ICS67

X04

DB13

河北省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB13/T5189.5—2020

天然植物提取物中危害成分檢測(cè)

第5部分：萬(wàn)壽菊提取物中對(duì)氧基苯胺的

測(cè)定

2020-06-28發(fā)布2020-07-28實(shí)施

河北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB13/T5189.5—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。

DB13/T5189《天然植物提取物中危害成分的測(cè)定》共分12個(gè)部分：

——第1部分：亞硝酸鹽的測(cè)定；

——第2部分：二氧化硫的測(cè)定；

——第3部分：正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇5種有機(jī)溶劑殘留的測(cè)定；

——第4部分：辣椒提取物中砷、鉛、鎘、鉻、汞的測(cè)定；

——第5部分：萬(wàn)壽菊提取物中對(duì)氧基苯胺的測(cè)定；

——第6部分：萬(wàn)壽菊提取物中乙氧基喹啉的測(cè)定；

——第7部分：天然番茄紅中苯并[α]芘的測(cè)定；

——第8部分：辣椒提取物中蘇丹紅的測(cè)定；

——第9部分：辣椒提取物中叔丁基對(duì)苯二酚的測(cè)定；

——第10部分：辣椒紅中赭曲霉毒素A的測(cè)定；

——第11部分：葉黃素中苯的測(cè)定；

——第12部分：甜菊糖苷中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定。

本部分為DB13/T5189的第5部分。

本標(biāo)準(zhǔn)由河北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北省食品檢驗(yàn)研究院、晨光生物科技集團(tuán)股份有限公司、石家莊海關(guān)技術(shù)中心、

清河縣食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王紅、張強(qiáng)、張曉芳、匡林鶴、牛瑜琦、王敬、田俊生。

I

DB13/T5189.5—2020

天然植物提取物中危害成分檢測(cè)

第5部分：萬(wàn)壽菊提取物中對(duì)氧基苯胺的

1范圍

本部分規(guī)定了萬(wàn)壽菊提取物中對(duì)乙氧基苯胺的測(cè)定方法。

本部分適用于萬(wàn)壽菊提取物中對(duì)乙氧基苯胺的測(cè)定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3原理

萬(wàn)壽菊提取物的對(duì)乙氧基苯胺經(jīng)乙醇超聲提取，取上清液過(guò)膜，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)，外標(biāo)

法定量。

4試劑或材料

除另有規(guī)定外，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水，試劑均為色譜純。

4.1試劑

4.1.1丙酮（C3H6O）：色譜純。

4.1.2乙醇（C2H6O）：色譜純。

4.2標(biāo)準(zhǔn)品

4.2.1對(duì)乙氧基苯胺標(biāo)準(zhǔn)品（C8H11NO，CAS號(hào)：156-43-4）：純度大于99.0%，-18℃冷凍儲(chǔ)藏。

4.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

4.3.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取對(duì)乙氧基苯胺標(biāo)準(zhǔn)品50mg（精確至0.1mg），用乙腈定容至50mL，

配制成1mg/mL的儲(chǔ)備液，于-18℃冰箱中冷凍保存。

4.3.2標(biāo)準(zhǔn)中間液：準(zhǔn)確移取適量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用乙腈配制成100ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液。

4.3.3標(biāo)準(zhǔn)使用液：準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)中間液0mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL、10mL于7個(gè)

100mL容量瓶中，用空白樣品提取液定容，此標(biāo)準(zhǔn)系列的濃度為0ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、

2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL。

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5儀器與設(shè)備

5.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源。

5.2電子天平：感量0.001g、0.0001g。

5.3漩渦混勻器。

5.4冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于10000r/min。

5.5超聲波清洗機(jī)。

6試驗(yàn)步驟

6.1試樣制備

準(zhǔn)確稱取萬(wàn)壽菊提取物樣品0.5g（精確至0.001g）于50mL試管中，加入5mL丙酮，超聲使試樣

溶解，加入20mL乙醇，超聲提取20min，10000r/min4℃冷凍離心3min。取上清液至25mL容量瓶

中，用乙醇定容至刻度。過(guò)0.22μm濾膜，待測(cè)。

6.2色譜質(zhì)譜參考條件

液相色譜條件和質(zhì)譜條件。

6.2.1液相色譜條件

a)色譜柱：HILIC色譜柱（2.1mm×100mm，2.7μm），或性能相當(dāng)者；

b)流動(dòng)相：乙腈：0.1%甲酸水=80：20；

c)流速：0.4mL/min；

d)柱溫：40℃；

e)進(jìn)樣量：2μL。

6.2.2質(zhì)譜條件

a)離子源：電噴霧離子源；

b)掃描方式：正離子掃描；

c)檢測(cè)方式：多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；

d)電噴霧電壓：5500V；

e)離子源溫度：550℃；

f)霧化氣、氣簾氣、輔助加熱氣、碰撞氣均為高純氮?dú)饣蚋鶕?jù)儀器選擇其他合適氣體；

g)定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、去簇電壓及碰撞能量見(jiàn)表1。

表1對(duì)乙氧基苯胺的質(zhì)譜參數(shù)

目標(biāo)物質(zhì)名稱定量離子對(duì)(m/z)定性離子對(duì)(m/z)去簇電壓/V碰撞能量/V

138.0/109.86020

對(duì)乙氧基苯胺138.0/109.8

138.0/92.96025

6.3液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定

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6.3.1定性測(cè)定

按照上述條件測(cè)定樣品和建立標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，如果樣品中化合物質(zhì)量色譜峰的保留時(shí)間（參見(jiàn)附錄

A）與標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間相比在允許偏差±2.5%之內(nèi)；定性離子對(duì)的相對(duì)豐度與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液

相比，相對(duì)豐度偏差不超過(guò)表2的規(guī)定，則可判斷樣品中存在相應(yīng)的目標(biāo)化合物。

表2定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度/%>20>20～50>10～20≤10

允許的相對(duì)偏差/%±20±25±30±50

6.3.2定量測(cè)定

在儀器最佳工作條件下，對(duì)基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測(cè)組分峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)

準(zhǔn)溶液中被測(cè)組分濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量。

6.4空白試驗(yàn)

空白試驗(yàn)，除不加試樣外，均按上述測(cè)定步驟進(jìn)行。

7試驗(yàn)結(jié)果

萬(wàn)壽菊提取物中對(duì)乙氧基苯胺含量X按式（1）計(jì)算。

(cc)V

X0………………(1)

m

式中：

X——萬(wàn)壽菊提取物對(duì)乙氧基苯胺的含量，單位為微克每千克（μg/kg）；

c——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線查出的試樣溶液中對(duì)乙氧基苯胺的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；

c0——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線查出的空白試驗(yàn)中對(duì)乙氧基苯胺的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；

V——試樣最終稀釋體積，單位為毫升（mL）；

m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。

計(jì)算結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后一位。

8精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。

9檢出限和定量限

檢出限為5μg/kg，定量限為17μg/kg。

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AA

附錄A

（資料性附錄）