醫(yī)學(xué)生微生物學(xué)高效復(fù)習(xí)筆記及試題第一部分核心知識(shí)點(diǎn)精要一、細(xì)菌學(xué)基礎(chǔ)（一）細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)1.形態(tài)分類：根據(jù)外形分為球菌（如葡萄球菌、鏈球菌）、桿菌（如大腸桿菌、結(jié)核分枝桿菌）、螺形菌（弧菌如霍亂弧菌，螺菌如鼠咬熱螺菌）。2.基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁：革蘭陽(yáng)性菌（G?）含肽聚糖（聚糖骨架+四肽側(cè)鏈+五肽交聯(lián)橋）和磷壁酸；革蘭陰性菌（G?）肽聚糖層?。▋H聚糖骨架+四肽側(cè)鏈），外膜含脂多糖（LPS，內(nèi)毒素核心）、脂質(zhì)雙層、外膜蛋白。L型細(xì)菌（細(xì)胞壁缺陷型）無(wú)完整細(xì)胞壁，多形性，需高滲培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)胞膜：參與物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、呼吸、生物合成，中介體（細(xì)胞膜內(nèi)陷形成）擴(kuò)大呼吸面積，類似線粒體。細(xì)胞質(zhì)：含核糖體（70S，抗生素作用靶點(diǎn)）、質(zhì)粒（獨(dú)立遺傳物質(zhì)，如F質(zhì)粒介導(dǎo)接合、R質(zhì)粒攜帶耐藥基因）、胞質(zhì)顆粒（如異染顆粒，鑒別白喉棒狀桿菌）。核質(zhì)：環(huán)狀雙鏈DNA，無(wú)核膜，細(xì)菌的遺傳物質(zhì)核心。3.特殊結(jié)構(gòu)：莢膜：多糖/多肽組成，抗吞噬（肺炎鏈球菌莢膜）、黏附（定居）、鑒別（莢膜腫脹試驗(yàn)）。鞭毛：蛋白質(zhì)，運(yùn)動(dòng)器官，H抗原（鑒別如傷寒沙門菌鞭毛抗原）。菌毛：分為普通菌毛（黏附宿主細(xì)胞，如淋球菌黏附尿道上皮）和性菌毛（傳遞質(zhì)粒，如F?菌通過(guò)性菌毛給F?菌傳遞F質(zhì)粒）。芽孢：細(xì)菌休眠體，抵抗力極強(qiáng)（耐熱、干燥、化學(xué)消毒劑），滅菌指標(biāo)（高壓蒸汽滅菌需殺滅芽孢），形態(tài)位置鑒別細(xì)菌（如破傷風(fēng)梭菌芽孢呈鼓槌狀，位于頂端）。（二）細(xì)菌的生理與代謝1.生長(zhǎng)繁殖條件：營(yíng)養(yǎng)（碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子）、溫度（嗜溫菌37℃，嗜冷菌如耶爾森菌，嗜熱菌如肉毒梭菌）、pH（多數(shù)中性偏堿，結(jié)核分枝桿菌偏酸，霍亂弧菌偏堿）、氣體（需氧菌、厭氧菌、兼性厭氧菌、微需氧菌）。2.培養(yǎng)特性：培養(yǎng)基分類：基礎(chǔ)培養(yǎng)基（肉湯）、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基（血平板、巧克力平板，后者用于嗜血桿菌）、選擇培養(yǎng)基（SS平板選腸道桿菌）、鑒別培養(yǎng)基（伊紅美藍(lán)平板鑒別大腸桿菌）、厭氧培養(yǎng)基（庖肉培養(yǎng)基）。生長(zhǎng)現(xiàn)象：液體培養(yǎng)基（混濁、沉淀、菌膜）、固體培養(yǎng)基（菌落，光滑型S、粗糙型R、黏液型M）、半固體培養(yǎng)基（穿刺試驗(yàn)判斷動(dòng)力）。3.代謝產(chǎn)物：與致病相關(guān)：熱原質(zhì)（LPS，引起發(fā)熱）、毒素（外毒素/內(nèi)毒素）、侵襲性酶（鏈激酶、透明質(zhì)酸酶）。與鑒別相關(guān)：色素（金黃色葡萄球菌金黃色色素，銅綠假單胞菌綠色色素）、糖發(fā)酵產(chǎn)物（酸/氣）、維生素（如大腸桿菌產(chǎn)VitK）。（三）細(xì)菌的遺傳與變異1.變異物質(zhì)：質(zhì)粒（閉合環(huán)狀DNA，可轉(zhuǎn)移）、噬菌體（病毒，分為毒性噬菌體<裂解宿主>和溫和噬菌體<整合基因組，形成前噬菌體>）、轉(zhuǎn)座子（可移動(dòng)的基因片段）。2.變異機(jī)制：轉(zhuǎn)化：受體菌攝取游離DNA（如肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)）。接合：通過(guò)性菌毛傳遞質(zhì)粒（如R質(zhì)粒傳播耐藥性）。轉(zhuǎn)導(dǎo)：噬菌體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移（普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：任何基因；局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)：特定基因，如λ噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)大腸桿菌gal基因）。溶原性轉(zhuǎn)換：溫和噬菌體整合后，宿主獲得新性狀（如白喉棒狀桿菌因前噬菌體攜帶毒素基因而產(chǎn)毒）。（四）細(xì)菌的致病性與免疫性1.致病性：毒力：侵襲力（黏附、定植、侵襲組織的能力，如菌毛黏附、莢膜抗吞噬、侵襲酶溶解組織）+毒素（外毒素：蛋白質(zhì)，耐熱性差，抗原性強(qiáng)，可制成類毒素；內(nèi)毒素：LPS，耐熱，抗原性弱，引起發(fā)熱、休克、DIC）。感染類型：隱性感染、顯性感染（急性/慢性、局部/全身）、帶菌狀態(tài)（重要傳染源，如傷寒帶菌者）。2.免疫性：固有免疫：屏障（皮膚黏膜）、吞噬細(xì)胞（中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，氧依賴/非氧依賴殺菌）、補(bǔ)體（溶菌、調(diào)理、炎癥介質(zhì)）。適應(yīng)性免疫：體液免疫（抗體中和毒素、調(diào)理吞噬、ADCC）、細(xì)胞免疫（Th1激活巨噬細(xì)胞，CTL殺傷胞內(nèi)菌感染細(xì)胞）。二、病毒學(xué)基礎(chǔ)（一）病毒的結(jié)構(gòu)與分類1.結(jié)構(gòu)：核心（DNA/RNA，單鏈/雙鏈，分節(jié)段/不分，如流感病毒RNA分8節(jié)段）+衣殼（蛋白質(zhì)，對(duì)稱型：二十面體<如脊髓灰質(zhì)炎病毒>、螺旋<如流感病毒>、復(fù)合<如痘病毒>）+包膜（脂質(zhì)雙層，含糖蛋白刺突，如HIV的gp120/gp41，流感的HA/NA）。2.分類：按核酸類型（DNA病毒：如HBV、HPV；RNA病毒：如HIV、流感病毒）、傳播途徑（呼吸道病毒、腸道病毒、蟲(chóng)媒病毒、肝炎病毒）。（二）病毒的復(fù)制與致病1.復(fù)制周期：吸附（刺突與受體結(jié)合，如HIVgp120結(jié)合CD4?T細(xì)胞CCR5）→穿入（包膜病毒融合/內(nèi)吞，裸病毒內(nèi)吞）→脫殼（釋放核酸）→生物合成（DNA病毒多在核內(nèi)，RNA病毒多在胞質(zhì)，逆轉(zhuǎn)錄病毒需逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA）→裝配與釋放（裸病毒裂解細(xì)胞，包膜病毒出芽釋放，獲得包膜）。2.致病機(jī)制：直接損傷：殺細(xì)胞效應(yīng)（如脊髓灰質(zhì)炎病毒）、穩(wěn)定狀態(tài)感染（包膜病毒，細(xì)胞融合形成多核巨細(xì)胞）、包涵體（如狂犬病病毒內(nèi)基小體）、細(xì)胞凋亡、基因整合（如HBV整合致肝癌）。免疫病理：Ⅰ型超敏反應(yīng)（如病毒抗原-抗體復(fù)合物沉積）、Ⅱ型（病毒感染細(xì)胞被抗體介導(dǎo)殺傷）、Ⅲ型（復(fù)合物沉積）、Ⅳ型（CTL或Th1介導(dǎo)炎癥）。（三）常見(jiàn)病毒特性1.流感病毒：分甲、乙、丙型，抗原變異（漂移：點(diǎn)突變，亞型內(nèi)變異；轉(zhuǎn)換：基因重配，新亞型，如H5N1），傳播途徑呼吸道，致病高熱、肌痛，并發(fā)癥肺炎。2.乙型肝炎病毒（HBV）：Dane顆粒（完整病毒，含HBsAg、HBcAg、HBeAg），傳播血液/母嬰/性，抗原抗體系統(tǒng)：HBsAg（感染標(biāo)志）、抗-HBs（保護(hù)性抗體）、HBeAg（復(fù)制活躍）、抗-HBc（感染標(biāo)志，IgM提示急性）。3.人類免疫缺陷病毒（HIV）：逆轉(zhuǎn)錄病毒，攻擊CD4?T細(xì)胞，三期：急性期（類似流感）、潛伏期（CD4下降）、艾滋病期（機(jī)會(huì)感染、腫瘤），傳播同HBV+體液。三、真菌學(xué)基礎(chǔ)（一）真菌的形態(tài)與分類1.形態(tài)：?jiǎn)渭?xì)胞（酵母型：如新生隱球菌，類酵母型：如白假絲酵母菌，出芽繁殖，形成假菌絲）、多細(xì)胞（霉菌，如毛霉、曲霉，有菌絲和孢子，菌絲分營(yíng)養(yǎng)/氣生/生殖，孢子分有性/無(wú)性）。2.分類：淺部真菌（皮膚癬菌，侵犯皮膚、毛發(fā)、甲板，如紅色毛癬菌）、深部真菌（白假絲酵母菌、新生隱球菌，侵犯內(nèi)臟，新生隱球菌有寬厚莢膜，墨汁負(fù)染可見(jiàn)）。（二）真菌的致病性1.淺部感染：角質(zhì)層、毛發(fā)、甲板，引起癬?。ㄈ珞w癬、甲癬），瘙癢、脫屑，免疫正常者多自限。2.深部感染：多為條件致病，如白假絲酵母菌（鵝口瘡、陰道炎、敗血癥，菌絲+芽生孢子為診斷依據(jù)）、新生隱球菌（鴿糞傳播，侵犯中樞，引起腦膜炎，腦脊液墨汁染色見(jiàn)莢膜菌）。四、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)（一）標(biāo)本采集與處理原則：無(wú)菌、及時(shí)、適量，不同病原體特殊處理（如腦膜炎奈瑟菌標(biāo)本需保溫、保濕，避免冷藏）。常見(jiàn)標(biāo)本：血液（需氧/厭氧培養(yǎng)）、痰（抗酸染色查結(jié)核）、糞便（SS平板分離腸道菌）、腦脊液（革蘭染色/墨汁染色）。（二）細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定1.培養(yǎng)基選擇：結(jié)核分枝桿菌用羅氏培養(yǎng)基（含孔雀綠抑制雜菌），淋病奈瑟菌用巧克力平板（含V、X因子），厭氧菌用庖肉培養(yǎng)基。2.鑒定方法：形態(tài)學(xué)：革蘭染色（G?紫、G?紅）、抗酸染色（結(jié)核分枝桿菌紅，背景藍(lán)）。生化反應(yīng)：IMViC試驗(yàn)（大腸桿菌++--，產(chǎn)氣桿菌--++）、糖發(fā)酵（如大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣）。血清學(xué)：凝集試驗(yàn)（如肥達(dá)試驗(yàn)測(cè)傷寒抗體）、ELISA（測(cè)抗原/抗體）。分子生物學(xué)：PCR（檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌rRNA）、核酸雜交（HPV分型）。（三）消毒與滅菌概念：消毒（殺滅病原微生物，如75%乙醇）、滅菌（殺滅所有微生物，如高壓蒸汽）、防腐（抑制微生物，如碘伏）、無(wú)菌（無(wú)活菌）。方法：物理：熱力（干熱<焚燒、干烤>、濕熱<高壓蒸汽121℃15-20min，殺滅芽孢>）、輻射（紫外線，空氣消毒）、濾過(guò)（血清、抗生素除菌）?；瘜W(xué)：消毒劑（含氯制劑、過(guò)氧乙酸）、防腐劑（苯扎溴銨）。第二部分經(jīng)典試題及解析一、選擇題（單選）1.下列細(xì)菌結(jié)構(gòu)中，與抗吞噬作用無(wú)關(guān)的是（）A.莢膜B.菌毛C.血漿凝固酶D.芽孢解析：莢膜（A）通過(guò)抗吞噬細(xì)胞識(shí)別發(fā)揮作用；血漿凝固酶（C）使血漿凝固，形成菌栓，阻礙吞噬；芽孢（D）是休眠體，雖抵抗力強(qiáng)，但無(wú)抗吞噬直接作用（主要抗不良環(huán)境）；菌毛（B）功能為黏附宿主細(xì)胞，與抗吞噬無(wú)關(guān)。答案：B。2.關(guān)于外毒素的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.多由革蘭陽(yáng)性菌產(chǎn)生B.化學(xué)成分是蛋白質(zhì)C.耐熱，100℃不被破壞D.可制成類毒素解析：外毒素不耐熱，60-80℃迅速破壞（內(nèi)毒素耐熱，160℃2-4h破壞）。A、B、D均正確。答案：C。3.HIV主要攻擊的細(xì)胞是（）A.CD8?T細(xì)胞B.CD4?T細(xì)胞C.B細(xì)胞D.巨噬細(xì)胞解析：HIVgp120結(jié)合CD4分子，主要攻擊CD4?T細(xì)胞，導(dǎo)致免疫缺陷。答案：B。4.新生隱球菌的致病物質(zhì)主要是（）A.莢膜B.菌絲C.毒素D.侵襲性酶解析：新生隱球菌有寬厚莢膜，抗吞噬，是主要致病物質(zhì)。菌絲為多細(xì)胞真菌結(jié)構(gòu)，新生隱球菌為單細(xì)胞酵母型。答案：A。5.高壓蒸汽滅菌法的條件是（）A.100℃，30minB.121℃，15-20minC.160℃，2hD.115℃，30min解析：高壓蒸汽滅菌標(biāo)準(zhǔn)條件為121℃，15-20min，可殺滅芽孢。答案：B。二、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述革蘭陽(yáng)性菌與革蘭陰性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的主要區(qū)別。解析：特征革蘭陽(yáng)性菌（G?）革蘭陰性菌（G?）---------------------------------------------------------------肽聚糖層數(shù)多層（15-50層）單層（1-2層）肽聚糖含量占細(xì)胞壁干重50%-90%占細(xì)胞壁干重5%-20%磷壁酸有無(wú)外膜無(wú)有（含脂多糖、脂質(zhì)雙層）脂多糖（LPS）無(wú)有（內(nèi)毒素核心）細(xì)胞壁厚度厚（20-80nm）?。?0-15nm）2.比較外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別。解析：特征外毒素內(nèi)毒素--------------------------------------------------------------來(lái)源革蘭陽(yáng)性菌及部分陰性菌革蘭陰性菌化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖（LPS）穩(wěn)定性不耐熱，60-80℃破壞耐熱，160℃2-4h破壞抗原性強(qiáng)，可刺激產(chǎn)生抗毒素，可制成類毒素弱，不能制成類毒素毒性作用強(qiáng)，對(duì)組織器官有選擇性，引起特殊癥狀（如破傷風(fēng)痙攣毒素致肌痙攣）弱，毒性作用大致相同，引起發(fā)熱、休克、DIC3.簡(jiǎn)述病毒的復(fù)制周期。解析：病毒的復(fù)制周期分為5個(gè)階段：①吸附：病毒表面刺突與宿主細(xì)胞受體特異性結(jié)合（如流感病毒HA結(jié)合呼吸道上皮細(xì)胞唾液酸受體）。②穿入：包膜病毒通過(guò)包膜與細(xì)胞膜融合或內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞；裸病毒多通過(guò)內(nèi)吞進(jìn)入。③脫殼：病毒核酸從衣殼中釋放（如脊髓灰質(zhì)炎病毒在溶酶體酶作用下脫殼）。④生物合成：病毒利用宿主細(xì)胞的原料、酶、核糖體合成自身核酸和蛋白質(zhì)（DNA病毒多在核內(nèi)復(fù)制，RNA病毒多在胞質(zhì)，逆轉(zhuǎn)錄病毒需逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA）。⑤裝配與釋放：核酸與蛋白質(zhì)裝配成子代病毒（裸病毒在胞質(zhì)/核內(nèi)裝配，包膜病毒在胞膜/核膜出芽時(shí)獲得包膜）；裸病毒多裂解細(xì)胞釋放，包膜病毒以出芽方式釋放，細(xì)胞常存活。三、案例分析題患者，男，25歲，發(fā)熱、咽痛伴皮疹2天，查體：咽部充血，雙側(cè)扁桃體腫大，表面有白色滲出物，頸部淋巴結(jié)腫大。實(shí)驗(yàn)室檢查：血常規(guī)白細(xì)胞升高，以中性粒細(xì)胞為主。取扁桃體滲出物涂片革蘭染色，見(jiàn)G?球菌呈葡萄串狀排列。1.該病原體最可能是什么？2.簡(jiǎn)述其致病物質(zhì)及所致疾病。解析：1.病原體：金黃色葡萄球菌（G?球菌，葡萄串狀排列，扁桃體滲出物提示化膿性感染）。2.致病物質(zhì)：侵襲力：莢膜（抗吞噬）、黏附素（黏附上皮細(xì)胞）、血