2025年病原生物學(xué)致病微生物鑒定與培養(yǎng)模擬考及答案解析一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分）1.下列哪一項(xiàng)不是革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁特有的成分？A.磷壁酸?B.肽聚糖?C.脂多糖?D.壁醛酸答案：C解析：脂多糖（LPS）是革蘭陰性菌外膜的主要成分，由脂質(zhì)A、核心多糖和O抗原組成；磷壁酸與壁醛酸僅存在于革蘭陽(yáng)性菌，肽聚糖雖兩者皆有，但陽(yáng)性菌層厚可達(dá)50層。2.在血平板上出現(xiàn)雙溶血環(huán)的細(xì)菌最可能是：A.產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌?B.金黃色葡萄球菌?C.產(chǎn)氣莢膜梭菌?D.肺炎鏈球菌答案：C解析：產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)生θ毒素與α毒素，θ毒素完全溶血，α毒素部分溶血，形成內(nèi)透明外暗的雙環(huán)；金葡為單環(huán)β溶血，李斯特菌為窄β溶血，肺炎鏈球菌為α溶血。3.用于鑒別沙門(mén)菌與志賀菌的生化反應(yīng)組合是：A.葡萄糖發(fā)酵+硫化氫產(chǎn)生?B.乳糖發(fā)酵+尿素酶?C.賴(lài)氨酸脫羧+ONPG?D.動(dòng)力+枸櫞酸鹽利用答案：D解析：沙門(mén)菌有動(dòng)力、枸櫞酸鹽陽(yáng)性，志賀菌兩者均陰性；乳糖發(fā)酵、尿素酶、ONPG在兩種菌中均不具鑒別意義。4.關(guān)于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)特性，錯(cuò)誤的是：A.需氧?B.營(yíng)養(yǎng)要求低?C.生長(zhǎng)緩慢?D.最適pH6.4–6.8答案：B解析：結(jié)核分枝桿菌為專(zhuān)性需氧、生長(zhǎng)緩慢，需添加雞蛋、甘油、馬鈴薯等復(fù)雜營(yíng)養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求極高。5.在沙保弱培養(yǎng)基上形成厚膜孢子與假菌絲的酵母樣真菌是：A.白色念珠菌?B.熱帶念珠菌?C.光滑念珠菌?D.新型隱球菌答案：A解析：白色念珠菌在25℃沙保弱培養(yǎng)基上可形成特征性厚膜孢子及假菌絲；隱球菌無(wú)假菌絲，光滑念珠菌極少厚膜孢子。6.下列哪種病毒可在雞胚羊膜腔中良好增殖？A.流感病毒?B.腮腺炎病毒?C.乙腦病毒?D.痘苗病毒答案：A解析：流感病毒初次分離首選羊膜腔，因其含豐富唾液酸受體；乙腦病毒宜選卵黃囊，痘苗病毒宜選絨毛尿囊膜。7.關(guān)于霍亂弧菌O1群與O139群的鑒別，最佳單試驗(yàn)是：A.多黏菌素B敏感試驗(yàn)?B.氧化酶?C.精氨酸脫羧?D.蔗糖發(fā)酵答案：A解析：O139對(duì)多黏菌素B耐藥，O1群敏感；氧化酶兩者均陽(yáng)性，蔗糖發(fā)酵、精氨酸脫羧無(wú)差異。8.用于檢測(cè)ESBLs表型確證試驗(yàn)的抗生素紙片組合是：A.頭孢他啶±克拉維酸?B.頭孢曲松±舒巴坦?C.亞胺培南±EDTA?D.氨曲南±阿莫西林答案：A解析：CLSI推薦頭孢他啶±克拉維酸、頭孢噻肟±克拉維酸雙紙片增效≥5mm即確證ESBLs；EDTA用于金屬酶。9.在麥康凱平板上形成紅色、黏液狀、拉絲狀菌落，最可能為：A.大腸埃希菌?B.肺炎克雷伯菌?C.奇異變形桿菌?D.沙門(mén)菌答案：B解析：肺炎克雷伯菌產(chǎn)大量莢膜多糖，菌落黏稠、拉絲，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸呈紅色；變形桿菌不發(fā)酵乳糖，沙門(mén)菌無(wú)色。10.關(guān)于梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)室診斷，正確的是：A.革蘭染色可見(jiàn)?B.普通培養(yǎng)基可生長(zhǎng)?C.可用兔睪丸組織培養(yǎng)?D.暗視野鏡檢潰瘍滲出液答案：D解析：梅毒螺旋體革蘭染色不著色，人工培養(yǎng)未成功，僅可通過(guò)兔睪丸活體內(nèi)有限增殖，臨床常用暗視野鏡檢。11.下列哪項(xiàng)不是細(xì)菌基因水平轉(zhuǎn)移方式？A.轉(zhuǎn)化?B.轉(zhuǎn)導(dǎo)?C.接合?D.溶原轉(zhuǎn)換答案：D解析：溶原轉(zhuǎn)換是噬菌體基因賦予宿主新性狀，而非宿主間基因轉(zhuǎn)移；轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合均為基因水平轉(zhuǎn)移。12.關(guān)于艱難梭菌毒素，正確的是：A.毒素A為細(xì)胞毒素?B.毒素B為腸毒素?C.兩者均為核糖體毒素?D.毒素B可致細(xì)胞變圓答案：D解析：毒素A為腸毒素，毒素B為細(xì)胞毒素，兩者均通過(guò)糖基化Rho家族蛋白致細(xì)胞骨架塌陷變圓。13.在Campy-BAP平板上生長(zhǎng)，42℃微需氧，氧化酶陽(yáng)性，菌落灰白、扁平，最可能為：A.空腸彎曲菌?B.大腸彎曲菌?C.幽門(mén)螺桿菌?D.胎兒彎曲菌答案：A解析：空腸彎曲菌最適42℃，對(duì)萘啶酸敏感；幽門(mén)螺桿菌37℃生長(zhǎng)，胎兒彎曲菌25℃生長(zhǎng)更佳。14.關(guān)于噬菌體用于細(xì)菌鑒定，錯(cuò)誤的是：A.可分型至種水平?B.可檢測(cè)耐藥基因?C.可用于流行病學(xué)追蹤?D.需活菌培養(yǎng)答案：B解析：噬菌體裂解譜用于分型與溯源，但不能直接檢測(cè)耐藥基因；需活菌培養(yǎng)形成噬菌斑。15.在呂氏血清斜面上形成灰白色、有光澤、紐扣狀菌落，涂片見(jiàn)異染顆粒，革蘭陽(yáng)性桿菌，最可能為：A.白喉棒狀桿菌?B.枯草芽孢桿菌?C.單增李斯特菌?D.陰道加德納菌答案：A解析：白喉棒狀桿菌在呂氏血清上呈典型紐扣狀，亞甲藍(lán)染色見(jiàn)異染顆粒；李斯特菌無(wú)此特征。16.關(guān)于布魯菌屬，正確的是：A.革蘭陽(yáng)性?B.有鞭毛?C.需CO2?D.菌落有溶血答案：C解析：布魯菌為革蘭陰性球桿菌，無(wú)鞭毛，需5%–10%CO2，血平板上無(wú)溶血。17.下列哪種病毒可引起“彈孔”樣細(xì)胞病變？A.腺病毒?B.麻疹病毒?C.單純皰疹病毒?D.呼吸道合胞病毒答案：C解析：HSV感染細(xì)胞出現(xiàn)多核巨細(xì)胞，核內(nèi)包涵體，細(xì)胞呈“彈孔”樣脫落；RSV為合胞病變，麻疹為Warthin-Finkeldey巨細(xì)胞。18.關(guān)于真菌小培養(yǎng)法，錯(cuò)誤的是：A.可觀察真實(shí)菌絲與孢子形態(tài)?B.常用玉米吐溫80瓊脂?C.需用蓋玻片壓平?D.可直接在鏡下測(cè)量菌絲寬度答案：C解析：小培養(yǎng)法保留自然生長(zhǎng)狀態(tài)，禁止壓平；壓平會(huì)破壞結(jié)構(gòu)，僅用于濕片。19.檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶表型最簡(jiǎn)便的紙片法是：A.頭孢硝噻吩紙片?B.亞胺培南紙片?C.苯唑西林紙片?D.克拉維酸紙片答案：A解析：頭孢硝噻吩由黃色變紅色為β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性，10min出結(jié)果；其余用于耐藥表型而非酶檢測(cè)。20.關(guān)于VRE耐藥機(jī)制，最常見(jiàn)的是：A.產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶?B.改變PBP?C.產(chǎn)生VanA/VanB蛋白?D.外排泵過(guò)表達(dá)答案：C解析：VanA/VanB為獲得性耐藥，可誘導(dǎo)對(duì)萬(wàn)古霉素及肽可霉素高水平耐藥；PBP改變見(jiàn)于MRSA。21.在巧克力平板上需X、V因子，菌落呈“露滴狀”，革蘭陰性小桿菌，最可能為：A.流感嗜血桿菌?B.杜克雷嗜血桿菌?C.副流感嗜血桿菌?D.溶血嗜血桿菌答案：A解析：流感嗜血桿菌需X（血紅素）、V（NAD），菌落透明如露滴；副流感僅需V因子。22.關(guān)于炭疽芽孢桿菌，錯(cuò)誤的是：A.有莢膜?B.有芽孢?C.有鞭毛?D.觸酶陽(yáng)性答案：C解析：炭疽芽孢桿菌無(wú)鞭毛，動(dòng)力陰性；其余均正確。23.下列哪項(xiàng)不是病毒分離的“金標(biāo)準(zhǔn)”？A.細(xì)胞培養(yǎng)?B.雞胚培養(yǎng)?C.動(dòng)物接種?D.抗原檢測(cè)答案：D解析：抗原檢測(cè)快速但靈敏度低，不能替代活病毒分離；細(xì)胞培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)。24.關(guān)于支原體培養(yǎng)，正確的是：A.需含膽固醇培養(yǎng)基?B.需10%CO2?C.菌落呈“煎蛋”狀需放大100倍?D.最適pH8.5答案：A解析：支原體無(wú)細(xì)胞壁，需外源膽固醇構(gòu)建膜；菌落“煎蛋”狀肉眼可見(jiàn)，最適pH7.6–7.8，5%CO2即可。25.關(guān)于諾卡菌屬，正確的是：A.革蘭陰性?B.抗酸陰性?C.需氧?D.有芽孢答案：C解析：諾卡菌為革蘭陽(yáng)性、需氧、部分抗酸弱陽(yáng)性，無(wú)芽孢。26.關(guān)于隱球菌墨汁負(fù)染色，正確的是：A.可見(jiàn)厚膜孢子?B.可見(jiàn)芽管?C.可見(jiàn)寬厚莢膜?D.可見(jiàn)假菌絲答案：C解析：墨汁背景下莢膜透亮呈暈輪；厚膜孢子、芽管、假菌絲為念珠菌特征。27.關(guān)于朊病毒，錯(cuò)誤的是：A.無(wú)核酸?B.對(duì)紫外線(xiàn)敏感?C.蛋白酶K部分耐受?D.可致海綿狀腦病答案：B解析：朊病毒對(duì)紫外線(xiàn)、核酸酶、甲醛均高度抵抗；蛋白酶K可部分消化PrP^c而保留PrP^sc。28.下列哪種寄生蟲(chóng)卵具有明顯卵蓋？A.蛔蟲(chóng)卵?B.鉤蟲(chóng)卵?C.肝吸蟲(chóng)卵?D.鞭蟲(chóng)卵答案：C解析：肝吸蟲(chóng)卵卵蓋明顯，肩峰突出；其余卵蓋缺如。29.關(guān)于MALDI-TOFMS鑒定真菌，錯(cuò)誤的是：A.需提取蛋白?B.可鑒定曲霉至種?C.對(duì)隱球菌效果差?D.可直接用血培養(yǎng)陽(yáng)性瓶答案：C解析：MALDI對(duì)隱球菌鑒定良好，僅需少量菌體；血培養(yǎng)瓶需去背景干擾。30.關(guān)于CRISPR-Cas用于耐藥基因檢測(cè)，正確的是：A.需PCR擴(kuò)增?B.不可定量?C.需電泳?D.單管檢測(cè)需30min答案：D解析：CRISPR-Cas12/13結(jié)合RPA等恒溫?cái)U(kuò)增，可實(shí)現(xiàn)30min單管可視化檢測(cè)，無(wú)需電泳。二、配伍題（每空1分，共20分）A.白喉棒狀桿菌?B.百日咳鮑特菌?C.軍團(tuán)菌?D.銅綠假單胞菌?E.破傷風(fēng)梭菌31.在鮑-金培養(yǎng)基上形成銀色、汞滴樣菌落——B32.需L-半胱酸和鐵離子——C33.產(chǎn)生綠膿素——D34.在血平板呈“彗星尾”狀遷徙生長(zhǎng)——E（注：破傷風(fēng)梭菌菌落邊緣不規(guī)則，似彗星尾）35.亞碲酸鉀血平板呈黑色菌落——AA.新型隱球菌?B.白色念珠菌?C.曲霉?D.毛霉?E.組織胞漿菌36.45℃生長(zhǎng)試驗(yàn)陽(yáng)性——B37.尿素酶陽(yáng)性——A38.寬而無(wú)隔菌絲，直角分枝——D39.小分生孢子呈“瓶梗”狀——C40.骨髓涂片見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)小體——E三、填空題（每空1分，共20分）41.結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高達(dá)60%，其中_______可刺激慢性肉芽腫形成。答案：索狀因子（6,6-雙分枝菌酸海藻糖）42.肺炎鏈球菌Optochin敏感試驗(yàn)抑菌圈直徑≥_______mm為陽(yáng)性。答案：1443.用于檢測(cè)碳青霉烯酶表型的“CarbaNP”試驗(yàn)中，底物為_(kāi)______。答案：亞胺培南44.病毒TCID50計(jì)算常用_______法。答案：Reed-Muench45.真菌小培養(yǎng)常用“_______玻片法”以維持濕度。答案：U形玻璃棒/濕盒46.艱難梭菌毒素基因tcdB編碼_______毒素。答案：B（細(xì)胞毒素）47.布魯菌需_______%CO2培養(yǎng)。答案：5–1048.檢測(cè)VZVIgM最佳標(biāo)本為_(kāi)______。答案：血清（發(fā)病3–7天）49.鉤端螺旋體培養(yǎng)基為_(kāi)______。答案：Fletcher半固體或EMJH50.諾卡菌部分抗酸陽(yáng)性是因含_______脂質(zhì)。答案：分枝菌酸四、判斷題（每題1分，共10分）51.大腸埃希菌O157:H7不發(fā)酵山梨醇。（√）52.所有曲霉均對(duì)兩性霉素B天然耐藥。（×）53.朊病毒可被高壓蒸汽132℃1h滅活。（×）54.支原體無(wú)細(xì)胞壁，故對(duì)萬(wàn)古霉素天然耐藥。（√）55.病毒凍存需加10%DMSO作為冷凍保護(hù)劑。（√）56.炭疽芽孢桿菌在含0.5IU青霉素紙片周?chē)霈F(xiàn)“串珠試驗(yàn)”陽(yáng)性。（√）57.隱球菌墨汁染色需加熱固定。（×）58.軍團(tuán)菌在BCYE-α平板上生長(zhǎng)需添加頭孢哌酮。（√）59.病毒CPE出現(xiàn)即可判定為陽(yáng)性，無(wú)需盲傳。（×）60.血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)后立即做革蘭染色并轉(zhuǎn)種是提高檢出率的關(guān)鍵。（√）五、簡(jiǎn)答題（每題6分，共30分）61.簡(jiǎn)述ESBLs確證試驗(yàn)操作步驟及結(jié)果判讀。答案：1）取0.5麥?zhǔn)蠁挝痪和坎糓H平板；2）貼頭孢他啶（30μg）與頭孢他啶/克拉維酸（30/10μg）紙片，間距20mm；3）35℃空氣培養(yǎng)16–18h；4）測(cè)量?jī)梢志χ睆讲钪怠?mm即為ESBLs陽(yáng)性；5）同時(shí)可用頭孢噻肟±克拉維酸平行試驗(yàn)提高敏感性；6）報(bào)告“產(chǎn)ESBLs”，提示青霉素、頭孢類(lèi)及氨曲南耐藥。62.簡(jiǎn)述新型隱球菌與白色念珠菌的鑒別要點(diǎn)。答案：1）溫度：白色念珠菌45℃生長(zhǎng)陽(yáng)性，隱球菌陰性；2）尿素酶：隱球菌2h內(nèi)陽(yáng)性，念珠菌陰性；3）糖同化：隱球菌可同化肌醇，念珠菌不能；4）形態(tài)：隱球菌無(wú)假菌絲，念珠菌有假菌絲與厚膜孢子；5）莢膜：隱球菌墨汁負(fù)染見(jiàn)寬厚莢膜，念珠菌缺如；6）酶譜：隱球菌產(chǎn)生酚氧化酶，使咖啡酸玉米瓊脂變棕黑。63.簡(jiǎn)述結(jié)核分枝桿菌液體培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)及注意事項(xiàng)。答案：優(yōu)點(diǎn)：1）BACTECMGIT960系統(tǒng)縮短檢出時(shí)間至7–10天；2）連續(xù)監(jiān)測(cè)CO2釋放，無(wú)需每日肉眼觀察；3）配套藥敏試驗(yàn)縮短至5–7天；4）污染率低于傳統(tǒng)羅氏管。注意事項(xiàng)：1）需去污染處理（N-乙酰-L-半胱酸+NaOH）；2）加抗生素混合液（多黏菌素B、兩性霉素B等）抑制雜菌；3）陽(yáng)性瓶需涂片抗酸染色確認(rèn)；4）防止實(shí)驗(yàn)室污染，生物安全三級(jí)。64.簡(jiǎn)述病毒細(xì)胞培養(yǎng)CPE記錄及盲傳原則。答案：記錄：每日鏡下觀察，描述細(xì)胞變圓、脫落、融合、包涵體等，按“+”至“++++”記錄程度并拍照。盲傳原則：1）培養(yǎng)7天無(wú)CPE需盲傳；2）取100μl培養(yǎng)液接種新鮮細(xì)胞；3）共盲傳2代仍無(wú)CPE方可報(bào)陰性；4）如臨床高度懷疑，可延長(zhǎng)培養(yǎng)至14天并增加細(xì)胞系種類(lèi)（如MDCK、RD、Hep-2）。65.簡(jiǎn)述質(zhì)譜直接涂板法快速鑒定血培養(yǎng)陽(yáng)性病原體的操作流程。答案：1）報(bào)陽(yáng)后即刻抽瓶，取2ml血-肉湯混合液；2）加2ml0.1%皂苷溶血5min；3）12000g離心2min，棄上清；4）加70%甲酸/乙腈各25μl裂解；5）取1μl點(diǎn)靶板，覆基質(zhì)（HCCA）；6）MALDI-TOFMS采集譜圖，與Biotype庫(kù)比對(duì)；7）得分≥2.0報(bào)種水平，1.7–1.99報(bào)屬；8）全程<30min，污染菌需革蘭染色確認(rèn)。六、案例分析題（每題10分，共40分）66.患者男，48歲，肝硬化，發(fā)熱39℃，腹水WBC850×10^6/L，中性85%。腹水培養(yǎng)48h后，血平板見(jiàn)灰白色、不溶血、凸起小菌落，革蘭陽(yáng)性球菌，觸酶陰性，6.5%NaCl不生長(zhǎng)，膽汁七葉苷陽(yáng)性，PYR陽(yáng)性。問(wèn)題：1）鑒定為何菌？2）寫(xiě)出關(guān)鍵試驗(yàn)及結(jié)果。3）給出治療建議。答案：1）糞腸球菌；2）關(guān)鍵試驗(yàn)：革蘭陽(yáng)性、觸酶陰性、膽汁七葉苷陽(yáng)性、PYR陽(yáng)性、6.5%NaCl陰性（部分株陽(yáng)性）；3）氨芐西林或青霉素G+慶大霉素聯(lián)合，若HLAR則選萬(wàn)古霉素；VRE可用利奈唑胺或達(dá)托霉素。67.患者女，26歲，妊娠28周，尿培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)>10^5CFU/ml，麥康凱平板紅色菌落，革蘭陰性桿菌，吲哚陽(yáng)性，甲基紅陽(yáng)性，VP陰性，枸櫞酸鹽陰性，尿素酶陰性。問(wèn)題：1）菌種？2）藥敏試驗(yàn)中哪些抗生素需常規(guī)報(bào)告？3）對(duì)孕婦用藥注意？答案：1）大腸埃希菌；2）氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢曲松、磷霉素、呋喃妥因、厄他培南；3）避免四環(huán)素、喹諾酮、TMP-SMZ早期；首選頭孢類(lèi)或磷霉素單劑，呋喃妥因可用于下尿路但禁分娩前。68.患者男，55歲，COPD，機(jī)械通氣第7天，氣管吸出物培養(yǎng)，血平板見(jiàn)金屬光澤、葡萄氣味、β溶血菌落，革蘭陰性桿菌，氧化酶陽(yáng)性，42℃生長(zhǎng)，OF葡萄糖氧化型。問(wèn)題：1）病原？2）寫(xiě)出兩種確證試驗(yàn)。3）給出耐藥關(guān)注點(diǎn)。答案：1）銅綠假單胞菌；2）氧化酶陽(yáng)性、42℃生長(zhǎng)、綠膿素或熒光素產(chǎn)生、精氨酸脫羧陽(yáng)性；3）關(guān)注碳青霉烯酶（IMP、VIM、NDM）、多黏菌素耐藥（mcr-1罕見(jiàn)），需做CarbaNP及多黏菌素MIC。69.患者女，32歲，非洲歸國(guó)務(wù)工人員，持續(xù)高熱40℃，脾大，血常規(guī)三系減少，骨髓涂片見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)大量卵圓形小體，有莢膜樣暈輪。血培養(yǎng)瓶7天報(bào)陽(yáng)，革蘭染色未見(jiàn)細(xì)菌，瑞氏染色見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)小體。問(wèn)題：1）最可能病原？2）如何進(jìn)一步培養(yǎng)與鑒定？3）給出治療方案。答案：1）莢膜組織胞漿菌；2）取骨髓液接種BHI+胱氨酸+血瓊脂，35℃5%CO2培養(yǎng)，可見(jiàn)白色棉花狀菌落，轉(zhuǎn)種鳥(niǎo)食葡萄糖瓊脂產(chǎn)生特征性大型結(jié)節(jié)狀厚壁孢子；用DNA探針或MALDI確認(rèn)；3）兩性霉素B脂質(zhì)體誘導(dǎo)2周，繼以伊曲康唑200mgbid維持12周；監(jiān)測(cè)肝功。七、綜合應(yīng)用題（30分）70.某ICU3