ICS65.020.01

CCSB16

DB51

四川省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB51/T3005—2023

大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)規(guī)程

2023-02-07發(fā)布2023-04-08實(shí)施

四川省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB51/T3005—2023

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4鑒定試驗(yàn)條件.......................................................................1

5病原菌選擇與培養(yǎng)...................................................................2

6接種體制備.........................................................................2

7鑒定程序...........................................................................2

附錄A（資料性）大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表.................................4

附錄B（資料性）大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報(bào)告表.....................................5

附錄C（資料性）大豆品種抗炭疽病性鑒定田間播種方式示意圖.............................6

I

DB51/T3005—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出、歸口并解釋。

本文件起草單位：四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳植保站、四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物育種栽培研究所。

本文件主要起草人：何煉、曾華蘭、葉鵬盛、尹勇、劉勇、蔣秋平、張梅、華麗霞、孫小芳、韋樹

谷、代順冬、賴佳、黃玲、盛玉珍、張騫方。

本次為首次發(fā)布。

II

DB51/T3005—2023

大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大豆品種抗炭疽病性鑒定的術(shù)語和定義、鑒定試驗(yàn)條件、病原菌選擇與培養(yǎng)、接種體

制備和鑒定程序。

本文件適用于大豆品種炭疽病抗性評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（所有部分）

NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

大豆炭疽病soybeananthracnose

主要由平頭炭疽菌引起，導(dǎo)致豆莢形成黃褐色或紅銹色不規(guī)則形病斑的病害。

3.2

接種體inoculum

通過人工接種接觸，侵入寄主植物并引起發(fā)病的病原物繁殖體或營養(yǎng)體。

4鑒定試驗(yàn)條件

4.1儀器設(shè)備及工具

4.1.1接種體制備儀器設(shè)備及工具

光學(xué)顯微鏡、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、移液器、血球計(jì)數(shù)板、培養(yǎng)皿、量筒、

挑針、涂布棒、酒精燈、鑷子、廣口瓶、紗布、封口膜。

4.1.2田間工具

量筒、靜電噴霧器。

4.2鑒定圃

4.2.1立地條件

鑒定圃應(yīng)地勢平整、形狀規(guī)正、肥力均勻、排灌方便、不受蔭蔽，并具備人工保濕條件。

1

DB51/T3005—2023

4.2.2面積

根據(jù)供試品種數(shù)量確定鑒定圃面積。每個供試品種不少于5m2。

5病原菌選擇與培養(yǎng)

5.1病原菌選擇

采集四川省生產(chǎn)上大豆平頭炭疽菌侵染的典型病樣，經(jīng)分離純化、接種感病品種鑒定致病力后，作

為抗性鑒定用病原菌。

5.2病原菌培養(yǎng)

將200g去皮馬鈴薯切成小塊，加水1L煮沸并維持20min,用四層紗布過濾，濾液中趁熱加入20g葡

萄糖、20g瓊脂，玻棒攪拌并加水定容至1L，121℃下蒸汽滅菌30min。冷卻至60℃左右倒入滅菌培養(yǎng)

皿中制成馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板。將濾紙片保存的病原菌轉(zhuǎn)接到馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板上，置于25℃～

28℃下恒溫培養(yǎng)6d，在超凈工作臺上用涂布棒將菌絲涂斷，用封口膜封口，置于26℃下恒溫培養(yǎng)3d。

6接種體制備

在培養(yǎng)好的大豆炭疽菌平板中加入10mL0.05%吐溫-80溶液，用涂布棒刮下大豆炭疽病菌分生孢子，

菌懸液經(jīng)四層脫脂紗布濾除菌絲，收集濾液，用血球計(jì)數(shù)板檢測濾液中孢子濃度，添加0.05%吐溫-80

溶液，配制成1×106個·mL-1的孢子懸浮液，在孢子懸浮液中按20g/L添加酵母粉并充分?jǐn)嚢枋蛊淙芙猓?/p>

作為抗性鑒定接種體。接種體應(yīng)在2h內(nèi)使用。

7鑒定程序

7.1供試品種種植

根據(jù)供試品種生育期調(diào)整播期，使各品種同一時期進(jìn)入始莢期。根據(jù)供試品種株型，按照行距60cm～

80cm、穴距30cm～35cm播種，每穴播種3?！?粒、定苗2株，每品種每重復(fù)至少保苗20株。各品種隨機(jī)

排列，重復(fù)3次。設(shè)置感病品種臺灣75為感病對照。田間播種方式排列見附錄C。

7.2接種方式

大豆始莢期進(jìn)行第一次接種，7d后進(jìn)行第二次接種。每次按每株20mL接種體，采用背負(fù)式靜電噴霧

器，以1.5m/min的勻速行進(jìn)速度對豆莢表面均勻噴霧進(jìn)行接種，接種后保濕48h。

7.3鑒定圃田間管理

7.3.1肥水管理

播種前7d～10d，每667m2施商品有機(jī)肥100kg～200kg或腐熟餅肥40kg～50kg、45%（15-15-15）

復(fù)合肥20kg～25kg，翻耕入土作基肥。如遇干旱，應(yīng)及時灌溉。灌溉水應(yīng)符合GB5084的規(guī)定。

7.3.2病蟲草害管理

及時中耕、除草、防治蟲害，供試品種全生育期不使用殺菌劑和除草劑。使用農(nóng)藥防治蟲害時，應(yīng)

符合GB/T8321和NY/T1276的規(guī)定。

2

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7.4病情調(diào)查記載

第二次接種后，逐日監(jiān)測感病對照發(fā)病情況，當(dāng)感病對照的病情指數(shù)達(dá)到50時，每小區(qū)摘取不少于

10株的全部結(jié)實(shí)豆莢，豆莢總數(shù)不少于300個，逐莢調(diào)查發(fā)病情況。病情分級標(biāo)準(zhǔn)見表1，病情調(diào)查記載

表見附錄A。

大豆炭疽病病情分級標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1大豆炭疽病病情分級標(biāo)準(zhǔn)

病情級別癥狀

0豆莢無病斑

1病斑面積占整個豆莢面積的5%以下

3病斑面積占整個豆莢面積的6%～10%

5病斑面積占整個豆莢面積的11%～25%

7病斑面積占整個豆莢面積的26%～50%

9病斑面積占整個豆莢面積的50%以上

7.5結(jié)果計(jì)算

7.5.1病情指數(shù)

病情指數(shù)按公式（1）計(jì)算。

∑(?×?)

??=??×100····································································(1)

??×9

式中：

DI——病情指數(shù)，衡量發(fā)病率與嚴(yán)重度的綜合指標(biāo)。用各病級數(shù)值與對應(yīng)病級的病莢數(shù)乘積的總和

與全部調(diào)查豆莢的理論最高總病級數(shù)總和的比較相對數(shù)表示。

dc——病情級別數(shù)值

nc——各病級豆莢數(shù)

nt——調(diào)查總豆莢數(shù)

7.6抗性評價標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)供試品種的病情指數(shù)均值評價各品種的抗性級別，抗性級別劃分標(biāo)準(zhǔn)見表2，大豆品種抗炭疽

病性鑒定結(jié)果報(bào)告表見附錄B。

大豆品種炭疽病抗性級別劃分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

表2大豆品種炭疽病抗性級別劃分標(biāo)準(zhǔn)

病情指數(shù)均值（ADI）抗性類型

ADI≤5.00高抗（HR）

5.00＜ADI≤10.00抗病（R）

10.00＜ADI≤20.00中抗（MR）

20.00＜ADI≤40.00中感（MS）

40.00＜ADI≤60.00感?。⊿）

3

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A

A

附錄A

（資料性）

大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表

大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表見表A.1。

表A.1大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表

各病級莢數(shù)（個）

編號品種名稱重復(fù)病情指數(shù)

0級1級3級5級7級9級

Ⅰ

1Ⅱ

Ⅲ

Ⅰ

2Ⅱ

Ⅲ

Ⅰ

3Ⅱ

Ⅲ

Ⅰ

…Ⅱ

Ⅲ

調(diào)查人：記載人：

調(diào)查時間：

4

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B

B

附錄B

（資料性）

大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報(bào)告表

大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報(bào)告表見表B.1。

表B.1大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報(bào)告表

編號品種名稱病情指數(shù)均值抗性類型

1