免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制演講人01#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制02##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析03##五、挑戰(zhàn)與展望：從基礎(chǔ)研究到臨床轉(zhuǎn)化的跨越目錄#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制##一、引言：免疫聯(lián)合治療的機(jī)遇與microRNA的核心地位免疫治療已成為腫瘤治療領(lǐng)域的革命性突破，以免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICI）、嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）療法、細(xì)胞因子等為代表的單模態(tài)免疫治療，部分患者實(shí)現(xiàn)了長(zhǎng)期緩解甚至臨床治愈。然而，臨床實(shí)踐表明，單藥響應(yīng)率有限（如PD-1抑制劑在實(shí)體瘤中響應(yīng)率不足20%），易產(chǎn)生原發(fā)性或繼發(fā)性耐藥，如何突破治療瓶頸成為亟待解決的科學(xué)問(wèn)題。免疫聯(lián)合治療——通過(guò)聯(lián)合不同機(jī)制的治療手段（如ICI聯(lián)合化療/靶向治療/細(xì)胞治療/抗血管生成治療等）——通過(guò)協(xié)同增強(qiáng)免疫應(yīng)答、逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境，顯著提升了療效，已成為當(dāng)前腫瘤治療的研究熱點(diǎn)。#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制在免疫聯(lián)合治療的作用機(jī)制中，表觀遺傳調(diào)控扮演了關(guān)鍵角色，其中microRNA（miRNA）作為一類長(zhǎng)度約22個(gè)核苷酸的非編碼RNA，通過(guò)靶向mRNA的3'非翻譯區(qū)（3'UTR）降解或抑制翻譯，參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡及免疫應(yīng)答等幾乎所有生命過(guò)程。近年來(lái)，大量研究發(fā)現(xiàn)，miRNA在免疫聯(lián)合治療的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮“分子開關(guān)”作用：一方面，miRNA可調(diào)控腫瘤細(xì)胞免疫原性、免疫細(xì)胞活化狀態(tài)及腫瘤微環(huán)境（TME）免疫抑制因子，影響聯(lián)合治療的敏感性；另一方面，聯(lián)合治療本身也可通過(guò)改變TME或直接作用于腫瘤細(xì)胞，調(diào)控miRNA的表達(dá)，形成“治療-調(diào)控-增效”的正向循環(huán)。#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制作為一名長(zhǎng)期從事腫瘤免疫機(jī)制研究的工作者，我在實(shí)驗(yàn)室中曾觀察到這樣一個(gè)現(xiàn)象：當(dāng)PD-1抑制劑與低劑量紫杉醇聯(lián)合處理荷瘤小鼠時(shí)，腫瘤組織中miR-34a的表達(dá)水平顯著升高，其通過(guò)靶向PD-L1和SIRT1，不僅增強(qiáng)了T細(xì)胞的浸潤(rùn)活性，還抑制了腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。這一微觀分子層面的變化，最終轉(zhuǎn)化為小鼠腫瘤體積的顯著縮小和生存期的延長(zhǎng)。這種“miRNA作為橋梁連接治療手段與免疫應(yīng)答”的現(xiàn)象，讓我深刻認(rèn)識(shí)到：解析miRNA在免疫聯(lián)合治療中的調(diào)控機(jī)制，不僅有助于揭示聯(lián)合增效的深層原理，更可為開發(fā)新型生物標(biāo)志物和靶向治療策略提供理論依據(jù)。本文將從miRNA的基礎(chǔ)功能出發(fā)，系統(tǒng)梳理其在不同免疫聯(lián)合治療策略中的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，探討其作為生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)的潛力，并展望當(dāng)前面臨的挑戰(zhàn)與未來(lái)方向，以期為相關(guān)領(lǐng)域的研究者和臨床工作者提供參考。#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制##二、microRNA的基礎(chǔ)功能及其在免疫應(yīng)答中的核心作用###（一）microRNA的生物合成與作用機(jī)制miRNA是一類內(nèi)源性非編碼RNA，其生物合成經(jīng)典途徑包括：細(xì)胞核內(nèi)RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄pri-miRNA，經(jīng)Drosha-DGCR8復(fù)合體加工為pre-miRNA，通過(guò)Exportin-5轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)；在細(xì)胞質(zhì)中，Dicer酶切割pre-miRNA形成miRNA:miRNA*雙鏈，其中g(shù)uide鏈（成熟miRNA）裝載至RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC），通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則識(shí)別靶mRNA，導(dǎo)致靶mRNA降解或翻譯抑制。值得注意的是，miRNA的作用具有“一對(duì)多”和“多對(duì)一”的特點(diǎn)：一個(gè)miRNA可靶向數(shù)百種mRNA，一種mRNA也可被多個(gè)miRNA協(xié)同調(diào)控，這種復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)使其成為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)整合的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制###（二）miRNA在固有免疫與適應(yīng)性免疫中的精細(xì)調(diào)控免疫應(yīng)答的啟動(dòng)和維持依賴于固有免疫細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞DCs、自然殺傷細(xì)胞NK細(xì)胞）和適應(yīng)性免疫細(xì)胞（T細(xì)胞、B細(xì)胞）的協(xié)同作用，而miRNA貫穿于免疫細(xì)胞發(fā)育、活化和效應(yīng)的全過(guò)程。####1.固有免疫細(xì)胞的miRNA調(diào)控巨噬細(xì)胞是TME中主要的免疫抑制細(xì)胞群體，其M1型（促炎抗腫瘤）與M2型（免疫抑制促腫瘤）極化狀態(tài)受miRNA的精密調(diào)控。例如，miR-155通過(guò)靶向SOCS1（細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子1），增強(qiáng)JAK-STAT信號(hào)通路，促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化，增強(qiáng)其吞噬抗原和呈遞能力；而miR-146a則通過(guò)靶向TRAF6和IRAK1，負(fù)調(diào)控NF-κB通路，抑制M1型極化，促進(jìn)M2型分化，這與腫瘤免疫逃逸密切相關(guān)。#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制DCs是連接固有免疫與適應(yīng)性免疫的“橋梁”，miR-34a可靶向Notch1，抑制DCs的成熟和抗原呈遞功能，而miR-181a則通過(guò)抑制酪氨酸磷酸酶SHP-2，增強(qiáng)DCs的MHCⅡ分子表達(dá)和IL-12分泌，促進(jìn)T細(xì)胞活化。NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性受miR-15b/16-2簇調(diào)控，其通過(guò)抑制BCL2（抗凋亡蛋白）和PI3K/Akt通路，增強(qiáng)NK細(xì)胞的顆粒酶B釋放和腫瘤殺傷能力。####2.適應(yīng)性免疫細(xì)胞的miRNA調(diào)控T細(xì)胞是抗腫瘤免疫的核心效應(yīng)細(xì)胞，其分化、增殖和耗竭均受miRNA調(diào)控。輔助性T細(xì)胞（Th1/Th2/Th17）的分化平衡中，miR-29a靶向T-bet（Th1關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子），抑制Th1分化；miR-21通過(guò)抑制PTEN，增強(qiáng)PI3K/Akt通路，促進(jìn)Th2分化；而miR-326則通過(guò)靶向Ets-1，#免疫聯(lián)合治療的microRNA調(diào)控機(jī)制促進(jìn)Th17分化，與自身免疫性疾病和腫瘤炎癥微環(huán)境相關(guān)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）具有免疫抑制功能，miR-10a通過(guò)靶向BCL6，抑制Tregs分化，而miR-155則通過(guò)抑制SOCS1，增強(qiáng)Tregs的抑制活性，促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTLs）的耗竭是免疫治療耐藥的主要原因，miR-101通過(guò)靶向PD-1和TIM-3，減輕CTLs的耗竭狀態(tài)；miR-150靶向c-Myb，抑制CTLs的增殖和效應(yīng)功能，而miR-155過(guò)表達(dá)則可增強(qiáng)CTLs的IFN-γ分泌和腫瘤殺傷能力。B細(xì)胞主要通過(guò)抗體依賴的細(xì)胞毒性作用（ADCC）和抗原呈遞參與抗免疫應(yīng)答，miR-150靶向轉(zhuǎn)錄因子MYB，調(diào)控B細(xì)胞的發(fā)育和活化；miR-155通過(guò)激活PI3K/Akt通路，促進(jìn)B細(xì)胞增殖和抗體類別轉(zhuǎn)換。123##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析免疫聯(lián)合治療的增效機(jī)制并非簡(jiǎn)單疊加，而是通過(guò)不同治療手段的協(xié)同作用，重塑TME、增強(qiáng)免疫細(xì)胞活性。miRNA作為關(guān)鍵調(diào)控分子，在多種聯(lián)合治療策略中發(fā)揮橋梁作用，以下從不同聯(lián)合模式展開具體分析。###（一）免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合化療：miRNA介導(dǎo)的“免疫原性死亡”與微環(huán)境重塑化療藥物通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，釋放損傷相關(guān)分子模式（DAMPs，如ATP、HMGB1），促進(jìn)DCs成熟和T細(xì)胞活化，即“免疫原性細(xì)胞死亡”（ICD）；同時(shí)，化療可減少免疫抑制細(xì)胞（如Tregs、髓源性抑制細(xì)胞MDSCs）的浸潤(rùn)，與ICI形成協(xié)同效應(yīng)。miRNA在此過(guò)程中調(diào)控化療誘導(dǎo)的免疫原性及ICI的敏感性。####1.化療藥物上調(diào)miRNA表達(dá)，抑制免疫抑制分子##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析順鉑、紫杉醇等化療藥物可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中miR-34a的表達(dá)，其通過(guò)靶向PD-L1和SIRT1，一方面降低腫瘤細(xì)胞的PD-L1表達(dá)，增強(qiáng)T細(xì)胞的識(shí)別和殺傷；另一方面抑制SIRT1介導(dǎo)的NF-κB失活，促進(jìn)促炎因子（如TNF-α、IL-6）釋放，進(jìn)一步激活免疫應(yīng)答。例如，在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）模型中，順鉑聯(lián)合PD-1抑制劑可顯著上調(diào)miR-34a，通過(guò)PD-L1/SIRT1軸抑制腫瘤生長(zhǎng)，且優(yōu)于單藥治療。蒽環(huán)類藥物（如阿霉素）通過(guò)拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑誘導(dǎo)ICD，釋放HMGB1和ATP，而miR-126可靶向PIK3R2（PI3K調(diào)節(jié)亞基），增強(qiáng)HMGB1的分泌，促進(jìn)DCs的抗原呈遞功能。此外，miR-16家族（miR-15a/16-1）在化療后表達(dá)上調(diào)，靶向BCL2，不僅誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，還通過(guò)減少Tregs的浸潤(rùn)，逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析####2.miRNA調(diào)控化療耐藥與ICI敏感性化療耐藥是聯(lián)合治療面臨的重要挑戰(zhàn)，miRNA可通過(guò)多重機(jī)制逆轉(zhuǎn)耐藥并增強(qiáng)ICI療效。例如，miR-200c通過(guò)靶向ZEB1/2，抑制EMT，減少腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，同時(shí)上調(diào)MHCⅠ類分子表達(dá)，增強(qiáng)CTLs的識(shí)別能力；在卵巢癌中，紫杉醇耐藥細(xì)胞中miR-200c低表達(dá)，而聯(lián)合PD-1抑制劑可恢復(fù)其表達(dá)，逆轉(zhuǎn)耐藥并增強(qiáng)療效。miR-21是化療耐藥的關(guān)鍵調(diào)控分子，其通過(guò)抑制PTEN，激活PI3K/Akt通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活；同時(shí)，miR-21靶向PDCD4（程序性死亡因子4），抑制DCs的成熟。在結(jié)直腸癌中，5-Fu聯(lián)合抗PD-1抗體可下調(diào)miR-21表達(dá)，通過(guò)PTEN/Akt和PDCD4軸，增強(qiáng)化療敏感性和T細(xì)胞活性。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析###（二）免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合靶向治療：miRNA調(diào)控信號(hào)通路的協(xié)同抑制靶向治療通過(guò)特異性抑制腫瘤細(xì)胞的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)基因（如EGFR、VEGF、ALK等），阻斷增殖、存活和血管生成信號(hào)，與ICI聯(lián)合可從“腫瘤細(xì)胞自身”和“微環(huán)境”兩個(gè)層面發(fā)揮協(xié)同作用。miRNA在此過(guò)程中靶向多條信號(hào)通路，增強(qiáng)聯(lián)合療效。####1.抗血管生成治療與ICI的協(xié)同：miRNA調(diào)控血管正?；c免疫浸潤(rùn)VEGF抑制劑（如貝伐珠單抗）通過(guò)抑制腫瘤血管生成，改善血管滲漏和缺氧，促進(jìn)T細(xì)胞浸潤(rùn)，即“血管正?；毙?yīng)。miRNA參與血管正?；恼{(diào)控：miR-126靶向SPRED1和PIK3R2，增強(qiáng)VEGFR2信號(hào)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)和血管成熟；在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，抗VEGF抗體聯(lián)合PD-1抑制劑可上調(diào)miR-126，通過(guò)血管正?；蚑細(xì)胞浸潤(rùn)，延長(zhǎng)生存期。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析miR-296通過(guò)靶向c-Met，抑制腫瘤血管的異常分支，減少免疫抑制細(xì)胞浸潤(rùn)；而miR-132通過(guò)靶向p120RasGAP，增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的存活和遷移，促進(jìn)血管正?；４送?，抗VEGF治療可下調(diào)TGF-β信號(hào)，而上調(diào)miR-20b，其靶向TGFBR2，抑制Tregs的分化，進(jìn)一步逆轉(zhuǎn)免疫抑制。####2.靶向致癌基因與ICI的協(xié)同：miRNA調(diào)控腫瘤免疫原性與耗竭逆轉(zhuǎn)EGFR抑制劑（如奧希替尼）在EGFR突變肺癌中療效顯著，但易產(chǎn)生耐藥并伴隨免疫微環(huán)境抑制。miR-143/145簇靶向EGFR下游的KRAS和ERK，抑制腫瘤增殖；同時(shí)，miR-143可靶向PD-L1，增強(qiáng)T細(xì)胞活性。在臨床前模型中，奧希替尼聯(lián)合PD-1抑制劑可上調(diào)miR-143/145，通過(guò)EGFR/PD-L1軸，顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析ALK抑制劑（如克唑替尼）在ALK陽(yáng)性肺癌中通過(guò)抑制ALK信號(hào)通路，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；而miR-101靶向EZH2（組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶），抑制EMT和腫瘤干細(xì)胞特性，同時(shí)上調(diào)MHCⅠ類分子表達(dá)，增強(qiáng)CTLs的識(shí)別。聯(lián)合PD-1抑制劑可進(jìn)一步放大miR-101的免疫調(diào)節(jié)作用，克服ALK抑制劑的耐藥。###（三）免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合細(xì)胞治療：miRNA調(diào)控CAR-T細(xì)胞功能與TME互作CAR-T細(xì)胞治療在血液腫瘤中取得突破，但在實(shí)體瘤中面臨TME抑制、CAR-T耗竭、浸潤(rùn)不足等挑戰(zhàn)。與ICI聯(lián)合可通過(guò)解除CAR-T細(xì)胞的抑制狀態(tài)，增強(qiáng)其持久性，而miRNA是調(diào)控CAR-T細(xì)胞功能和TME互作的關(guān)鍵分子。####1.miRNA增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞的增殖、存活與效應(yīng)功能##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析CAR-T細(xì)胞的耗竭與PD-1、TIM-3、LAG-3等抑制性分子的高表達(dá)相關(guān)，miRNA可通過(guò)靶向這些分子或其上游調(diào)控因子，逆轉(zhuǎn)耗竭狀態(tài)。例如，miR-155過(guò)表達(dá)可增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞的增殖和IFN-γ分泌，其通過(guò)抑制SHIP1（PI3K負(fù)調(diào)控因子），激活PI3K/Akt/mTOR通路；在CD19陽(yáng)性淋巴瘤模型中，miR-155修飾的CAR-T細(xì)胞聯(lián)合PD-1抑制劑，顯著提高了小鼠的生存率。miR-17-92簇（包含miR-17、miR-18a、miR-19a等）靶向PTEN和BIM，抑制CAR-T細(xì)胞的凋亡，同時(shí)增強(qiáng)其細(xì)胞毒性；在實(shí)體瘤中，miR-17-92修飾的CAR-T細(xì)胞可更好地浸潤(rùn)腫瘤組織，并通過(guò)分泌IFN-γ重塑TME，促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化。####2.miRNA調(diào)控TME對(duì)CAR-T細(xì)胞的抑制作用##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析實(shí)體瘤TME中的TGF-β、IL-10、腺苷等抑制性因子可抑制CAR-T細(xì)胞功能，miRNA可通過(guò)靶向這些因子或其受體，解除抑制。例如，miR-34a靶向TGFBR2，阻斷TGF-β信號(hào)，抑制CAR-T細(xì)胞的耗竭和EMT；在胰腺癌模型中，TGF-β抵抗的CAR-T細(xì)胞聯(lián)合PD-1抑制劑，通過(guò)miR-34a/TGF-β軸，顯著增強(qiáng)了腫瘤清除能力。miR-146a靶向TRAF6和IRAK1，負(fù)調(diào)控NF-κB通路，抑制MDSCs的活化；在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，CAR-T細(xì)胞聯(lián)合抗PD-1抗體可上調(diào)miR-146a，減少M(fèi)DSCs的浸潤(rùn)，改善TME的免疫抑制狀態(tài)。###（四）雙免疫聯(lián)合治療：miRNA調(diào)控免疫檢查點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的協(xié)同激活##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析雙免疫聯(lián)合（如CTLA-4抑制劑+PD-1抑制劑）通過(guò)阻斷不同免疫檢查點(diǎn)，從T細(xì)胞活化的“啟動(dòng)階段”（CTLA-4）和“效應(yīng)階段”（PD-1）雙重增強(qiáng)抗腫瘤免疫，而miRNA調(diào)控CTLA-4與PD-1的表達(dá)及信號(hào)通路協(xié)同。CTLA-4主要表達(dá)于初始T細(xì)胞，通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合B7分子抑制T細(xì)胞活化；PD-1表達(dá)于活化T細(xì)胞，通過(guò)結(jié)合PD-L1/PD-L2抑制T細(xì)胞功能。miR-28-5p靶向CTLA-4mRNA，抑制其翻譯，在T細(xì)胞活化早期增強(qiáng)免疫應(yīng)答；而miR-138靶向PD-L1，在效應(yīng)階段解除T細(xì)胞抑制。在黑色素瘤模型中，CTLA-4抑制劑聯(lián)合PD-1抑制劑可上調(diào)miR-28-5p和miR-138，通過(guò)CTLA-4/PD-L1雙重抑制，顯著增強(qiáng)T細(xì)胞活化和腫瘤清除。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析此外，miR-155通過(guò)抑制SOCS1，增強(qiáng)CTLA-4抑制劑對(duì)T細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用；miR-21通過(guò)抑制PTEN，增強(qiáng)PD-1抑制劑的療效。雙免疫聯(lián)合治療通過(guò)調(diào)控這些miRNA，形成“早期啟動(dòng)+效應(yīng)增強(qiáng)”的協(xié)同效應(yīng)，提高臨床響應(yīng)率。##四、microRNA作為免疫聯(lián)合治療的生物標(biāo)志物與治療靶點(diǎn)###（一）miRNA作為預(yù)測(cè)療效和預(yù)后的生物標(biāo)志物免疫聯(lián)合治療的療效存在顯著個(gè)體差異，尋找可靠的生物標(biāo)志物對(duì)篩選優(yōu)勢(shì)人群、優(yōu)化治療方案至關(guān)重要。miRNA因其穩(wěn)定性（在血液、組織、外泌體中不易降解）、組織特異性和可檢測(cè)性，成為極具潛力的生物標(biāo)志物。####1.血清/血漿外泌體miRNA作為無(wú)創(chuàng)標(biāo)志物##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析外泌體是由細(xì)胞分泌的納米級(jí)囊泡，可攜帶miRNA等生物活性分子，通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)遠(yuǎn)端組織，反映腫瘤的生物學(xué)特征和治療響應(yīng)狀態(tài)。例如，在NSCLC患者中，接受PD-1抑制劑聯(lián)合化療后，血清外泌體miR-34a高表達(dá)與緩解率顯著相關(guān)，其通過(guò)靶向PD-L1，預(yù)測(cè)治療敏感性；而miR-21高表達(dá)則與耐藥和不良預(yù)后相關(guān)，其通過(guò)抑制PTEN，促進(jìn)腫瘤存活。在黑色素瘤患者中，外泌體miR-125b水平可預(yù)測(cè)CTLA-4抑制劑聯(lián)合PD-1抑制劑的療效：miR-125b低表達(dá)患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）顯著高于高表達(dá)患者，其通過(guò)靶向BCL2，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，是預(yù)后不良的標(biāo)志物。####2.組織miRNA作為療效預(yù)測(cè)標(biāo)志物##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析腫瘤組織miRNA表達(dá)可直接反映TME的免疫狀態(tài)和治療響應(yīng)。在腎癌患者中，PD-1抑制劑聯(lián)合靶向治療（如mTOR抑制劑）后，腫瘤組織中miR-155高表達(dá)與T細(xì)胞浸潤(rùn)增加和PFS延長(zhǎng)相關(guān)，其通過(guò)抑制SOCS1，增強(qiáng)T細(xì)胞活性；而miR-146a高表達(dá)則與Tregs浸潤(rùn)增加和耐藥相關(guān)，是預(yù)后不良的標(biāo)志物。此外，miR-142在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平可預(yù)測(cè)PD-1抑制劑聯(lián)合化療的療效：miR-142高表達(dá)患者中，腫瘤突變負(fù)荷（TMB）較高，PD-L1表達(dá)上調(diào)，對(duì)聯(lián)合治療響應(yīng)率顯著提高，其通過(guò)靶向DNMT1，上調(diào)腫瘤細(xì)胞的免疫原性。###（二）miRNA作為治療靶點(diǎn)的策略與進(jìn)展##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析基于miRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，通過(guò)miRNA模擬物（agomir，用于補(bǔ)充低表達(dá)的miRNA）或miRNA抑制劑（antagomir，用于抑制高表達(dá)的miRNA），可重塑免疫微環(huán)境，增強(qiáng)免疫聯(lián)合治療的療效。然而，miRNA靶向治療面臨遞送效率低、脫靶效應(yīng)等挑戰(zhàn)，近年來(lái)，新型遞送系統(tǒng)的開發(fā)為其臨床轉(zhuǎn)化提供了可能。####1.miRNA模擬物增強(qiáng)抗腫瘤免疫miR-34a模擬物（MRX34）是首個(gè)進(jìn)入臨床研究的miRNA藥物，在I期臨床試驗(yàn)中，MRX34聯(lián)合PD-1抑制劑可上調(diào)腫瘤組織中miR-34a表達(dá)，通過(guò)靶向PD-L1和SIRT1，抑制腫瘤生長(zhǎng)；然而，因其嚴(yán)重的免疫相關(guān)不良反應(yīng)（如細(xì)胞因子釋放綜合征）而暫停試驗(yàn)，這提示miRNA藥物的安全性需進(jìn)一步優(yōu)化。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析miR-155模擬物在臨床前研究中顯示出良好效果：在淋巴瘤模型中，miR-155聯(lián)合PD-1抑制劑可增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒性，通過(guò)抑制SHIP1，激活PI3K/Akt通路；目前，脂質(zhì)體包裹的miR-155模擬物已進(jìn)入臨床前開發(fā)階段，有望在實(shí)體瘤治療中發(fā)揮作用。####2.miRNA抑制劑逆轉(zhuǎn)免疫抑制miR-21是腫瘤中高表達(dá)的促癌miRNA，通過(guò)抑制PTEN和PDCD4，促進(jìn)腫瘤存活和免疫抑制。在肝癌模型中，miR-21抑制劑（antagomiR-21）聯(lián)合PD-1抑制劑可下調(diào)miR-21表達(dá)，通過(guò)PTEN/Akt和PDCD4軸，增強(qiáng)T細(xì)胞活性，抑制腫瘤生長(zhǎng)；目前，antagomiR-21聯(lián)合PD-1抑制劑的I期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中，初步結(jié)果顯示其具有良好的安全性和療效。##三、免疫聯(lián)合治療中microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析miR-146a抑制劑在胰腺癌模型中可減少Tregs和MDSCs的浸潤(rùn)，通過(guò)靶向TRAF6和IRAK1，逆轉(zhuǎn)免疫抑制；與吉西他濱聯(lián)合PD-1抑制劑協(xié)同，顯著延長(zhǎng)小鼠生存期。此外，納米顆粒包裹的miR-146a抑制劑已顯示出良好的組織靶向性和穩(wěn)定性，為臨床轉(zhuǎn)化奠定了基礎(chǔ)。####3.新型遞送系統(tǒng)的開發(fā)miRNA的靶向遞送是miRNA藥物成功的關(guān)鍵。近年來(lái)，脂質(zhì)納米粒（LNP）、外泌體、聚合物納米粒等遞送系統(tǒng)取得了顯著進(jìn)展：LNP可高效遞送miRNA模擬物至肝臟組織，如Patisiran（siRNA-LNP）已獲FDA批準(zhǔn)；外泌體因其天然生物相容性和靶向性，可遞送miRNA至腫瘤組織，在臨床前模型中，載有miR-155的外泌體聯(lián)合PD-1抑制劑可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)。此外，抗體-偶聯(lián)納米粒（ADC-likenanoparticles）可通過(guò)抗體特異性結(jié)合腫瘤抗原，實(shí)現(xiàn)miRNA的精準(zhǔn)遞送，減少脫靶效應(yīng)。##五、挑戰(zhàn)與展望：從基礎(chǔ)研究到臨床轉(zhuǎn)化的跨越盡管miRNA在免疫聯(lián)合治療中展現(xiàn)出巨大潛力，但其從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用仍面臨諸多挑戰(zhàn)，需要多學(xué)科交叉合作，共同推動(dòng)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的發(fā)展。###（一）當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)####1.miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性與異質(zhì)性miRNA的作用具有“一對(duì)多”和“多對(duì)一”的特點(diǎn)，一個(gè)miRNA可調(diào)控?cái)?shù)百個(gè)靶基因，一個(gè)靶基因也可被多個(gè)miRNA協(xié)同調(diào)控，這種復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)增加了機(jī)制解析的難度。此外，腫瘤的異質(zhì)性（不同患者、同一腫瘤的不同區(qū)域）導(dǎo)致miRNA表達(dá)譜存在顯著差異，限制了miRNA標(biāo)志物的通用性和靶向治療的普適性。####2.遞送系統(tǒng)的效率與安全性##五、挑戰(zhàn)與展望：從基礎(chǔ)研究到臨床轉(zhuǎn)化的跨越miRNA藥物（如模擬物、抑制劑）在體內(nèi)易被核酸酶降解，且缺乏組織特異性，導(dǎo)致遞送效率低、脫靶效應(yīng)明顯。雖然納米遞送系統(tǒng)（如LNP、外泌體）取得了進(jìn)展，但仍面臨大規(guī)模生產(chǎn)的成本控制、長(zhǎng)期使用的安全性評(píng)估等問(wèn)題。此外，miRNA的脫靶效應(yīng)可能導(dǎo)致非預(yù)期的不良反應(yīng)（如免疫過(guò)度激活），需通過(guò)優(yōu)化序列設(shè)計(jì)和遞送系統(tǒng)來(lái)降低風(fēng)險(xiǎn)。####3.臨床轉(zhuǎn)化中的標(biāo)準(zhǔn)化與驗(yàn)證問(wèn)題miRNA作為生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)，需要在大樣本、多中心的臨床隊(duì)列中進(jìn)行驗(yàn)證，以確定其敏感度、特異度和臨床價(jià)值。然而，目前不同研究采用的樣本類型（血液/組織）、檢測(cè)方法（qRT-PCR/測(cè)序/芯片）和數(shù)據(jù)分析標(biāo)準(zhǔn)不一致，導(dǎo)致結(jié)果可比性差。此外，miRNA的表達(dá)受年齡、性別、合并癥等多種因素影響，需建立標(biāo)準(zhǔn)化的校正模型。###（二）未來(lái)研究方向與展望##五、挑戰(zhàn)與展望：從基礎(chǔ)研究到臨床轉(zhuǎn)化的跨越####1.多組學(xué)整合解析miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)通過(guò)整合miRNA測(cè)序、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)數(shù)據(jù)，構(gòu)建“miRNA-靶基因-信號(hào)通路-免疫細(xì)胞”的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，系統(tǒng)揭示miRNA在免疫聯(lián)合治療中的作用機(jī)制。例如，單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)可解析不同免疫細(xì)胞亞群中miRNA的表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞特異性的miRNA調(diào)控靶點(diǎn)，為精準(zhǔn)治療提供依據(jù)。####2.個(gè)性化miRNA調(diào)控策略的開發(fā)基于患者的腫瘤基因組、miRNA表達(dá)譜和TME特征，制定個(gè)性化的miRNA靶向治療方案。例如，對(duì)于miR