心肌干細胞治療工藝開發(fā)工程師崗位考試試卷及答案一、單項選擇題（每題2分，共20分）1.以下哪種細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基不適合心肌干細胞培養(yǎng)？A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.LB培養(yǎng)基2.細胞傳代時，一般細胞匯合度達到多少進行傳代較為合適？A.30%-40%B.50%-60%C.70%-80%D.90%-100%3.下列哪種設(shè)備常用于細胞凍存？A.離心機B.超低溫冰箱C.培養(yǎng)箱D.顯微鏡4.心肌干細胞的鑒定不包括以下哪種方法？A.形態(tài)學觀察B.免疫熒光檢測C.核酸測序D.流式細胞術(shù)5.無菌操作時，常用的消毒酒精濃度是？A.50%B.75%C.95%D.100%6.以下哪種物質(zhì)不是細胞培養(yǎng)中常用的血清替代物？A.人血清白蛋白B.血小板裂解物C.胰蛋白酶D.無血清培養(yǎng)基添加劑7.細胞培養(yǎng)過程中，二氧化碳培養(yǎng)箱的二氧化碳濃度一般設(shè)置為？A.1%B.5%C.10%D.20%8.進行細胞計數(shù)時，常用的染色劑是？A.伊紅B.臺盼藍C.結(jié)晶紫D.剛果紅9.以下哪種技術(shù)可用于擴增心肌干細胞？A.RT-PCRB.基因編輯C.懸浮培養(yǎng)D.Westernblot10.細胞復蘇時，一般將凍存管在多少度的水浴中快速融化？A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃二、多項選擇題（每題2分，共20分）1.心肌干細胞培養(yǎng)需要的基本條件有（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.一定的氣體環(huán)境D.無菌條件2.細胞凍存液的主要成分通常包括（）A.血清B.DMSOC.抗生素D.緩沖液3.鑒定心肌干細胞的標志物有（）A.cTnTB.α-actininC.Nkx2.5D.Oct44.細胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的污染類型有（）A.細菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染5.以下屬于細胞培養(yǎng)常用的耗材有（）A.培養(yǎng)瓶B.移液器C.離心管D.細胞篩6.影響心肌干細胞增殖的因素包括（）A.生長因子B.細胞密度C.培養(yǎng)基成分D.培養(yǎng)時間7.用于細胞計數(shù)的方法有（）A.血細胞計數(shù)板計數(shù)B.流式細胞儀計數(shù)C.比濁法D.平板計數(shù)法8.基因編輯技術(shù)可用于心肌干細胞研究的方面有（）A.基因敲除B.基因過表達C.基因修復D.基因定位9.細胞培養(yǎng)中常用的消化液有（）A.胰蛋白酶B.膠原酶C.彈性蛋白酶D.胃蛋白酶10.心肌干細胞治療工藝開發(fā)需要考慮的因素有（）A.細胞來源B.細胞質(zhì)量控制C.治療劑量D.給藥途徑三、判斷題（每題2分，共20分）1.心肌干細胞可以在普通環(huán)境下培養(yǎng)。（）2.細胞凍存時，凍存液中DMSO濃度越高越好。（）3.免疫熒光檢測可以用于確定心肌干細胞的分化狀態(tài)。（）4.細胞培養(yǎng)過程中，只要定期更換培養(yǎng)基就不會出現(xiàn)污染。（）5.進行細胞傳代時，細胞消化時間越長越好。（）6.無血清培養(yǎng)基一定不含有任何動物來源成分。（）7.流式細胞術(shù)只能用于細胞計數(shù)，不能用于細胞分選。（）8.基因編輯技術(shù)可以隨意改變心肌干細胞的基因序列。（）9.細胞復蘇后，可直接放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，無需進行其他處理。（）10.心肌干細胞治療工藝開發(fā)不需要考慮倫理問題。（）四、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述心肌干細胞培養(yǎng)的基本流程。2.列舉兩種檢測細胞活性的方法及原理。3.簡述細胞凍存和復蘇的要點。4.說明在心肌干細胞治療工藝開發(fā)中質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)。五、討論題（每題5分，共20分）1.討論目前心肌干細胞治療面臨的主要挑戰(zhàn)及可能的解決策略。2.談談基因編輯技術(shù)在心肌干細胞治療工藝開發(fā)中的應用前景與潛在風險。3.如何確保心肌干細胞治療的安全性和有效性，請闡述你的觀點。4.若要開發(fā)新的心肌干細胞培養(yǎng)工藝，你會從哪些方面入手？答案一、單項選擇題1.D2.C3.B4.C5.B6.C7.B8.B9.C10.B二、多項選擇題1.ABCD2.AB3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.AB8.ABC9.ABC10.ABCD三、判斷題1.×2.×3.√4.×5.×6.×7.×8.×9.×10.×四、簡答題1.取合適來源的心肌干細胞，用合適培養(yǎng)基在適宜溫度、氣體環(huán)境下培養(yǎng)，定期觀察細胞狀態(tài)，適時傳代，細胞匯合度70%-80%時進行消化傳代，必要時凍存。2.臺盼藍染色法：活細胞細胞膜完整，拒染臺盼藍，死細胞細胞膜破損被染成藍色，通過計數(shù)區(qū)分死活細胞比例。MTT法：活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶可將MTT還原成不溶性藍紫色結(jié)晶，根據(jù)吸光度檢測細胞活性。3.凍存要點：細胞生長良好時，用含血清和DMSO的凍存液，梯度降溫凍存。復蘇要點：37℃水浴快速融化凍存管，立即加入培養(yǎng)基稀釋，離心棄上清后接種培養(yǎng)。4.細胞來源明確且質(zhì)量可靠，培養(yǎng)過程控制條件穩(wěn)定，檢測細胞活性、純度、分化能力等指標，嚴格的無菌操作確保無微生物污染。五、討論題1.挑戰(zhàn)：細胞來源有限、分化調(diào)控難、安全性擔憂等。策略：探索新細胞源，研究調(diào)控機制，加強臨床前和臨床試驗。2.前景：精準調(diào)控基因，改善細胞治療效果。風