ICS65.020.01

CCSB38

DB61

陜西省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB61/T1517—2021

靈芝固體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范

TechnicalspecificationforproductionofGanodermalucidumsolidspawn

2021-12-17發(fā)布2022-01-17實(shí)施

陜西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB61/T1517-2021

目??次

前言.....................................................................................................................................................................II

1范圍.................................................................................................................................................................1

2規(guī)范性引用文件.............................................................................................................................................1

3術(shù)語(yǔ)和定義.....................................................................................................................................................1

4生產(chǎn)條件.........................................................................................................................................................2

5生產(chǎn)工藝.........................................................................................................................................................2

6菌種生產(chǎn)檔案.................................................................................................................................................4

附錄A（規(guī)范性）常用培養(yǎng)基及其配方........................................................................................................5

附錄B（規(guī)范性）常用原種和栽培種培養(yǎng)基及其配方...............................................................................6

參考文獻(xiàn)...............................................................................................................................................................7

I

DB61/T1517-2021

前??言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

本文件由陜西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本文件起草單位：陜西省微生物研究所、柞水縣科技開(kāi)發(fā)中心、寧強(qiáng)縣真菌研究所、陜西中科菌業(yè)

科技有限公司。

本文件主要起草人：李峻志、戴璐、霍文嚴(yán)、喬婷、祁鵬、張黎光、劉愚、路鵬鵬、賀雪蓮、張懷

榮、陸博、李安利、李坤先、李小虎、趙亞琳。

本文件由陜西省微生物研究所負(fù)責(zé)解釋。

本文件首次發(fā)布。

聯(lián)系信息如下：

單位：陜西省微生物研究所

電話/p>

地址：陜西省西安市西影路76號(hào)

郵編：710043

II

DB61/T1517-2021

靈芝固體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了靈芝固體菌種生產(chǎn)的術(shù)語(yǔ)和定義、生產(chǎn)條件、生產(chǎn)工藝、菌種生產(chǎn)檔案的要求。

本文件適用于靈芝（Ganodermalucidum）固體菌種的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T12728食用菌術(shù)語(yǔ)

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T1742食用菌菌種通用技術(shù)要求

3術(shù)語(yǔ)和定義

GB/T12728界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

母種stockculture

經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一級(jí)種、試管種。

[來(lái)源：GB/T12728——2006，2.5.7]

3.2

原種pre-culturespawn

由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱二級(jí)種。

[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.8]

3.3

栽培種spawn

由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。栽培種只能用于栽培，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種。也

稱三級(jí)種。

[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.9]

3.4

固體菌種solidspawn

生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)料上的菌種。

1

DB61/T1517-2021

[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.31]

4生產(chǎn)條件

4.1技術(shù)人員

應(yīng)按照《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定配備生產(chǎn)技術(shù)人員和檢驗(yàn)人員。

4.2生產(chǎn)環(huán)境要求

應(yīng)符合NY/T528中4.2的規(guī)定。

4.3廠房設(shè)置和布局

應(yīng)符合NY/T528中4.3的規(guī)定。

4.4基本設(shè)備

應(yīng)配備稱量用具、蒸煮設(shè)備、母種培養(yǎng)基分裝設(shè)備、拌料機(jī)、裝袋機(jī)、高壓滅菌和常壓滅菌設(shè)備、

凈化工作臺(tái)或接種箱、接種工具、恒溫培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室、培養(yǎng)架、烘箱、除濕設(shè)備、備用電源（發(fā)電機(jī)）、

冰箱或冷庫(kù)、顯微鏡等。高壓滅菌設(shè)備等壓力容器應(yīng)符合《特種設(shè)備使用管理規(guī)則》和《固定式壓力容

器安全技術(shù)監(jiān)察規(guī)程》的規(guī)定。

4.5種源

應(yīng)符合NY/T528中4.5的規(guī)定。

5生產(chǎn)工藝

5.1菌種分類

固體菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）、栽培種（三級(jí)種）。

5.2母種生產(chǎn)

5.2.1容器

應(yīng)符合NY/T528中4.7.1.2的規(guī)定。

5.2.2備料

見(jiàn)附錄A。

5.2.3培養(yǎng)基配料、分裝

選無(wú)青皮、未發(fā)芽的新鮮馬鈴薯洗凈、去皮，稱取200g切成薄片或小塊。加水1200mL煮沸20min～

30min，煮至熟而不爛，用先預(yù)濕的4層紗布過(guò)濾。濾液中加入20g葡萄糖攪拌溶化，再加入20g瓊脂，

邊煮邊攪拌至瓊脂全部溶化。加水定容至1000mL。分裝量為試管長(zhǎng)度的1/5～1/4，管口保持干凈，最

后塞上試管塞。將分裝好的試管直立放入內(nèi)鍋，用牛皮紙或報(bào)紙包住試管塞。

5.2.4高壓滅菌

2

DB61/T1517-2021

121℃滅菌30min。

5.2.5冷卻

滅菌結(jié)束，自然降壓至零。

5.2.6斜面培養(yǎng)基制備

降溫至50℃～60℃，將試管的一端斜放在1cm高的木條上擺出斜面，斜面頂端距試管口不少于5

cm。斜面擺放完畢應(yīng)迅速覆蓋棉布。

5.2.7滅菌效果檢查

隨機(jī)抽取母種培養(yǎng)基總數(shù)的3%～5%，置于28℃～35℃恒溫條件培養(yǎng)48h，無(wú)微生物長(zhǎng)出，即為滅

菌合格。

5.2.8接種

5.2.8.1接種場(chǎng)地和工具的消毒

按照NY/T528中4.7.7.2和4.7.7.3的規(guī)定對(duì)接種場(chǎng)地和工具嚴(yán)格消毒。

5.2.8.2接種操作

應(yīng)符合NY/T528中4.7.7的規(guī)定。

5.2.9培養(yǎng)

溫度控制在23℃～26℃，通風(fēng)避光培養(yǎng)。

5.2.10檢驗(yàn)

應(yīng)符合NY/T1742中5.2.1的規(guī)定。

5.3原種、栽培種生產(chǎn)

5.3.1容器

應(yīng)符合NY/T528中4.7.1.3和4.7.1.4的規(guī)定。

5.3.2培養(yǎng)基的配制

培養(yǎng)基配制見(jiàn)附錄B。所用原材料應(yīng)符合NY/T528中4.7.2的規(guī)定。

5.3.3消毒

應(yīng)符合NY/T528中4.7.7.2和4.7.7.3的規(guī)定。

5.3.4接種

應(yīng)符合NY/T528中4.7.7的規(guī)定。

5.3.5培養(yǎng)

培養(yǎng)溫度22℃～25℃，空氣相對(duì)濕度60%～70%，通風(fēng)避光培養(yǎng)。

3

DB61/T1517-2021

5.3.6檢查

第4d～5d、第7d～9d、第11d～12d逐袋（瓶）檢查，并及時(shí)剔除未萌發(fā)、已污染、生長(zhǎng)不良等

菌袋（瓶）。

5.4留樣

應(yīng)符合NY/T528中4.7.13的規(guī)定。

6菌種生產(chǎn)檔案

應(yīng)按照《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定，建立和保存菌種生產(chǎn)檔案。

4

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AA

附錄A

（規(guī)范性）

常用培養(yǎng)基及其配方

A.1PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）

馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL。

A.2CPDA培養(yǎng)基（綜合馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）

馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0.5g，水1000mL。

A.3加富馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基

馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g，蛋白胨5g，瓊脂20g，VB110

mg，水1000mL。

A.4馬鈴薯麩皮葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基

馬鈴薯200g（用浸出汁），麩皮50g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL。

5

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BB

附錄B

（規(guī)范性）