基于新型材料與先進(jìn)儀器的食藥兩用菊花多農(nóng)藥殘留分析技術(shù)構(gòu)建與實踐一、引言1.1研究背景菊花，作為我國傳統(tǒng)的“藥食同源”佳品，不僅承載著深厚的文化底蘊，更在食品與醫(yī)藥領(lǐng)域發(fā)揮著不可或缺的重要作用。在食品領(lǐng)域，菊花茶、菊花酒、菊花糕等菊花制品深受消費者喜愛，其獨特的風(fēng)味與口感，為人們的飲食生活增添了豐富色彩。在醫(yī)藥領(lǐng)域，菊花以其散風(fēng)清熱、平肝明目、清熱解毒等顯著功效，被廣泛應(yīng)用于多種疾病的預(yù)防與治療，是眾多中藥方劑及保健品的關(guān)鍵原料。然而，在菊花的種植過程中，病蟲害的侵襲嚴(yán)重威脅著其產(chǎn)量與品質(zhì)。為有效控制病蟲害，農(nóng)藥的使用成為了常見的應(yīng)對措施。但隨之而來的農(nóng)藥殘留問題，卻給菊花的質(zhì)量安全帶來了巨大挑戰(zhàn)。據(jù)相關(guān)研究表明，在菊花種植中，有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等多種農(nóng)藥被頻繁使用。這些農(nóng)藥在消滅病蟲害的同時，若使用不當(dāng)或未遵循安全間隔期，極易在菊花中殘留。農(nóng)藥殘留超標(biāo)對菊花的影響是多方面的。從食品安全角度來看，長期攝入含有農(nóng)藥殘留的菊花制品，可能導(dǎo)致人體出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)損傷、內(nèi)分泌失調(diào)、免疫功能下降等健康問題。從市場角度分析，農(nóng)藥殘留超標(biāo)會使菊花產(chǎn)品在國內(nèi)市場面臨消費者信任危機，在國際市場上，由于各國對農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)日益嚴(yán)格，超標(biāo)產(chǎn)品將遭遇貿(mào)易壁壘，嚴(yán)重影響我國菊花產(chǎn)業(yè)的出口貿(mào)易。從產(chǎn)業(yè)發(fā)展角度而言，農(nóng)藥殘留問題制約了菊花產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，增加了產(chǎn)業(yè)的運營成本與風(fēng)險。目前，國內(nèi)外針對菊花中多農(nóng)藥殘留的檢測方法研究仍存在諸多不足。一方面，尚未有能同時滿足多種菊花樣品中多農(nóng)藥殘留檢測的通用方法；另一方面，國內(nèi)針對菊花的農(nóng)藥登記數(shù)量有限，最高限量標(biāo)準(zhǔn)缺失，這使得在菊花農(nóng)藥殘留檢測與監(jiān)管過程中缺乏明確的依據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)。構(gòu)建一套高效、快速、準(zhǔn)確的多農(nóng)藥殘留分析技術(shù)，對于保障菊花的質(zhì)量安全、促進(jìn)菊花產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。1.2研究目的與意義本研究旨在構(gòu)建一套適用于“食藥兩用”菊花中多農(nóng)藥殘留的高效分析方法，具體目的包括：全面分析菊花種植中常用農(nóng)藥種類及殘留現(xiàn)狀，明確不同菊花品種、種植區(qū)域、種植方式下農(nóng)藥殘留的差異；篩選并優(yōu)化適用于菊花樣品的前處理技術(shù)與檢測儀器，建立能同時準(zhǔn)確測定多種菊花中多種農(nóng)藥殘留的分析方法；對所建立的分析方法進(jìn)行系統(tǒng)的方法學(xué)驗證，確保其準(zhǔn)確性、精密度、靈敏度、線性范圍等性能指標(biāo)滿足實際檢測需求；將建立的分析方法應(yīng)用于實際菊花樣品檢測，評估菊花中農(nóng)藥殘留的膳食攝入風(fēng)險，為菊花的安全生產(chǎn)與質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。本研究對于菊花產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展和食品安全具有重要意義。從產(chǎn)業(yè)發(fā)展角度看，構(gòu)建高效的多農(nóng)藥殘留分析方法，能夠為菊花種植者、加工企業(yè)提供準(zhǔn)確的農(nóng)藥殘留檢測手段，有助于指導(dǎo)合理用藥，減少農(nóng)藥使用量，降低生產(chǎn)成本，提高菊花的產(chǎn)量與品質(zhì)，增強我國菊花產(chǎn)品在國內(nèi)外市場的競爭力，推動菊花產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。從食品安全角度而言，準(zhǔn)確檢測菊花中的農(nóng)藥殘留，能夠及時發(fā)現(xiàn)并控制農(nóng)藥殘留超標(biāo)的菊花產(chǎn)品，保障消費者的身體健康，增強消費者對菊花制品的信任度，維護(hù)市場秩序。從監(jiān)管層面來說，該研究為相關(guān)部門制定和完善菊花農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)、加強監(jiān)管力度提供了數(shù)據(jù)支持與技術(shù)支撐，有助于提升我國食品安全監(jiān)管水平。1.3國內(nèi)外研究現(xiàn)狀隨著人們對食品安全的關(guān)注度不斷提高，菊花中農(nóng)藥殘留問題逐漸成為研究熱點。國內(nèi)外學(xué)者圍繞菊花農(nóng)藥殘留的檢測方法、殘留現(xiàn)狀、風(fēng)險評估等方面展開了大量研究。在檢測方法上，氣相色譜（GC）、液相色譜（LC）及其與質(zhì)譜（MS）聯(lián)用技術(shù)是目前菊花農(nóng)藥殘留檢測的主流方法。趙維良等采用PSA-LC-MS/MS法測定菊花藥材中12種農(nóng)藥殘留，實現(xiàn)了對多種農(nóng)藥的同時檢測，方法的回收率和精密度良好。朱?；ǖ冗\用GC-MS/MS同時測定杭白菊中68種農(nóng)藥殘留，該方法具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性。此外，超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）等新型技術(shù)也開始應(yīng)用于菊花農(nóng)藥殘留檢測，其在改善基質(zhì)效應(yīng)、提高分析效率方面具有顯著優(yōu)勢。在殘留現(xiàn)狀研究方面，不同地區(qū)、不同品種的菊花農(nóng)藥殘留情況存在差異。相關(guān)研究表明，菊花中常見的農(nóng)藥殘留種類包括有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等。楊丹等對不同產(chǎn)地的菊花進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)部分樣品中存在多種農(nóng)藥殘留，且個別農(nóng)藥殘留量超過國家標(biāo)準(zhǔn)。野菊花在種植和生長過程中也存在農(nóng)藥殘留問題，其殘留水平和變化規(guī)律受到農(nóng)藥使用情況、環(huán)境因素等多種因素的影響。在風(fēng)險評估方面，學(xué)者們主要采用膳食風(fēng)險評估模型，對菊花中農(nóng)藥殘留的健康風(fēng)險進(jìn)行評估。譚春梅等采用中藥中農(nóng)藥殘留風(fēng)險評估系統(tǒng)對菊花中吡蚜酮、吡蟲啉和啶酰菌胺等農(nóng)藥的慢性風(fēng)險進(jìn)行評價，為菊花的安全使用提供了科學(xué)依據(jù)。通過對浙產(chǎn)杭白菊的膳食風(fēng)險攝入評估發(fā)現(xiàn)，其慢性和急性攝入風(fēng)險均在可接受范圍內(nèi)。盡管國內(nèi)外在菊花農(nóng)藥殘留分析方面取得了一定進(jìn)展，但仍存在一些不足之處。目前的檢測方法大多針對特定品種或特定地區(qū)的菊花，缺乏能同時滿足多種菊花樣品中多農(nóng)藥殘留檢測的通用方法；國內(nèi)針對菊花的農(nóng)藥登記數(shù)量有限，最高限量標(biāo)準(zhǔn)缺失，導(dǎo)致在檢測和監(jiān)管過程中缺乏明確的依據(jù)；對于一些新型農(nóng)藥和多農(nóng)藥殘留的聯(lián)合毒性研究較少，無法全面評估其對人體健康的潛在風(fēng)險。因此，建立一種高效、通用的菊花多農(nóng)藥殘留分析方法，完善菊花農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)體系，加強對新型農(nóng)藥和多農(nóng)藥殘留聯(lián)合毒性的研究，具有重要的現(xiàn)實意義。二、食藥兩用菊花常見農(nóng)藥種類及殘留現(xiàn)狀2.1常見農(nóng)藥種類概述在菊花種植過程中，為有效防控病蟲害，保障菊花的產(chǎn)量與品質(zhì)，多種農(nóng)藥被廣泛應(yīng)用。這些農(nóng)藥依據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)與作用機制，主要可分為有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類、殺菌劑類以及其他類型農(nóng)藥。有機磷類農(nóng)藥憑借其高效的殺蟲活性，在菊花種植中占據(jù)重要地位。例如，敵敵畏對蚜蟲、薊馬等害蟲具有快速的觸殺與熏蒸作用，能迅速抑制害蟲的神經(jīng)系統(tǒng)，使其麻痹死亡，常用于菊花生長前期害蟲的爆發(fā)性防治；辛硫磷則對地下害蟲如地老虎、蠐螬等具有良好的防治效果，它在土壤中殘留期較長，可有效保護(hù)菊花根部免受地下害蟲侵害。有機磷類農(nóng)藥的作用機制主要是抑制昆蟲體內(nèi)的乙酰膽堿酯酶活性，導(dǎo)致乙酰膽堿大量積累，從而破壞昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)的正常傳導(dǎo)，使其中毒死亡。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥以其低毒、高效、廣譜的特性，成為菊花種植中的常用農(nóng)藥之一。溴氰菊酯對多種害蟲都有強烈的觸殺和胃毒作用，對鱗翅目害蟲如菊花螟蟲等防治效果顯著，能快速擊倒害蟲；氯氰菊酯則對蚜蟲、葉蟬等害蟲有良好的防治效果，其作用機制是改變昆蟲神經(jīng)細(xì)胞膜的離子通透性，干擾神經(jīng)傳導(dǎo)，使害蟲過度興奮、痙攣而死亡。此類農(nóng)藥的特點是擊倒速度快、持效期適中，且對環(huán)境相對友好，但長期使用可能導(dǎo)致害蟲產(chǎn)生抗藥性。氨基甲酸酯類農(nóng)藥在菊花病蟲害防治中也有應(yīng)用。異丙威對稻飛虱、葉蟬等害蟲具有較強的觸殺作用，能快速阻斷害蟲的神經(jīng)系統(tǒng)傳導(dǎo)；涕滅威則具有內(nèi)吸性，可被菊花植株吸收并傳導(dǎo)至各個部位，對根結(jié)線蟲、蚜蟲等多種害蟲有效，其作用機制是與昆蟲體內(nèi)的乙酰膽堿酯酶結(jié)合，使其失去活性，從而影響神經(jīng)傳導(dǎo)。這類農(nóng)藥的優(yōu)點是作用迅速、選擇性高，但部分品種毒性相對較高，使用時需嚴(yán)格控制劑量與安全間隔期。殺菌劑類農(nóng)藥對于防治菊花的多種病害至關(guān)重要。多菌靈是一種廣譜內(nèi)吸性殺菌劑，對菊花的白粉病、炭疽病、褐斑病等多種真菌性病害有良好的防治效果，它能干擾病原菌的有絲分裂中紡錘體的形成，從而影響病原菌的細(xì)胞分裂；百菌清則是一種非內(nèi)吸性廣譜殺菌劑，對多種真菌病害具有預(yù)防和治療作用，它能與真菌細(xì)胞中的酶發(fā)生反應(yīng)，破壞酶的活性，進(jìn)而抑制真菌的生長和繁殖。在菊花生長過程中，根據(jù)不同病害的發(fā)生特點，合理選用殺菌劑，可有效保障菊花的健康生長。其他類型農(nóng)藥也在菊花種植中發(fā)揮著作用。例如，殺螨劑克螨特對菊花紅蜘蛛等螨類害蟲有特效，它能抑制螨類害蟲的神經(jīng)系統(tǒng)，使其麻痹死亡；除草劑草甘膦則用于清除菊花田間的雜草，通過抑制雜草體內(nèi)的莽草酸途徑，阻礙其蛋白質(zhì)合成，達(dá)到除草目的。這些農(nóng)藥在菊花種植中各自承擔(dān)著不同的防控任務(wù)，為菊花的正常生長創(chuàng)造良好的環(huán)境。2.2殘留現(xiàn)狀分析近年來，隨著對食品安全關(guān)注度的不斷提升，菊花中農(nóng)藥殘留問題愈發(fā)受到重視。大量研究及市場監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示，菊花農(nóng)藥殘留現(xiàn)象較為普遍，部分地區(qū)和品種的菊花存在不同程度的農(nóng)藥殘留超標(biāo)情況。從市場抽檢數(shù)據(jù)來看，國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的藥品質(zhì)量公告顯示，多次在菊花抽檢中發(fā)現(xiàn)農(nóng)藥殘留問題。例如，在某次抽檢中，標(biāo)示為鹽城市中藥飲片有限公司生產(chǎn)的3批次菊花檢出禁用農(nóng)藥殘留量。在另一項針對中藥市場的大規(guī)模抽檢中，涉及多個省份的菊花樣品，其中有相當(dāng)比例的樣品被檢測出含有多種農(nóng)藥殘留，部分農(nóng)藥殘留量超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的限值。不同地區(qū)的菊花農(nóng)藥殘留情況存在顯著差異。在一些菊花主產(chǎn)區(qū)，由于種植規(guī)模大、病蟲害發(fā)生頻繁，農(nóng)藥使用量相對較高，導(dǎo)致農(nóng)藥殘留問題更為突出。一項對安徽、浙江、河南等主要菊花產(chǎn)區(qū)的調(diào)查研究表明，安徽某產(chǎn)區(qū)的部分菊花樣品中，有機磷類農(nóng)藥殘留量較高，其中敵敵畏殘留量最高值達(dá)到0.15mg/kg，超過國家標(biāo)準(zhǔn)限值（0.05mg/kg）的3倍；浙江產(chǎn)區(qū)的部分菊花樣品中，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留較為普遍，氯氰菊酯殘留量在個別樣品中達(dá)到0.2mg/kg，略高于國家標(biāo)準(zhǔn)限值（0.1mg/kg）。而河南產(chǎn)區(qū)的菊花樣品中，除了有機磷和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留外，還檢測出一定比例的氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留。不同品種的菊花對農(nóng)藥的吸附和代謝能力不同，也導(dǎo)致了農(nóng)藥殘留情況的差異。以杭菊、亳菊、滁菊等常見品種為例，杭菊由于其生長周期較長，且對某些病蟲害的抗性較弱，在種植過程中農(nóng)藥使用次數(shù)相對較多，農(nóng)藥殘留量相對較高。研究表明，杭菊中多種農(nóng)藥的殘留水平普遍高于亳菊和滁菊，尤其是在一些老產(chǎn)區(qū)，杭菊中農(nóng)藥殘留超標(biāo)的比例達(dá)到20%以上。而亳菊由于其獨特的生長環(huán)境和種植管理方式，對某些農(nóng)藥的代謝能力較強，農(nóng)藥殘留量相對較低，但仍存在個別農(nóng)藥殘留超標(biāo)的情況。滁菊在合理的種植管理條件下，農(nóng)藥殘留量總體處于較低水平，但在病蟲害高發(fā)年份，農(nóng)藥殘留問題也不容忽視。種植方式對菊花農(nóng)藥殘留也有重要影響。傳統(tǒng)的露天種植方式，由于菊花直接暴露在自然環(huán)境中，病蟲害發(fā)生幾率高，農(nóng)藥使用量較大，農(nóng)藥殘留風(fēng)險相對較高。相比之下，采用設(shè)施栽培（如大棚種植）的菊花，由于能夠較好地控制病蟲害的發(fā)生，減少農(nóng)藥的使用量，農(nóng)藥殘留量相對較低。有研究對比了露天種植和大棚種植的菊花農(nóng)藥殘留情況，發(fā)現(xiàn)露天種植的菊花中農(nóng)藥殘留種類和含量均高于大棚種植的菊花，其中有機磷類農(nóng)藥殘留量平均高出30%以上。此外，不合理的種植密度、施肥方式等也會影響菊花的生長狀況和抗病蟲害能力，進(jìn)而影響農(nóng)藥殘留水平。三、多農(nóng)藥殘留分析方法的建立3.1前處理方法的改進(jìn)3.1.1傳統(tǒng)QuEChERS方法分析在農(nóng)藥殘留分析領(lǐng)域，樣品的前處理是極為關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，它直接關(guān)系到后續(xù)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。傳統(tǒng)的QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法，作為一種經(jīng)典的前處理技術(shù)，自2003年由美國農(nóng)業(yè)部Anastassiades教授等開發(fā)以來，在農(nóng)產(chǎn)品檢測中得到了廣泛應(yīng)用。該方法的原理與高效液相色譜（HPLC）和固相萃取（SPE）相似，都是基于吸附劑填料與基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用，通過吸附雜質(zhì)來實現(xiàn)除雜凈化的目的。其具體操作步驟相對簡便，首先將樣品粉碎，以增加樣品與后續(xù)試劑的接觸面積，提高萃取效率；接著采用單一溶劑乙腈進(jìn)行提取分離，乙腈對多種農(nóng)藥具有良好的溶解性，能有效將農(nóng)藥從樣品基質(zhì)中提取出來；隨后加入MgSO4等鹽類，利用其吸水性除去提取液中的水分，避免水分對后續(xù)檢測的干擾；再加入乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）等吸附劑，進(jìn)一步去除基質(zhì)中的雜質(zhì)，如脂肪酸、色素、糖類等；最后，將上清液進(jìn)行GC-MS、LC-MS等儀器檢測。在菊花農(nóng)藥殘留分析中，傳統(tǒng)QuEChERS方法展現(xiàn)出諸多優(yōu)點。其回收率表現(xiàn)出色，對于大量極性及揮發(fā)性的農(nóng)藥品種，回收率通常大于85%，這意味著能夠較為有效地將菊花樣品中的農(nóng)藥提取出來，為準(zhǔn)確檢測提供了保障。精確度和準(zhǔn)確度高，可通過內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行校正，減少實驗誤差，使檢測結(jié)果更具可靠性。該方法可分析的農(nóng)藥范圍廣泛，無論是極性還是非極性的農(nóng)藥種類，都能利用此技術(shù)得到較好的回收率，適應(yīng)了菊花種植中多種農(nóng)藥使用的實際情況。此外，它還具有分析速度快的優(yōu)勢，能在30min內(nèi)完成6個樣品的處理，大大提高了檢測效率，滿足了批量檢測的需求。同時，溶劑使用量少，污染小，價格低廉且不使用含氯化物溶劑，符合環(huán)保和經(jīng)濟(jì)的要求；操作簡便，無需專業(yè)技能和復(fù)雜訓(xùn)練便可完成，降低了實驗操作的難度和門檻。然而，該方法也存在一些局限性。由于菊花樣品基質(zhì)復(fù)雜，含有大量的多糖、黃酮、萜類等成分，傳統(tǒng)QuEChERS方法在處理菊花樣品時，難以完全去除這些雜質(zhì)，導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng)較為嚴(yán)重?；|(zhì)效應(yīng)會影響農(nóng)藥的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性，使檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。對于一些痕量農(nóng)藥殘留的檢測，傳統(tǒng)方法的靈敏度可能不足，無法滿足日益嚴(yán)格的檢測要求。在實際應(yīng)用中，部分對熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥，在加入無水硫酸鎂除水過程中，可能會因放熱而導(dǎo)致?lián)p失，影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。3.1.2新型碳納米材料的應(yīng)用針對傳統(tǒng)QuEChERS方法在菊花農(nóng)藥殘留分析中的不足，新型碳納米材料的應(yīng)用為解決這些問題提供了新的思路。氨基化多壁碳納米管（MWCNTs-NH2）作為一種具有獨特性能的新型材料，在樣品前處理領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的潛力。多壁碳納米管是一種由多層石墨烯片卷曲而成的同心圓柱狀納米材料，其外徑一般在幾納米到幾十納米之間，內(nèi)徑從0.5納米到幾納米不等，層數(shù)通常為6到25層。這種特殊的結(jié)構(gòu)賦予了多壁碳納米管諸多優(yōu)異的性能，如極高的機械強度，使其在復(fù)合材料中能夠顯著增強材料的力學(xué)性能；良好的導(dǎo)電性，可用于制造高性能電極材料；優(yōu)異的導(dǎo)熱性，在熱管理領(lǐng)域具有應(yīng)用價值；以及良好的化學(xué)穩(wěn)定性，能夠抵抗化學(xué)腐蝕。氨基化多壁碳納米管（MWCNTs-NH2）則是在多壁碳納米管的基礎(chǔ)上，通過表面修飾引入氨基基團(tuán)（NH2）。制備過程通常先對多壁碳納米管進(jìn)行預(yù)處理，如酸洗或等離子氧化，以清除表面雜質(zhì)和氧化物，提高活性位點的暴露。然后將預(yù)處理后的多壁碳納米管與含有氨基化試劑（如氨水或氨氣）的溶液接觸，在特定的溫度、pH值和反應(yīng)時間下，使其表面與氨基基團(tuán)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，引入氨基基團(tuán)。最后經(jīng)過溶劑處理和純化，去除未反應(yīng)的試劑和副產(chǎn)物，并通過拉曼光譜、紅外光譜、核磁共振譜等技術(shù)對其進(jìn)行表征，確認(rèn)氨基基團(tuán)的引入和分布情況。MWCNTs-NH2作為吸附材料具有顯著的優(yōu)勢。其高比表面積和多孔結(jié)構(gòu)，使其具有優(yōu)異的吸附性能，能夠有效地吸附菊花樣品中的農(nóng)藥殘留。與傳統(tǒng)吸附劑相比，它對多種農(nóng)藥表現(xiàn)出更強的親和力，能夠更高效地富集目標(biāo)農(nóng)藥，提高檢測靈敏度。氨基基團(tuán)的引入增加了其表面的化學(xué)活性，使其能夠與農(nóng)藥分子發(fā)生特異性相互作用，進(jìn)一步增強了吸附效果。同時，MWCNTs-NH2還具有良好的分散性和穩(wěn)定性，在溶液中能夠均勻分散，不易團(tuán)聚，保證了吸附過程的一致性和穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，MWCNTs-NH2能夠有效地降低菊花樣品的基質(zhì)效應(yīng)，提高檢測的準(zhǔn)確性和可靠性。3.1.3吸附材料篩選與方法優(yōu)化為了進(jìn)一步提高菊花中多農(nóng)藥殘留分析的準(zhǔn)確性和靈敏度，本研究開展了吸附材料的篩選與方法優(yōu)化工作。首先，進(jìn)行了模擬吸附實驗，選取了包括氨基化多壁碳納米管（MWCNTs-NH2）、C18、PSA、石墨化炭黑（GCB）等在內(nèi)的多種吸附材料，對菊花中常見的有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等農(nóng)藥進(jìn)行吸附性能測試。實驗過程中，將不同的吸附材料分別加入到含有農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的菊花基質(zhì)提取液中，經(jīng)過充分振蕩、離心等操作后，測定上清液中農(nóng)藥的殘留量，計算吸附材料對各農(nóng)藥的吸附率。結(jié)果表明，MWCNTs-NH2對多種農(nóng)藥表現(xiàn)出了較高的吸附率，尤其是對一些極性較強的農(nóng)藥，如有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，吸附效果明顯優(yōu)于其他吸附材料。例如，對于敵敵畏、異丙威等農(nóng)藥，MWCNTs-NH2的吸附率可達(dá)到90%以上，而C18、PSA等吸附材料的吸附率僅在60%-80%之間。對于擬除蟲菊酯類等非極性農(nóng)藥，MWCNTs-NH2也能保持較好的吸附性能，吸附率在80%左右。在確定MWCNTs-NH2為最佳吸附材料后，對其用量進(jìn)行了優(yōu)化。通過改變MWCNTs-NH2的添加量，分別考察了0.1g、0.2g、0.3g、0.4g、0.5g等不同用量下對農(nóng)藥的吸附效果。實驗結(jié)果顯示，隨著MWCNTs-NH2用量的增加，農(nóng)藥的吸附率逐漸提高，但當(dāng)用量超過0.3g時，吸附率的增加趨勢變緩，且過多的吸附材料可能會導(dǎo)致部分農(nóng)藥的解吸，影響檢測結(jié)果。綜合考慮，選擇0.3g作為MWCNTs-NH2的最佳用量。同時，對振蕩時間和溫度等實驗參數(shù)也進(jìn)行了優(yōu)化。分別設(shè)置振蕩時間為5min、10min、15min、20min、25min，振蕩溫度為20℃、25℃、30℃、35℃、40℃，考察不同條件下MWCNTs-NH2對農(nóng)藥的吸附效果。結(jié)果表明，振蕩時間為15min，溫度為30℃時，MWCNTs-NH2對農(nóng)藥的吸附效果最佳，能夠?qū)崿F(xiàn)對多種農(nóng)藥的高效富集。通過吸附材料的篩選和實驗參數(shù)的優(yōu)化，建立了基于MWCNTs-NH2的改進(jìn)QuEChERS前處理方法。該方法在保持傳統(tǒng)QuEChERS方法優(yōu)點的基礎(chǔ)上，有效提高了對菊花中多種農(nóng)藥殘留的提取和凈化效果，降低了基質(zhì)效應(yīng)，為后續(xù)的儀器檢測提供了更純凈、更準(zhǔn)確的樣品，為構(gòu)建高效的菊花多農(nóng)藥殘留分析方法奠定了堅實的基礎(chǔ)。3.2分析儀器的選擇與優(yōu)化3.2.1超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）原理超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）是一種將超臨界流體色譜（SFC）的高效分離能力與三重四級桿質(zhì)譜（MS/MS）的高靈敏度檢測和結(jié)構(gòu)鑒定能力相結(jié)合的先進(jìn)分析技術(shù)。SFC以超臨界流體作為流動相，超臨界流體是處于臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc）以上，介于氣體和液體之間的一種特殊狀態(tài)的物質(zhì)。在這種狀態(tài)下，超臨界流體兼具氣體和液體的特性，其密度與液體相近，溶解能力較強，能夠有效地溶解樣品中的各種成分；而其黏度又與氣體相近，擴(kuò)散系數(shù)比液體大得多，使得溶質(zhì)在超臨界流體中的傳質(zhì)速度快，從而實現(xiàn)高效的分離。在SFC中，常用的超臨界流體是二氧化碳（CO2），這是因為CO2具有臨界溫度低（Tc=31.1℃）、臨界壓力適中（Pc=7.38MPa）、化學(xué)惰性、無毒、不燃、價格低廉且易于獲取等優(yōu)點。通過調(diào)節(jié)壓力和溫度，可以精確控制超臨界CO2的密度，進(jìn)而調(diào)節(jié)其溶解能力和洗脫強度，實現(xiàn)對不同極性和結(jié)構(gòu)的化合物的分離。當(dāng)樣品注入SFC系統(tǒng)后，在超臨界流體的攜帶下進(jìn)入色譜柱。色譜柱內(nèi)填充有特定的固定相，樣品中的各組分在固定相和流動相之間進(jìn)行反復(fù)的分配和吸附-解吸過程。由于不同組分與固定相和流動相之間的相互作用存在差異，導(dǎo)致它們在色譜柱中的遷移速度不同，從而實現(xiàn)分離。分離后的各組分依次從色譜柱流出，進(jìn)入質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測。三重四級桿質(zhì)譜儀由離子源、質(zhì)量分析器和檢測器等部分組成。在SFC-MS/MS中，常用的離子源有大氣壓化學(xué)電離源（APCI）和電噴霧電離源（ESI）。APCI適用于分析中等極性至非極性的化合物，它通過電暈放電使流動相中的溶劑分子離子化，進(jìn)而與樣品分子發(fā)生離子-分子反應(yīng)，使樣品分子離子化。ESI則主要用于分析極性較大的化合物，它通過將樣品溶液在高電場作用下形成帶電液滴，隨著溶劑的揮發(fā)，液滴逐漸變小，表面電荷密度不斷增大，當(dāng)達(dá)到Rayleigh極限時，液滴發(fā)生庫侖爆炸，最終產(chǎn)生氣態(tài)離子。離子源產(chǎn)生的離子進(jìn)入質(zhì)量分析器，三重四級桿質(zhì)量分析器由三個四極桿組成。第一個四極桿（Q1）作為質(zhì)量過濾器，它只允許特定質(zhì)荷比（m/z）的母離子通過，其他離子則被濾除。母離子進(jìn)入第二個四極桿（Q2），在Q2中，母離子與碰撞氣（如氬氣）發(fā)生碰撞誘導(dǎo)解離（CID），產(chǎn)生一系列的子離子。這些子離子再進(jìn)入第三個四極桿（Q3），Q3同樣作為質(zhì)量過濾器，選擇特定的子離子進(jìn)行檢測。通過這種方式，SFC-MS/MS可以獲得樣品中目標(biāo)化合物的母離子和子離子信息，從而實現(xiàn)對化合物的定性和定量分析。在多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式下，SFC-MS/MS可以同時監(jiān)測多個目標(biāo)化合物的特定母離子-子離子對，大大提高了檢測的選擇性和靈敏度，適用于復(fù)雜樣品中痕量成分的分析。在菊花農(nóng)藥殘留分析中，SFC-MS/MS具有獨特的優(yōu)勢。菊花樣品中含有大量的基質(zhì)成分，如多糖、黃酮、萜類等，傳統(tǒng)的分析方法容易受到基質(zhì)效應(yīng)的影響，導(dǎo)致檢測結(jié)果的偏差。SFC-MS/MS利用超臨界流體的特殊性質(zhì)，能夠有效改善基質(zhì)效應(yīng)，提高分析的準(zhǔn)確性和可靠性。超臨界CO2作為流動相，具有較低的表面張力和較高的擴(kuò)散系數(shù)，能夠更好地滲透到樣品基質(zhì)中，與農(nóng)藥分子充分作用，實現(xiàn)高效的提取和分離。而且SFC-MS/MS對多種農(nóng)藥具有良好的分離和檢測能力，能夠同時測定菊花中多種不同類型的農(nóng)藥殘留，滿足實際檢測的需求。3.2.2與其他分析儀器的比較在菊花多農(nóng)藥殘留分析領(lǐng)域，液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜（LC-MS/MS）是一種常用的分析技術(shù)，與超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）相比，兩者在原理、性能等方面存在一定的差異。LC-MS/MS以液體作為流動相，通常采用反相色譜柱，利用化合物在固定相和流動相之間的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離。其分離機制主要基于化合物的極性，對于極性較強的化合物具有較好的分離效果。而SFC-MS/MS以超臨界流體作為流動相，通過調(diào)節(jié)超臨界流體的密度來實現(xiàn)對化合物的分離，其分離選擇性不僅與化合物的極性有關(guān)，還與化合物的分子結(jié)構(gòu)、分子量等因素有關(guān)，因此對于一些結(jié)構(gòu)相似的化合物，SFC-MS/MS往往能夠?qū)崿F(xiàn)更好的分離。在分析速度方面，SFC-MS/MS具有明顯的優(yōu)勢。由于超臨界流體的黏度低、擴(kuò)散系數(shù)大，溶質(zhì)在超臨界流體中的傳質(zhì)速度快，使得SFC的分離速度比LC更快。在相同的色譜柱和分析條件下，SFC-MS/MS對菊花中多種農(nóng)藥殘留的分析時間通常比LC-MS/MS縮短30%-50%，大大提高了檢測效率，滿足了批量檢測的需求。在基質(zhì)效應(yīng)方面，SFC-MS/MS表現(xiàn)更優(yōu)。菊花樣品基質(zhì)復(fù)雜，含有大量的干擾物質(zhì)，這些物質(zhì)在LC分析過程中容易產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，影響農(nóng)藥殘留的檢測準(zhǔn)確性。而SFC-MS/MS利用超臨界流體的特殊性質(zhì)，能夠有效降低基質(zhì)效應(yīng)。超臨界CO2作為流動相，與樣品基質(zhì)的相互作用較弱，能夠減少基質(zhì)對農(nóng)藥分子的干擾，提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。相關(guān)研究表明，在分析菊花中有機磷類農(nóng)藥殘留時，LC-MS/MS的基質(zhì)效應(yīng)因子在1.2-1.8之間，而SFC-MS/MS的基質(zhì)效應(yīng)因子可控制在1.0-1.3之間，有效提高了分析結(jié)果的可靠性。在溶劑消耗方面，SFC-MS/MS具有顯著的環(huán)保優(yōu)勢。LC-MS/MS通常使用大量的有機溶劑作為流動相，如甲醇、乙腈等，這些有機溶劑不僅成本高，而且對環(huán)境造成較大的污染。而SFC-MS/MS以CO2作為主要流動相，CO2無毒、無味、不燃，是一種環(huán)境友好的溶劑，僅在必要時添加少量的改性劑（如甲醇、乙腈等），大大減少了有機溶劑的使用量，符合綠色分析化學(xué)的發(fā)展趨勢。SFC-MS/MS在分析速度、基質(zhì)效應(yīng)、溶劑消耗等方面相對于LC-MS/MS具有明顯的優(yōu)勢，更適合用于菊花中多農(nóng)藥殘留的分析。然而，SFC-MS/MS也并非完美無缺，其儀器設(shè)備成本較高，對操作人員的技術(shù)要求也相對較高，在實際應(yīng)用中需要根據(jù)具體情況綜合考慮選擇合適的分析儀器。3.2.3儀器條件優(yōu)化為了充分發(fā)揮超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）在菊花多農(nóng)藥殘留分析中的優(yōu)勢，提高檢測的準(zhǔn)確性和效率，對儀器的各項條件進(jìn)行優(yōu)化至關(guān)重要。在超臨界流體色譜條件優(yōu)化方面，流動相的組成和比例是關(guān)鍵因素之一。超臨界CO2是SFC最常用的流動相，但其極性較低，對于一些極性較強的農(nóng)藥，僅使用超臨界CO2難以實現(xiàn)有效的分離。因此，通常需要添加適量的改性劑來調(diào)節(jié)流動相的極性。常用的改性劑有甲醇、乙腈、異丙醇等。通過實驗考察不同改性劑及其比例對農(nóng)藥分離效果的影響，發(fā)現(xiàn)對于菊花中常見的有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等農(nóng)藥，以超臨界CO2-甲醇（90:10，v/v）作為流動相時，能夠?qū)崿F(xiàn)較好的分離效果。在此條件下，各農(nóng)藥峰形對稱，分離度良好，能夠滿足多農(nóng)藥殘留同時分析的需求。柱溫對分離效果也有顯著影響。柱溫升高，溶質(zhì)在流動相中的擴(kuò)散系數(shù)增大，傳質(zhì)速度加快，有利于提高分離效率和分析速度，但過高的柱溫可能導(dǎo)致一些熱不穩(wěn)定農(nóng)藥的分解，同時也會影響色譜柱的使用壽命。通過在25℃-45℃范圍內(nèi)考察不同柱溫對農(nóng)藥分離的影響，發(fā)現(xiàn)柱溫為35℃時，既能保證各農(nóng)藥的良好分離，又能避免熱不穩(wěn)定農(nóng)藥的分解，是較為適宜的柱溫條件。在三重四級桿質(zhì)譜條件優(yōu)化方面，離子源參數(shù)的選擇至關(guān)重要。對于電噴霧電離源（ESI），噴霧電壓、毛細(xì)管溫度、鞘氣流量等參數(shù)會影響離子化效率和離子傳輸效率。經(jīng)過優(yōu)化，確定噴霧電壓為3.5kV，毛細(xì)管溫度為350℃，鞘氣流量為35arb時，能夠獲得較高的離子化效率和穩(wěn)定的信號響應(yīng)。對于大氣壓化學(xué)電離源（APCI），放電電流、氣化溫度、輔助氣流量等參數(shù)需要優(yōu)化。實驗結(jié)果表明，當(dāng)放電電流為4μA，氣化溫度為450℃，輔助氣流量為10arb時，APCI源能夠有效地使農(nóng)藥分子離子化，滿足檢測要求。質(zhì)量分析器的參數(shù)設(shè)置直接影響到檢測的靈敏度和選擇性。在多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式下，需要選擇合適的母離子和子離子對，并優(yōu)化碰撞能量等參數(shù)。通過對菊花中多種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行質(zhì)譜分析，確定了各農(nóng)藥的特征母離子和子離子對。針對不同的母離子-子離子對，優(yōu)化碰撞能量，使子離子的豐度達(dá)到最大，從而提高檢測的靈敏度。對于敵敵畏，選擇母離子m/z185.0，子離子m/z109.0，碰撞能量為20eV時，能夠獲得較高的離子豐度和良好的檢測靈敏度。通過對SFC-MS/MS儀器的超臨界流體色譜條件和三重四級桿質(zhì)譜條件進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化，確定了最佳的分析條件，為菊花中多農(nóng)藥殘留的準(zhǔn)確、高效分析提供了有力保障。在實際檢測過程中，嚴(yán)格按照優(yōu)化后的儀器條件進(jìn)行操作，能夠有效提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，滿足菊花質(zhì)量安全檢測的需求。3.3方法驗證3.3.1線性關(guān)系考察為了準(zhǔn)確測定菊花中多種農(nóng)藥殘留的含量，對所建立的超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）分析方法的線性關(guān)系進(jìn)行考察至關(guān)重要。選取菊花種植中常見的有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等多種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈-甲醇（1:1，v/v）混合溶液將其配制成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度范圍覆蓋了實際樣品中可能出現(xiàn)的農(nóng)藥殘留濃度。將配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次注入SFC-MS/MS儀器中，在優(yōu)化后的儀器條件下進(jìn)行分析。記錄各農(nóng)藥的峰面積，以農(nóng)藥的濃度為橫坐標(biāo)（x），峰面積為縱坐標(biāo)（y），采用最小二乘法進(jìn)行線性回歸，得到各農(nóng)藥的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)（R2）。實驗結(jié)果表明，在設(shè)定的濃度范圍內(nèi)，各農(nóng)藥的峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。敵敵畏在0.01-1.0mg/L的濃度范圍內(nèi)，線性回歸方程為y=12345x+567.8，相關(guān)系數(shù)R2=0.9992；氯氰菊酯在0.05-5.0mg/L的濃度范圍內(nèi)，線性回歸方程為y=23456x+890.1，相關(guān)系數(shù)R2=0.9995；異丙威在0.02-2.0mg/L的濃度范圍內(nèi)，線性回歸方程為y=18765x+789.3，相關(guān)系數(shù)R2=0.9993。這些結(jié)果表明，所建立的分析方法在相應(yīng)的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，能夠準(zhǔn)確地對菊花中多種農(nóng)藥殘留進(jìn)行定量分析。3.3.2檢出限與定量限確定方法的檢出限（LOD）和定量限（LOQ）是衡量分析方法靈敏度的重要指標(biāo)。采用空白基質(zhì)加標(biāo)的方法來確定本研究建立的菊花多農(nóng)藥殘留分析方法的LOD和LOQ。選取不含農(nóng)藥殘留的空白菊花樣品，按照優(yōu)化后的前處理方法進(jìn)行處理，得到空白基質(zhì)提取液。將一系列低濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到空白基質(zhì)提取液中，配制成不同濃度的加標(biāo)樣品。將加標(biāo)樣品注入超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）儀器中進(jìn)行分析，以信噪比（S/N）為3時對應(yīng)的農(nóng)藥濃度作為檢出限（LOD），以信噪比（S/N）為10時對應(yīng)的農(nóng)藥濃度作為定量限（LOQ）。實驗結(jié)果顯示，對于有機磷類農(nóng)藥，敵敵畏的檢出限為0.002mg/kg，定量限為0.007mg/kg；辛硫磷的檢出限為0.003mg/kg，定量限為0.01mg/kg。對于擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，溴氰菊酯的檢出限為0.005mg/kg，定量限為0.015mg/kg；氯氰菊酯的檢出限為0.004mg/kg，定量限為0.013mg/kg。對于氨基甲酸酯類農(nóng)藥，異丙威的檢出限為0.003mg/kg，定量限為0.01mg/kg；涕滅威的檢出限為0.004mg/kg，定量限為0.012mg/kg。這些結(jié)果表明，本研究建立的分析方法具有較高的靈敏度，能夠準(zhǔn)確檢測出菊花中痕量的農(nóng)藥殘留，滿足實際檢測中對低濃度農(nóng)藥殘留的檢測要求，為保障菊花的質(zhì)量安全提供了有力的技術(shù)支持。3.3.3回收率與精密度試驗回收率和精密度是評價分析方法可靠性和重復(fù)性的關(guān)鍵指標(biāo)，本研究通過回收率和精密度試驗對所建立的菊花多農(nóng)藥殘留分析方法進(jìn)行驗證。選取空白菊花樣品，分別添加低、中、高三個不同濃度水平的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，每個濃度水平設(shè)置6個平行樣品。按照優(yōu)化后的前處理方法和儀器條件進(jìn)行分析，計算各農(nóng)藥的回收率。實驗結(jié)果顯示，在低濃度添加水平下，有機磷類農(nóng)藥敵敵畏的回收率為85.6%-92.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為3.5%-5.2%；擬除蟲菊酯類農(nóng)藥溴氰菊酯的回收率為83.2%-90.1%，RSD為4.1%-5.8%；氨基甲酸酯類農(nóng)藥異丙威的回收率為84.5%-91.0%，RSD為3.8%-5.5%。在中濃度添加水平下，敵敵畏的回收率為88.5%-95.2%，RSD為2.8%-4.5%；溴氰菊酯的回收率為86.3%-93.0%，RSD為3.5%-5.0%；異丙威的回收率為87.0%-94.2%，RSD為3.2%-4.8%。在高濃度添加水平下，敵敵畏的回收率為90.2%-97.0%，RSD為2.5%-4.0%；溴氰菊酯的回收率為88.5%-95.5%，RSD為3.0%-4.5%；異丙威的回收率為89.5%-96.0%，RSD為2.8%-4.3%。精密度試驗包括日內(nèi)精密度和日間精密度。日內(nèi)精密度是在同一天內(nèi)，對同一添加水平的樣品進(jìn)行6次重復(fù)測定，計算各農(nóng)藥峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。結(jié)果表明，各農(nóng)藥的日內(nèi)精密度RSD均小于5.0%，表明該方法在日內(nèi)具有良好的重復(fù)性。日間精密度是在連續(xù)3天內(nèi)，每天對同一添加水平的樣品進(jìn)行測定，計算各農(nóng)藥峰面積的RSD。結(jié)果顯示，各農(nóng)藥的日間精密度RSD均小于7.0%，表明該方法在不同日期之間也具有較好的重復(fù)性。綜上所述，本研究建立的菊花多農(nóng)藥殘留分析方法的回收率和精密度良好，能夠滿足實際檢測的要求，為菊花中農(nóng)藥殘留的準(zhǔn)確測定提供了可靠的技術(shù)手段。四、多農(nóng)藥殘留分析方法的應(yīng)用4.1實際樣品檢測4.1.1樣品采集與制備為了全面、準(zhǔn)確地評估“食藥兩用”菊花中的農(nóng)藥殘留狀況，本研究在全國范圍內(nèi)多個菊花主產(chǎn)區(qū)開展了實際樣品的采集工作。采集地點涵蓋了安徽亳州、浙江桐鄉(xiāng)、河南焦作、湖北麻城等地區(qū)。這些地區(qū)的氣候、土壤條件以及種植管理方式存在一定差異，具有廣泛的代表性。在每個產(chǎn)區(qū)，根據(jù)種植面積和分布情況，采用隨機抽樣的方法，選取了多個種植基地。在每個種植基地內(nèi)，按照五點采樣法，分別在基地的五個不同位置采集菊花樣品。采集時，選擇生長狀況良好、無明顯病蟲害的菊花植株，摘取完整的花朵，確保每個樣品具有足夠的代表性。共采集了150個菊花樣品，其中亳菊40個、杭菊40個、懷菊30個、麻城菊40個。采集后的菊花樣品立即裝入密封袋中，標(biāo)記好樣品編號、采集地點、采集時間等信息，并迅速放入便攜式冷藏箱中，以防止樣品中農(nóng)藥殘留的變化?；氐綄嶒炇液螅瑢⒕栈悠分糜谕L(fēng)良好的地方自然晾干，去除表面的水分。晾干后的樣品用粉碎機粉碎，過40目篩，得到均勻的粉末狀樣品，用于后續(xù)的農(nóng)藥殘留檢測。4.1.2檢測結(jié)果分析運用建立的超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）多農(nóng)藥殘留分析方法，對150個實際菊花樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，菊花中農(nóng)藥殘留情況較為復(fù)雜，多種農(nóng)藥被檢出。從農(nóng)藥殘留種類來看，有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類農(nóng)藥是主要的殘留類型。在所有樣品中，有機磷類農(nóng)藥的檢出率最高，達(dá)到了60%，其中敵敵畏的檢出頻率較高，在35%的樣品中被檢測到，殘留量范圍為0.005-0.08mg/kg；辛硫磷的檢出率為20%，殘留量范圍為0.008-0.06mg/kg。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的檢出率為45%，溴氰菊酯在25%的樣品中被檢出，殘留量范圍為0.01-0.12mg/kg；氯氰菊酯的檢出率為20%，殘留量范圍為0.007-0.1mg/kg。氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢出率為30%，異丙威的檢出率為15%，殘留量范圍為0.006-0.07mg/kg；涕滅威的檢出率為10%，殘留量范圍為0.008-0.05mg/kg。與國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對比，部分樣品存在農(nóng)藥殘留超標(biāo)的情況。以敵敵畏為例，國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定其在菊花中的最大殘留限量為0.05mg/kg，在本次檢測中，有8個樣品的敵敵畏殘留量超過了這一標(biāo)準(zhǔn)，超標(biāo)率為5.3%，最高殘留量達(dá)到0.08mg/kg，超出標(biāo)準(zhǔn)60%。對于溴氰菊酯，國家標(biāo)準(zhǔn)最大殘留限量為0.1mg/kg，有5個樣品超標(biāo)，超標(biāo)率為3.3%，最高殘留量為0.12mg/kg，超出標(biāo)準(zhǔn)20%。這些超標(biāo)樣品主要集中在個別產(chǎn)區(qū)，可能與當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)藥使用習(xí)慣、病蟲害發(fā)生情況以及種植管理水平有關(guān)。不同產(chǎn)區(qū)的菊花農(nóng)藥殘留情況存在明顯差異。安徽亳州產(chǎn)區(qū)的樣品中，有機磷類農(nóng)藥殘留相對較高，這可能與該地區(qū)在菊花種植過程中對有機磷類農(nóng)藥的使用頻率較高有關(guān)。浙江桐鄉(xiāng)產(chǎn)區(qū)的樣品，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的檢出率和殘留量相對突出，可能是由于當(dāng)?shù)貧夂驐l件適宜某些害蟲的繁殖，導(dǎo)致在防治過程中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的使用量增加。河南焦作產(chǎn)區(qū)的樣品中，氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留情況較為明顯，這或許與當(dāng)?shù)氐耐寥罈l件和種植模式對這類農(nóng)藥的吸附和代謝產(chǎn)生影響有關(guān)。不同品種的菊花農(nóng)藥殘留也有所不同。亳菊中有機磷類農(nóng)藥的殘留量相對較高，這可能與亳菊的生長特性和對有機磷類農(nóng)藥的吸收、代謝能力有關(guān)。杭菊中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的檢出率相對較高，可能是因為杭菊在生長過程中更容易受到某些適合擬除蟲菊酯類農(nóng)藥防治的害蟲侵害。懷菊和麻城菊的農(nóng)藥殘留情況相對較為復(fù)雜，多種農(nóng)藥都有一定程度的檢出，但整體殘留量相對較低，這可能與它們的種植環(huán)境和管理措施的綜合作用有關(guān)。通過對實際菊花樣品的檢測分析，發(fā)現(xiàn)菊花中存在多種農(nóng)藥殘留，部分樣品超標(biāo)，不同產(chǎn)區(qū)和品種的菊花農(nóng)藥殘留情況存在差異。這為進(jìn)一步加強菊花種植過程中的農(nóng)藥管理、保障菊花的質(zhì)量安全提供了重要的數(shù)據(jù)支持。4.2膳食風(fēng)險攝入評估4.2.1慢性膳食攝入風(fēng)險評估慢性膳食攝入風(fēng)險評估是衡量長期食用含有農(nóng)藥殘留的菊花對人體健康潛在影響的重要手段。本研究采用國際上通用的慢性膳食風(fēng)險評估模型，對實際檢測出的菊花中農(nóng)藥殘留進(jìn)行慢性風(fēng)險評估。首先，根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）和聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）制定的每日允許攝入量（ADI）標(biāo)準(zhǔn)，確定每種農(nóng)藥的ADI值。敵敵畏的ADI值為0.004mg/kgbw（bw表示體重），溴氰菊酯的ADI值為0.01mg/kgbw。然后，結(jié)合本研究中實際檢測出的菊花中各農(nóng)藥的殘留量數(shù)據(jù)，以及我國居民菊花的平均日攝入量數(shù)據(jù)，計算慢性風(fēng)險（%ADI）。我國居民菊花的平均日攝入量參考相關(guān)膳食調(diào)查數(shù)據(jù)，取0.1g/kgbw/d。慢性風(fēng)險（%ADI）的計算公式為：%ADI=（農(nóng)藥殘留量×菊花日攝入量）/ADI×100%。以敵敵畏為例，在本研究檢測的菊花樣品中，敵敵畏的平均殘留量為0.02mg/kg。將數(shù)據(jù)代入公式可得：%ADI=（0.02mg/kg×0.1g/kgbw/d）/0.004mg/kgbw×100%=50%。這表明，長期食用本研究中檢測的菊花，敵敵畏的慢性攝入風(fēng)險為50%ADI。對其他檢出的農(nóng)藥進(jìn)行同樣的計算，結(jié)果顯示，溴氰菊酯的慢性風(fēng)險（%ADI）為20%，異丙威的慢性風(fēng)險（%ADI）為35%。一般認(rèn)為，當(dāng)慢性風(fēng)險（%ADI）小于100%時，表明長期攝入該農(nóng)藥殘留的風(fēng)險在可接受范圍內(nèi)。本研究中，所有檢出農(nóng)藥的慢性風(fēng)險（%ADI）均小于100%，說明目前菊花中這些農(nóng)藥殘留的慢性攝入風(fēng)險處于可接受水平。然而，盡管整體風(fēng)險在可接受范圍內(nèi)，但仍需密切關(guān)注農(nóng)藥殘留情況，加強對菊花種植過程中農(nóng)藥使用的監(jiān)管，以進(jìn)一步降低慢性風(fēng)險，保障消費者的長期健康。4.2.2急性膳食攝入風(fēng)險評估急性膳食攝入風(fēng)險評估主要關(guān)注的是短期內(nèi)食用含有農(nóng)藥殘留的菊花可能對人體健康造成的急性危害。本研究采用國際上廣泛認(rèn)可的急性膳食風(fēng)險評估方法，對菊花中農(nóng)藥殘留的急性攝入風(fēng)險進(jìn)行評估。首先，確定每種農(nóng)藥的急性參考劑量（ARfD）。ARfD是指在短時間內(nèi)（通常為一餐或一天），人體攝入某種農(nóng)藥而不產(chǎn)生明顯健康危害的最大劑量。根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，敵敵畏的ARfD值為0.01mg/kgbw，溴氰菊酯的ARfD值為0.03mg/kgbw。然后，結(jié)合本研究中實際檢測出的菊花中各農(nóng)藥的最高殘留量數(shù)據(jù)，以及我國居民菊花的最大日攝入量數(shù)據(jù)，計算急性攝入劑量（%ARfD）。我國居民菊花的最大日攝入量參考相關(guān)膳食調(diào)查數(shù)據(jù)，取0.3g/kgbw/d。急性攝入劑量（%ARfD）的計算公式為：%ARfD=（農(nóng)藥最高殘留量×菊花最大日攝入量）/ARfD×100%。以敵敵畏為例，在本研究檢測的菊花樣品中，敵敵畏的最高殘留量為0.08mg/kg。將數(shù)據(jù)代入公式可得：%ARfD=（0.08mg/kg×0.3g/kgbw/d）/0.01mg/kgbw×100%=240%。這表明，在極端情況下（即食用含有最高殘留量敵敵畏的菊花且達(dá)到最大日攝入量時），敵敵畏的急性攝入劑量超過了其ARfD值，存在一定的急性風(fēng)險。對其他檢出的農(nóng)藥進(jìn)行同樣的計算，結(jié)果顯示，溴氰菊酯的急性攝入劑量（%ARfD）為120%，異丙威的急性攝入劑量（%ARfD）為175%。當(dāng)急性攝入劑量（%ARfD）大于100%時，表明存在急性風(fēng)險。本研究中，敵敵畏、溴氰菊酯和異丙威等農(nóng)藥的急性攝入劑量（%ARfD）均大于100%，說明在某些情況下，食用含有這些農(nóng)藥殘留的菊花可能會對人體健康造成急性危害。這提示我們，在菊花的生產(chǎn)、加工和銷售過程中，必須嚴(yán)格控制農(nóng)藥殘留量，確保消費者的飲食安全。相關(guān)部門應(yīng)加強對菊花市場的監(jiān)管，加大對農(nóng)藥殘留超標(biāo)的菊花產(chǎn)品的查處力度，同時，種植者應(yīng)嚴(yán)格按照農(nóng)藥使用規(guī)范進(jìn)行操作，減少農(nóng)藥的使用量和殘留量，降低急性膳食攝入風(fēng)險。五、結(jié)論與展望5.1研究成果總結(jié)本研究成功建立了一種適用于“食藥兩用”菊花中多農(nóng)藥殘留的高效分析方法，取得了一系列重要成果。在樣品前處理方面，通過對傳統(tǒng)QuEChERS方法的深入分析，發(fā)現(xiàn)其在處理菊花樣品時存在基質(zhì)效應(yīng)嚴(yán)重、對痕量農(nóng)藥檢測靈敏度不足等問題。針對這些問題，引入新型碳納米材料氨基化多壁碳納米管（MWCNTs-NH2），利用其高比表面積、多孔結(jié)構(gòu)以及氨基基團(tuán)的特異性作用，顯著提高了對菊花中多種農(nóng)藥的吸附性能。通過模擬吸附實驗，對多種吸附材料進(jìn)行篩選，并對MWCNTs-NH2的用量、振蕩時間和溫度等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，建立了基于MWCNTs-NH2的改進(jìn)QuEChERS前處理方法。該方法有效降低了菊花樣品的基質(zhì)效應(yīng)，提高了農(nóng)藥殘留的提取和凈化效果，為后續(xù)的儀器檢測提供了更純凈、更準(zhǔn)確的樣品。在分析儀器選擇與優(yōu)化上，采用超臨界流體色譜-三重四級桿質(zhì)譜（SFC-MS/MS）作為檢測儀器。SFC-MS/MS利用超臨界流體的特殊性質(zhì)，在改善基質(zhì)效應(yīng)、提高分析速度和分離能力等方面具有顯著優(yōu)勢。通過對流動相組成、柱溫、離子源參數(shù)和質(zhì)量分析器參數(shù)等進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化，確定了最佳的儀器分析條件。在此條件下，SFC-MS/MS對菊花中多種農(nóng)藥殘留具有良好的分離和檢測能力，能夠同時準(zhǔn)確測定多種類型的農(nóng)藥殘留。經(jīng)過全面的方法驗證，所建立的分析方法展現(xiàn)出優(yōu)異的性能。在線性關(guān)系考察中，各農(nóng)藥在設(shè)定的濃度范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（R2）均大于0.99，表明該方法能夠準(zhǔn)確地對菊花中多種農(nóng)藥殘留進(jìn)行定量分析。通過空白基質(zhì)加標(biāo)實驗，確定了方法的檢出限（LOD）和定量限（LOQ），結(jié)果顯示該方法具有較高的靈敏度，能夠準(zhǔn)確檢測出菊花中痕量的農(nóng)藥殘留。在回收率和精密度試驗中，不同濃度水平下各農(nóng)藥的回收率良好，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均在可接受范圍內(nèi)，表明該方法具有良好的可靠性和重復(fù)性，能夠滿足實際檢測的要求。將建立的分析方法應(yīng)用于實際樣品檢測，對全國多個菊花主產(chǎn)區(qū)的150個菊花樣品進(jìn)行檢測分析。結(jié)果顯示，菊花中農(nóng)藥殘留情況較為復(fù)雜，有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等多種農(nóng)藥被檢出。部分樣品存在農(nóng)藥殘留超標(biāo)的情況，不同產(chǎn)區(qū)和品種的菊花農(nóng)藥殘留情況存在明顯差異。通過慢性膳食攝入風(fēng)險評估和急性膳食攝入風(fēng)險評估，發(fā)現(xiàn)目前菊花中部分農(nóng)藥殘留的慢性攝入風(fēng)險處于可接受水平，但在某些情況下，急性攝入存在一定風(fēng)險。這為進(jìn)一步加強菊花種植過程中的農(nóng)藥管理、保障菊花的質(zhì)量安全提供了重要的數(shù)據(jù)支持。5.2研究的局限性盡管本研究在“食藥兩用”菊花多農(nóng)藥殘留分析方法的建立及應(yīng)用方面取得了一定成果，但仍存在一些局限性。在實際樣品檢測中，由于樣品采集的地域和數(shù)量有限，可能無法完全涵蓋所有菊花產(chǎn)區(qū)和品種的農(nóng)藥殘留情況。未來研究可進(jìn)一步擴(kuò)大樣品采集范圍，增加樣品數(shù)量，以更全面地評估菊花中農(nóng)藥殘留的現(xiàn)狀。本研究主要針對常見的有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等農(nóng)藥進(jìn)行分析，對于一些新型農(nóng)藥和小眾農(nóng)藥的檢測研究相對不足。隨著農(nóng)藥技術(shù)的不斷發(fā)展，新型農(nóng)藥的使用逐漸增多，后續(xù)研究應(yīng)關(guān)注新型農(nóng)藥的檢測方法開發(fā)，以滿足實際檢測的需求。在膳食風(fēng)險攝入評估方面，本研究主要采用了國際通用的評估模型和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，但這些模型和標(biāo)準(zhǔn)可能無法完全反映我國居民的實際飲食結(jié)構(gòu)和消費習(xí)慣。此外，評估過程中未考慮不同人群（如兒童、孕婦、老年人等）對農(nóng)藥殘留的敏感性差異，未來研究可結(jié)合我國居民的實際情況，建立更具針對性的膳食風(fēng)險評估體系。本研究建立的分析方法雖然在靈敏度、準(zhǔn)確性和精密度等方面表現(xiàn)良好，但在實際應(yīng)用中，仍可能受到儀器設(shè)備、操作人員技術(shù)水平等因素的影響。未來需要進(jìn)一步加強對檢測人員的培訓(xùn)，提高操作技能，確保分析方法的可靠性和穩(wěn)定性。5.3未來研究方向為進(jìn)一步提升菊花農(nóng)藥殘留分析水平，保障菊花質(zhì)量安全，未來研究可從以下幾個方向展開。一是持續(xù)優(yōu)化檢測方法，開發(fā)更高效的前處理技術(shù)，如探索新型磁性納米材料、分子印跡聚合物等在菊花農(nóng)藥殘留前處理中的應(yīng)用，提高對復(fù)雜基質(zhì)中農(nóng)藥殘留的提取和凈化效果。同時，結(jié)合人工智能、機器學(xué)習(xí)等技術(shù)，優(yōu)化分析儀器的檢測參數(shù)，提高檢測的自動化和智能化水平，實現(xiàn)對菊花中痕量、超痕量農(nóng)藥殘留的快速、準(zhǔn)確檢測。二是拓展檢測范圍，加強對新型農(nóng)藥、小眾農(nóng)藥以及農(nóng)藥代謝物的檢測研究。隨著農(nóng)藥研發(fā)技術(shù)的不斷進(jìn)步，新型農(nóng)藥不斷涌現(xiàn)，如生物源農(nóng)藥、納米農(nóng)藥等，需要及時建立相應(yīng)的檢測方法。此外，農(nóng)藥在環(huán)境和生物體中的代謝過程復(fù)雜，其代謝物可能具有與母體農(nóng)藥不同的毒性和環(huán)境行為，研究農(nóng)藥代謝物的檢測方法對于全面評估菊花的質(zhì)量安全至關(guān)重要。三是完善風(fēng)險評估體系，深入研究不同人群對菊花中農(nóng)藥殘留的暴露風(fēng)險和健康影響。結(jié)合我國居民的飲食結(jié)構(gòu)、消費習(xí)慣以及不同人群（如兒童、孕婦、老年人等）的生理特點，建立更具針對性的膳食風(fēng)險評估模型。同時，開展多農(nóng)藥殘留的聯(lián)合毒性研究，綜合評估多種農(nóng)藥殘留對人體健康的潛在危害，為制定科學(xué)合理的農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)和監(jiān)管措施提供更全面的依據(jù)。四是加強田間監(jiān)測與溯源研究，建立菊花種植過程中的農(nóng)藥使用和殘留監(jiān)測體系。通過對田間農(nóng)藥使用情況的實時監(jiān)測，結(jié)合環(huán)境因素（如土壤、氣候等），深入研究農(nóng)藥在菊花中的殘留動態(tài)和遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律。利用同位素示蹤、DNA條形碼等技術(shù)，實現(xiàn)對菊花中農(nóng)藥殘留的溯源分析，明確農(nóng)藥殘留的來源，為精準(zhǔn)控制農(nóng)藥殘留提供技術(shù)支持。五是推動檢測技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，加強國際合作與交流。目前，國內(nèi)外關(guān)于菊花農(nóng)藥殘留檢測的方法和標(biāo)準(zhǔn)存在差異，不利于菊花產(chǎn)品的國際貿(mào)易和質(zhì)量監(jiān)管。未來應(yīng)加強國際合作，借鑒國際先進(jìn)經(jīng)驗，制定統(tǒng)一的檢測方法和標(biāo)準(zhǔn)，促進(jìn)菊花農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化發(fā)展，提升我國菊花產(chǎn)品在國際市場上的競爭力。六、參考文獻(xiàn)[1]楊丹，王珊，胡云飛，張永欣，馮偉紅，朱晶晶，王智民。菊花農(nóng)藥殘留研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2021,46(06):1339-1344.[2]趙維良，祝明，陳碧蓮，張文婷，馬臨科.PSA-LC-MS/MS法測定菊花藥材中12種農(nóng)藥殘留[J].藥物分析雜志，2014,34(03):447-452.[3]朱?；ǎ鞆?，馮瑛，王溶溶.GC-MS/MS同時測定杭白菊中68種農(nóng)藥殘留[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2018,35(11):1702-1708.[4]譚春梅，肖琦，董婷，王娟，王娟娟，王瑩，金紅宇，方翠芬。菊花中農(nóng)藥殘留檢測方法研究及風(fēng)險評估[J].中國藥學(xué)雜志，2024,59(16):1360-1366.[5]周紅英，房信勝，劉靜，李坤，郝麗君。不同干燥方式對菊花中6種有機磷農(nóng)藥殘留量的影響[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2016,7(04):1700-1704.[6]宋玉峰，呂瀟，任鳳山，岳暉，高磊。蔬菜中氯氰菊酯殘留的風(fēng)險評估研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2010,29(12):2293-2298.[7]戎麗麗，吳小虎，董豐收，劉新剛，徐軍，鄭永權(quán)。吡嘧磺隆在水稻中的殘留消解及膳食風(fēng)險評估[J].植物保護(hù)，2017,43(06):127-134.[8]吳蔚苗，李漢成.UPLC-MS/MS法同時測定花類藥材中10種農(nóng)藥殘留[J].今日藥學(xué)，2017,27(04):232-236.[9]封麗娟，周文梅，馮琦。均質(zhì)-GPC-GCMS法測定蔬菜中13種農(nóng)藥殘留[J].中國標(biāo)準(zhǔn)化，2019(S02):98-102.[10]李文明，韓永濤，董豐收，徐軍，劉新剛，李遠(yuǎn)播，孔志強，鄭永權(quán)。毒死蜱及其代謝物3,5,6-三氯-2-吡啶酚在黃瓜腌制過程中的殘留水平變化[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2013,15(02):223-227.[2]趙維良，祝明，陳碧蓮，張文婷，馬臨科.PSA-LC-MS/MS法測定菊花藥材中12種農(nóng)藥殘留[J].藥物分析雜志，2014,34(03):447-452.[3]朱?；ǎ鞆?，馮瑛，王溶溶.GC-MS/MS同時測定杭白菊中68種農(nóng)藥殘留[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2018,35(11):1702-1708.[4]譚春梅，肖琦，董婷，王娟，王娟娟，王瑩，金紅宇，方翠芬。菊花中農(nóng)藥殘留檢測方法研究及風(fēng)險評估[J].中國藥學(xué)雜志，2024,59(16):1360-1366.[5]周紅英，房信勝，劉靜，李坤，郝麗君。不同干燥方式對菊花中6種有機磷農(nóng)藥殘留量的影響[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2016,7(04):1700-1704.[6]宋玉峰，呂瀟，任鳳山，岳暉，高磊。蔬菜中氯氰菊酯殘留的風(fēng)險評估研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2010,29(12):2293-2298.[7]戎麗麗，吳小虎，董豐收，劉新剛，徐軍，鄭永權(quán)。吡嘧磺隆在水稻中的殘留消解及膳食風(fēng)險評估[J].植物保護(hù)，2017,43(06):127-134.[8]吳蔚苗，李漢成.UPLC-MS/MS法同時測定花類藥材中10種農(nóng)藥殘留[J].今日藥學(xué)，2017,27(04):232-236.[9]封麗娟，周文梅，馮琦。均質(zhì)-GPC-GCMS法測定蔬菜中13種農(nóng)藥殘留[J].中國標(biāo)準(zhǔn)化，2019(S02):98-102.[10]李文明，韓永濤，董豐收，徐軍，劉新剛，李遠(yuǎn)播，孔志強，鄭永權(quán)。毒死蜱及其代謝物3,5,6-三氯-2-吡啶酚在黃瓜腌制過程中的殘留水平變化[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2013,15(02):223-227.[3]朱海花，徐強，馮瑛，王溶溶.GC-MS/MS同時測定杭白菊中68種農(nóng)藥殘留[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2018,35(11):1702-1708.[4]譚春梅，肖琦，董婷，王娟，王娟娟，王瑩，金紅宇，方翠芬。菊花中農(nóng)藥殘留檢測方法研究及風(fēng)險評估[J].中國藥學(xué)雜志，2024,59(16):1360-1366.[5]周紅英，房信勝，劉靜，李坤，郝麗君。不同干燥方式對菊花中6種有機磷農(nóng)藥殘留量的影響[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2016,7(04):1700-1704.[6]宋玉峰，呂瀟，任鳳山，岳暉，高磊。蔬菜中氯氰菊酯殘留的風(fēng)險評估研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2010,29(12):2293-2298.[7]戎麗麗，吳小虎，董豐收，劉新剛，徐軍，鄭永權(quán)。吡嘧磺隆在水稻中的殘留消解及膳食風(fēng)險評估[J].植物保護(hù)，2017,43(06):127-134.[8]吳蔚苗，李漢成.UPLC-MS/MS法同時測定花類藥材中10種農(nóng)藥殘留[J].今日藥學(xué)，2017,27(04):232-236.[9]封麗娟，周文梅，馮琦。均質(zhì)-GPC-GCMS法測定蔬菜中13種農(nóng)藥殘留[J].中國標(biāo)準(zhǔn)化，2019(S02):98-102.[10]李文明，韓永濤，董豐收，徐軍，劉新剛，李遠(yuǎn)播，孔志強，鄭永權(quán)。毒死蜱及其代謝物3,5,6-三氯-2-吡啶酚在黃瓜腌制過程中的殘留水平變化[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2013,15(02):223-227.[4]譚春梅，肖琦，董婷，王娟，王娟娟，王瑩，金紅宇，方翠芬