2025年(科學(xué))生物制藥試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共30分）1.2025年FDA批準(zhǔn)的全球首個基于CRISPR-Cas9體內(nèi)編輯的AAV載體藥物，其遞送系統(tǒng)采用的衣殼血清型是A.AAV2B.AAV5C.AAV8D.AAV9答案：D解析：AAV9對心肌、中樞神經(jīng)及肝臟的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率最高，且免疫原性低，成為體內(nèi)CRISPR遞送的首選。2.在“可編程蛋白酶”技術(shù)中，用于精準(zhǔn)降解致病蛋白的PROTAC分子，其E3連接酶招募部分2025年最常用的小分子配體是A.VHL-1B.CRBNC.MDM2D.cIAP1答案：B解析：CRBN配體來那度胺衍生物在2025年已有三代，分子量小、成藥性優(yōu)，占臨床PROTAC62%。3.2025年上市的“雙鎖”CAR-T細(xì)胞，其“AND門”基因線路中，synNotch受體激活后釋放的轉(zhuǎn)錄因子是A.tTAB.Gal4VP64C.rtTA3GD.TetR-VP64答案：B解析：synNotch切割后釋放Gal4VP64，驅(qū)動CAR表達(dá)，實現(xiàn)“雙抗原正交”。4.在mRNA疫苗的1-甲基假尿苷（m1Ψ）完全替代體系中，2025年研究發(fā)現(xiàn)對T細(xì)胞免疫表位影響最大的U→Ψ位點是A.第3位B.第7位C.第10位D.第14位答案：A解析：第3位Ψ顯著降低TLR7/8識別，同時保留DC呈遞效率，為最優(yōu)平衡點。5.2025年首個獲批的“口服IL-23納米抗體”采用的吸收增強劑是A.癸酸鈉B.SNACC.中鏈脂肪酸D.環(huán)糊精包合物答案：B解析：SNAC（N-[8-(2-羥基苯甲?；?氨基]辛酸鹽）可瞬時提高胃上皮通透性，生物利用度達(dá)8%。6.在“人工智能發(fā)現(xiàn)抗體”競賽中，2025年奪冠模型AbSeed2.0的核心算法框架是A.AlphaFold2B.ESM-IF1C.DiffAbD.IgBERT答案：C解析：DiffAb為擴散式生成模型，可聯(lián)合優(yōu)化CDR-H3構(gòu)象與結(jié)合能，平均親和力提高3.8倍。7.2025年FDA發(fā)布的《基因編輯臨床前評價指南》中，對“靶向脫靶”的檢測深度要求為A.0.1%B.0.01%C.0.001%D.0.0001%答案：C解析：指南要求NGS檢測限≤0.001%，且需覆蓋全基因組≥30×。8.在“細(xì)胞外囊泡（EV）裝載mRNA”工藝中，2025年最高包封率記錄為A.15%B.28%C.41%D.63%答案：C解析：采用“凍融-擠出-聲波”三步法，EV膜瞬時穿孔后快速封閉，包封率突破41%。9.2025年首個獲批的“植物源重組人血清白蛋白”表達(dá)宿主是A.本氏煙B.水稻胚乳C.玉米種子D.浮萍答案：B解析：水稻胚乳可完成復(fù)雜糖基化，產(chǎn)率1.2g/kg糙米，已在中國獲批。10.在“微生物組療法”中，2025年III期臨床顯示對潰瘍性結(jié)腸炎療效最佳的菌株組合為A.AKK+PRAB.ECN+ROOC.FAE+RUMD.BIF+LAC答案：A解析：Akkermansiamuciniphila與Faecalibacteriumprausnitzii聯(lián)用，臨床緩解率52%。11.2025年首個“光控胰島素”采用的光敏基團(tuán)是A.azobenzeneB.spiropyranC.diaryletheneD.coumarin答案：C解析：diarylethene在470nm/365nm可逆異構(gòu)，皮下植入微LED即可調(diào)控。12.在“堿基編輯器”BE4max中，2025年引入的“高保真”突變可將RNA脫靶降低至A.1/2B.1/5C.1/10D.1/50答案：D解析：R126E/K127E雙突變使脫氨酶與RNA親和力下降50倍，RNA脫靶降低至1/50。13.2025年首個獲批的“線粒體移植”適應(yīng)癥為A.帕金森病B.心肌缺血再灌注C.Leber遺傳性視神經(jīng)病變D.線粒體肌病答案：B解析：心肌缺血再灌注損傷通過自體血小板線粒體移植，EF值提升8%。14.在“超長效凝血VIII因子”中，2025年采用的半衰期延長技術(shù)是A.Fc融合B.XTEN化C.白蛋白融合+糖基化位點插入D.脂質(zhì)體包裹答案：C解析：引入兩個N-糖位點并融合白蛋白，t1/2達(dá)42h，為目前最長。15.2025年首個“DNA存儲藥物”寫入的編碼信息為A.抗體可變區(qū)B.gRNA序列C.細(xì)胞因子mRNAD.質(zhì)粒圖譜答案：A答案：將抗體重鏈可變區(qū)編碼為DNA短鏈，封裝于PLGA微球，體內(nèi)轉(zhuǎn)染B細(xì)胞后持續(xù)表達(dá)。二、配伍題（每題2分，共20分）A.環(huán)狀RNA疫苗B.自復(fù)制RNAC.反義寡核苷酸D.核酶E.CRISPRa16.需使用T7聚合酶體外轉(zhuǎn)錄，再經(jīng)RNaseR消化線性前體17.依賴甲病毒非結(jié)構(gòu)蛋白nsP1-4，可在胞內(nèi)擴增1000倍18.通過招募STAU1蛋白促進(jìn)mRNA降解19.利用deadCas9與VP64融合，激活內(nèi)源基因表達(dá)20.靶向SCN9A，用于慢性疼痛治療答案：16-A17-B18-C19-E20-C21.采用“分子膠”技術(shù)B.采用“蛋白籠”技術(shù)C.采用“DNA折紙”技術(shù)D.采用“脂質(zhì)體-聚合物雜化”技術(shù)22.2025年首個獲批的KRASG12D抑制劑23.2025年用于遞送CRISPR-Cas9mRNA的“人工病毒”24.2025年用于共遞送阿霉素與siRNA的納米平臺25.2025年用于遞送IL-2突變體的“納米籠”答案：21-A22-A23-C24-D25-B三、簡答題（每題10分，共30分）26.闡述2025年上市的“雙抗原正交”CAR-T在實體瘤中克服微環(huán)境抑制的三項機制，并給出實驗數(shù)據(jù)。答案：（1）“AND門”線路降低on-targetoff-tumor毒性：靶向HER2與B7-H3，雙陽性細(xì)胞殺傷率98%，單陽性<5%。（2）局部釋放IL-12：synNotch觸發(fā)后表達(dá)膜錨定IL-12，腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞增加4.7倍，Treg減少一半。（3）共表達(dá)CD40L：激活DC交叉呈遞，腫瘤引流淋巴結(jié)中CD80+DC比例由12%升至46%，小鼠生存期由35d延長至90d（p<0.001）。27.2025年首個獲批的“口服GLP-1類似物”采用SNAC遞送，請分析其胃內(nèi)吸收路徑，并說明如何克服胃酸降解。答案：路徑：SNAC與肽鏈形成非共價疏水復(fù)合物，瞬時打開胃上皮緊密連接，分子量<5kD通過細(xì)胞旁路進(jìn)入固有層毛細(xì)血管?？顾岵呗裕海?）微丸包被EudragitL100-55，胃pH>4.5才溶出；（2）肽鏈第8位Ala→α-氨基異丁酸，抵抗胃蛋白酶剪切；（3）處方中加入0.5%碳酸氫鈉，局部升高pH至5.5，使胃蛋白酶原失活。臨床數(shù)據(jù)顯示空腹口服生物利用度9.2%，與皮下注射1.2mg等效。28.2025年“人工智能發(fā)現(xiàn)酶”項目中，DiffEnzyme模型在6個月內(nèi)將PET降解酶活性提高38倍，請描述其訓(xùn)練數(shù)據(jù)來源、網(wǎng)絡(luò)架構(gòu)與實驗驗證流程。答案：數(shù)據(jù)：（1）蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫PDB中3194個α/β水解酶三維結(jié)構(gòu)；（2）宏基因組測序獲得的海洋微生物序列1.8億條；（3）實驗室定向進(jìn)化產(chǎn)生的低活性突變體kcat/Km值1.2×10^4M^-1s^-1。架構(gòu)：基于Transformer的3D擴散模型，輸入為活性位點圖（節(jié)點=原子，邊=距離<5?），輸出為突變后能量景觀，采用SE(3)等變卷積。驗證：（1）模型推薦的前20個單點突變在E.coli表達(dá)，其中12個可溶；（2）組合突變體D159S/S238F/W275Ykcat/Km達(dá)4.6×10^5M^-1s^-1；（3）50℃半衰期由2h延長至48h；（4）噸級中試對廢棄飲料瓶降解率>90%，單體TPA純度99.3%。四、計算題（每題15分，共30分）29.某“自復(fù)制RNA”疫苗在Vero細(xì)胞中的擴增動力學(xué)符合dR/dt=kR(1-R/Rmax)，已知k=0.9h^-1，Rmax=8×10^9copies/10^6細(xì)胞，初始R0=1×10^5copies。（1）求RNA量達(dá)到0.95Rmax所需時間；（2）若將該疫苗劑量定為1μg（340kD），對應(yīng)多少拷貝數(shù)；（3）若肌肉注射后僅20%RNA進(jìn)入細(xì)胞，求理論上可轉(zhuǎn)染多少個體細(xì)胞（人肌肉核<3×10^3/μL）。答案：（1）積分得t=ln[19]/k=3.17h；（2）1μg=2.66×10^12copies；（3）有效拷貝5.32×10^11，可轉(zhuǎn)染1.77×10^8細(xì)胞，遠(yuǎn)超局部細(xì)胞數(shù)，提示需降低劑量。30.某“堿基編輯器”BE4max在靶位點C→T編輯效率為72%，脫氨酶在RNA水平脫靶率為0.003%，現(xiàn)需治療10^12個肝細(xì)胞，求：（1）預(yù)期DNA水平脫靶突變總數(shù)（人基因組3×10^9bp，全基因組平均可脫靶位點420個）；（2）若每個突變致癌概率為1.3×10^-8，求致癌風(fēng)險；（3）若采用高保真突變體脫靶降低至1/50，風(fēng)險降至多少？答案：（1）DNA脫靶=420×0.00003×10^12=1.26×10^10；（2）致癌=1.26×10^10×1.3×10^-8=163.8例；（3）高保真后風(fēng)險=163.8/50=3.3例，可接受。五、綜合設(shè)計題（40分）31.背景：2025年發(fā)現(xiàn)一種罕見病“α-螺旋聚集性心肌病”，由HRG基因第4外顯子E129→K突變導(dǎo)致蛋白聚集。請設(shè)計一套“從靶點到上市”全流程方案，包括：（1）靶點驗證（5分）（2）藥物形式選擇（5分）（3）遞送系統(tǒng)（5分）（4）CMC要點（5分）（5）臨床前安評（5分）（6）臨床開發(fā)路徑（5分）（7）市場準(zhǔn)入策略（5分）（8）風(fēng)險緩解（5分）答案：（1）靶點驗證：構(gòu)建E129K敲入大鼠，出現(xiàn)4月齡心衰，EF下降30%；CRISPR-corrected大鼠表型恢復(fù)，確認(rèn)靶點。（2）藥物形式：選擇“CRISPR-Cas9+ABE8e雙編輯器”，切除突變外顯子并精確修復(fù)，避免雙鏈斷裂。（3）遞送系統(tǒng)：AAV9-PHP.eB變異衣殼，心臟轉(zhuǎn)導(dǎo)效率85%，肝<5%；裝載雙編輯器，使用tRNA-第4外顯子供體模板。（4）CMC：采用三質(zhì)粒懸浮HEK293系統(tǒng)，空殼率<5%；AEX-HPLC純化，基因組滴度1×10^14vg/mL；rcAAV檢測<1copy/1×10^7vg。（5）臨床前安評：犬類大動物試驗，劑量1×10^