一、前言演講人目錄01.前言07.健康教育03.護理評估05.護理目標與措施02.病例介紹04.護理診斷06.并發(fā)癥的觀察及護理08.總結(jié)醫(yī)學類器官培養(yǎng)防疫流行病學教學課件01前言前言作為一名在感染科工作了十余年的臨床護理人員，我見證了醫(yī)學技術(shù)與防疫手段的迭代升級。2020年新冠疫情暴發(fā)后，流行病學研究與傳染病防控的緊迫性被推至歷史高位——如何快速模擬病毒致病機制？怎樣高效驗證藥物或疫苗的實際效果？傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)或動物模型逐漸顯現(xiàn)出局限性：前者無法還原人體組織的復雜性，后者因種屬差異導致結(jié)果外推性不足。正是在這樣的背景下，類器官（Organoid）技術(shù)進入了我們的視野。類器官是通過干細胞定向分化或組織祖細胞三維培養(yǎng)形成的微型器官結(jié)構(gòu)，能高度模擬人體器官的生理功能與病理特征。在防疫流行病學領(lǐng)域，它像一把“鑰匙”，既能精準復現(xiàn)病毒感染人體的動態(tài)過程，又能為藥物篩選、疫苗評價提供更接近真實人體的實驗平臺。作為一線護理工作者，我們不僅要配合醫(yī)生完成類器官培養(yǎng)的基礎(chǔ)操作，更要在患者管理、感染控制、并發(fā)癥預防等環(huán)節(jié)發(fā)揮關(guān)鍵作用。今天，我將結(jié)合一例新冠病毒感染患者的類器官培養(yǎng)案例，與大家分享相關(guān)護理經(jīng)驗。02病例介紹病例介紹2022年3月，我們科室收治了一名58歲的男性患者張某（化名）。他因“發(fā)熱伴咳嗽7天，加重伴氣促3天”入院，胸部CT提示雙肺多發(fā)磨玻璃影，新冠病毒核酸檢測陽性，診斷為“新型冠狀病毒肺炎（普通型）”?；颊哂懈哐獕翰∈?年，長期口服氨氯地平，無吸煙史，入院時體溫38.5℃，血氧飽和度92%（未吸氧），呼吸頻率24次/分，實驗室檢查顯示淋巴細胞計數(shù)0.8×10?/L（正常1.1-3.2），C反應蛋白（CRP）45mg/L（正常＜10）?？紤]到患者存在基礎(chǔ)疾病，且當時奧密克戎變異株傳播力強、致病機制尚不明確，經(jīng)多學科會診后，我們團隊決定為其進行肺組織類器官培養(yǎng)。目的有三：一是通過類器官模擬病毒在患者體內(nèi)的復制與損傷過程，分析其個體易感性；二是利用類器官測試不同抗病毒藥物（如阿茲夫定、Paxlovid）的敏感性，指導精準用藥；三是為流行病學研究提供本地毒株的感染特征數(shù)據(jù)。病例介紹類器官培養(yǎng)的具體流程如下：經(jīng)患者及家屬知情同意后，在纖維支氣管鏡下取少量右下肺外周組織（約2mm3），立即置于含抗生素的運輸培養(yǎng)基中，30分鐘內(nèi)送至實驗室。實驗室通過酶消化法分離上皮祖細胞，接種于Matrigel基質(zhì)膠中，加入含表皮生長因子（EGF）、成纖維細胞生長因子（FGF）等的專用培養(yǎng)基，在37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。約7-10天后，類器官形成直徑200-500μm的囊性結(jié)構(gòu)，經(jīng)免疫熒光染色確認表達肺上皮細胞標志物（如SPC、CC10），即完成模型構(gòu)建。03護理評估護理評估類器官培養(yǎng)的特殊性，要求我們的護理評估必須兼顧“患者”與“模型”兩個維度。患者生理與心理狀態(tài)評估1患者入院時處于疾病急性期，發(fā)熱、咳嗽、氣促等癥狀明顯，且因?qū)︻惼鞴倥囵B(yǎng)技術(shù)不了解，表現(xiàn)出焦慮（SAS焦慮自評量表得分52分，提示輕度焦慮）。我們重點評估了以下指標：2生命體征：體溫波動（37.8-38.9℃）、呼吸頻率（22-26次/分）、血氧飽和度（未吸氧時90-94%）；3實驗室指標：淋巴細胞計數(shù)、CRP、D-二聚體（監(jiān)測炎癥與凝血狀態(tài)）、肝腎功能（評估藥物耐受性）；4癥狀主訴：咳嗽頻率（夜間加重）、痰液性狀（白色黏痰，量約10ml/日）、胸痛（深呼吸時加重）；5心理狀態(tài)：反復詢問“取組織會不會加重病情？”“類器官能幫我治病嗎？”，睡眠質(zhì)量差（每日入睡困難，睡眠時長＜5小時）。類器官培養(yǎng)環(huán)境與操作風險評估過程監(jiān)控：培養(yǎng)箱溫度（37±0.5℃）、CO?濃度（5±0.2%）、濕度（90±5%）的實時記錄是否完整（近1周數(shù)據(jù)無異常波動）。05人員資質(zhì)：參與培養(yǎng)的護士與實驗員是否經(jīng)過嚴格培訓（考核內(nèi)容包括無菌操作、基質(zhì)膠使用、類器官形態(tài)觀察等）；03類器官對培養(yǎng)環(huán)境的無菌性、營養(yǎng)條件、溫度濕度高度敏感，任何微小污染都可能導致模型失敗。我們聯(lián)合實驗室人員進行了以下評估：01材料安全性：培養(yǎng)基、基質(zhì)膠是否在有效期內(nèi)（均未超過生產(chǎn)日期6個月），是否進行過內(nèi)毒素檢測（內(nèi)毒素＜0.1EU/ml）；04操作環(huán)境：細胞培養(yǎng)室是否達到萬級潔凈標準（經(jīng)檢測，沉降菌≤3CFU/皿30min），生物安全柜是否定期校驗（高效過濾器無泄漏）；0204護理診斷護理診斷基于評估結(jié)果，我們梳理出以下核心護理診斷：體溫過高與病毒感染及炎癥反應有關(guān)依據(jù)：患者入院時體溫38.5℃，CRP升高，淋巴細胞計數(shù)降低，符合病毒感染急性期表現(xiàn)。焦慮與疾病不確定性及對類器官技術(shù)認知不足有關(guān)（四）知識缺乏（特定的）與患者及家屬對類器官培養(yǎng)目的、配合事項不了解有關(guān)依據(jù)：患者多次詢問“取組織疼不疼？”“培養(yǎng)需要多久？”，家屬擔心“會不會影響后續(xù)治療”。（三）有感染的危險（模型污染）與類器官培養(yǎng)過程中無菌操作不規(guī)范有關(guān)依據(jù)：培養(yǎng)環(huán)境需嚴格無菌，任何操作失誤（如手消毒不徹底、超凈臺暴露時間過長）都可能導致細菌或真菌污染。依據(jù)：SAS量表得分52分，主訴“擔心檢查風險”“害怕治療無效”，睡眠質(zhì)量差。在右側(cè)編輯區(qū)輸入內(nèi)容05護理目標與措施護理目標與措施針對上述診斷，我們制定了“患者-模型”雙維度的護理目標與具體措施。體溫過高目標：3日內(nèi)體溫降至37.5℃以下，炎癥指標（CRP）呈下降趨勢。措施：物理降溫：每4小時監(jiān)測體溫，體溫＞38.5℃時予溫水擦?。ū荛_心前區(qū)、腹部），冰袋置于腋窩、腹股溝（每次不超過30分鐘）；藥物干預：遵醫(yī)囑予對乙酰氨基酚0.5g口服（體溫＞38.5℃且患者自覺不適時），用藥后30分鐘復測體溫并記錄；補液支持：鼓勵患者每日飲水1500-2000ml（心腎功能正常），必要時靜脈補充生理鹽水，維持水、電解質(zhì)平衡；環(huán)境調(diào)節(jié)：保持病房溫度22-24℃，濕度50-60%，減少蓋被厚度，避免捂汗。焦慮目標：1周內(nèi)SAS量表得分降至45分以下，患者能主動表達需求，睡眠質(zhì)量改善（每日睡眠時長＞6小時）。措施：認知干預：用通俗語言解釋類器官培養(yǎng)的原理（“就像給您的肺組織種個‘小樹苗’，在實驗室里觀察病毒怎么‘欺負’它，再找辦法保護您”），強調(diào)取材僅取2mm3組織，風險極低（類似常規(guī)活檢）；情感支持：每日晨間護理時留出10分鐘傾聽患者主訴，對其擔憂表示理解（“我能感受到您很擔心，換作是我也會緊張”）；放松訓練：指導患者睡前進行5分鐘腹式呼吸（吸氣4秒，屏氣2秒，呼氣6秒），播放輕音樂（患者選擇的古典樂）輔助入睡；焦慮家屬參與：邀請家屬共同學習類器官相關(guān)科普視頻（5分鐘動畫版），鼓勵家屬陪伴時多聊日常趣事，轉(zhuǎn)移患者注意力。有感染的危險（模型污染）目標：類器官培養(yǎng)周期內(nèi)（2周）污染率為0，鏡下觀察無細菌/真菌團塊。措施：操作前準備：參與培養(yǎng)的護士需更換無菌服、戴雙層手套（內(nèi)層丁腈手套，外層乳膠手套），手消毒采用“七步洗手法+快速手消毒液”（作用時間≥30秒）；過程控制：組織取材后立即置于含青霉素（100U/ml）、鏈霉素（100μg/ml）的運輸培養(yǎng)基，30分鐘內(nèi)送達實驗室；培養(yǎng)基配制時嚴格無菌操作（超凈臺內(nèi)操作，物品距邊緣≥15cm），基質(zhì)膠需在冰上解凍（避免溫度過高導致凝固）；環(huán)境監(jiān)測：每日培養(yǎng)前用紫外線消毒超凈臺30分鐘（照射強度≥70μW/cm2），培養(yǎng)箱每周用75%酒精擦拭內(nèi)壁，每月做沉降菌檢測（目標≤1CFU/皿30min）；有感染的危險（模型污染）應急處理：若鏡下發(fā)現(xiàn)類器官周圍有細菌（桿狀或球狀亮點）或真菌（絲狀結(jié)構(gòu)），立即標記污染孔，丟棄該孔培養(yǎng)物，同時追溯操作環(huán)節(jié)（如是否在超凈臺外暴露時間過長），全員復盤改進。知識缺乏目標：患者及家屬能復述類器官培養(yǎng)的目的（至少2點）、配合事項（至少3項）。措施：圖文教育：制作“類器官培養(yǎng)小手冊”，用漫畫+短句說明（如“取材位置：右下肺外周，不影響呼吸”“培養(yǎng)時間：約2周，期間正常治療不中斷”）；一對一講解：取材前30分鐘，由責任護士再次確認患者理解（提問：“您知道為什么要做這個培養(yǎng)嗎？”“取材后需要注意什么？”），解答遺漏問題；家屬同步：告知家屬“培養(yǎng)期間患者需保持良好營養(yǎng)（多吃雞蛋、魚肉），有助于組織修復”“避免在病房內(nèi)噴灑香水（可能影響實驗室檢測）”。06并發(fā)癥的觀察及護理并發(fā)癥的觀察及護理類器官培養(yǎng)與患者治療過程中，可能出現(xiàn)兩類并發(fā)癥：一是模型相關(guān)并發(fā)癥（如污染、類器官死亡），二是患者相關(guān)并發(fā)癥（如取材后出血、感染加重）。模型相關(guān)并發(fā)癥污染：最常見的是細菌污染（培養(yǎng)24-48小時后培養(yǎng)基變渾濁，鏡下見活動微生物），其次是真菌污染（培養(yǎng)3-5天后出現(xiàn)白色絮狀物）。觀察：每日鏡檢類器官形態(tài)（正常應為透亮囊性結(jié)構(gòu)，邊緣清晰），同時觀察培養(yǎng)基顏色（正常為淡紅色，污染后可能變黃或變紫）。護理：一旦確認污染，立即終止該批次培養(yǎng)，記錄污染時間、可能原因（如操作時間過長、培養(yǎng)基過期），并對環(huán)境、器械重新消毒（如超凈臺用3%過氧化氫噴霧消毒）。類器官死亡：表現(xiàn)為結(jié)構(gòu)塌陷、細胞皺縮，可能因培養(yǎng)基營養(yǎng)不足（如生長因子濃度過低）或機械損傷（如吹打力度過大）導致。觀察：鏡下觀察類器官折光性（正常折光均勻，死亡后折光減弱），臺盼藍染色（死亡細胞被染成藍色）。32145模型相關(guān)并發(fā)癥護理：調(diào)整培養(yǎng)基配方（如增加EGF濃度至50ng/ml），優(yōu)化操作手法（吹打時用1ml移液器，力度輕柔，避免反復抽吸）。患者相關(guān)并發(fā)癥取材后出血：纖維支氣管鏡取材可能導致少量咯血（痰中帶血），罕見大咯血（＞50ml/次）。01觀察：取材后24小時內(nèi)每2小時觀察痰液顏色（正常為白色或淡紅色，若出現(xiàn)鮮紅色血痰需警惕），監(jiān)測生命體征（心率＞100次/分、血壓下降可能提示出血）。02護理：少量咯血時安慰患者（“這是正常現(xiàn)象，就像抽血后針孔滲血，很快會好”），指導患側(cè)臥位；大咯血時立即通知醫(yī)生，保持氣道通暢，準備吸引器及止血藥物（如垂體后葉素）。03感染加重：表現(xiàn)為體溫持續(xù)＞39℃、血氧飽和度＜90%（吸氧狀態(tài)）、CRP＞100mg/L，可能合并細菌或真菌感染。04患者相關(guān)并發(fā)癥觀察：每日聽診雙肺呼吸音（濕啰音增多提示感染進展），復查胸部CT（病灶是否擴大），痰培養(yǎng)（明確致病菌）。護理：遵醫(yī)囑調(diào)整抗生素（如加用莫西沙星），加強氧療（鼻導管吸氧2-4L/min，維持血氧＞95%），指導有效咳嗽（深吸氣后用力咳出痰液）。07健康教育健康教育健康教育是連接醫(yī)療、護理與患者的重要橋梁，在類器官培養(yǎng)的特殊場景下，我們從“患者-醫(yī)護-公眾”三個層面展開?；颊呒凹覍俳逃夹g(shù)認知：用“類比法”解釋類器官（“就像給您的肺做個‘縮小版模型’，醫(yī)生在模型上測試藥物，就知道哪種藥對您最有效”），強調(diào)“取材是微創(chuàng)操作，不會影響肺功能”；01配合要點：取材前4小時禁食（避免誤吸），取材后2小時內(nèi)禁水（待咽喉反射恢復），培養(yǎng)期間保持規(guī)律作息（22:00前入睡）、均衡飲食（每日蛋白質(zhì)攝入≥1g/kg體重）；02隨訪指導：培養(yǎng)結(jié)果出來后（約2周），醫(yī)生會根據(jù)模型藥物敏感性調(diào)整治療方案（如發(fā)現(xiàn)Paxlovid對患者類器官抑制率達85%，則優(yōu)先使用），需按時復診（出院后2周、1個月復查胸部CT）。03醫(yī)護人員教育操作規(guī)范：組織“類器官培養(yǎng)護理要點”專題培訓，內(nèi)容包括無菌操作流程（考核手消毒合格率需100%）、基質(zhì)膠使用技巧（解凍時避免反復凍融）、類器官形態(tài)觀察（正常與異常的鏡下特征）；01防疫知識：強調(diào)類器官培養(yǎng)的生物安全（新冠病毒陽性組織需在BSL-2實驗室操作，廢棄物經(jīng)高壓蒸汽滅菌后處理），醫(yī)護人員需嚴格防護（穿戴N95口罩、護目鏡、雙層手套）；02溝通技巧：培訓“共情式語言”（如“我知道您很擔心，但我們會全程監(jiān)測，確保安全”），避免使用專業(yè)術(shù)語（如“祖細胞”“基質(zhì)膠”），用患者能理解的語言解釋。03公眾科普通過科室公眾號發(fā)布“類器官：抗疫的‘微型戰(zhàn)場’”科普文章，用案例說明類器官如何幫助理解病毒致病機制（如奧密克戎在類器官中的復制速度比原始株快3倍），消除“類器官=克隆人”的誤解，強調(diào)其在精準醫(yī)療中的應用價值。08總結(jié)總結(jié)回顧這例類器官培養(yǎng)的護理實踐，我深刻體會到：在防疫流行病學與精準醫(yī)學交叉的領(lǐng)域，護理工作已從“執(zhí)行醫(yī)囑”升級為“全流程協(xié)同”——我們不僅要關(guān)注患者的生理與心理需求，更要深度參與類器官培養(yǎng)的質(zhì)量控制；不僅要掌握傳統(tǒng)護理技能，更要學習細胞培養(yǎng)、生物安全等新興知識。張某的類器官培養(yǎng)最終成功，模型顯示其感染的奧密克戎變異株對阿茲