動物源性食品中紅霉素、螺旋霉素、泰樂菌素、替米考星的快速檢測膠體金免疫層析法國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布1動物源性食品中紅霉素、螺旋霉素、泰樂菌素、替米考星的快速檢測膠體金免疫層析法3.2.10.5mol/L磷酸鹽緩沖液：稱取磷酸二氫鉀(3.1.2)13.5g,磷酸氫二鈉(3.1.3)56.8g,氯化鉀(3.1.4)10.0g,用水溶解并定容至1000mL。3.2.220mmol/L磷酸鹽緩沖液(定容至1000mL。質(zhì)量見表1,純度≥98%。注：或等同可溯源物質(zhì)。2中文名稱替米考星各5.0mL,分別置于50mL棕色容量瓶中，用甲醇(3.1.1)定容，搖勻。4℃以下避光保存，有效期1個月。溫度10℃~40℃。36.2.1.2雞蛋和動物肌肉組織：準確稱取1g±0.05g試樣于15mL離心管中，加入2mL相應(yīng)的樣品測試項目(紅霉素、螺旋霉素、泰樂菌素)測試項目(替米考星)雞肉豬肉牛肉4粒完全溶解，室溫孵育3min;孵育結(jié)束后，將試紙條樣品墊端垂直向下插入金標微孔反應(yīng)5min或6min,從微孔中取出試紙條，除去試紙條下端的樣品墊，根據(jù)示意圖(圖1)判定結(jié)果。在1min內(nèi)進行判讀。表3試樣的檢測測試項目(紅霉素、螺旋霉素、泰樂菌素)測試項目(替米考星)雞蛋試樣：6;其他試樣：55每批試樣應(yīng)同時進行空白試驗和加標質(zhì)控試驗。稱取同類基質(zhì)空白試樣，按照6.2和6.3步驟與試樣同法操作。準確稱取同類基質(zhì)空白試樣1g±0.05g,置于15mL離心管中，分別加入適量紅霉素、螺旋霉素、泰樂菌素標準工作液(10μg/mL)(3.4.3)或替米考星標準工作液(1μg/mL)(3.4.3),使各類基質(zhì)試樣中待測組分的含量分別為本方法的檢出限值(見表4),按照6.2和6.3步驟與試樣同法操作。當測試項目為單一藥物時，采用單一藥物加標質(zhì)控試驗；當測試項目為多個藥物時，采用混標加標質(zhì)控試驗。7結(jié)果判定要求7.1通則采用目視法對結(jié)果進行判讀，目視判定示意圖如圖1所示。結(jié)果有以下幾種：a)無效：控制線(C線)不顯色，表明不正確操作或檢測卡無效。b)陽性結(jié)果：檢測線(T線)不顯色或檢測線(T線)顏色比控制線(C線)顏色淺，表明試樣中待測組分含量高于方法檢出限，判為陽性。c)陰性結(jié)果：檢測線(T線)顏色比控制線(C線)顏色深或者檢測線(T線)顏色與控制線(C線)顏色相當，表明試樣中待測組分含量低于方法檢出限，判為陰性。5無效陰性陽性無效陰性陽性圖1目視判定示意圖(比色法)空白試驗檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，加標質(zhì)控試驗檢測結(jié)果應(yīng)為陽性。當檢測結(jié)果為陽性時，采用參比方法進行確證。9性能指標表4方法檢出限檢出限/(μg/kg)替米考星牛肉、豬肉雞肉靈敏度≥95%。特異性≥90%。6酰泰樂菌素、泰萬菌素等存在交叉反應(yīng)。相關(guān)藥物交叉反應(yīng)情況詳見表5和表6。目標化合物(1)結(jié)構(gòu)類似藥物：交沙霉素、林可霉素、依普菌素、泰萬菌素、3-O-乙酰泰樂菌素、克林霉素、阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素、吉他霉素、替米考星、泰樂菌素、螺旋霉素。吉他霉素(1)結(jié)構(gòu)類似藥物：竹桃霉素、林可霉素、依普菌素、泰萬菌素、3-O-乙酰泰樂菌素、克林霉素、阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素、替米考星、泰樂菌素、紅霉素。吉他霉素、替米考星(1)結(jié)構(gòu)類似藥物：竹桃霉素、交沙霉素、林可霉素、依普菌素、克林霉素、阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素、紅霉素、螺旋霉素。目標化合物替米考星(1)結(jié)構(gòu)類似藥物：交沙霉素、竹桃霉素、依普菌素、泰萬菌素、3-O-乙酰泰樂菌素、林可霉素、克林霉素、阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素、吉他霉素、泰樂菌素、紅霉素、螺旋假陽性率≤10%。7本方法所述試劑、試劑盒信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不作限定。方法使用者在使用替代試劑、試劑盒(包括多合一項目檢測產(chǎn)品和單一項目檢測產(chǎn)品)或操作步驟前，應(yīng)對其進行考察，并滿足本方法規(guī)定的各項性能指標。本方法參比標準(方法)為GB/T22988—2008《牛奶和奶粉中螺旋霉素、吡利霉素、竹桃霉素