試管操作培訓(xùn)試題及答案1.以下哪種溶液在配制培養(yǎng)基時(shí)常用作緩沖劑（）A.鹽酸B.氫氧化鈉C.磷酸二氫鉀D.氯化鈉答案：C2.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)培養(yǎng)箱的溫度要求一般為（）A.20℃B.30℃C.37℃D.42℃答案：C3.進(jìn)行試管操作時(shí)，酒精燈的正確使用方法是（）A.直接用打火機(jī)點(diǎn)燃B.用火柴從下往上點(diǎn)燃C.用已點(diǎn)燃的酒精燈去引燃D.隨意放置酒精燈答案：B4.以下哪種儀器用于精確吸取少量液體（）A.量筒B.滴管C.移液器D.燒杯答案：C5.配制培養(yǎng)基時(shí)，需要嚴(yán)格控制的條件不包括（）A.溫度B.時(shí)間C.溶液顏色D.酸堿度答案：C6.在進(jìn)行細(xì)胞傳代操作時(shí)，一般選擇細(xì)胞處于（）時(shí)進(jìn)行。A.潛伏期B.對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期C.平臺(tái)期D.衰退期答案：B7.用于消毒試管操作臺(tái)面的常用消毒劑是（）A.清水B.酒精C.生理鹽水D.蒸餾水答案：B8.以下哪種試劑在細(xì)胞凍存時(shí)常用作保護(hù)劑（）A.甘油B.甲醛C.硫酸銅D.硫酸亞鐵答案：A9.進(jìn)行試管操作時(shí)，為防止交叉污染，以下做法正確的是（）A.不同試劑瓶使用同一滴管B.操作過(guò)程中頻繁說(shuō)話C.定期更換實(shí)驗(yàn)服D.不戴手套進(jìn)行操作答案：C10.細(xì)胞培養(yǎng)所用的血清一般需要經(jīng)過(guò)（）處理。A.高溫滅菌B.過(guò)濾除菌C.紫外線照射D.化學(xué)沉淀答案：B11.配制好的培養(yǎng)基應(yīng)在（）內(nèi)使用。A.當(dāng)天B.一周C.一個(gè)月D.三個(gè)月答案：A12.觀察細(xì)胞形態(tài)時(shí)，常用的顯微鏡是（）A.體視顯微鏡B.電子顯微鏡C.光學(xué)顯微鏡D.熒光顯微鏡答案：C13.以下哪種操作可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染（）A.在超凈臺(tái)內(nèi)操作B.操作前洗手并消毒C.打開培養(yǎng)瓶長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中D.定期清潔培養(yǎng)箱答案：C14.細(xì)胞凍存時(shí)，凍存管應(yīng)放入（）中。A.液氮罐B.冰箱冷藏室C.烤箱D.水浴鍋答案：A15.進(jìn)行試管操作時(shí)，正確的著裝是（）A.穿拖鞋B.穿實(shí)驗(yàn)服、戴手套和口罩C.穿便服D.不戴帽子答案：B16.培養(yǎng)基中添加抗生素的目的是（）A.促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)B.抑制微生物污染C.調(diào)節(jié)酸堿度D.提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)答案：B17.細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，常用的計(jì)數(shù)板是（）A.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板B.電子計(jì)數(shù)板C.玻璃計(jì)數(shù)板D.塑料計(jì)數(shù)板答案：A18.以下哪種操作不屬于試管操作的基本技能（）A.培養(yǎng)基的配制B.細(xì)胞的接種C.標(biāo)本的采集D.電腦編程答案：D19.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色變黃，可能的原因是（）A.細(xì)胞生長(zhǎng)良好B.培養(yǎng)基過(guò)期C.二氧化碳濃度過(guò)高D.污染答案：D20.進(jìn)行試管操作時(shí)，實(shí)驗(yàn)廢棄物應(yīng)（）A.隨意丟棄B.分類收集，統(tǒng)一處理C.倒入下水道D.扔到垃圾桶答案：B1.試管操作中常用的玻璃儀器有（）A.試管B.滴管C.移液器槍頭D.培養(yǎng)瓶答案：ABD2.細(xì)胞培養(yǎng)所需的條件包括（）A.適宜的溫度B.合適的酸堿度C.充足的氧氣D.無(wú)菌環(huán)境答案：ABCD3.配制培養(yǎng)基時(shí)需要用到的原料有（）A.氨基酸B.維生素C.無(wú)機(jī)鹽D.血清答案：ABCD4.進(jìn)行細(xì)胞傳代操作時(shí)，需要用到的工具包括（）A.胰蛋白酶B.吸管C.離心管D.顯微鏡答案：ABCD5.防止細(xì)胞污染的措施有（）A.在超凈臺(tái)內(nèi)操作B.嚴(yán)格消毒實(shí)驗(yàn)用品C.定期更換培養(yǎng)基D.操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程答案：ABCD6.細(xì)胞凍存的步驟包括（）A.收集細(xì)胞B.加入凍存保護(hù)劑C.分裝到凍存管D.放入液氮罐答案：ABCD7.觀察細(xì)胞形態(tài)時(shí)，可以使用的染色方法有（）A.蘇木精-伊紅染色B.吉姆薩染色C.臺(tái)盼藍(lán)染色D.熒光染色答案：ABCD8.試管操作中可能用到的防護(hù)用品有（）A.手套B.口罩C.護(hù)目鏡D.防護(hù)服答案：ABCD9.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需要定期檢查的項(xiàng)目有（）A.細(xì)胞形態(tài)B.培養(yǎng)基顏色C.細(xì)胞密度D.培養(yǎng)箱溫度答案：ABCD10.進(jìn)行試管操作時(shí)，正確的實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)包括（）A.實(shí)驗(yàn)日期B.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果D.操作人員答案：ABCD1.進(jìn)行試管操作時(shí)，可以不戴手套。（）答案：×2.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基可以不進(jìn)行無(wú)菌處理。（）答案：×3.酒精燈使用完畢后，直接用嘴吹滅。（）答案：×4.移液器可以吸取任何液體。（）答案：×5.細(xì)胞凍存時(shí)，凍存速度越快越好。（）答案：×6.超凈臺(tái)在使用前不需要進(jìn)行消毒。（）答案：×7.觀察細(xì)胞形態(tài)時(shí)，不需要使用顯微鏡。（）答案：×8.培養(yǎng)基配制好后，可長(zhǎng)期保存?zhèn)溆?。（）答案：?.細(xì)胞傳代次數(shù)越多越好。（）答案：×10.進(jìn)行試管操作時(shí)，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面可以不保持整潔。（）答案：×1.細(xì)胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基類型有（）培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基。答案：含血清2.配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先將各種成分溶解在適量的（）中。答案：蒸餾水3.細(xì)胞接種時(shí)，一般按照（）的比例將細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)容器中。答案：合適（如1:2、1:3等，根據(jù)細(xì)胞類型而定）（注：這里答案不唯一，需要根據(jù)具體細(xì)胞類型的接種比例填寫合適數(shù)字或范圍）4.進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，需要將細(xì)胞懸液與（）混合后滴加到計(jì)數(shù)板上。答案：臺(tái)盼藍(lán)5.細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)的二氧化碳濃度一般維持在（）。答案：5%6.試管操作前，雙手應(yīng)使用（）進(jìn)行消毒。答案：酒精7.細(xì)胞凍存時(shí)，一般將凍存管放入（）中，以每分鐘1℃的速度降溫。答案：程序降溫盒8.觀察細(xì)胞形態(tài)時(shí)，應(yīng)將顯微鏡的（）調(diào)節(jié)到合適位置。答案：焦距9.配制培養(yǎng)基時(shí)，需要用（）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的酸堿度。答案：酸堿緩沖液（如碳酸氫鈉溶液、鹽酸等，根據(jù)實(shí)際情況填寫）10.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)定期更換（），以保證細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。答案：培養(yǎng)基1.簡(jiǎn)述細(xì)胞傳代的基本步驟。答案：棄去原培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基。用PBS緩沖液沖洗細(xì)胞1-2次，去除殘留培養(yǎng)基。加入適量胰蛋白酶，覆蓋細(xì)胞，放入培養(yǎng)箱中消化適當(dāng)時(shí)間（一般1-3分鐘，根據(jù)細(xì)胞類型而定）。在顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞變圓、彼此分離時(shí)，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。用吸管輕輕吹打細(xì)胞，使其分散成單細(xì)胞懸液。將細(xì)胞懸液按照合適比例接種到新的培養(yǎng)瓶中，加入適量新鮮培養(yǎng)基。將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中，在適宜條件下培養(yǎng)。2.如何正確使用移液器？答案：根據(jù)需要吸取的液體體積，旋轉(zhuǎn)移液器的量程調(diào)節(jié)旋鈕，設(shè)定合適的量程。將移液器的槍頭套在移液器的頭部，確保安裝牢固。垂直握住移液器，將槍頭插入液面下適當(dāng)深度，避免吸入氣泡。緩慢松開移液器的控制按鈕，吸取液體至設(shè)定體積。將移液器從液體中取出，保持垂直，輕輕靠在容器壁上，使槍頭外壁的液體流回容器。將移液器移至目標(biāo)容器，垂直向下，緩慢按下控制按鈕，將液體準(zhǔn)確放出。使用完畢后，將槍頭取下，妥善處理，然后將移液器量程調(diào)至最大刻度，放回移液器架。3.簡(jiǎn)述細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)。答案：選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存，確保細(xì)胞狀態(tài)良好。凍存前一天更換新鮮培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于良好的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)。按照合適比例配制凍存液，一般為細(xì)胞懸液與凍存保護(hù)劑（如甘油或DMSO）按9:1混合。將細(xì)胞懸液分裝到合適的凍存管中，注意不要裝得太滿，一般為凍存管體積的2/3左右。將凍存管放入程序降溫盒中，然后放入-80℃冰箱過(guò)夜，使細(xì)胞緩慢降溫。第二天將凍存管轉(zhuǎn)移至液氮罐中保存，注意做好標(biāo)記，記錄凍存時(shí)間、細(xì)胞名稱等信息。4.如何保證試管操作的無(wú)菌環(huán)境？答案：在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行操作，操作前打開超凈臺(tái)的紫外燈照射30分鐘以上進(jìn)行消毒，操作時(shí)關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機(jī)。操作人員穿戴好實(shí)驗(yàn)服、口罩、帽子和手套，避免皮膚暴露。操作臺(tái)面保持整潔，定期用酒精擦拭消毒。使用的所有實(shí)驗(yàn)用品，如試管、滴管、移液器槍頭、培養(yǎng)基等，均需經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理。操作過(guò)程中動(dòng)作要輕緩，盡量減少空氣流動(dòng)，避免灰塵和微生物進(jìn)入操作區(qū)域。避免在超凈臺(tái)內(nèi)頻繁說(shuō)話、走動(dòng)，減少污染機(jī)會(huì)。1.論述試管操作在細(xì)胞培養(yǎng)中的重要性。答案：精準(zhǔn)操作保障細(xì)胞生長(zhǎng)：試管操作中的培養(yǎng)基配制、細(xì)胞接種、傳代等環(huán)節(jié)，都需要精確控制，確保為細(xì)胞提供適宜的營(yíng)養(yǎng)、酸堿度、溫度等條件，從而保障細(xì)胞正常生長(zhǎng)和增殖。防止污染維持細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境：嚴(yán)格的無(wú)菌操作是試管操作的關(guān)鍵，能有效防止微生物污染細(xì)胞培養(yǎng)體系。一旦污染，細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)受到嚴(yán)重影響甚至死亡，無(wú)菌的試管操作能維持細(xì)胞培養(yǎng)的純凈環(huán)境，保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。準(zhǔn)確記錄為研究提供依據(jù)：在試管操作過(guò)程中，準(zhǔn)確記錄實(shí)驗(yàn)步驟、時(shí)間、觀察結(jié)果等信息，有助于后續(xù)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程的分析和研究。這些記錄為細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的科研工作提供了重要的數(shù)據(jù)支持，便于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)化培養(yǎng)條件。實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化和可重復(fù)性：規(guī)范的試管操作流程使得細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程具有標(biāo)準(zhǔn)化，不同實(shí)驗(yàn)人員按照相同的操作規(guī)范進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，能夠得到相對(duì)一致的結(jié)果，保證了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性，有利于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在科研、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用和深入研究。2.論述如何提高試管操作的準(zhǔn)確性和效率。答案：充分準(zhǔn)備：在進(jìn)行試管操作前，仔細(xì)規(guī)劃實(shí)驗(yàn)流程，準(zhǔn)備好所需的全部試劑、儀器和耗材，并確保其處于良好狀態(tài)。熟悉實(shí)驗(yàn)步驟和要求，明確各操作環(huán)節(jié)的目的和注意事項(xiàng)。規(guī)范操作手法：嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行每一個(gè)動(dòng)作，如移液器的正確使用、試劑的準(zhǔn)確吸取和添加、細(xì)胞的接種和傳代操作等。保持操作的穩(wěn)定性和連貫性，避免因手法不熟練或操作不當(dāng)導(dǎo)致誤差。定期培訓(xùn)與練習(xí)：不斷參加相關(guān)的培訓(xùn)課程，學(xué)習(xí)新的試管操作技術(shù)和方法，了解行業(yè)最新動(dòng)態(tài)。定期進(jìn)行操作練習(xí)，通過(guò)反復(fù)實(shí)踐提高操作的熟練度和準(zhǔn)確性，形成肌肉記憶，減少操作失誤。使用合適的儀器和工具：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇精度高、質(zhì)量可靠的儀器和工具，如準(zhǔn)確的移液器、優(yōu)質(zhì)的試管和培養(yǎng)瓶等。定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)和維護(hù)，確保其性能穩(wěn)定，能夠準(zhǔn)確地完成各項(xiàng)操作任務(wù)。做好實(shí)驗(yàn)記錄與總結(jié)：在操作過(guò)程中，及時(shí)、準(zhǔn)確地記錄每一個(gè)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。操作結(jié)束后，對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行回顧和總結(jié)，分析出現(xiàn)的問(wèn)題和不足之處，思考改進(jìn)方法，不斷積累經(jīng)驗(yàn)，逐步提高操作的準(zhǔn)確性和效率。3.在試管操作中，如何避免細(xì)胞污染？請(qǐng)?jiān)敿?xì)論述。答案：操作環(huán)境的控制：在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行操作，超凈臺(tái)應(yīng)提前進(jìn)行清潔和消毒，定期檢查其過(guò)濾系統(tǒng)是否正常工作。操作前打開紫外燈照射30分鐘以上，操作時(shí)關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機(jī)，保持臺(tái)內(nèi)空氣流通且無(wú)塵埃顆粒。操作人員的防護(hù)：操作人員應(yīng)穿戴經(jīng)過(guò)消毒的實(shí)驗(yàn)服、口罩、帽子和手套，避免皮膚暴露在外。操作前認(rèn)真洗手并消毒，操作過(guò)程中盡量減少身體的移動(dòng)和交談，防止飛沫污染。實(shí)驗(yàn)用品的處理：所有使用的實(shí)驗(yàn)用品，如試管、滴管、移液器槍頭、培養(yǎng)基、血清等，都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理。玻璃器皿可采用高溫高壓滅菌，塑料制品可采用化學(xué)消毒劑浸泡或輻照滅菌。使用一次性無(wú)菌耗材，避免重復(fù)使用帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn)。無(wú)菌操作技術(shù)：在吸取和轉(zhuǎn)移液體時(shí)，確保移液器槍頭垂直插入液面下適當(dāng)深度，避免吸入氣泡，防止液體外濺。操作過(guò)程中，試劑瓶、培養(yǎng)瓶等容器的瓶口應(yīng)盡量靠近超凈臺(tái)的火焰區(qū)域進(jìn)行短暫灼燒，以殺滅可能附著的微生物，但要注意避免燙傷。不同試劑瓶使用不同的滴管，避免交叉污染。定期監(jiān)測(cè)與維護(hù)：定期對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行微生物檢測(cè)，如使用無(wú)菌平板進(jìn)行培養(yǎng)，檢查是否有細(xì)菌、真菌等污染。定期清潔和消毒培養(yǎng)箱，更換水盤和濾網(wǎng)，保持培養(yǎng)箱內(nèi)環(huán)境清潔。對(duì)超凈臺(tái)進(jìn)行定期的性能檢測(cè)和維護(hù)，確保其正常運(yùn)行。4.論述試管操作與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的關(guān)系。答案：試管操作準(zhǔn)確性決定實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性：準(zhǔn)確的試管操作，如精確的試劑配制、細(xì)胞接種密度的控制、無(wú)菌操作等，能夠?yàn)榧?xì)胞實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定、可靠的條件。只有操作準(zhǔn)確無(wú)誤，才能保證細(xì)胞在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng)和反應(yīng)，從而使實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)反映細(xì)胞的生物學(xué)特性和實(shí)驗(yàn)預(yù)期，結(jié)果具有可重復(fù)性和可信度。操作規(guī)范影響細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)而影響結(jié)果：規(guī)范的試管操作流程有助于維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。例如，合適的培養(yǎng)基更換時(shí)間、傳代時(shí)機(jī)等操作規(guī)范，能保證細(xì)胞獲得充足的營(yíng)養(yǎng)，避免細(xì)胞老化或過(guò)度生長(zhǎng)，使細(xì)胞處于良好的活性和功能狀態(tài)，進(jìn)而產(chǎn)生準(zhǔn)確、有效的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。反之，不規(guī)范的操作可能導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)異常，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果