳腺癌診斷提供參考C.DMI與HER-2特異性結(jié)合是T-DMI對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行選擇性殺傷的關(guān)鍵D.利用同位素標(biāo)記的曲妥珠單抗在乳腺組織中成像的技術(shù)可定位診斷腫瘤的位置【答案】C〖祥解〗由題意可知，HER-2（一種跨膜糖蛋白）高表達(dá)通常只出現(xiàn)于胎兒期，正常人體組織中其表達(dá)量極低，在乳腺細(xì)胞中高表達(dá)可加速細(xì)胞分裂，使其增殖、分化過程失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槿橄侔？贵w一藥物偶聯(lián)物T-DMI能與HER-2特異性結(jié)合?！驹斘觥緼、HER-2（一種跨膜糖蛋白）高表達(dá)通常只出現(xiàn)于胎兒期，可能與胚胎發(fā)育有關(guān)，A正確；B、正常人體組織中其表達(dá)量極低，在乳腺細(xì)胞中高表達(dá)可加速細(xì)胞分裂，使其增殖、分化過程失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槿橄侔猿扇薍ER-2含量高可為乳腺癌診斷提供參考，B正確；C、T-DMI與HER-2特異性結(jié)合是實(shí)現(xiàn)DMI對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行選擇性殺傷的關(guān)鍵，C錯(cuò)誤；D、曲妥珠單抗能與HER-2特異性結(jié)合，故利用同位素標(biāo)記的曲妥珠單抗在乳腺組織中成像的技術(shù)可定位診斷腫瘤的位置，D正確。故選C。15.中國(guó)丹頂鶴主要繁殖在扎龍自然保護(hù)區(qū)，越冬在蘇北地區(qū)。1995~2015年蘇北越冬棲息地中相關(guān)指標(biāo)變化如下表。下列敘述錯(cuò)誤的是（）棲息地類型棲息地面積（km2）斑塊數(shù)（個(gè)）斑塊平均面積（km2）年份199520052015199520052015199520052015沼澤地15029167524274263893.512.151.93鹽田1155110510269821428711.795.173.57A.丹頂鶴的種群數(shù)量、棲息空間等生態(tài)學(xué)問題可供科研工作者研究屬于間接價(jià)值B.據(jù)表分析，斑塊平均面積減小是丹頂鶴越冬生境破碎化的重要體現(xiàn)C.丹頂鶴的越冬棲息地面積減小、生境破碎化，影響其活動(dòng)、生存和繁殖D.就地保護(hù)是促進(jìn)丹頂鶴種群的發(fā)展最有效措施，如建立丹頂鶴自然保護(hù)區(qū)【答案】A〖祥解〗生物多樣性的價(jià)值包括直接價(jià)值、間接價(jià)值和潛在價(jià)值。保護(hù)生物多樣性最有效的措施就地保護(hù)?！驹斘觥緼、丹頂鶴的種群數(shù)量、棲息空間等生態(tài)學(xué)問題可供科研工作者研究屬于直接價(jià)值，A錯(cuò)誤；B、據(jù)表分析，從表格數(shù)據(jù)可以看出，沼澤地和鹽田的斑塊平均面積均逐年減?。ㄕ訚傻貜?.51km2降至1.93km2，鹽田從11.79km2降至3.57km2），這表明棲息地破碎化加劇，斑塊平均面積減小是丹頂鶴越冬生境破碎化的重要體現(xiàn)，B正確；C、丹頂鶴的越冬棲息地面積減小、生境破碎化會(huì)影響其活動(dòng)、生存和繁殖，C正確；D、就地保護(hù)是指在原地對(duì)被保護(hù)的生態(tài)系統(tǒng)或物種建立自然保護(hù)區(qū)及國(guó)家公園等，故建立自然保護(hù)區(qū)是保護(hù)野生丹頂鶴的最有效措施之一，D正確。故選A。16.在愈傷組織生芽過程中，細(xì)胞分裂素（CK）通過A基因、W基因和Y基因起作用?，F(xiàn)將A基因功能缺失的突變體（突變體a）、A基因功能缺失但利用相關(guān)技術(shù)處理使W基因過量表達(dá)的材料甲和野生型三組愈傷組織在高CK的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，三組愈傷組織分化生芽的情況如圖1所示，愈傷組織生芽過程中有關(guān)基因和植物激素的相互關(guān)系如圖2所示。下列相關(guān)分析正確的是（）A.誘導(dǎo)愈傷組織和誘導(dǎo)生芽都需要每日給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照B.①②分別為W、A，③表示促進(jìn)作用C.過量表達(dá)W基因可使生芽時(shí)間提前，且會(huì)提高愈傷組織生芽的比例D.激素的產(chǎn)生是基因表達(dá)調(diào)控的結(jié)果，同時(shí)激素會(huì)調(diào)控基因的表達(dá)【答案】D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物體細(xì)胞的全能性，即已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素能促進(jìn)細(xì)胞分裂分化，在培養(yǎng)的不同時(shí)期對(duì)兩者的比例會(huì)有不同要求，在再分化過程中，生長(zhǎng)素比例高，促進(jìn)根的分化，細(xì)胞分裂素比例高，促進(jìn)芽的分化?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)愈傷組織的形成不需要每日給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照，A錯(cuò)誤；BC、據(jù)題圖1中的數(shù)據(jù)可知，在細(xì)胞分裂素（CK）的作用下，突變體a的愈傷組織分化出芽的比例沒有提高，而野生型的愈傷組織可以，說明A基因在愈傷組織分化生芽的過程中發(fā)揮促進(jìn)作用。材料甲W基因過量表達(dá)，在細(xì)胞分裂素（CK）的作用下，愈傷組織分化出芽的比例大幅度提高，與野生型相同（即過量表達(dá)W基因不會(huì)提高愈傷組織生芽的比例），但可使愈傷組織分化生芽的時(shí)間提前，說明A基因的表達(dá)產(chǎn)物可能會(huì)促進(jìn)W基因的表達(dá)，可知①②分別為基因A、基因W。生長(zhǎng)素促進(jìn)生根，故③應(yīng)表示抑制作用，BC錯(cuò)誤；D、激素的產(chǎn)生是基因表達(dá)調(diào)控的結(jié)果，依據(jù)圖2可知，激素（CK）也會(huì)調(diào)控基因（W基因、Y基因）的表達(dá)，D正確。故選D。二、非選擇題：本大題共5小題，共60分。考生根據(jù)要求作答。17.陸基圓池循環(huán)水養(yǎng)殖模式是一種綠色生態(tài)養(yǎng)殖新模式。該模式基于地面上設(shè)置圓形養(yǎng)殖池并耦聯(lián)養(yǎng)殖尾水處理的“兩池一壩”系統(tǒng)（如圖1），通過圓池底部集排污裝置聯(lián)通人工濕地進(jìn)行尾水處理，凈化后的養(yǎng)殖尾水進(jìn)入圓池循環(huán)利用，實(shí)現(xiàn)高密度集約化生態(tài)養(yǎng)殖?；卮鹣铝袉栴}：（1）處理沉淀區(qū)的養(yǎng)殖糞便和食物殘?jiān)?，所利用的生物在生態(tài)系統(tǒng)中屬于______；設(shè)置曝氣區(qū)可使水體______增加，進(jìn)而加快水中微生物______，以達(dá)到凈化水質(zhì)的目的。（2）現(xiàn)探究種植茭白和菖蒲作為生物浮床植物對(duì)尾水的凈化效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。從圖中數(shù)據(jù)可得到的結(jié)論有______（答出2點(diǎn)即可）。（3）陸基圓池養(yǎng)殖尾水處理系統(tǒng)的設(shè)置綜合考慮了______之間的關(guān)系，體現(xiàn)了生態(tài)工程的整體性原理。尾水處理需達(dá)標(biāo)才可經(jīng)進(jìn)水管道回到養(yǎng)殖池重新使用，請(qǐng)?zhí)岢鲆粭l實(shí)現(xiàn)可持續(xù)水產(chǎn)養(yǎng)殖的措施：______。【答案】（1）①.分解者②.溶解氧（氧氣）③.氧化分解有機(jī)物（或有氧呼吸分解有機(jī)物）（2）兩種植物不論單獨(dú)種植還是等量混合種植都具有明顯的凈化效果；菖蒲對(duì)總磷的去除效果明顯高于茭白和混合種植；混合種植對(duì)總氮去除效果高于單獨(dú)種植（3）①.自然、經(jīng)濟(jì)和社會(huì)②.尾水處理池塘的沉淀池需要定期清理沉淀物（并利用生物發(fā)酵的方式進(jìn)行處理后循環(huán)利用）；向養(yǎng)殖池投入適宜數(shù)量的水產(chǎn)品（不能造成過高密度養(yǎng)殖）；定期收割用于水質(zhì)凈化的水生植物；根據(jù)需求調(diào)整凈化池中各種生物的比例；定期更換濾網(wǎng)（清理過濾壩、過濾區(qū)）；保持曝氣區(qū)水體溶解氧在適宜范圍〖祥解〗生態(tài)系統(tǒng)指生物群落與它的無機(jī)環(huán)境相互作用而形成的統(tǒng)一整體。生態(tài)系統(tǒng)的組成成分包括非生物的物質(zhì)和能量、生產(chǎn)者、消費(fèi)者、分解者。【解析】（1）生態(tài)系統(tǒng)中的分解者能將動(dòng)植物遺體和動(dòng)物的排遺物分解為無機(jī)物，因此，處理沉淀區(qū)的養(yǎng)殖糞便和食物殘?jiān)锼玫纳镌谏鷳B(tài)系統(tǒng)中屬于分解者；設(shè)置曝氣區(qū)可提高水體溶解氧，即氧氣的增加，進(jìn)而加快水中微生物進(jìn)行有氧呼吸分解有機(jī)物，以達(dá)到凈化水質(zhì)的目的。（2）從柱形圖數(shù)據(jù)可知，兩種植物不論單獨(dú)種植還是等量混合種植，凈化效果均明顯高于對(duì)照組；菖蒲對(duì)總磷的去除效果明顯高于茭白和混合種植；混合種植對(duì)總氮去除效果高于單獨(dú)種植。（3）進(jìn)行生態(tài)工程的建設(shè)時(shí)，不僅要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，更要考慮經(jīng)濟(jì)和社會(huì)等系統(tǒng)的影響力，體現(xiàn)了生態(tài)工程的整體性原理。為實(shí)現(xiàn)可持續(xù)水產(chǎn)養(yǎng)殖，可采取定期清理沉淀池的沉淀物、向養(yǎng)殖池投入適宜數(shù)量的水產(chǎn)品防止養(yǎng)殖密度過大等措施。18.鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在某種植物根部細(xì)胞特異性表達(dá)并定位于細(xì)胞質(zhì)膜，具有吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)境中Zn2+功能。為研究該植物2種鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白M和N與吸收Zn2+相關(guān)的生物學(xué)功能，在克隆M、N基因基礎(chǔ)上，轉(zhuǎn)化鋅吸收缺陷型酵母，并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定。（1）鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因M、N克隆。以該植物根部細(xì)胞為材料提取并純化mRNA，通過_______合成cDNA。根據(jù)序列信息設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，回收DNA片段，連接至克隆載體，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，測(cè)序驗(yàn)證。（2）重組表達(dá)載體構(gòu)建。分別將含M、N基因的重組質(zhì)粒和酵母表達(dá)載體同時(shí)進(jìn)行酶切處理，然后利用________連接，得到的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌。（3）酵母菌轉(zhuǎn)化。取凍存的鋅吸收缺陷型酵母菌株，直接在固體培養(yǎng)基進(jìn)行劃線分離培養(yǎng)，活化后接種至_______以擴(kuò)大菌體數(shù)量，用重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化酵母菌。用_______技術(shù)檢測(cè)M、N基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)水平，無顯著差異。（4）轉(zhuǎn)基因酵母功能鑒定。分別將轉(zhuǎn)化了M、N基因的酵母菌株于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD600為0.6。將菌液用逐級(jí)稀釋至OD600為0．06、0．006和0．0006，然后各取10μL菌液用涂布器均勻涂布方法接種在固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2天，菌落生長(zhǎng)如圖。該實(shí)驗(yàn)中對(duì)照為______。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可初步推測(cè)：轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白M和N中，轉(zhuǎn)運(yùn)Zn2+能力更強(qiáng)的是N，依據(jù)是_____。注：波長(zhǎng)600nm下的吸光值0D600與菌液濃度呈正相關(guān)；空載體為未插入M或N基因的表達(dá)載體。【答案】（1）反轉(zhuǎn)錄（2）DNA連接酶（3）①.液體培養(yǎng)基并振蕩培養(yǎng)②.抗原-抗體雜交技術(shù)（4）①.野生型酵母+空載體、鋅吸收缺陷型酵母+空載體②.轉(zhuǎn)入N基因的這組酵母菌數(shù)量多〖祥解〗基因工程的基本操作程序：（1）目的基因的篩選與獲取；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。【解析】（1）由題意可知，鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在某種植物根部細(xì)胞特異性表達(dá)并定位于細(xì)胞質(zhì)膜，所以以該植物的根為材料提取并純化mRNA，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。（2）內(nèi)切酶處理后的質(zhì)粒和目的基因，用DNA連接酶進(jìn)行連接。（3）凍存的酵母菌濃度較高，可直接在固體培養(yǎng)基上劃線接種后進(jìn)行培養(yǎng)，進(jìn)行活化，然后轉(zhuǎn)至液體培養(yǎng)基增殖，培養(yǎng)過程中進(jìn)行震蕩，有利于增加培養(yǎng)液的溶氧量和使酵母菌和培養(yǎng)液充分接觸，從而快速增殖?？刹捎每乖?抗體雜交法檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。（4）由題意可知，菌液稀釋后OD600為0.06、0.006和0.0006，說明其進(jìn)行10指數(shù)的梯度稀釋。由圖可知，野生型酵母+空載體和鋅吸收缺陷型酵母+空載體為對(duì)照組，其余兩組是實(shí)驗(yàn)組。由圖中光譜吸收值可知，轉(zhuǎn)入N基因的這組酵母菌數(shù)量多，說明N轉(zhuǎn)運(yùn)Zn2+能力更強(qiáng)。19.我國(guó)科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。（1）過程②采用顯微操作法去“核”，其實(shí)是去除_____。（2）重構(gòu)細(xì)胞經(jīng)分裂、發(fā)育至_____時(shí)期，可移植到受體子宮中。若要獲得遺傳性狀完全相同的多只幼鼠，可對(duì)重構(gòu)胚進(jìn)行_____，再進(jìn)行移植。（3）圖中向重構(gòu)胚中注入Kdm4d的mRNA和TSA說明組蛋白的______和_____有利于重構(gòu)胚的后續(xù)發(fā)育過程。（4）科研人員為確定Kdm4d的mRNA的作用，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，其中A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)重構(gòu)胚，B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kdm4d的mRNA的重構(gòu)胚，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)Kdm4d的mRNA的作用是______?！敬鸢浮浚?）紡錘體—染色體復(fù)合物（2）①.桑葚胚或囊胚②.胚胎分割（3）①.去甲基化②.乙?；?）注入Kdm4d的mRNA通過翻譯產(chǎn)生的去甲基化酶，促進(jìn)了相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而表現(xiàn)出既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的形成率，也能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率〖祥解〗將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物?！窘馕觥浚?）減數(shù)分裂Ⅱ中期（MI期）卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是紡錘體—染色體復(fù)合物，采用顯微操作法去“核”，其實(shí)是去除該復(fù)合物。（2）當(dāng)胚胎發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段時(shí)，可移植到受體母牛子宮中。若要獲得遺傳性狀完全相同的多只犢牛，可對(duì)重構(gòu)胚進(jìn)行胚胎分割。（3）重構(gòu)胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表達(dá)產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，保持組蛋白乙酰化，即組蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程。（4）據(jù)題意和題圖可知，A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)重構(gòu)胚，B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kdm4d的mRNA的重構(gòu)胚，A組囊胚的形成率和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率都低于B組，推測(cè)Kdm4d的mRNA的作用是注入mRNA通過翻譯產(chǎn)生的去甲基化酶，促進(jìn)了相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)而表現(xiàn)出既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的形成率，也能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率。20.美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員通過特定技術(shù)培養(yǎng)能表達(dá)美西螈CD14蛋白的大腸桿菌，分離純化目的蛋白；隨后制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下圖所示：（1）步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射______和______。（2）步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)是______。添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是______。（3）在③篩選雜交瘤細(xì)胞過程中，吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，檢測(cè)過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體，原因是______。（4）步驟⑥從______中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞?！敬鸢浮浚?）①.CD14蛋白/CD14抗原②.分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞（2）①.能在體外無限增殖②.使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合（3）參與形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，有的不能分泌抗CD14抗體（4）小鼠腹水〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！窘馕觥浚?）步驟①是注射特定抗原，針對(duì)本實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?yīng)該注射CD14蛋白/CD14抗原；步驟⑤是將分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，以獲得大量單克隆抗體。（2）步驟②所用的SP2/0細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞，特點(diǎn)是能在體外無限增殖。添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。