文件起草單位通訊地址：遼寧省沙地治理與利用研究所（阜新市細(xì)河區(qū)中華路東段55號(hào)），聯(lián)系電

話

DB21/T3610—2022

紫葉稠李組培快繁技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了紫葉稠李（Padusvirginiana）組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)方法，具體包括外植體的采集與

處理、培養(yǎng)基的配制、組織培養(yǎng)程序等技術(shù)和要求。

本文件適用于遼寧省范圍內(nèi)紫葉稠李的組培快繁育苗。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件，不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6001-1985育苗技術(shù)規(guī)程

LY/T1000-2013容器育苗技術(shù)

LY/T1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

紫葉稠李Padusvirginiana

為薔薇科（Rosaceae）稠李屬（Padus）落葉喬木。生物學(xué)特性參見(jiàn)附錄A。

3.2

外植體explant

用于植物組織培養(yǎng)的離體植物器官、組織、細(xì)胞以及原生質(zhì)體。

3.3

母液stocksolution

按照培養(yǎng)基配方將培養(yǎng)基的成分配制成一定濃度和比例的溶液或混合溶液。

3.4

初代培養(yǎng)primaryculture

將經(jīng)滅菌處理的外植體接種于瓊脂培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出愈傷組織或芽的培養(yǎng)過(guò)程。

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3.5

繼代培養(yǎng)subculture

外植體經(jīng)初代培養(yǎng)后，再次以及以后各次接種于新培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程。

3.6

生根培養(yǎng)rootingculture

誘導(dǎo)無(wú)根試管苗產(chǎn)生根的過(guò)程。

4外植體采集與處理

4.1外植體采集

外植體的采集一般在6月中旬，選擇優(yōu)良母樹(shù)當(dāng)年生莖段作為外植體，采集宜在晴天進(jìn)行，宜隨采

隨用，若需長(zhǎng)途運(yùn)輸，需將外植體保存在裝有冰塊放入保鮮盒中。

4.2外植體處理

將采集的外植體枝條進(jìn)行如下處理：剪除枝條上的葉片，并將其剪成長(zhǎng)約2cm～3cm的帶腋芽（頂

芽）莖段，放入燒杯中用洗衣粉或洗潔精浸泡5min，流水沖洗2h～3h，再用蒸餾水沖洗2次，轉(zhuǎn)至超

凈工作臺(tái)上備用。

5培養(yǎng)基配制

5.1MS培養(yǎng)基母液配制

MS培養(yǎng)基母液配制注意如下事項(xiàng)。

a)母液配制使用蒸餾水。

b)配制大量元素母液時(shí)，每個(gè)組分單獨(dú)溶解，避免沉淀發(fā)生。

c)配制后的母液應(yīng)置于4℃冰箱中冷藏保存，微量元素母液用棕色瓶盛裝保存，母液配制后應(yīng)貼好標(biāo)

簽，注明名稱(chēng)、配制日期并及時(shí)使用，貯存時(shí)間不宜超過(guò)3個(gè)月，發(fā)現(xiàn)有沉淀或絮狀物出現(xiàn)應(yīng)停止

使用。

5.2植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物劑母液配制

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液的配制濃度為0.1mg/mL～1.0mg/mL，其配制方法參見(jiàn)附錄B。母液配制好

后貼好標(biāo)簽并置于4℃冰箱中冷藏，保存期不超過(guò)3個(gè)月。

5.3培養(yǎng)基制作

培養(yǎng)基的制作按LY/T1882中4.2中執(zhí)行。培養(yǎng)基配制參考用量見(jiàn)附錄B。

5.4培養(yǎng)基滅菌

培養(yǎng)基滅菌按LY/T1882中4.2執(zhí)行

5.5培養(yǎng)基保存

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滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)注明編號(hào)及配制日期，同時(shí)按培養(yǎng)基種類(lèi)、配制先后順序分別儲(chǔ)存于接種室或培

養(yǎng)室。存儲(chǔ)時(shí)間不宜超過(guò)2周。

5.6培養(yǎng)基配方

初代培養(yǎng)：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L或MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L；繼代培養(yǎng)：MS+6-BA

0.8mg/L+NAA0.08mg/L；生根培養(yǎng)：MS+NAA0.5mg/L。

6外植體消毒

在超凈工作臺(tái)上，用0.1%的Hgcl2消毒液浸泡頂芽部分1min～3min，腋芽部分2min～5min，

用無(wú)菌水沖洗5次~7次，再用無(wú)菌濾紙吸干水分后，最后剪成1.5cm~2.5cm的單芽莖段備用。

7培養(yǎng)條件

培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為2000Lx，光照時(shí)間為每天12h～16h。

8組織培養(yǎng)

8.1初代培養(yǎng)

將已消毒的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，接種操作參照NY/T2306中10.5執(zhí)行。用記號(hào)筆在培養(yǎng)瓶

上注明接種日期、編號(hào)或名稱(chēng)，放至培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。10d～15d后芽開(kāi)始萌發(fā)，20d左右莖尖變綠并

伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，莖段腋芽萌發(fā)新芽，誘導(dǎo)30d左右可獲得1cm～2cm的新芽。

8.2繼代培養(yǎng)

將初代培養(yǎng)誘導(dǎo)形成的幼芽或叢生芽，接種到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)周期為30d～40d。

8.3生根培養(yǎng)

選取壯苗高2cm～3cm的幼苗，接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。

9溫室煉苗與馴化

9.1煉苗

生根培養(yǎng)2～3周后，選取葉片綠色、株高大于3cm，根長(zhǎng)1.5cm～2.5cm，須根柔軟且不少于3條

的無(wú)菌苗，將組培苗置于溫室自然散射光下，封口煉苗2d～3d，溫度范圍在18℃～28℃。

9.2馴化

馴化基質(zhì)為細(xì)河沙、珍珠巖與草炭土比例為1:1:1，并加入0.5g/L的多菌靈攪拌均勻，然后裝入穴

盤(pán)中壓緊待用。將無(wú)菌苗從培養(yǎng)容器中取出，將根部粘附的瓊脂用清水（或用0.01%高錳酸鉀）清洗干

凈，移到營(yíng)養(yǎng)缽中，用基質(zhì)將根埋好，澆水，覆膜，在膜上扎幾個(gè)透氣小孔。每天用細(xì)霧噴壺噴水，使

環(huán)境濕度保持在90%左右。外面用遮陽(yáng)網(wǎng)罩著，避免陽(yáng)光直射。當(dāng)發(fā)現(xiàn)小苗基部或基質(zhì)上出現(xiàn)白色絮狀

菌絲時(shí)，用多菌靈液噴灑基質(zhì)。馴化時(shí)間為2周～3周。

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9.3移栽

經(jīng)過(guò)馴化后，當(dāng)苗木表現(xiàn)為葉色深綠、葉片增大、有新葉長(zhǎng)出時(shí)，將苗木移栽至12cm×12cm相同

基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽中培養(yǎng)。

9.4苗期管理

a)水肥管理

移栽后，每天向葉面噴水1次，在遮陰且通風(fēng)條件下培養(yǎng)。1周后，撤掉遮蔭，注意通風(fēng)。施肥管理

參照GB/T6001執(zhí)行。

b)病蟲(chóng)害防治

當(dāng)發(fā)生紅蜘蛛危害時(shí)，可噴施500倍～1000倍的樂(lè)果稀釋液防治。

10定植

翌年春季移栽至圃地。容器苗的定植參考LY/T1000執(zhí)行。

11檔案管理

每批移栽馴化的苗木都要配有標(biāo)簽，并建立管理檔案，按LY/T1000執(zhí)行。

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AA

附錄A

（資料性）

紫葉稠李生物學(xué)特性

紫葉稠李（Padusvirginiana）為薔薇科落葉喬木，樹(shù)高可達(dá)7m。樹(shù)皮灰褐色，小枝紫紅色，有光

澤。單葉互生，葉緣有鋸齒，近葉片基部有2腺體。葉質(zhì)地較厚，葉片長(zhǎng)橢圓形至倒卵形，先端漸尖，

鋸齒較稠李尖銳，初生葉為綠色，進(jìn)入5月后隨著溫度升高，逐漸由綠色轉(zhuǎn)至紫紅色，葉背脈腋白色簇

毛變淡褐色，整個(gè)葉背有白粉，秋后變成紅色。紫葉稠李為總狀花序，花白色，花期4～5月。核果，

果實(shí)為球形，較大，徑約1～11.2cm，果皮光亮，果熟期7～8月。隨著果實(shí)逐漸成熟，果色由淺綠到

淡黃再到橘紅，秋季呈紫紅色或紫黑色，不斷換顏色的核果具有較高的觀賞價(jià)值。紫葉稠李原產(chǎn)于北美

洲。在我國(guó)三北地區(qū)以及青海西藏等地區(qū)均有栽植。紫葉稠李對(duì)土壤要求不高，耐寒、耐旱、耐瘠薄。

日常養(yǎng)護(hù)和管理成本低，是我國(guó)北方地區(qū)園林綠化的優(yōu)良樹(shù)種。

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