細(xì)胞治療CAR-NK細(xì)胞制備考試試卷與答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.CAR-NK細(xì)胞中“CAR”的中文是？A.嵌合抗原受體B.腫瘤相關(guān)抗原C.自然殺傷細(xì)胞D.細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞2.以下哪種不屬于NK細(xì)胞的來(lái)源？A.外周血B.臍帶血C.胚胎干細(xì)胞D.脂肪組織3.CAR-NK細(xì)胞制備過(guò)程中常用的轉(zhuǎn)染技術(shù)是？A.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染B.電穿孔轉(zhuǎn)染C.病毒載體轉(zhuǎn)染D.以上都常用4.培養(yǎng)CAR-NK細(xì)胞時(shí)，常用的培養(yǎng)基是？A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.F125.檢測(cè)CAR-NK細(xì)胞活性常用的方法是？A.MTT法B.流式細(xì)胞術(shù)C.免疫熒光法D.ELISA法6.制備CAR-NK細(xì)胞的第一步一般是？A.基因構(gòu)建B.細(xì)胞采集C.細(xì)胞培養(yǎng)D.細(xì)胞凍存7.CAR-NK細(xì)胞相比CAR-T細(xì)胞，優(yōu)勢(shì)在于？A.安全性更高B.制備更復(fù)雜C.靶向性更弱D.增殖能力更強(qiáng)8.凍存CAR-NK細(xì)胞常用的保護(hù)劑是？A.DMSOB.甘油C.乙醇D.葡萄糖9.以下哪種細(xì)胞因子對(duì)NK細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用？A.IL-2B.TNF-αC.IFN-γD.TGF-β10.評(píng)估CAR-NK細(xì)胞質(zhì)量時(shí)，不包括以下哪項(xiàng)指標(biāo)？A.細(xì)胞純度B.細(xì)胞活力C.細(xì)胞大小D.表面標(biāo)志物表達(dá)二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.制備CAR-NK細(xì)胞所需的基本設(shè)備有（）A.流式細(xì)胞儀B.細(xì)胞培養(yǎng)箱C.離心機(jī)D.移液器2.CAR-NK細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)包括（）A.低免疫原性B.非MHC限制性C.多種殺傷機(jī)制D.不易引起細(xì)胞因子風(fēng)暴3.常用的基因載體用于構(gòu)建CAR基因的有（）A.慢病毒載體B.腺病毒載體C.質(zhì)粒載體D.噬菌體載體4.在CAR-NK細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，可能添加的成分有（）A.胎牛血清B.細(xì)胞因子C.抗生素D.生長(zhǎng)因子5.檢測(cè)CAR-NK細(xì)胞的靶向性，可采用的方法有（）A.免疫熒光B.流式細(xì)胞術(shù)C.細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)D.基因測(cè)序6.影響CAR-NK細(xì)胞制備質(zhì)量的因素有（）A.起始細(xì)胞質(zhì)量B.培養(yǎng)條件C.轉(zhuǎn)染效率D.操作人員技術(shù)7.CAR-NK細(xì)胞治療可能面臨的挑戰(zhàn)有（）A.細(xì)胞擴(kuò)增困難B.體內(nèi)存活時(shí)間短C.脫靶效應(yīng)D.生產(chǎn)成本高8.細(xì)胞采集過(guò)程中，需要注意的事項(xiàng)有（）A.采集量B.采集時(shí)間C.無(wú)菌操作D.樣本保存9.用于鑒定CAR-NK細(xì)胞的表面標(biāo)志物有（）A.CD56B.CD16C.CAR分子D.CD310.以下哪些屬于CAR-NK細(xì)胞的殺傷機(jī)制（）A.釋放穿孔素和顆粒酶B.激活凋亡途徑C.ADCC效應(yīng)D.分泌細(xì)胞因子三、判斷題（每題2分，共10題）1.CAR-NK細(xì)胞可以直接從人體分離獲得，無(wú)需基因改造。（）2.培養(yǎng)CAR-NK細(xì)胞時(shí)，溫度必須嚴(yán)格控制在37℃。（）3.轉(zhuǎn)染效率對(duì)CAR-NK細(xì)胞的制備成功與否影響不大。（）4.檢測(cè)CAR-NK細(xì)胞活性只能用MTT法。（）5.外周血來(lái)源的NK細(xì)胞比臍帶血來(lái)源的NK細(xì)胞更適合制備CAR-NK細(xì)胞。（）6.制備CAR-NK細(xì)胞過(guò)程中，所有操作都需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。（）7.CAR-NK細(xì)胞治療腫瘤不會(huì)有任何副作用。（）8.凍存的CAR-NK細(xì)胞復(fù)蘇后活性不會(huì)受到影響。（）9.細(xì)胞因子的種類(lèi)和濃度會(huì)影響CAR-NK細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。（）10.只要CAR基因構(gòu)建成功，CAR-NK細(xì)胞就一定能發(fā)揮靶向殺傷作用。（）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述CAR-NK細(xì)胞制備的主要步驟。2.說(shuō)明CAR-NK細(xì)胞與CAR-T細(xì)胞在治療上的主要差異。3.列舉兩種檢測(cè)CAR-NK細(xì)胞活性的方法及原理。4.簡(jiǎn)述影響CAR-NK細(xì)胞體外擴(kuò)增的因素。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論CAR-NK細(xì)胞在實(shí)體瘤治療中的優(yōu)勢(shì)與挑戰(zhàn)。2.如何進(jìn)一步優(yōu)化CAR-NK細(xì)胞的制備工藝以提高其療效和安全性？3.分析CAR-NK細(xì)胞治療可能面臨的倫理問(wèn)題及應(yīng)對(duì)策略。4.探討CAR-NK細(xì)胞與其他免疫治療方法聯(lián)合應(yīng)用的前景和可能面臨的問(wèn)題。答案一、單項(xiàng)選擇題1.A2.D3.D4.B5.A6.B7.A8.A9.A10.C二、多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABC6.ABCD7.ABCD8.ACD9.ABC10.ABCD三、判斷題1.×2.√3.×4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.×四、簡(jiǎn)答題1.主要步驟：細(xì)胞采集（外周血、臍帶血等獲取NK細(xì)胞）；基因構(gòu)建（構(gòu)建含CAR基因載體）；轉(zhuǎn)染（將載體轉(zhuǎn)入NK細(xì)胞）；細(xì)胞培養(yǎng)（添加合適成分培養(yǎng)擴(kuò)增）；質(zhì)量檢測(cè)（檢測(cè)活性、純度等指標(biāo)）。2.差異：CAR-NK細(xì)胞免疫原性低，不易引起嚴(yán)重免疫反應(yīng)；非MHC限制，識(shí)別更廣泛；不易引發(fā)細(xì)胞因子風(fēng)暴；而CAR-T細(xì)胞靶向性強(qiáng)但可能有嚴(yán)重副作用。3.MTT法：活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使MTT還原為不溶性藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚，通過(guò)檢測(cè)吸光度反映細(xì)胞活性。流式細(xì)胞術(shù)：利用熒光標(biāo)記抗體結(jié)合細(xì)胞表面或胞內(nèi)分子，通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量和活性相關(guān)指標(biāo)。4.因素：起始NK細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量；培養(yǎng)基成分（營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、細(xì)胞因子等）；培養(yǎng)條件（溫度、pH、氣體環(huán)境等）；轉(zhuǎn)染效率影響細(xì)胞生長(zhǎng)；培養(yǎng)體系的污染情況等。五、討論題1.優(yōu)勢(shì)：低免疫原性、多種殺傷機(jī)制、不易引起細(xì)胞因子風(fēng)暴，對(duì)實(shí)體瘤有潛在治療效果。挑戰(zhàn)：在實(shí)體瘤中浸潤(rùn)能力弱、腫瘤微環(huán)境抑制其活性、大規(guī)模制備工藝待完善。2.優(yōu)化工藝：篩選更優(yōu)質(zhì)的起始細(xì)胞來(lái)源；改進(jìn)基因載體和轉(zhuǎn)染技術(shù)提高轉(zhuǎn)染效率；精準(zhǔn)調(diào)控培養(yǎng)條件和添加物；建立更嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系。3.倫理問(wèn)題：如細(xì)胞來(lái)源的合