肝細(xì)胞癌基因治療進(jìn)展CONTENTS01020304RNA干擾技術(shù)基因引入與編輯病毒治療與疫苗其他創(chuàng)新療法RNA干擾技術(shù)siRNA技術(shù)在HCC治療中的作用機(jī)制siRNA遞送系統(tǒng)的研究進(jìn)展siRNA聯(lián)合療法的臨床應(yīng)用前景通過(guò)特異性降解mRNA，siRNA能有效抑制HCC相關(guān)癌基因的表達(dá)，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。研究開(kāi)發(fā)了多種遞送系統(tǒng)，如多肽納米顆粒和LHRH-MPG△NLS肽，以提高siRNA在肝癌細(xì)胞中的靶向性和基因沉默效率。將siRNA與其他治療方法（如TRAIL、化療）聯(lián)合使用，顯示出增強(qiáng)的抗腫瘤效果和改善患者生存質(zhì)量的潛力。siRNA在HCC中的應(yīng)用010203RNA介導(dǎo)的基因沉默復(fù)合體通過(guò)與特定蛋白結(jié)合，識(shí)別并配對(duì)靶基因的mRNA，阻斷蛋白質(zhì)合成。siRNA作為外源基因入侵的防御機(jī)制，通過(guò)高效特異性降解同源mRNA實(shí)現(xiàn)特定基因表達(dá)的下調(diào)。shRNA和miRNA是兩種功能性RNA，它們通過(guò)與Argonaute-2蛋白結(jié)合進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，參與基因沉默過(guò)程。RNA介導(dǎo)的基因沉默復(fù)合體形成siRNA在基因沉默中的作用shRNA和miRNA的應(yīng)用基因沉默復(fù)合體機(jī)制研究顯示，LHRH-MPG△NLS肽與siRNA組裝形成的穩(wěn)定納米級(jí)多聚體，可顯著提高對(duì)肝癌細(xì)胞的靶向性和基因沉默效率。多肽納米顆粒的靶向性通過(guò)多肽納米顆粒遞送特異性靶向TGF-β和Cox-2基因的siRNA至肝癌細(xì)胞，成功增強(qiáng)腫瘤抑制效果，為基因治療提供新方法。多肽納米顆粒在基因治療中的應(yīng)用多肽載體具有雙重功能，能夠有效提高對(duì)特定基因的靶向性和沉默效率，為肝癌治療帶來(lái)新的希望。多肽載體的優(yōu)勢(shì)多肽納米顆粒遞送基因引入與編輯蛋白質(zhì)替代療法蛋白質(zhì)替代療法的原理pDNA和mRNA作為載體的應(yīng)用抗血管生成因子的應(yīng)用通過(guò)導(dǎo)入自殺基因或調(diào)控蛋白干預(yù)細(xì)胞過(guò)程，重新激活HCC中下調(diào)的抑癌通路。pDNA和mRNA是常用的兩種載體，mRNA具有制備工藝簡(jiǎn)單、包封率高等優(yōu)勢(shì)。導(dǎo)入內(nèi)皮抑素、PEDF、NK4等多種抗血管生成因子，可有效抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。010302pDNA載體的應(yīng)用mRNA載體的優(yōu)勢(shì)載體在基因治療中的應(yīng)用pDNA載體用于導(dǎo)入特定基因，如TRAIL基因，以誘導(dǎo)HCC細(xì)胞凋亡并抑制腫瘤生長(zhǎng)。mRNA載體具有制備簡(jiǎn)單、包封率高等優(yōu)點(diǎn)，能在細(xì)胞質(zhì)中直接發(fā)揮作用，無(wú)需核轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。通過(guò)pDNA和mRNA載體遞送抗血管生成因子等，有效抑制HCC的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。pDNA和mRNA載體010203CRISPR-Cas9系統(tǒng)CRISPR-Cas9技術(shù)通過(guò)靶向特定DNA序列實(shí)現(xiàn)基因敲除或敲入，為HCC治療提供了精確的基因編輯手段。研究顯示，CRISPR-Cas9用于敲除HCC細(xì)胞中的ALDOA可抑制腫瘤增殖和遷移，增強(qiáng)治療效果。盡管CRISPR-Cas9具有巨大潛力，但面臨脫靶效應(yīng)、遞送效率低和細(xì)胞毒性等挑戰(zhàn)，需要進(jìn)一步優(yōu)化。CRISPR-Cas9的基因編輯潛力CRISPR-Cas9在HCC中的應(yīng)用案例CRISPR-Cas9技術(shù)的局限性與挑戰(zhàn)病毒治療與疫苗010203ONYX-015病毒研究AFP啟動(dòng)子/增強(qiáng)子腺病毒開(kāi)發(fā)TetrahymenaⅠ組反式剪接核酶應(yīng)用ONYX-015是首個(gè)溶瘤病毒，通過(guò)E1B55K基因缺失特點(diǎn)在腫瘤細(xì)胞中激活復(fù)制，實(shí)現(xiàn)腫瘤特異性復(fù)制。針對(duì)AFP陽(yáng)性的HCC細(xì)胞，研究人員開(kāi)發(fā)了攜帶AFP啟動(dòng)子/增強(qiáng)子的腺病毒，實(shí)現(xiàn)了對(duì)該類細(xì)胞的特異性溶解。Han等提出了基于腺病毒介導(dǎo)的TetrahymenaⅠ組反式剪接核酶方法，通過(guò)HCC特異性替代TERTRNA誘導(dǎo)靶向自殺基因活性。溶瘤病毒研究010203mRNA腫瘤疫苗的應(yīng)用樹(shù)突狀細(xì)胞疫苗的開(kāi)發(fā)AFP靶點(diǎn)疫苗的研究mRNA腫瘤疫苗通過(guò)遞送編碼新抗原的mRNA至抗原呈遞細(xì)胞，激活T細(xì)胞免疫反應(yīng)。利用患者自體細(xì)胞構(gòu)建特異性識(shí)別腫瘤的樹(shù)突狀細(xì)胞，回輸后激活T細(xì)胞免疫反應(yīng)。基于AFP蛋白或其衍生肽段的疫苗，通過(guò)表達(dá)AFP/熱休克蛋白70融合蛋白激活免疫反應(yīng)。抗腫瘤疫苗開(kāi)發(fā)010203mRNA疫苗需要高效的遞送系統(tǒng)，目前常用的是脂質(zhì)納米顆粒，以提高靶向性和減少副作用。mRNA疫苗的遞送系統(tǒng)mRNA疫苗在HCC治療中已取得進(jìn)展，如GNOS-PV02疫苗聯(lián)合PD-1單抗治療晚期肝癌，客觀緩解率達(dá)30.6%。mRNA疫苗的臨床應(yīng)用盡管mRNA疫苗在預(yù)防癌癥相關(guān)病毒感染方面有應(yīng)用，但針對(duì)癌癥本身仍需進(jìn)一步研究，未來(lái)前景廣闊。mRNA疫苗的未來(lái)展望mRNA疫苗應(yīng)用其他創(chuàng)新療法CAR-T細(xì)胞通過(guò)轉(zhuǎn)染嵌合抗原受體，增強(qiáng)腫瘤識(shí)別能力并進(jìn)行擴(kuò)增，回輸后發(fā)揮抗腫瘤作用。在HCC中，GPC3高表達(dá)，而正常肝組織幾乎不表達(dá)，成為理想的免疫治療靶點(diǎn)，顯著延長(zhǎng)患者生存期?；蚪M編輯技術(shù)可提升CAR-T細(xì)胞的安全性，減少脫靶毒性、細(xì)胞因子釋放綜合征和神經(jīng)毒性等不良事件。CAR-T細(xì)胞治療原理GPC3CAR-T細(xì)胞治療應(yīng)用基因組編輯增強(qiáng)安全性過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移超聲波激發(fā)與基因治療結(jié)合三聯(lián)治療策略的創(chuàng)新應(yīng)用納米仿酶在免疫治療中的作用通過(guò)超聲波激發(fā)技術(shù)，增強(qiáng)人工納米仿酶在HCC細(xì)胞內(nèi)的活性，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)和受控的腫瘤消融。整合化學(xué)動(dòng)力治療、聲動(dòng)力治療與精準(zhǔn)基因治療，形成CDT+SDT+PGT新型治療模式，減少對(duì)正常組織的損傷。利用人工納米仿酶調(diào)節(jié)HCC細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡，提升免疫治療效果，促進(jìn)腫瘤微環(huán)境的改善。新型人工納米仿酶化學(xué)動(dòng)力治療聯(lián)合策略通過(guò)化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的活性氧物質(zhì)破壞癌細(xì)胞的氧化還原平衡，實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的特異性殺傷?；瘜W(xué)動(dòng)力治療（CDT）的原理與應(yīng)