4ICS67.0504CCSX04

T/HBIQA河北省檢驗檢疫學會團體標準T/HBIQA0003—202552β液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationof52β-LactamresiduesinanimalderivedfoodsLiquidchromatography-tandemmassspectrometry2025-11-13發(fā)布 2026-01-01實施河北省檢驗檢疫學會發(fā)布T/HBIQA0003—2025T/HBIQA0003—2025前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由河北省檢驗檢疫學會提出并歸口。本文件起草單位：石家莊市疾病預防控制中心、河北醫(yī)科大學。本文件主要起草人：王可、李璐、趙偉、連靠奇、李思思、強春鈺、馬玲、郭愛靜、邢騫文、夏翠。T/HBIQA0003—2025T/HBIQA0003—2025PAGEPAGE152β-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件規(guī)定了動物源性食品中52種β-內(nèi)酰胺類藥物殘留量檢測的制樣和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。G52種β（GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理試樣中的β-內(nèi)酰胺類藥物用乙腈-水溶液提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，氮吹濃縮后用乙腈-0.1%甲酸水溶液復溶，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定，基質(zhì)外標法定量。試劑除另有規(guī)定外，試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。乙腈（CH3CN）甲酸（CH2O2）0.1%1.0mL1000mL5.2.2 0.1%（1:1,v/v）50mL0.1%（5.2.1）50mL5.2.3 乙腈-0.1%（1:9,v/v）10mL90mL0.1%（5.2.1）乙腈-（2:1,v/v）25mL50mL。乙腈-（3:1,v/v）25mL75mL。標準品β92.2%A表A.1。（100μg/mL）52β-（5.3）10mg（0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，用乙腈-水溶液（5.2.4）溶解并定容至刻度，-18℃避光保存。（10.1010mL棕色-（5.2.4）8.18.2（5.4.2）（5.4.3）0.5μg/L2μg/L5μg/L10μg/L20μg/L50μg/L100μg/L材料（C18）：40μm~60μm。0.22μm。-（ESI）10000r/min。6.6 0.01g0.00001。樣品經(jīng)粉碎、均質(zhì)后置入樣品瓶中，密封，并做上標記。-18℃下保存。提取稱取1.00g（精確至0.01g）試樣于50mL離心管中，加入12mL乙腈-水溶液（5.2.5），2000r/min渦旋振蕩3min，在4℃下以10000r/min離心5min，轉(zhuǎn)移上清液9mL至15mL離心管中，待凈化。凈化將0.3gC1（5.59L5L14下10000n56mL40℃1mL-0.1%0.22μm--C18（150mm×2.1mm，3.5μm）A0.4%B1；0.5mL/min；d)40；e)進樣量：5μL。表1 梯度脫件時間（min）A（%）B（%）0.09643.59643.69557.59557.692810.592810.6881212.5881212.6841614.5841614.6821820.5821820.6208021.5208021.696424.0964（ESI+）；（MRM）；其他參考質(zhì)譜條件見附錄A中的表A.1。-ββ偏差為±40%。8.3.18.3.2-52β-B。取空白試樣，除不加標準溶液外，采用與試樣相同的測定步驟進行平行操作。試樣中β-內(nèi)酰胺類藥物的殘留量按標準曲線或公式（1）計算：式中：

X=A×Cs×V1×1000As×V2×m×1000

…………（1）X——試樣中被測物殘留量的數(shù)值，單位為微克每千克（μg/kg）；A——試樣溶液中被測物的峰面積；Cs——標準溶液中被測物濃度的數(shù)值，單位為納克每毫升（ng/mL）；V1——提取液總體積的數(shù)值，單位為毫升（mL）；As——標準溶液中被測物的峰面積；V2——用于氮吹的上清液體積，單位為毫升（mL）；m——試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。靈敏度2.58.0μg/kg，1.5μg/kg5.0μg/kg47β-內(nèi)酰胺類藥物的檢出限為1.0μg/kg，定量限為3.0μg/kg。準確度本方法對雞肉、雞蛋、牛奶和魚肉及其制品中頭孢丙烯在8.0μg/kg~50.0μg/kg添加濃度的回收率為80%~100%。本方法對雞肉、雞蛋、牛奶和魚肉及其制品中頭孢替安、頭孢拉定、雙氯西林和氟氯西林在5.0μg/kg~50.0μg/kg添加濃度的回收率為75%~110%。47種β-3.0μg/kg~50.0μg/kg添70%~115%。精密度本方法相對標準偏差≤20%。T/HBIQA0003—2025T/HBIQA0003—2025PAGEPAGE10附 錄 A（資料性）參考質(zhì)譜條件參考質(zhì)譜條件1)：5500V；550℃；50psi；40psi；55psi。表A.152種β-內(nèi)酰胺類藥物的英文名稱、CAS號、參考保留時間、監(jiān)測離子對、去簇電壓和碰撞能中文名稱英文名稱CAS號保留時間（min）離子對（m/z）去簇電壓（V）碰撞能（eV）比阿培南Biapenem120410-24-41.40351.1/110.1*22.777.9351.1/170.128.082.1頭孢替安Cefotiam61622-34-21.76526.3/174.3*20.977.8526.3/353.017.169.1阿莫西林Amoxicillin26787-78-02.48366.2/114.1*26.575.14366.2/208.217.465.8頭孢吡肟Cefepime88040-23-72.64481.3/396.0*16.7120.1481.3/86.018.1118.1多尼培南Doripenem148016-81-32.63421.1/274.2*23.494.0421.1/342.220.697.0頭孢唑蘭Cefozopran113359-04-93.90516.1/120.2*19.871.0516.1/251.126.869.2頭孢布烯Ceftibuten97519-39-64.84411.1/268.1*20.290.1411.1/211.123.193.2阿撲西林Aspoxicillin63358-49-64.95494.3/250.0*25.4105.0494.3/349.124.8109.3頭孢匹林Cefapirin24356-60-35.94424.2/291.9*20.477.8424.2/152.130.777.9頭孢他啶Ceftazidime72558-82-86.77547.2/468.0*17.275.9547.2/396.224.187.8美羅培南Meropenem96036-03-27.11384.1/141.0*21.080.8384.1/340.215.677.0頭孢地尼Cefdinir91832-40-57.10396.2/226.9*20.258.0396.2/125.838.289.01)AABSCIEX5500中文名稱英文名稱CAS號保留時間（min）離子對（m/z）去簇電壓（V）碰撞能（eV）氨芐西林Ampicillin69-53-47.20350.1/106.1*24.050.2350.1/159.718.051.1頭孢氨芐Cephalexin15686-71-27.23348.2/157.8*14.879.0348.2/106.242.070.8頭孢匹羅Cefpirome84957-29-97.24515.3/396.0*17.4128.4515.3/120.319.989.6頭孢唑肟Ceftizoxime68401-81-07.43384.0/227.2*27.180.2384.0/126.042.2102.2頭孢拉定Cefradine38821-53-38.52350.1/176.1*16.268.0350.1/108.331.063.9西司他丁Cilastatin82009-34-59.44359.1/97.0*32.995.0359.1/202.020.679.8頭孢他美Cefetamet65052-63-39.61398.1/241.1*20.579.2398.1/126.138.176.6頭孢克肟Cefixime79350-37-110.29454.3/285.0*21.283.2454.3/210.226.0123.0美西林Mecillinam32887-01-710.51326.1/167.2*30.598.2326.1/139.339.9111.3頭孢噻肟Cefotaxime63527-52-610.73456.0/396.0*15.383.9456.0/324.119.897.8頭孢特侖新戊酯Cefterampivoxil82547-58-810.74480.2/396.2*19.289.8480.2/324.223.180.1頭孢曲松Ceftriaxone73384-59-510.96555.1/396.1*18.782.6555.1/166.934.279.4法羅培南Faropenem106560-14-911.82308.0/178.2*23.385.9308.0/222.117.070.0頭孢甲肟Cefmenoxime65085-01-011.72512.2/324.0*23.890.1512.2/167.131.584.6頭孢丙烯Cefprozil92665-29-712.13390.3/208.0*13.940.1390.3/183.611.340.0頭孢呋辛Cefuroxime55268-75-212.49442.2/364.1*14.155.1442.2/336.219.359.2頭孢唑啉Cefazolin27164-46-112.70455.2/323.4*15.465.0455.2/295.138.9178.0頭孢硫脒Cefathiamidine33075-00-213.79473.3/201.1*30.6149.2473.3/275.326.7148.1頭孢地嗪Cefodizime69739-16-814.66585.2/396.1*20.866.4585.2/166.936.7100.0中文名稱英文名稱CAS號保留時間（min）離子對（m/z）去簇電壓（V）碰撞能（eV）替卡西林Ticarcillin34787-01-414.97385.1/160.1*20.698.0385.1/114.247.196.0頭孢匹胺Cefpiramide70797-11-415.45613.1/257.3*37.7130.1613.1/285.125.3129.9頭孢孟多鈉Cefamandolesodium30034-03-815.70463.1/347.0*12.9129.2463.1/158.023.7130.3羧芐西林Carbenicillin4697-36-316.48379.3/160.2*24.0117.9379.3/220.118.9109.0頭孢哌酮Cefoperazone62893-19-017.74646.3/290.3*30.8151.0646.3/142.943.1136.4頭孢噻呋Ceftiofur80370-57-618.85524.1/241.0*24.6112.0524.1/210.130.3120.0頭孢泊肟酯Cefpodoximeproxetil87239-81-419.47558.2/410.1*22.8105.1558.2/428.122.277.9頭孢他美酯Cefetametpivoxil65243-33-619.47512.2/241.1*24.295.9512.2/398.127.2109.9苯唑西林Oxacillin1173-88-219.47402.3/160.1*18.9101.9402.3/243.119.0126.1甲氧西林Methicillin61-32-519.48381.1/165.0*27.194.2381.1/222.123.377.2頭孢呋辛酯Cefuroximeaxetil64544-07-619.48528.1/406.1*30.5120.3528.1/364.138.3130.4萘夫西林Nafcillin985-16-019.48415.2/199.1*19.2111.8415.2/255.930.2114.0青霉素ⅤPenicillinV87-08-119.48351.1/160.1*16.081.3351.1/114.246.076.9美洛西林Mezlocillin51481-65-319.49540.3/296.2*27.0130.0540.3/324.018.4118.2青霉素GPenicillinG61-33-619.49335.1/159.9*16.074.1335.1/175.919.181.0阿洛西林Azlocill