豬圓環(huán)病毒二型研究進(jìn)展Advancesinporcinecircovirustype2目錄摘要……………1關(guān)鍵詞…………11前言………………12豬圓環(huán)病毒二型的危害…………22.1抑制免疫系統(tǒng)…………………22.2斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征…………………22.3豬皮膚和腎病綜合征…………32.4豬呼吸疾病綜合征……………32.5母豬繁殖障礙綜合征…………33PCV2疫苗研究現(xiàn)狀……………43.1PCV2疫苗……………………4豬圓環(huán)病毒二型研究進(jìn)展摘要：豬圓環(huán)病毒1型（PCV1）于1974年被德國學(xué)者Tischer發(fā)現(xiàn)并于1982年命名，但PCV1不具備致病性，而讓豬圓環(huán)病毒被科學(xué)家重視的是1991年在加拿大發(fā)現(xiàn)的PCV的另一種病毒基因型：具有致病性的PCV2。PCV2感染能降低豬群的免疫能力，使豬群處于亞健康狀態(tài)，易感染其它病毒，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟(jì)產(chǎn)生巨大危害。本文主要講述豬圓環(huán)病毒二型的危害和PCV2疫苗的研究現(xiàn)狀，以及PCV2病毒樣顆粒（VLP）的研究進(jìn)展。從PCV的發(fā)現(xiàn)到其引發(fā)的疾病和國內(nèi)外對(duì)PCV2疫苗的制備、效果入手，對(duì)PCV2研究進(jìn)行了全面回顧，展望PCV2VLP疫苗的大好前景。關(guān)鍵詞：豬圓環(huán)病毒二型；病毒樣顆粒；疫苗；研究Abstract:Porcinecircovirustype1(PCV1)wasdiscoveredin1974byGermanresearcherTischerandnamedin1982,ButPCV1isnotpathogenic,andwhathasmadeporcinecircovirusimportanttoscientistsisanotherviralgenotypeofPCVdiscoveredinCanadain1991:thepathogenicPCV2.PCV2infectioncanreducetheimmuneabilityofthepigpopulation,makethepigpopulationinasub-healthystate,easytobeinfectedwithotherviruses,andcausegreatharmtotheeconomyofthepigindustry.Thispapermainlydescribestheharmofporcinecircovirustype2andthecurrentresearchstatusofPCV2vaccine,aswellastheresearchprogressofPCV2virus-likeparticles(VLP).FromthediscoveryofPCVtothediseasescausedbyPCVandthepreparationandeffectofPCV2vaccineathomeandabroad,theresearchonPCV2wasreviewedcomprehensively,andthepromisingprospectofPCV2VLPvaccinewasprospected.Keywords:Porcinecircovirustype2;Virus-likeparticle;vaccine;research1前言豬圓環(huán)病毒（Porcinecircovirus，PCV）于1974年被德國學(xué)者Tischer發(fā)現(xiàn)并于1982年被命名[1]，該病毒分屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，無囊膜，基因組為單股環(huán)狀DNA，直徑為14-17nm。是迄今為止發(fā)現(xiàn)的對(duì)哺乳動(dòng)物具有感染性且病毒粒子最小的動(dòng)物病毒。PCV對(duì)pH3的酸性環(huán)境、氯仿、高溫等不敏感。不具備血凝性。PCV可分為三個(gè)病毒基因型，不致病的PCV1、具有致病性的PCV2、以及新發(fā)現(xiàn)的PCV3[2]。在發(fā)現(xiàn)PCV1后不久，Ellis等在加拿大的一例斷奶豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(Post-weaningmultisystemicwastingsyndrome，PMWS）患豬體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了PCV2，并認(rèn)為PCV2感染與斷奶豬多系統(tǒng)衰竭綜合征有緊密的關(guān)系。之后的研究成果普遍認(rèn)為PCV2還會(huì)導(dǎo)致母豬繁殖障礙綜合征(SwinereproductivedisordersyndromeSRDS)、斷奶豬和育肥豬呼吸道綜合征(PorcinerespiratorydiseasecomplexPRDC)、豬皮膚和腎病綜合征(PorcinedermatitisandnephropathysyndromePDNS)等疾病。這些由PCV2引發(fā)的疾病稱為豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVrelateddisease，PCVRD）。PCV2的機(jī)理為：影響豬的免疫系統(tǒng)，引發(fā)免疫抑制，降低豬的抵抗力而易感染其它病原。到現(xiàn)在為止，PCV2主要有五種基因亞型：PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e[3]。PCV3于2016年被發(fā)現(xiàn)，目前研究尚少，但有研究稱PCV3感染有一定的季節(jié)性，春季感染率最高，夏季最低；對(duì)各個(gè)階段豬都具有感染性，且混合感染嚴(yán)重?，F(xiàn)在對(duì)PCV3的發(fā)病機(jī)理尚不清楚，致病性強(qiáng)弱也不了解，還需要進(jìn)一步研究。目前還沒有應(yīng)對(duì)PCV3感染的特效治療藥物與疫苗，防控措施必須要結(jié)合生物安全。2豬圓環(huán)病毒二型的危害2.1抑制免疫系統(tǒng)豬圓環(huán)病毒是一種引發(fā)豬免疫抑制疾病的病原，Darwich研究表明，感染PCV2的豬體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞與T細(xì)胞數(shù)量明顯比未感染豬少。據(jù)有關(guān)學(xué)者推測，樹狀突細(xì)胞可作為PCV2的載體，將PCV2傳輸?shù)搅馨推鞴?，淋巴器官中的DC再將PCV2傳送到體內(nèi)各處，PCV2不斷增殖，抑制體內(nèi)免疫系統(tǒng)，免疫功能下降，豬處于亞健康狀態(tài)，極易感染其他傳染病，且因病豬表現(xiàn)不明顯，往往被飼養(yǎng)員所忽視，錯(cuò)過最佳的防控時(shí)機(jī)[4]。2.2斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(Post-weaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)是一種由PCV2與其他病毒或細(xì)菌混合感染的傳染病，主要感染斷奶仔豬和生長前期育肥豬。該傳染病常見于5～16周齡的豬?；钾i大多表現(xiàn)為消瘦、淺腹股溝淋巴結(jié)腫大、呼吸困難、黃疸等。解剖病豬可見全身淋巴結(jié)腫大，胸肺萎陷，少數(shù)還可見到皮膚出血和壞死。仔豬只感染PCV2，只會(huì)表現(xiàn)出輕癥，若是PCV2與其他病毒或細(xì)菌共同感染，如豬細(xì)小病毒（PPV）、輸血性傳播病毒，則會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的系統(tǒng)衰竭。該病在豬群的發(fā)病率不高，但死亡率高達(dá)80%，幾乎沒有康復(fù)的豬。目前仍沒有有效的治療手段，抗生素對(duì)患病豬無效，但可以減少豬群的二次感染[5]。2.3豬皮膚和腎病綜合征豬皮膚和腎病綜合征(Porcinedermatitisandnephropathysyndrome,PDNS)是由PCV2感染育成豬與育肥豬引起的傳染病，主要表現(xiàn)為全身性脈管炎和腎小球腎炎。豬皮炎腎病綜合癥常出現(xiàn)混合感染或繼發(fā)感染多種病原，如溶血型鏈球菌（SS）、巴氏桿菌（PM）、副豬嗜血桿菌（HP）、壞死性桿菌、葡萄球菌等。該傳染病在豬的各日齡段均有發(fā)生，一般20-80kg的豬多發(fā)。多發(fā)于夏季。病豬主要表現(xiàn)為皮膚變紅，出現(xiàn)粉紅色丘疹，一般從臀部開始，蔓延到四肢、體側(cè)、耳朵等處，發(fā)展為丘疹破潰，流出黃色黏液，后結(jié)痂，結(jié)痂處破裂流膿出血，直至脫落。采食量嚴(yán)重下降，被毛粗糙，可見皮膚蒼白，病豬四肢和眼瞼水腫,體表淋巴結(jié)腫大,食欲喪失,治療不及時(shí)，短短幾天便會(huì)衰竭而死[6]。治療可用敏感抗生素，可用中草藥進(jìn)行防治。2.4豬呼吸疾病綜合征豬呼吸疾病綜合征(Porcinerespiratorydiseasecomplex,PRDC)是多因子疾病綜合征。該病發(fā)病沒有季節(jié)性，秋冬季發(fā)病率高。該病的發(fā)病機(jī)理為病原體通過呼吸道進(jìn)入豬體，侵害機(jī)體。常為雙重感染或多重感染。常見于育肥豬，病豬大多表現(xiàn)為體溫升高,食欲下降或廢絕，呼吸困難，生長緩慢，日漸消瘦。解剖可見淋巴結(jié)腫大，內(nèi)臟發(fā)生實(shí)質(zhì)硬度。豬呼吸疾病綜合征包括豬瘟、偽狂犬病、豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征、豬肺疫、支原體肺炎、萎縮性鼻炎、鏈球菌病等，所以防控時(shí)應(yīng)注意這些病的疫苗接種。雖然該病的病死率不高，但發(fā)病率高，且為長期發(fā)病，嚴(yán)重危害了豬場的經(jīng)濟(jì)效益[7]。2.5母豬繁殖障礙綜合征母豬繁殖障礙綜合征(SRDS)是指由于多種病原因子的感染或作用而引起的妊娠母豬不發(fā)情、發(fā)情推遲、不孕以及出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎和公母豬的不育癥為其主的一種傳染病?；钾i常表現(xiàn)為不孕，體內(nèi)胎兒易發(fā)生溶解、流產(chǎn)，產(chǎn)出的胎兒過少或?yàn)樗捞ヅc木乃伊胎。有的病原因子還可感染產(chǎn)出的仔豬,引起仔豬的大量死亡,也會(huì)導(dǎo)致母豬不發(fā)情和產(chǎn)后無乳綜合征等。主要的傳染源是病豬和帶毒豬,傳播途徑主要是通過呼吸道傳播,也可通過垂直傳播[8]。公豬感染本病后從精液中排出的豬精子活力差,配種率降低，導(dǎo)致繁殖障礙。母豬圓環(huán)病毒感染呈現(xiàn)相關(guān)的繁殖障礙綜合征也可通過母體垂直傳播給仔豬，另據(jù)試驗(yàn)表明，公豬也可通過精液將豬圓環(huán)病毒傳染給母豬，并引發(fā)母豬出現(xiàn)相關(guān)繁殖障礙綜合征。感染母豬有明顯的排毒現(xiàn)象,而耐過豬可長期帶毒并不斷向體外排毒。死后剖檢的主要病變?yōu)槿砹馨徒Y(jié)腫脹，部分淋巴結(jié)出血和非化膿性心肌炎[9]。根據(jù)最近幾年的新聞報(bào)道,豬群中母豬繁殖障礙綜合征的發(fā)病率很高，中國各地都發(fā)生過母豬繁殖障礙綜合征，該病沒有有效治療藥物，又因?yàn)榭祻?fù)的母豬的生產(chǎn)能力下降，一不注意便會(huì)造成重大損失，需要嚴(yán)格按照免疫程序進(jìn)行免疫接種。3PCV2疫苗研究現(xiàn)狀3.1PCV2疫苗豬圓環(huán)病毒2型引發(fā)的豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病嚴(yán)重危害了世界養(yǎng)豬業(yè)，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)過國內(nèi)外學(xué)者的努力研究，目前已經(jīng)研制出了PCV2滅活疫苗、PCV2病毒疫苗和PCV2基因工程疫苗等。而PCV2基因工程疫苗又有PCV2亞單位疫苗、重組PCV2活體疫苗、PCV2核酸疫苗、PCV1-2嵌合疫苗和PCV2標(biāo)記疫苗。通過大量的實(shí)驗(yàn)，普遍認(rèn)為現(xiàn)有的PCV2疫苗在一定程度上能預(yù)防PCV2感染，提高豬群的免疫功能，但面對(duì)被感染豬群，既不能徹底阻止PCV2的傳播，也沒法徹底清除豬體內(nèi)的豬圓環(huán)2型病毒，且因PCV2疫苗價(jià)格昂貴，中小型豬場難以承受，所以現(xiàn)在急需價(jià)格低廉、效果好的新型疫苗[10]。3.2國外PCV2疫苗研究現(xiàn)狀2006年，在美國通過審批了第一種商業(yè)用的PCV2疫苗，在此之后，養(yǎng)豬生產(chǎn)者至少有4種商用疫苗可供選用。這些疫苗包括Circovac?PCV2疫苗、FosteraTMPCV疫苗以及Suvaxyn?PCV2OneDoseTM疫苗。Circovac?PCV2疫苗用于接種仔豬和母豬，而FosteraTMPCV疫苗是嵌合病毒滅活苗，用于接種21天齡的仔豬[11]。CircovacR是美國第一種商用PCV2疫苗,試驗(yàn)表明,免疫接種該疫苗能有效降低仔豬死亡率,保護(hù)淋巴系統(tǒng)不受PCV2危害[12]。Opriessnig通過實(shí)驗(yàn)表明嵌合病毒滅活疫苗SuvaxynPCV2Onedose能使豬免受PCV2引起的病毒血癥，還能保護(hù)淋巴系統(tǒng)。研究表明該疫苗具有抗母源抗體干擾的特點(diǎn)。目前該疫苗已上市推廣至全世界。IngelvacCircoFLEX、Circumvent和Porcilis等PCV2疫苗用于接種21天齡以上仔豬[13-14]。3.3國內(nèi)PCV2疫苗研究現(xiàn)狀劉長明學(xué)者以PCV2/LG株為種毒，用PK15培養(yǎng)增殖病毒，病毒液滅活后與佐劑混合而成，該疫苗特點(diǎn)是病毒含量高、僅兩周可產(chǎn)生抗體和幾乎沒有危害性[15]。姜平教授研發(fā)制備的PCV2疫苗（SH株）已經(jīng)在全國各地推廣使用。李玉峰學(xué)者用病毒液制備PCV2滅活苗，該滅活苗對(duì)豬體的傷害很小,僅免疫接種2次就可產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答,生成抗體。研究表明該滅活苗可有效的預(yù)防PCV2感染[16]。4PCV2VLP研究進(jìn)展病毒樣顆粒(viruslikeparticle,VLP)是一種與病毒高度相似的空心顆粒，空間構(gòu)象上與病毒顆粒相似，與病毒入侵一樣的途徑，沒有病毒的基因組，卻能誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答，被認(rèn)為可以制備出安全、有效的疫苗[17]。病毒樣顆粒擁有與天然圓環(huán)病毒粒子相似的構(gòu)象和抗原表位，將這些VLPs注射到動(dòng)物體內(nèi)能有效的誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答，當(dāng)病毒入侵機(jī)體，免疫系統(tǒng)檢測到高度相似的抗原表位，淋巴細(xì)胞介導(dǎo)特異性免疫清除病毒[18]。GrahamDY等學(xué)者用來從免疫接種諾瓦克病毒VLP的動(dòng)物體內(nèi)得到抗體。VLP可作為安全有效的疫苗，這些年科學(xué)家對(duì)VLP進(jìn)行了大量的研究。PCV2基因組中ORF2能編碼病毒的衣殼蛋白,用桿狀病毒表達(dá)ORF2基因發(fā)現(xiàn),在電鏡下能觀察到Cap蛋白可以自我裝配成病毒衣殼樣顆粒[19]。ORF2編碼PCV2的唯一結(jié)構(gòu)蛋白：衣殼蛋白Cap，而PCV2Cap蛋白基因經(jīng)BEVS表達(dá)后,能夠自組裝VLPs[20]。由于VLP具有與病毒相似的空間構(gòu)象和誘導(dǎo)中和抗體的抗原表位,在進(jìn)入機(jī)體后,會(huì)被抗原提呈細(xì)胞攝取,進(jìn)行加工處理后能夠以抗原肽-MHCI類分子復(fù)合物的形式將抗原信息提呈給CD8+T細(xì)胞,發(fā)揮CTL特異性地殺傷靶細(xì)胞的功能，同時(shí)能刺激B細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體,因此VLP作為疫苗有很大的前景[21]。盡管VLP被很多學(xué)者看好，但張顏學(xué)者提出有些抗原在組成VLPs時(shí)存在缺陷，不能形成完美的VLPs，甚至有些抗原無法被機(jī)體識(shí)別，機(jī)體無法產(chǎn)生免疫應(yīng)答。研究表明VLPs在低溫下能穩(wěn)定保存，對(duì)堿性環(huán)境敏感，海藻糖能提高VLPs的穩(wěn)定性，從而保存更久[22]。目前國內(nèi)對(duì)病毒樣顆粒的研究較少，相關(guān)的VLP疫苗也只有3種人用疫苗[23]，但由于VLP與病毒相似的空間構(gòu)象、不含病毒基因組卻能引起機(jī)體的免疫應(yīng)答的特性，在免疫預(yù)防PCVRD上具有很好的發(fā)展前景。參考文獻(xiàn)TISCHERI,RASCHUR,TOCHTENMANNG.Characterizationofpapovavirusandpicornavirus-likearticlesinpermanentpigkidneycelllines[J].ZentralblBakteriol,1974,226:153-167.史巖,秦愛建.豬圓環(huán)病毒2型生物學(xué)特性與致病特征研究進(jìn)展[J].揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2010,31(01):10-15.胡意,王愛兵.豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）不同基因亞型間混合感染及進(jìn)化的研究[D].湖南:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué).2017：1.吳德銘,曹永長,畢英佐.豬圓環(huán)病毒研究進(jìn)展[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2004(01):79-82.王濤,王子軾,彭德旺.豬圓環(huán)病毒感染與斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2002(03):314-316.研究進(jìn)展[J].揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2010,31(01):10-15.金石,白子金,徐斌龍,白志超.豬病診治問答(連載19)[J].養(yǎng)豬,2007(05):82-83.陳延俊,吳敏芳,黨聯(lián)銀.豬呼吸系統(tǒng)疾病綜合征的病因分析及防治對(duì)策[J].畜禽業(yè),2012(09):8-9.牛德料,孟日增,劉彩俠.母豬繁殖障礙綜合征的病因分析與防制措施[J].畜禽業(yè),2008(03):8-11.張棟,王善輝,王振勇.豬繁殖與呼吸綜合征的臨床癥狀與鑒別診斷[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2006(01):57-58.王一平,郭龍軍,唐青海,劉長明.豬圓環(huán)病毒2型疫苗的研究進(jìn)展[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2012,43(09):1337-1345.劉國民,ZahraAfghaha,BrettWebbb,Xiang-JinMengc,SheelaRamamoorthy.PCV2疫苗和免疫接種的10年:凈化能否成為事實(shí)[J].國外畜牧學(xué)(豬與禽),2019,39(09):85-88.邢海云,趙建增,趙亞榮.豬2型圓環(huán)病毒疫苗的研究進(jìn)展[J].中國生物制品學(xué)雜志,2009,22(03):305-308.OpriessnigT,PattersonAR,MadsonDM,etal.Comparisonoftheeffectivenessofpassive(dam)versusactive(piglet)immunizationagainstporcinecircovirustype2(PCV2)andimpactofpassivelyderivedPCV2vaccineinducedimmunity