ICS65.020.40B61DB23黑龍江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局IDB23/T2323—2019本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1—2009的編寫規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省林業(yè)和草原局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：黑龍江省林業(yè)科學(xué)研究所、黑龍江省林業(yè)監(jiān)測(cè)規(guī)劃院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：田新華、李京、周偉政、張玲、盧慧穎、李艷霞、張妍妍、張建瑛、姜天瑞、溫愛亭、李念森、黃俊杰、毛洪波、于臘梅、于曉杰、韓賢波、白吉福、徐英華。DB23/T2323—2019軟棗獼猴桃組培快繁育苗技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了軟棗獼猴桃（ActinidiaargutaPlaneh.）組培快繁育苗技術(shù)的儀器設(shè)備、環(huán)境和設(shè)備消毒、培養(yǎng)基制備、外植體培養(yǎng)、煉苗與移栽、生產(chǎn)檔案。本標(biāo)準(zhǔn)適用于軟棗獼猴桃組培快繁育苗。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程DB23/T1589藍(lán)靛果種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3儀器設(shè)備應(yīng)符合DB23/T1589的規(guī)定。4環(huán)境和設(shè)備消毒4.1接種室消毒接種前用紫外燈照射30min。4.2培養(yǎng)室消毒每周用臭氧消毒40min。4.3超凈工作臺(tái)的消毒接種前用紫外燈照射30min并用70％酒精擦拭臺(tái)面，定期清洗超凈工作臺(tái)過濾膜。4.4接種器具的消毒使用前將槍式鑷子、解剖剪、培養(yǎng)皿、解剖刀進(jìn)行高溫蒸汽消毒；接種過程中采用酒精燈灼燒消毒。5培養(yǎng)基制備5.1母液配制按照LY/T1882的規(guī)定執(zhí)行。5.2培養(yǎng)基配制DB23/T2323—2019按照LY/T1882的規(guī)定執(zhí)行。誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+6-BA0.5mg/L+ZT11.0mg/L+ZT0.5mg/L；生根培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+IBA0.2mg/L。5.3培養(yǎng)基滅菌采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105MPa、溫度121℃條件下滅菌20min。鍋內(nèi)的滅菌物以不超過鍋容量的3/4為宜。5.4培養(yǎng)基保存滅菌后的培養(yǎng)基放入接種室，常溫條件下宜在7d內(nèi)使用，2℃~4℃條件下14d內(nèi)使用。培養(yǎng)基應(yīng)保存于潔凈環(huán)境中，避免陽(yáng)光直射。6外植體培養(yǎng)6.1外植體的選擇選擇生長(zhǎng)健壯、無病的植株作為采樣母株，剪取當(dāng)年生的半木質(zhì)化的莖段作為外植體，采樣時(shí)間宜選擇晴天或露水干后。6.2外植體滅菌先將外植體用洗滌劑作表面清洗，再將外植體用流水沖洗30min后，將外植體放入消毒瓶中。把裝有外植體的消毒瓶放入超凈工作臺(tái)，打開消毒瓶倒入0.1%升汞并搖晃，浸泡消毒3min取出，用無菌水沖洗5次；再用無菌水浸泡40min，用無菌濾紙吸干外植體表面的水分。6.3外植體接種與誘導(dǎo)培養(yǎng)將培養(yǎng)瓶的封口膜取下，瓶口在酒精燈外焰上旋轉(zhuǎn)灼燒消毒。槍式鑷子在酒精燈上灼燒消毒并冷卻后，將表面消毒后的外植體用手術(shù)剪刀剪去兩端，剪取長(zhǎng)約1.0cm左右的帶有單個(gè)腋芽的莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基。每個(gè)培養(yǎng)瓶放3個(gè)外植體，接種后蓋上封口膜，并標(biāo)注日期。培養(yǎng)35d后進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)。6.4繼代增殖培養(yǎng)外植體經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)生成叢生芽，轉(zhuǎn)接至繼代增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)。培養(yǎng)35d后再進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)。6.5生根培養(yǎng)選取培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)度1.5cm～2.0cm生長(zhǎng)健壯的芽接種至生根培養(yǎng)基中，組培苗生長(zhǎng)過程中在基部會(huì)出現(xiàn)淺綠色嫩根，培養(yǎng)35d后平均生根數(shù)3條以上，根長(zhǎng)在1.0cm以上即可煉苗。6.6組培苗培養(yǎng)條件培養(yǎng)室的溫度控制在24±2℃,相對(duì)空氣濕度控制在70%～80%，光照強(qiáng)度為2000Lux～3000Lux，光照時(shí)間為12h/d。7煉苗與移栽DB23/T2323—20197.1組培苗煉苗將裝組培苗的培養(yǎng)瓶從培養(yǎng)架上輕輕取下，迅速轉(zhuǎn)移到日光溫室中，自然散射光下煉苗，溫度控制在20℃~25℃,每天中午在培養(yǎng)瓶周圍噴灑霧水，封口煉苗3d～5d。封口煉苗后打開瓶口，向瓶?jī)?nèi)注入超過培養(yǎng)基表面0.5cm高的自來水，溫度控制在20℃~25℃,煉苗1d～2d后即可移栽。7.2移栽用手指或鑷子輕輕取出組培苗，用清水洗去苗基部的培養(yǎng)基，速蘸0.5%高錳酸鉀溶液消毒，移栽至裝有黑壤土和粗河沙（混合比例為2：1）的混合基質(zhì)的育苗盤中。育苗盤。7.3移栽苗管理育苗期保持育苗基質(zhì)見干見濕，育苗水分管理按照GB/T6001