2025年大學(xué)《應(yīng)用生物科學(xué)-生物檢測(cè)技術(shù)》考試備考題庫及答案解析單位所屬部門：________姓名：________考場(chǎng)號(hào)：________考生號(hào)：________一、選擇題1.生物檢測(cè)技術(shù)中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的基本原理是（）A.抗原抗體反應(yīng)的特異性B.免疫磁珠的富集作用C.電化學(xué)發(fā)光信號(hào)的檢測(cè)D.熒光色素的標(biāo)記技術(shù)答案：A解析：ELISA的核心原理是基于抗原抗體之間的高度特異性結(jié)合，通過酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測(cè)物反應(yīng)，再加入酶底物顯色，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的定量檢測(cè)。其他選項(xiàng)所述的技術(shù)雖在生物檢測(cè)中有應(yīng)用，但并非ELISA的基本原理。2.在進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)，為防止雜菌污染，常用的無菌操作技術(shù)包括（）A.干熱滅菌B.滅菌鍋滅菌C.超凈工作臺(tái)操作D.巴氏消毒法答案：C解析：超凈工作臺(tái)通過創(chuàng)建無菌氣流環(huán)境，配合嚴(yán)格的操作規(guī)范，是防止空氣傳播雜菌污染微生物培養(yǎng)物的常用技術(shù)。干熱滅菌和滅菌鍋滅菌是滅菌方法，巴氏消毒法是溫和消毒方法，均不直接涉及操作過程中的動(dòng)態(tài)無菌防護(hù)。3.分子生物學(xué)中，PCR技術(shù)的核心步驟不包括（）A.變性B.退火C.延伸D.雜交答案：D解析：PCR技術(shù)的三步循環(huán)過程為變性（高溫解開雙鏈）、退火（低溫引物結(jié)合）、延伸（DNA聚合酶合成新鏈）。雜交是核酸分子間結(jié)合的過程，是Southernblot等技術(shù)的基礎(chǔ)，但非PCR的核心步驟。4.電鏡觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)時(shí)，樣品制備的關(guān)鍵要求是（）A.樣品干燥B.樣品固定C.樣品染色D.樣品解凍答案：B解析：樣品固定是電鏡觀察前必須步驟，通過化學(xué)固定劑使細(xì)胞結(jié)構(gòu)凝固，保持原有形態(tài)和空間位置，為后續(xù)脫水、染色和投影電子束轟擊創(chuàng)造條件。干燥、染色和解凍均非電鏡觀察前的標(biāo)準(zhǔn)制備環(huán)節(jié)。5.生物傳感器中，酶?jìng)鞲衅鞯闹饕獧z測(cè)信號(hào)類型是（）A.電阻變化B.顏色變化C.電流變化D.發(fā)光變化答案：C解析：酶?jìng)鞲衅骼妹复呋磻?yīng)導(dǎo)致電活性物質(zhì)濃度變化，從而產(chǎn)生電流、電壓或頻率信號(hào)。其中電流變化是最常見的檢測(cè)信號(hào)類型，如酶促氧化還原反應(yīng)產(chǎn)生的電流峰。電阻、顏色和發(fā)光變化雖可能伴隨發(fā)生，但非主要檢測(cè)信號(hào)。6.實(shí)驗(yàn)室常用的移液器，其準(zhǔn)確操作要點(diǎn)不包括（）A.選用合適量程B.快速垂直進(jìn)液C.按壓推液至第一停點(diǎn)D.等待氣泡消除答案：B解析：移液器正確操作要求緩慢垂直進(jìn)液，快速推液至第一停點(diǎn)后保持幾秒再至第二停點(diǎn)排出?？焖俅怪边M(jìn)液會(huì)導(dǎo)致進(jìn)樣誤差，尤其對(duì)于粘度較大的樣品。其他選項(xiàng)均符合標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范。7.在進(jìn)行基因測(cè)序時(shí)，Sanger法的基本原理涉及（）A.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)B.電泳分離C.標(biāo)記物熒光檢測(cè)D.限制性內(nèi)切酶識(shí)別答案：C解析：Sanger測(cè)序法通過合成終止子鏈，經(jīng)電泳分離后根據(jù)熒光標(biāo)記的dNTP終止位置讀取序列。其核心是合成終止和熒光成像檢測(cè)，而非PCR、電泳分離前的酶識(shí)別等過程。8.細(xì)胞培養(yǎng)中，Luria-Bertani（LB）培養(yǎng)基的主要用途是（）A.培養(yǎng)真菌B.培養(yǎng)支原體C.培養(yǎng)細(xì)菌D.培養(yǎng)病毒答案：C解析：LB培養(yǎng)基是通用型細(xì)菌培養(yǎng)基，含有蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉，為多種細(xì)菌提供生長所需營養(yǎng)。其配方簡單經(jīng)濟(jì)，是微生物實(shí)驗(yàn)中最常用的細(xì)菌培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基。9.生物信息學(xué)中，序列比對(duì)的主要目的是（）A.獲取基因表達(dá)量B.確定蛋白質(zhì)功能C.查找序列相似性D.設(shè)計(jì)PCR引物答案：C解析：序列比對(duì)通過算法比較生物序列間的相似程度，是基因功能預(yù)測(cè)、進(jìn)化關(guān)系分析等研究的基礎(chǔ)。獲取表達(dá)量需通過芯片或測(cè)序，確定功能需結(jié)合結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)，設(shè)計(jì)引物需考慮序列特異性，這些均非序列比對(duì)本身目的。10.實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理中，含汞廢液的正確處理方法是（）A.直接倒入下水道B.與酸性廢液混合C.加入還原劑沉淀D.收集于專用容器答案：D解析：含汞廢液具有劇毒性和環(huán)境危害性，必須嚴(yán)格收集于專用密封容器中，由有資質(zhì)單位進(jìn)行規(guī)范處理。直接排放、與酸混合或簡單沉淀均會(huì)擴(kuò)散污染環(huán)境，違反標(biāo)準(zhǔn)要求。11.下列哪種方法不適合用于檢測(cè)樣品中特定蛋白質(zhì)的存在？()A.免疫印跡法B.蛋白質(zhì)凝膠電泳C.蛋白質(zhì)芯片技術(shù)D.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定答案：B解析：蛋白質(zhì)凝膠電泳主要用于根據(jù)分子量或電荷差異分離蛋白質(zhì)，不能直接檢測(cè)樣品中是否存在特定蛋白質(zhì)。免疫印跡法、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定都是基于抗原抗體反應(yīng)或分子探針結(jié)合原理，能夠特異性檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)。12.在微生物鑒定過程中，生化反應(yīng)試驗(yàn)的主要目的是什么？()A.確定微生物的遺傳密碼B.測(cè)定微生物的生長速率C.鑒定微生物的代謝特征D.計(jì)算微生物的細(xì)胞密度答案：C解析：生化反應(yīng)試驗(yàn)通過檢測(cè)微生物對(duì)特定底物的代謝能力（如產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、氧化還原反應(yīng)等），鑒定其獨(dú)特的代謝特征，是微生物分類鑒定的重要手段。其他選項(xiàng)所述內(nèi)容非生化試驗(yàn)的主要目的。13.以下哪種技術(shù)通常用于大規(guī)模篩選生物樣品中的特定核酸序列？()A.基因測(cè)序B.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)C.核酸微陣列D.電子顯微鏡觀察答案：C解析：核酸微陣列（基因芯片或蛋白質(zhì)芯片）可以在固相支持物上固定大量探針，同時(shí)檢測(cè)樣品中成百上千個(gè)目標(biāo)核酸序列或蛋白質(zhì)的存在與數(shù)量，適合大規(guī)模篩選。其他選項(xiàng)或用于確定序列、或用于擴(kuò)增、或用于觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)。14.制備電鏡樣品時(shí)，進(jìn)行滲透處理的目的是什么？()A.使樣品脫水B.使樣品固定C.使樣品染色D.使樣品導(dǎo)電答案：B解析：滲透處理是電鏡樣品制備中的關(guān)鍵步驟，使用滲透劑（如丙酮）緩慢取代樣品中的水分，使固定液滲透到樣品內(nèi)部，達(dá)到完全固定細(xì)胞結(jié)構(gòu)的目的。脫水、染色和導(dǎo)電是后續(xù)步驟或最終要求，非滲透處理本身目的。15.生物傳感器根據(jù)其敏感元件的性質(zhì)，可以分為哪幾類？()A.酶?jìng)鞲衅?、微生物傳感器、免疫傳感器B.電化學(xué)傳感器、光學(xué)傳感器、熱敏傳感器C.重力傳感器、壓電傳感器、磁力傳感器D.機(jī)械傳感器、化學(xué)傳感器、生物傳感器答案：B解析：生物傳感器按敏感元件可分為基于電化學(xué)變化的電化學(xué)傳感器、基于光學(xué)信號(hào)變化的顯微鏡傳感器、基于溫度變化的熱敏傳感器等主要類型。其他選項(xiàng)是按識(shí)別元件或傳感器應(yīng)用領(lǐng)域分類。16.使用移液器吸液時(shí)，為避免產(chǎn)生氣泡，正確的操作是？()A.快速刺破液面B.慢慢刺入液面以下C.先完全按下調(diào)零鈕再刺入液面D.刺入液面時(shí)用力按壓推液鈕答案：B解析：吸取液體時(shí)，移液器吸頭應(yīng)慢慢刺入液面以下一定深度，使吸頭尖端與樣品液面接觸良好，讓樣品緩慢進(jìn)入吸頭，可有效避免因吸入空氣產(chǎn)生氣泡?？焖俅唐?、先調(diào)零后刺入或刺入時(shí)用力按壓均易導(dǎo)致氣泡。17.PCR反應(yīng)體系中，引物設(shè)計(jì)時(shí)需要考慮的因素不包括？()A.引物長度B.引物GC含量C.引物二級(jí)結(jié)構(gòu)D.目標(biāo)基因的物理位置答案：D解析：設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需考慮引物本身的理化性質(zhì)（長度、GC含量）及其與模板的相互作用（特異性結(jié)合、避免二級(jí)結(jié)構(gòu)如發(fā)夾或二聚體形成）。目標(biāo)基因的物理位置是PCR擴(kuò)增的背景信息，不直接用于引物設(shè)計(jì)本身。18.在進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，平板法（傾注法或涂布法）適用于哪種類型的樣品？()A.含菌量極低的樣品B.含菌量非常高的樣品C.液體樣品D.固體樣品答案：C解析：平板法通過將樣品稀釋后接種到固體培養(yǎng)基上，每皿形成單個(gè)菌落，適用于計(jì)數(shù)液體樣品中的活菌數(shù)。對(duì)于含菌量過高或過低的樣品，直接計(jì)數(shù)效果不佳。固體樣品需先處理成液體。19.下列哪種試劑常用于蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot）實(shí)驗(yàn)中的封閉步驟？()A.SDSB.TrisC.脫脂牛奶D.封閉劑答案：C解析：蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)的封閉步驟是為了阻斷非特異性抗體與膜上蛋白質(zhì)的結(jié)合，常用5%-20%的脫脂牛奶或BSA等封閉劑覆蓋膜表面。SDS是電泳緩沖液成分，Tris是緩沖劑，封閉劑是通用術(shù)語。20.根據(jù)分子雜交原理，核酸探針需要具備什么基本性質(zhì)？()A.具有酶活性B.具有熒光標(biāo)記C.與目標(biāo)核酸序列互補(bǔ)D.具有抗原性答案：C解析：核酸探針是帶有標(biāo)記的小分子核酸片段，其基本原理是能與樣品中特定的目標(biāo)核酸序列通過堿基互補(bǔ)配對(duì)形成雜交雙鏈。因此，與目標(biāo)序列互補(bǔ)是其核心功能。酶活性、熒光標(biāo)記是檢測(cè)手段，抗原性不相關(guān)。二、多選題1.下列哪些屬于生物檢測(cè)技術(shù)中常用的樣品前處理方法？（）A.離心B.濾膜過濾C.破壁D.提取E.消毒答案：ABCD解析：生物檢測(cè)前的樣品前處理旨在獲得適合檢測(cè)的樣品組分。離心用于分離固體和液體；濾膜過濾用于去除不溶性雜質(zhì)；破壁是為了釋放細(xì)胞內(nèi)的目標(biāo)分子（如核酸、蛋白質(zhì)）；提取是將目標(biāo)物從復(fù)雜基質(zhì)中分離出來。消毒主要是消除樣品中的微生物，并非提取目標(biāo)分析物的方法。2.PCR反應(yīng)體系中通常包含哪些組分？（）A.模板DNAB.引物C.DNA聚合酶D.dNTPsE.甘油答案：ABCD解析：PCR反應(yīng)必需的組分包括：待擴(kuò)增的模板DNA（A）、能與模板特定序列結(jié)合的引物（B）、能夠合成新DNA鏈的DNA聚合酶（C）、提供合成所需堿基的dNTPs（D）。甘油常作為PCR反應(yīng)的甘油載體，改善體系粘度，但非PCR擴(kuò)增的核心組分。3.電鏡樣品制備過程中，常用的固定方法有哪些？（）A.甲醛固定B.戊二醛固定C.乙醇固定D.丙酮固定E.鋨酸固定答案：ABE解析：電鏡樣品固定需使用能迅速穿透組織、使生物大分子結(jié)構(gòu)凝固的方法。常用的化學(xué)固定劑包括甲醛、戊二醛和鋨酸，它們能交聯(lián)蛋白質(zhì)，保持細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)。乙醇和丙酮主要用于樣品脫水和滲透，使固定液進(jìn)入樣品內(nèi)部，本身不是主要的結(jié)構(gòu)固定劑。4.生物傳感器根據(jù)識(shí)別元件的不同，可以分為哪些類型？（）A.酶?jìng)鞲衅鰾.微生物傳感器C.組織傳感器D.免疫傳感器E.半導(dǎo)體傳感器答案：ABD解析：生物傳感器按識(shí)別元件（能特異性識(shí)別目標(biāo)分析物的生物分子）分類，主要包括酶?jìng)鞲衅鳎ˋ）、微生物傳感器（B）、抗體（免疫）傳感器（D）等。組織傳感器和半導(dǎo)體傳感器不是基于識(shí)別元件的分類方式，前者是生物材料應(yīng)用形式，后者是敏感材料類型。5.進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)，需要控制哪些環(huán)境條件？（）A.溫度B.pHC.氧氣濃度D.濕度E.光照答案：ABC解析：微生物培養(yǎng)需要根據(jù)具體種類優(yōu)化培養(yǎng)條件。溫度（A）、pH（B）和氧氣濃度（C）是大多數(shù)微生物生長的關(guān)鍵環(huán)境因素。濕度（D）和光照（E）對(duì)某些微生物（如霉菌、光合微生物）重要，但并非普遍必需的核心條件。6.蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot）實(shí)驗(yàn)通常包含哪些主要步驟？（）A.蛋白質(zhì)樣品制備與電泳分離B.轉(zhuǎn)膜C.封閉D.一抗孵育E.二抗孵育與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)答案：ABCDE解析：WesternBlot是分離、轉(zhuǎn)移和檢測(cè)蛋白質(zhì)的技術(shù)，完整流程包括：樣品經(jīng)SDS電泳分離（A），然后轉(zhuǎn)移到固相膜上（B），用封閉液處理膜以阻斷非特異性結(jié)合（C），接著與特異性一抗孵育（D），再與標(biāo)記的二抗孵育（E），最后通過化學(xué)發(fā)光等方式檢測(cè)目標(biāo)蛋白。7.核酸分子雜交技術(shù)的基本原理是什么？（）A.單鏈核酸變性B.互補(bǔ)鏈間形成堿基配對(duì)C.雜交分子復(fù)性D.溫度控制E.探針標(biāo)記答案：ABC解析：核酸分子雜交的核心是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則（B）。該過程通常需要先通過加熱等手段使核酸單鏈解開（A），然后在特定條件下讓互補(bǔ)鏈重新結(jié)合形成雙鏈雜交分子（C），并需要溫度控制（D）來優(yōu)化雜交效率和特異性。探針標(biāo)記（E）是雜交檢測(cè)的常用手段，但非雜交本身原理。8.下列哪些操作存在生物安全風(fēng)險(xiǎn)？（）A.打開培養(yǎng)皿蓋B.離心管reciprocating振蕩C.消毒滅菌D.使用移液器E.處理氣溶膠答案：ABDE解析：生物安全風(fēng)險(xiǎn)來源于可能接觸或吸入有害微生物。打開培養(yǎng)皿蓋（A）可能產(chǎn)生氣溶膠；離心管reciprocating振蕩（B）可能使內(nèi)容物濺出；使用移液器（D）不當(dāng)可能導(dǎo)致液體噴濺或氣溶膠形成；處理氣溶膠（E）本身即高風(fēng)險(xiǎn)操作。消毒滅菌（C）是控制風(fēng)險(xiǎn)的過程，而非風(fēng)險(xiǎn)源。9.影響PCR反應(yīng)效率的因素有哪些？（）A.引物設(shè)計(jì)B.DNA模板質(zhì)量C.DNA聚合酶活性D.dNTPs濃度E.反應(yīng)緩沖液答案：ABCDE解析：PCR反應(yīng)效率受多種因素影響。引物設(shè)計(jì)（A）直接影響特異性與效率；DNA模板質(zhì)量和純度（B）決定了起始材料；DNA聚合酶的來源和活性（C）是酶促反應(yīng)的關(guān)鍵；dNTPs的濃度和比例（D）是合成原料；反應(yīng)緩沖液（pH、離子強(qiáng)度等）（E）提供了必要的反應(yīng)環(huán)境，任何因素的變化都可能影響最終擴(kuò)增效果。10.生物信息學(xué)工具可用于分析哪些類型的數(shù)據(jù)？（）A.基因序列B.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)C.基因表達(dá)譜D.細(xì)胞圖像E.化學(xué)結(jié)構(gòu)式答案：ABCD解析：生物信息學(xué)是利用計(jì)算機(jī)工具分析生物數(shù)據(jù)的交叉學(xué)科。它可以處理和分析基因序列（A）、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)（B）、基因或蛋白質(zhì)表達(dá)量數(shù)據(jù)（C）、以及通過圖像分析軟件處理的細(xì)胞圖像（D）等生物信息。化學(xué)結(jié)構(gòu)式（E）屬于化學(xué)領(lǐng)域數(shù)據(jù)，雖然可能用于藥物設(shè)計(jì)等交叉研究，但非生物信息學(xué)主要分析對(duì)象。11.下列哪些屬于生物大分子分離純化的常用技術(shù)？（）A.溶劑萃取B.離子交換色譜C.凝膠過濾色譜D.透析E.電泳答案：BCDE解析：生物大分子（蛋白質(zhì)、核酸等）的分離純化是生物技術(shù)核心內(nèi)容。離子交換色譜（B）、凝膠過濾色譜（C）、透析（D）和電泳（E）都是基于分子大小、電荷、親和力等差異進(jìn)行分離的經(jīng)典且常用的層析或電學(xué)技術(shù)。溶劑萃?。ˋ）雖然也是一種分離方法，但在生物大分子純化中應(yīng)用相對(duì)較少，且可能破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。12.在進(jìn)行酶活性測(cè)定時(shí)，需要監(jiān)測(cè)哪些參數(shù)？（）A.底物濃度B.產(chǎn)物生成速率C.反應(yīng)時(shí)間D.酶濃度E.pH值答案：ABCDE解析：酶活性是指酶催化反應(yīng)的速度，通常以單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量或底物的消耗量表示。因此，測(cè)定酶活性必須監(jiān)測(cè)產(chǎn)物生成速率（B）、底物濃度（A）的變化、反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)間（C）以及確保反應(yīng)在適宜條件下進(jìn)行，包括pH值（E）和酶濃度（D）。13.下列哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）的優(yōu)勢(shì)？（）A.定量準(zhǔn)確B.靈敏度高C.可同時(shí)檢測(cè)多種目標(biāo)D.操作簡便E.特異性強(qiáng)答案：ABDE解析：實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）相比傳統(tǒng)PCR具有多重優(yōu)勢(shì)：能夠精確量化起始模板量（A），檢測(cè)靈敏度極高（B），操作流程相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)簡便（D），且通過熔解曲線分析等方法能保證產(chǎn)物特異性（E）?？赏瑫r(shí)檢測(cè)多種目標(biāo)通常指多重PCR，而非qPCR本身的優(yōu)勢(shì)。14.電鏡樣品制備中，脫水過程需要注意哪些問題？（）A.脫水速度要慢B.使用系列濃度乙醇或丙酮C.避免樣品收縮變形D.脫水要徹底E.脫水后立即染色答案：ABCD解析：電鏡樣品脫水是關(guān)鍵步驟，需謹(jǐn)慎操作。應(yīng)采用逐步增加溶劑極性的系列濃度乙醇或丙酮（B），并控制緩慢的脫水速度（A），以減少樣品收縮、變形或產(chǎn)生內(nèi)應(yīng)力（C）。同時(shí)要確保脫水徹底（D），防止殘留水分影響后續(xù)包埋和成像。脫水后需干燥、滲透、包埋、染色等一系列過程，并非立即染色（E）。15.生物傳感器根據(jù)信號(hào)轉(zhuǎn)換方式，可以分為哪些類型？（）A.酶?jìng)鞲衅鰾.電化學(xué)傳感器C.光學(xué)傳感器D.磁場(chǎng)傳感器E.壓電傳感器答案：BCE解析：生物傳感器按信號(hào)轉(zhuǎn)換方式（將識(shí)別信號(hào)轉(zhuǎn)化為可測(cè)量信號(hào)的過程）分類，主要包括電化學(xué)傳感器（B，如氧化還原、離子選擇性）、光學(xué)傳感器（C，如熒光、光吸收、表面等離激元）和壓電傳感器（E，利用壓電晶體諧振頻率變化）。酶?jìng)鞲衅鳎ˋ）是按識(shí)別元件分類，磁場(chǎng)傳感器（D）應(yīng)用較少且非典型分類。16.制備微生物菌懸液時(shí)，可能需要采取哪些措施？（）A.稀釋B.破壁（針對(duì)孢子等）C.加熱D.使用勻漿器E.消毒答案：ABD解析：制備均勻的微生物菌懸液常需：通過系列稀釋（A）控制濃度；對(duì)于難透性細(xì)胞（如孢子）可能需要物理方法（D，如超聲波、高壓勻漿）或化學(xué)方法（B，如酶解）輔助破壁；加熱（C）有時(shí)用于殺死雜菌或使細(xì)胞膜通透性增加，但非普遍必需。消毒（E）是樣品處理前的步驟，而非懸液制備本身。17.核酸雜交探針根據(jù)其標(biāo)記方式，可以分為哪些類型？（）A.同位素標(biāo)記探針B.化學(xué)發(fā)光標(biāo)記探針C.熒光標(biāo)記探針D.生物素標(biāo)記探針E.探針長度答案：ABCD解析：核酸雜交探針為檢測(cè)目標(biāo)核酸而標(biāo)記，根據(jù)標(biāo)記物不同可分為多種類型。常見的有同位素標(biāo)記（A）、熒光標(biāo)記（C）、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記（B）、酶標(biāo)記（如辣根過氧化物酶）或親和素/生物素標(biāo)記（D）等。探針長度（E）是探針的物理特性，不是分類方式。18.影響PCR特異性擴(kuò)增的因素有哪些？（）A.引物退火溫度B.引物二聚體形成C.dNTPs濃度D.DNA模板純度E.循環(huán)數(shù)答案：ABD解析：PCR特異性取決于引物與模板的精確匹配。影響特異性的因素包括：引物退火溫度（A，過高或過低均降低特異性）、引物自身性質(zhì)可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合或二聚體形成（B）、DNA模板中存在雜質(zhì)或非特異性模板（D）。dNTPs濃度（C）主要影響擴(kuò)增效率和產(chǎn)量。循環(huán)數(shù)（E）影響擴(kuò)增限度。19.生物信息學(xué)可用于進(jìn)行哪些分析？（）A.基因功能預(yù)測(cè)B.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)模擬C.進(jìn)化關(guān)系構(gòu)建D.基因表達(dá)模式比較E.藥物靶點(diǎn)篩選答案：ABCDE解析：生物信息學(xué)是利用計(jì)算機(jī)分析生物數(shù)據(jù)的強(qiáng)大工具，其應(yīng)用范圍極廣，包括：基于序列比對(duì)和數(shù)據(jù)庫信息預(yù)測(cè)基因功能（A）、利用物理化學(xué)原理和算法模擬蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)（B）、通過系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建生物進(jìn)化關(guān)系（C）、比較不同條件下或不同個(gè)體間的基因表達(dá)譜（D），以及利用計(jì)算方法篩選潛在的藥物作用靶點(diǎn)（E）等。20.處理生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)廢棄物時(shí)，需要注意哪些原則？（）A.分類收集B.消毒滅菌C.防止交叉污染D.按規(guī)定處置E.廢液直接倒入下水道答案：ABCD解析：生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物含有潛在生物危害，處理必須遵守原則：不同類型廢棄物（如感染性廢物、化學(xué)廢物、銳器）需分類收集（A）；所有廢棄物在處置前必須經(jīng)過有效消毒滅菌（B）以殺滅病原體；處理和轉(zhuǎn)運(yùn)過程中要防止交叉污染（C）；最終處置必須符合相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)要求（D）。廢液直接倒入下水道是嚴(yán)重違反規(guī)定的行為（E）。三、判斷題1.PCR技術(shù)只能用于擴(kuò)增DNA片段，不能用于RNA的擴(kuò)增。（）答案：錯(cuò)誤解析：PCR技術(shù)的基本原理是特異性地?cái)U(kuò)增核酸片段，其核心酶——DNA聚合酶，原則上只能延長DNA鏈。然而，通過使用能夠擴(kuò)增RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶（RT），可以將RNA模板逆轉(zhuǎn)錄成DNA，再利用DNAPCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。這種先將RNA轉(zhuǎn)換為DNA再進(jìn)行PCR的技術(shù)稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR），因此PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增DNA，也可以通過RT-PCR技術(shù)間接擴(kuò)增RNA片段。2.在電鏡樣品制備過程中，固定劑的作用主要是使細(xì)胞結(jié)構(gòu)保持原有形態(tài)。（）答案：正確解析：電鏡觀察需要極高分辨率，樣品必須非常精細(xì)。固定劑是電鏡樣品制備的第一步，其作用是在細(xì)胞存活或剛死亡時(shí)，迅速穿透細(xì)胞，使其內(nèi)部結(jié)構(gòu)（包括細(xì)胞器、細(xì)胞骨架等）發(fā)生不可逆的化學(xué)交聯(lián)和凝固，從而將細(xì)胞在那一刻的狀態(tài)“凍結(jié)”下來，保持其天然的形態(tài)和空間結(jié)構(gòu)，為后續(xù)的脫水、包埋和成像奠定基礎(chǔ)。3.生物傳感器通常由敏感元件和信號(hào)轉(zhuǎn)換器兩部分組成。（）答案：正確解析：生物傳感器是一種將生物識(shí)別元件（能夠特異性識(shí)別目標(biāo)分析物）與物理或化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)換器相結(jié)合的分析工具。生物識(shí)別元件負(fù)責(zé)與目標(biāo)物質(zhì)發(fā)生特異性相互作用，產(chǎn)生可測(cè)量的生物信號(hào)；信號(hào)轉(zhuǎn)換器則負(fù)責(zé)將這種微弱的生物信號(hào)轉(zhuǎn)換為易于檢測(cè)和量化的電信號(hào)、光信號(hào)或其他物理信號(hào)。這兩部分協(xié)同工作，使得生物傳感器能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)特定分析物的快速、靈敏檢測(cè)。4.微生物平板計(jì)數(shù)法適用于計(jì)數(shù)液體樣品中所有微生物的數(shù)量。（）答案：錯(cuò)誤解析：微生物平板計(jì)數(shù)法（包括傾注法和涂布法）是基于一個(gè)細(xì)菌或孢子形成一個(gè)可見菌落的原理來估算樣品中活菌數(shù)量的方法。它只計(jì)數(shù)那些能夠存活、增殖并形成可見單菌落的微生物，即**活菌**。對(duì)于樣品中死菌、芽孢以及那些無法在特定培養(yǎng)基上生長的微生物是無法計(jì)數(shù)的。因此，平板計(jì)數(shù)法只能估算液體樣品中**活菌**的數(shù)量，而非所有微生物（包括死菌和芽孢）的總數(shù)。5.實(shí)驗(yàn)室使用的移液器，其吸量刻度是精確且可回零的。（）答案：錯(cuò)誤解析：實(shí)驗(yàn)室常用的移液器（如單道移液器和多道移液器）在其吸液端（吸頭）上標(biāo)有刻度，用于設(shè)定所需的吸取體積。然而，這些刻度通常只保證在特定條件下（如使用配套吸頭、在特定溫度下）具有一定的準(zhǔn)確度，并且存在一定的容許誤差。移液器的總行程（從第一停點(diǎn)到底部）和第二停點(diǎn)（完全推下）的準(zhǔn)確性更為關(guān)鍵。此外，吸量刻度本身并非完全線性，且在使用過程中會(huì)因磨損等因素導(dǎo)致精度下降，其初始設(shè)定體積是否準(zhǔn)確需要通過校準(zhǔn)來確認(rèn)，并非絕對(duì)可回零或完全精確。6.DNA分子雜交的特異性取決于探針與目標(biāo)序列之間堿基配對(duì)的嚴(yán)格性。（）答案：正確解析：DNA分子雜交的原理是兩條DNA鏈或DNA與RNA鏈之間基于堿基互補(bǔ)配對(duì)（A-T，G-C）的原則結(jié)合。雜交的特異性，即探針只與目標(biāo)序列精確結(jié)合而不與其他非特異性序列結(jié)合的能力，直接取決于兩者之間堿基配對(duì)的嚴(yán)格程度。如果探針序列與目標(biāo)序列在關(guān)鍵位置存在不匹配的堿基，就會(huì)導(dǎo)致結(jié)合不穩(wěn)定或無法結(jié)合，從而降低非特異性雜交的幾率。因此，設(shè)計(jì)高特異性的探針時(shí)，必須確保其序列與目標(biāo)序列的高度同源性。7.離心是分離生物大分子常用的物理方法，其分離效果主要取決于離心力的大小和離心時(shí)間。（）答案：正確解析：離心是利用離心機(jī)產(chǎn)生的離心力場(chǎng)，使密度或質(zhì)量不同的物質(zhì)在離心管中發(fā)生沉降分離的常用物理方法。在生物大分子分離中，通過調(diào)節(jié)離心機(jī)的轉(zhuǎn)速（決定離心力大小）和離心時(shí)間，可以使不同大小、密度或沉降系數(shù)的生物大分子（如細(xì)胞、細(xì)胞器、蛋白質(zhì)、核酸片段等）在離心管中形成不同的沉降帶，從而實(shí)現(xiàn)分離。離心力的方向和樣品的初始分布也會(huì)影響分離效果。8.生物信息學(xué)分析可以幫助預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的功能。（）答案：正確解析：生物信息學(xué)是利用計(jì)算機(jī)科學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析生物數(shù)據(jù)的學(xué)科。通過整合大量的基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組等數(shù)據(jù)，以及利用已知的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能信息，生物信息學(xué)發(fā)展了多種算法和模型，可以預(yù)測(cè)未知蛋白質(zhì)的潛在功能、參與通路、結(jié)構(gòu)域組成、進(jìn)化關(guān)系等。雖然預(yù)測(cè)結(jié)果需要實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，但生物信息學(xué)分析在推斷蛋白質(zhì)功能方面提供了強(qiáng)大的計(jì)算工具和理論支持。9.使用酒精燈加熱時(shí)，應(yīng)該用內(nèi)焰加熱試管底部。（）答案：錯(cuò)誤解析：酒精燈火焰分為外焰、內(nèi)焰和焰心。外焰溫度最高且燃燒充分，適合需要較高溫度的加熱操作。內(nèi)焰溫度較低，焰心溫度最低。加熱試管時(shí)，應(yīng)使用酒精燈的外焰來加熱試管底部，并且要不斷移動(dòng)試管，使其受熱均勻，避免局部過熱導(dǎo)致試管破裂。絕不應(yīng)使用內(nèi)焰或焰心加熱。10.生物安全等級(jí)越高，實(shí)驗(yàn)室對(duì)生物因子控制的嚴(yán)格程度就越低。（）答案：錯(cuò)誤解析：生物安全等級(jí)（通常指BSL-1到BSL-4）是依據(jù)實(shí)驗(yàn)室操作所處理的生物因子的風(fēng)險(xiǎn)程度（包括傳染性、致病性、潛在危害等）以及實(shí)驗(yàn)室建筑和操作防護(hù)措施所劃分的級(jí)別。生物安全等級(jí)越高，表示所處理的生物因子風(fēng)險(xiǎn)越大，因此實(shí)驗(yàn)室對(duì)其containment（containment）的要求就越嚴(yán)格，包括更高級(jí)別的建筑設(shè)施、更嚴(yán)格的操作規(guī)程、更完善的廢棄