ICS65.100.01CCSZ18152021-03-25發(fā)布IDB15/T2130—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由赤峰市農(nóng)牧科學(xué)研究院提出。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC19）歸口。本文件起草單位：赤峰市農(nóng)牧科學(xué)研究院。本文件主要起草人：烏仁圖雅、文輝、榮迪、鄧宇、王巖、王國(guó)全、娜日娜、王盛男、曲穎超、陳琪、趙劍平、李雯雯、索力墨、李峰、正月、劉丹竹、劉漢宇。DB15/T2130—20211土壤中硝基呋喃類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定高效液相色譜法本文件規(guī)定了土壤中呋喃西林、呋喃妥因、呋喃唑酮和呋喃它酮4種硝基呋喃類(lèi)藥物殘留量的高效液相色譜測(cè)定方法。本文件適用于土壤中硝基呋喃類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T395農(nóng)田土壤環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4原理試樣經(jīng)60%乙腈溶液振蕩、超聲提取處理后，HLB固相萃取柱凈化，高效液相色譜法測(cè)定，外標(biāo)法定量。5試劑和材料5.5乙酸銨(C2H7NO2)。5.6硝基呋喃類(lèi)藥物標(biāo)準(zhǔn)品：呋喃西林(furacilin),純度大于等于99.9%；呋喃妥因(nitrofurantoin),純度大于等于99.9%；呋喃唑酮(furazolidone),純度大于等于99.9%；呋喃它酮(furaltanone),純度大于等于99.9%。mL。2DB15/T2130—20215.8硝基呋喃類(lèi)藥物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（100μg/mL稱(chēng)取4種硝基呋喃類(lèi)藥物各10mg(精確到0.00001g)于4個(gè)100mL容量瓶中，加乙腈（5.1）超聲溶解定容至刻度，超聲溶解。0℃~4℃保存6個(gè)月。5.9硝基呋喃類(lèi)藥物混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10μg/mL精密量取100μg/mL的4種硝基呋喃類(lèi)藥物標(biāo)準(zhǔn)貯備液各10mL于100mL容量瓶中，用乙腈（5.1）定容至刻度。0℃~4℃保存6個(gè)月。定容至刻度，配制成0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL和4.00μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。0℃~4℃保存1周。5.11乙腈水（60%量取600mL乙腈（4.1）與400mL水混勻。5.12甲酸乙腈（0.1%量取1mL甲酸（4.3）與999mL乙腈混勻。5.13甲醇溶液（10%量取100mL甲醇（4.2）與900mL水混勻。5.14乙腈水（10%量取100mL乙腈（4.1）與900mL水混勻。5.15固相萃取柱：HLB柱，規(guī)格為60mg/3mL。5.17微孔濾膜：規(guī)格為0.2μm。6儀器和設(shè)備6.1高效液相色譜儀：配有紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。6.2分析天平：感量0.00001g。6.3分析天平：感量為0.01g。6.4離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。6.5振蕩器：振蕩頻率不低于300r/min。6.6超聲波清洗器。6.7旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：配有50mL茄型瓶。6.8固相萃取裝置。6.9移液槍?zhuān)?000μL。6.10移液槍?zhuān)?00μL。6.11具塞離心管：50mL。6.12樣品篩：0.5mm。6.13容量瓶：10mL、100mL、1000mL。6.14漩渦混勻儀：振蕩頻率不低于2800r/min。DB15/T2130—202137分析步驟7.1樣品采集土壤樣品采集按NY/T395的規(guī)定執(zhí)行。7.2制備樣品采集后去雜物后充分混勻，在室溫條件下自然風(fēng)干，粉粹，全部通過(guò)0.5mm樣品篩，裝入潔凈容器，密封保存。7.3樣品的提取、凈化7.3.1提取稱(chēng)取試樣2g（精確至0.01g）于50mL具塞離心管中，加入15mL乙腈水溶液（5.11以200r/min振蕩5min（6.5）,超聲提取15min（6.6以4000r/min離心10min（6.4重復(fù)提取3次，上清液合并搖勻，置于50mL茄形瓶中，45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干（6.7用10mL甲酸乙腈（5.12）溶解，待凈化。7.3.2凈化將HLB柱安裝于固相萃取裝置上（6.8依次用甲醇（5.2）3mL、水3mL活化。將樣品液通過(guò)固相萃取柱，用水3mL、用3mL甲醇溶液（5.13）淋洗、抽真空1min，用10mL甲醇（5.2）洗脫，收集供高效液相色譜儀測(cè)定。7.3.3空白實(shí)驗(yàn)除不加樣品外，其余均按照上述測(cè)定步驟進(jìn)行。7.4測(cè)定7.4.1液相色譜儀參考條件7.4.1.1色譜柱：C18色譜柱，柱長(zhǎng)250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑4.6μm。7.4.1.2流動(dòng)相：乙腈：0.05%乙酸銨，體積比80:20，調(diào)至pH值為4.8。7.4.1.3流速：1.0mL/min。7.4.1.4檢測(cè)波長(zhǎng)：365nm。7.4.1.5柱溫：40℃。7.4.1.6進(jìn)樣量：20μL。7.4.2液相色譜測(cè)定7.4.2.1標(biāo)準(zhǔn)系列工作曲線的繪制在儀器最佳條件下，將標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（5.10）分別注入液相色譜儀中，測(cè)定相應(yīng)的色譜峰，以標(biāo)準(zhǔn)系列工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。標(biāo)準(zhǔn)溶液液相色譜圖參見(jiàn)附錄A。DB15/T2130—202147.4.2.2試樣溶液及空白溶液的測(cè)定分別移取試樣溶液和空白溶液，分別注入液相色譜儀中。以色譜峰面積進(jìn)行外標(biāo)法定量。試樣液中硝基呋喃類(lèi)的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍之內(nèi)。試樣濃度不在線性范圍內(nèi)時(shí)將樣品稀釋后進(jìn)樣。8結(jié)果計(jì)算土壤中硝基呋喃類(lèi)殘留量Xi質(zhì)量分?jǐn)?shù)（mg/kg）表示,按式（1）計(jì)算:式中：Xi——試樣硝基呋喃類(lèi)的含量，單位為毫克每千克（mg/kgCi——從工作曲線得到的被測(cè)組分溶液濃度，單位為微克每毫升(μg/mLV——提取液總體積，單位為毫升（mLf——稀釋倍數(shù)；m——樣品稱(chēng)樣量，單位為克（g）。9精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過(guò)算術(shù)平均值的10%。10檢出限、定量限和回收率10.1本方法的檢出限：呋喃西林0.16mg/kg；呋喃托因0.14mg/kg；呋喃唑酮0.16mg/kg；呋喃它酮0.12mg/kg。10.2本方法的定量限：呋喃西林0.34mg/kg；呋喃托因0.30mg/kg；呋喃唑酮0.34mg/kg；呋喃它酮0.27mg/kg。10.3呋喃西林回收率：88.59%~102.92%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD2.24%~4.20%；呋喃妥因回收率：74.43%~89.72%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD0.91%~4.29%；呋喃唑酮回收率：78.61%~91.81%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD0.65%~3.85%；呋喃它酮回收率：81.47%~89.86%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD1.70%~4.49%。DB15/T2130—20215（資料性）土壤中硝基呋喃