2025年實驗室生物安全培訓考試試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共20題，合計40分）1.根據(jù)《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2022），BSL-3實驗室的核心工作間應滿足的最小換氣次數(shù)為：A.6次/小時B.8次/小時C.10次/小時D.12次/小時2.下列哪類微生物屬于第一類病原微生物？A.埃博拉病毒（滅活樣本）B.結(jié)核分枝桿菌（臨床分離株）C.天花病毒（活病毒）D.新型冠狀病毒（Omicron變異株，低致病性）3.實驗室操作高致病性病原微生物時，必須使用的個人防護裝備（PPE）不包括：A.正壓式呼吸防護器B.一次性防滲透隔離衣C.雙層乳膠手套（外層為無粉手套）D.護目鏡（非密封型）4.關于實驗室醫(yī)療廢物的處理，下列說法錯誤的是：A.含病原體的培養(yǎng)基需先高壓蒸汽滅菌（121℃，30分鐘）再丟棄B.一次性移液管應放入黃色醫(yī)療廢物袋，直接焚燒處理C.被污染的實驗服應放入專用收集袋，送指定機構(gòu)高壓滅菌后清洗D.銳器（如注射針）需放入防穿刺、防泄漏的專用容器，達到3/4滿時封口5.進行動物實驗時，感染性動物尸體的正確處理方式是：A.直接投入普通生活垃圾箱B.裝入雙層黃色醫(yī)療廢物袋，冷凍保存后送專業(yè)機構(gòu)焚燒C.用2000mg/L含氯消毒液浸泡2小時后丟棄D.高壓蒸汽滅菌（134℃，45分鐘）后作為普通廢物處理6.實驗室發(fā)生生物安全柜內(nèi)樣本泄漏（含HIV病毒），應急處理的第一步是：A.立即用75%酒精覆蓋污染區(qū)域B.關閉生物安全柜風機，標記污染區(qū)域C.佩戴額外防護裝備（如雙層手套、護目鏡）進入處理D.通知實驗室負責人啟動應急預案7.下列哪項不符合BSL-2實驗室的安全操作規(guī)范？A.操作結(jié)束后，工作臺面用1000mg/L含氯消毒液擦拭B.離心管未完全平衡（重量差＞0.1g）時啟動離心機C.使用移液器時避免液體濺出，禁止用口吸移液D.實驗室內(nèi)不存放與實驗無關的個人物品（如水杯、手機）8.關于生物安全風險評估，下列說法正確的是：A.僅需在實驗室建設前進行一次評估B.評估內(nèi)容包括病原微生物的危害程度、操作過程的風險點及控制措施C.評估報告無需記錄具體數(shù)據(jù)，只需定性描述D.由實驗室技術骨干單獨完成即可，無需多部門參與9.運輸高致病性病原微生物樣本時，必須滿足的條件不包括：A.使用三層包裝系統(tǒng)（主容器、輔助容器、外包裝）B.取得省級衛(wèi)生行政部門核發(fā)的《高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》C.運輸人員需接受生物安全培訓并考核合格D.樣本數(shù)量超過50管時，可分批次運輸（每批不超過20管）10.實驗室生物安全管理體系中，“雙人雙鎖”制度適用于：A.普通化學試劑的存放B.高致病性病原微生物菌（毒）種的保存C.實驗動物的飼養(yǎng)籠具管理D.實驗室鑰匙的日常管理11.下列哪種消毒方式無法有效滅活朊病毒？A.134℃高壓蒸汽滅菌180分鐘B.1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡60分鐘C.5%次氯酸鈉溶液浸泡60分鐘D.75%酒精擦拭30分鐘12.實驗室人員發(fā)生銳器傷（被含HBV血液的針頭刺傷），應急處理流程的正確順序是：①立即從近心端向遠心端擠壓傷口，盡可能擠出損傷處血液②用肥皂水和流動水沖洗傷口③用75%酒精或0.5%碘伏消毒傷口并包扎④報告實驗室負責人，填寫職業(yè)暴露記錄表⑤24小時內(nèi)進行HBV抗體檢測，必要時注射乙肝免疫球蛋白A.①→②→③→④→⑤B.②→①→③→④→⑤C.①→③→②→④→⑤D.③→①→②→④→⑤13.BSL-3實驗室的核心區(qū)與緩沖間之間的壓差應維持在：A.核心區(qū)相對于緩沖間為正壓（+10Pa）B.核心區(qū)相對于緩沖間為負壓（-10Pa）C.核心區(qū)與緩沖間壓差為0PaD.核心區(qū)相對于緩沖間為負壓（-50Pa）14.關于實驗動物生物安全，下列說法錯誤的是：A.感染性動物實驗應在ABSL-2及以上級別的實驗室進行B.動物籠具需每周至少消毒1次，污染時立即消毒C.實驗結(jié)束后，動物可直接放歸自然D.操作動物時應佩戴防咬手套，避免被抓咬傷15.實驗室制定生物安全手冊時，必須包含的內(nèi)容不包括：A.實驗室生物安全管理組織結(jié)構(gòu)及職責B.各類實驗操作的標準操作程序（SOP）C.實驗室工作人員的個人聯(lián)系方式D.應急預案（如樣本泄漏、火災、停電）16.下列哪項屬于實驗室生物安全事件中的“嚴重事件”？A.離心管破裂導致少量樣本濺出（未接觸人員）B.實驗人員未佩戴手套接觸污染臺面C.高致病性病原微生物菌（毒）種丟失D.生物安全柜過濾器輕微老化（未影響氣流）17.高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測方法不包括：A.化學指示卡（121℃時由藍色變紅色）B.生物指示劑（嗜熱脂肪芽孢桿菌）C.溫度壓力記錄儀D.肉眼觀察物品是否干燥18.實驗室使用的紫外線消毒燈，有效消毒的條件是：A.距離被消毒物品≤1米，照射時間≥30分鐘B.距離被消毒物品≤2米，照射時間≥15分鐘C.距離被消毒物品≤3米，照射時間≥60分鐘D.紫外線燈無需定期檢測輻照強度19.關于實驗室準入制度，下列說法正確的是：A.新入職人員只需進行一次生物安全培訓即可永久準入B.實習生、進修人員無需進行準入考核C.準入前需確認人員已接種必要疫苗（如乙肝疫苗）D.實驗室負責人可直接批準未經(jīng)培訓的人員進入BSL-3實驗室20.下列哪項操作符合“最小化氣溶膠產(chǎn)生”的原則？A.用力搖晃含菌液體試管B.使用電動移液器緩慢吸取液體C.在生物安全柜外打開離心管（已平衡）D.用注射器快速推注含菌液體二、判斷題（每題1分，共10題，合計10分）1.BSL-1實驗室可操作所有已知無致病性的微生物。（）2.實驗室醫(yī)療廢物的黃色包裝袋外需標注“感染性廢物”及產(chǎn)生日期。（）3.實驗人員離開實驗室前，只需脫去外層手套，無需洗手。（）4.生物安全柜使用時，手臂應快速進出，避免影響氣流。（）5.高致病性病原微生物實驗活動結(jié)束后，菌（毒）種需及時放回專用保存設備，不得在操作臺面過夜。（）6.實驗室發(fā)生火災時，若火勢較小，可直接使用二氧化碳滅火器撲滅生物安全柜內(nèi)的火焰。（）7.實驗動物的墊料可與普通垃圾混合處理。（）8.實驗室生物安全委員會應至少每半年召開一次會議，審議安全事項。（）9.個人防護裝備（PPE）的穿戴順序應為：先戴口罩，再穿隔離衣，最后戴手套。（）10.實驗室應急預案需定期演練（至少每年1次），并記錄演練效果。（）三、簡答題（每題6分，共5題，合計30分）1.簡述BSL-3實驗室與BSL-2實驗室的核心區(qū)別（從建筑結(jié)構(gòu)、防護要求、操作規(guī)范三方面回答）。2.列舉實驗室生物安全風險評估的主要內(nèi)容（至少5項）。3.說明實驗室發(fā)生樣本泄漏（含結(jié)核分枝桿菌）時的應急處理步驟。4.簡述實驗室人員進入BSL-3核心區(qū)的個人防護裝備穿戴流程（按順序列出）。5.解釋“三級包裝系統(tǒng)”在感染性樣本運輸中的具體要求及各層的作用。四、案例分析題（20分）背景：某高校BSL-2實驗室進行沙門氏菌（第二級病原微生物）培養(yǎng)實驗。實驗員張某在操作時未關閉生物安全柜玻璃門（高度超過20cm），離心時因離心管未平衡（重量差1.5g）導致離心機劇烈震動，其中一管樣本破裂，液體濺出至生物安全柜外臺面。張某立即用紙巾擦拭污染區(qū)域，未佩戴額外防護裝備，隨后繼續(xù)實驗。問題：1.分析案例中存在的生物安全違規(guī)操作（至少4項）。（8分）2.指出樣本泄漏后的正確處理步驟。（7分）3.提出實驗室針對此類事件的改進措施（至少3項）。（5分）參考答案一、單項選擇題1-5：D、C、D、B、B6-10：B、B、B、D、B11-15：D、A、B、C、C16-20：C、D、A、C、B二、判斷題1.×（BSL-1實驗室操作已知無或極低致病性微生物，需明確無致病性）2.√3.×（必須洗手并消毒）4.×（手臂應緩慢進出，避免干擾氣流）5.√6.×（生物安全柜內(nèi)火災需先關閉電源，使用專用滅火器，避免直接開啟柜門）7.×（感染性動物墊料需高壓滅菌后處理）8.√9.×（正確順序：先穿隔離衣，再戴口罩，最后戴手套）10.√三、簡答題1.核心區(qū)別：-建筑結(jié)構(gòu)：BSL-3實驗室需設置獨立的緩沖間、污染區(qū)-半污染區(qū)-清潔區(qū)三區(qū)劃分，核心區(qū)為負壓（-30Pa至-50Pa），配備雙扉高壓滅菌器；BSL-2實驗室無嚴格分區(qū)，僅需獨立操作間，保持微負壓或常壓。-防護要求：BSL-3需使用正壓式呼吸防護器或高效過濾式口罩（N95及以上）、雙層手套、全包裹式隔離衣；BSL-2使用普通外科口罩、單層手套、長袖實驗服即可。-操作規(guī)范：BSL-3要求所有操作在生物安全柜內(nèi)進行，禁止開啟門窗，實驗結(jié)束后需進行空間消毒（如甲醛熏蒸）；BSL-2允許部分開放操作（如無氣溶膠產(chǎn)生的實驗），操作后僅需臺面消毒。2.風險評估內(nèi)容：-病原微生物的危害等級（根據(jù)《病原微生物分類名錄》）；-實驗操作的風險點（如離心、勻漿、接種等易產(chǎn)生氣溶膠的步驟）；-現(xiàn)有防護措施的有效性（如生物安全柜性能、PPE質(zhì)量）；-人員培訓及操作能力（是否掌握SOP、應急處理）；-實驗室環(huán)境控制（通風系統(tǒng)、壓差、消毒設備）；-意外事件的可能性及后果（如泄漏、人員暴露）。3.結(jié)核分枝桿菌泄漏處理步驟：-立即停止操作，標記污染區(qū)域，限制人員進入；-佩戴N95口罩、雙層手套、護目鏡及防滲透隔離衣；-用吸水材料覆蓋污染區(qū)域（如紗布），倒上2000mg/L含氯消毒液（覆蓋紗布），靜置30分鐘；-從污染區(qū)域外圍向中心緩慢擦拭，將污染材料放入醫(yī)療廢物袋；-用2000mg/L含氯消毒液再次擦拭臺面，作用30分鐘；-記錄泄漏事件，報告實驗室負責人；-對暴露人員進行結(jié)核菌素試驗（PPD）篩查，必要時預防性用藥。4.BSL-3核心區(qū)PPE穿戴流程：-清潔區(qū)：換實驗室專用鞋，摘除首飾、手表；-半污染區(qū)：穿內(nèi)層一次性隔離衣（連體式），戴內(nèi)層乳膠手套（檢查無破損）；-緩沖間：戴N95口罩（做密合性測試），戴護目鏡（與口罩無間隙），穿外層防滲透隔離衣（帶帽子，完全覆蓋內(nèi)層），戴外層無粉乳膠手套（覆蓋隔離衣袖口）；-核心區(qū)入口：檢查所有防護裝備是否密封，確認無誤后進入。5.三級包裝系統(tǒng)要求：-主容器：防泄漏、耐壓力的密封容器（如螺口管、凍存管），標注樣本信息（名稱、數(shù)量、危害等級）；-輔助容器：防水、抗壓的次級包裝（如泡沫盒），填充吸水材料（如紗布、棉花），用于吸收主容器泄漏的液體；-外包裝：符合國際航空運輸協(xié)會（IATA）標準的硬質(zhì)箱（如塑料箱、金屬箱），標注“生物危害”標識、運輸責任方信息，確保在運輸中不受外力損壞。四、案例分析題1.違規(guī)操作：-生物安全柜玻璃門開啟高度超過標準（BSL-2實驗室要求≤20cm），影響氣流屏障；-離心管未平衡（重量差＞0.1g），違反離心機操作規(guī)范；-樣本濺出至生物安全柜外，未立即停止實驗并啟動應急程序；-用普通紙巾擦拭污染區(qū)域（未使用含氯消毒液），且未佩戴額外防護裝備（如護目鏡、雙層手套）；-未對污染區(qū)域進行徹底消毒（僅擦拭一次）。2.正確處理步驟：-立即停止實驗，關閉離心機，標記污染區(qū)域（生物安全柜外臺面）；-離開污染區(qū)域，在緩沖間穿戴N95口罩、雙層手套、護目鏡及防滲透隔離衣；-用紗布覆蓋污染區(qū)域，倒上1000mg/L含氯消毒液（覆蓋紗布），靜置30分鐘；-從外圍向中心緩慢擦拭，將污染紗布放入黃色醫(yī)療廢物袋，密封后高壓滅菌；-用1000mg/L含氯消毒液再次擦拭臺面，作用30分鐘；-對離心機進行消毒（75%酒精擦拭內(nèi)部），檢查是否損壞；-記錄事件經(jīng)過、處理措施及暴露人員信息，報告實驗室負責人；-