202420247PAGEPAGE10/計數(shù)方法包括平皿法、薄膜過濾法和最可能數(shù)法（MostProbable-MethodMPN法。MPN物污染量很小的供試品，MPN表1需氧菌總數(shù)計霉菌和酵母菌(Staphylococcus30～18～243(Pseudomonas〔30～18～24353天，3(Bacillus30～18～243(Candida20～2～330～5天，溫度20～25℃，5100cfu培養(yǎng)基（MPN法5天，接種量不20～5(Aspergillus20～5～730～5天，溫度20～25℃，5100cfu培養(yǎng)基（MPN法5天，接種量不20～5菌 試驗用菌株的傳代次數(shù)不得超過5代（從菌種保藏中心獲得的干燥菌0代1菌液制 按表1規(guī)定程序培養(yǎng)各試驗菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單或或 80800.9%0.05%0.05%（ml/ml）80pH7.0無菌氯化鈉-0.05%0.05%（ml/ml）800.9%黑曲霉孢子懸液。取各試驗菌的新鮮培養(yǎng)物用黑曲霉孢子懸液。取各試驗菌的新鮮培養(yǎng)物用pH7.0無菌氯化鈉-pH7.2pH7.20.9%長。如陰性對照有菌生長，應進行偏差每批1100cfu的菌液至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管胨瓊脂培養(yǎng)基平板或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板122個平板。被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應在0.5～2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應與對照培養(yǎng)基上的菌落一致；被檢液體培養(yǎng)基1.1水溶性供試 取供試品用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或pH7.2無1:10的pH6～810倍系列水不溶性非油脂類供試 取供試品用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液pH7.2無菌1:10的pH6～810倍系列油脂類供試 8045℃短時間內(nèi)形成乳狀液。必要時，用稀釋液或含上述表面活性劑的稀釋液進一步0.22μm膜劑供試 無菌1:10腸溶及結(jié)腸溶制劑供試 取供試品，加入pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液（用于溶制劑）pH7.6無菌磷酸鹽緩沖液（用于結(jié)腸溶制劑，置45℃中，振搖，使溶解，制成1:1010倍系列氣霧劑供試 貼劑、貼膏劑供試 品粘貼在一起。將處理后的供試品放入盛有適宜體積并含有表面活性劑（80或卵磷脂）3010倍系列2.接種和稀釋1液。所加菌液的體積應不超過供試液體積的1%試驗 100cfu供試品對照 菌液對照 3.（1）（2）中和劑或滅活劑（表2）

0.5～2

2EDTAββ（3）（4）4.1MPN 平皿法包括傾注法和涂布法。表1中每株試驗菌每種培養(yǎng)基2傾注 取照上“供試液的制備“接種和稀釋和“抗菌活性的去1ml90mm15～20ml超過1涂布 取適量（通常為15～20ml）溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂或90mm方法（如，在層流罩下或培養(yǎng)箱中干燥）0.1ml1 薄膜過濾法所采用的濾膜孔徑應不大于0.45μm，直徑一50mm500ml1000ml供試液適量（1g、1ml、1貼10cm2測定霉菌和酵母菌1（3）MPN MPN331ml331g、1ml10cm2表3g、ml10cm2MPN/gml10cm<10cm2或10cm2和5.0.5～2MPNcm2210g10ml；1010貼或100cm22個以上24丸，膜劑、貼劑和貼膏劑和的供試品4（1g1g1ml（指制劑）1mg10 10g10ml（1000ml1001200的供試品（11101mg1mg1010g10ml長。如果陰性對照有菌生長，應進行偏差1.平皿法平皿法包括傾注法和涂布法。除另有規(guī)定外，取規(guī)定量供試品，按計數(shù)用性試驗確認的方法進行供試液制備和菌數(shù)測定，每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備培養(yǎng)和計數(shù)除另有規(guī)定外，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板在30～35℃培養(yǎng)20～25℃5～7菌數(shù)報告規(guī) 需氧菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于300250cfu的稀釋級10050cfu1g、1ml10cm2供試品中所含的微生物菌1時，以<12.薄膜過濾法除另有規(guī)定外，取規(guī)定量供試品，液制備和菌數(shù)測定。1g、1ml、1貼10cm2所含的菌數(shù)較多時，可取適宜稀釋級的供試液，照方法適用性試驗確認的方法供試液加至適量稀釋液中，立即過濾，沖洗，沖洗后取出濾膜，菌面濾膜面1培養(yǎng)和計 培養(yǎng)條件和計數(shù)方法同平皿法，每張濾膜上的菌落數(shù)應不超菌數(shù)報告規(guī) 以相當于1g、1ml、1貼或10cm2供試品的菌落數(shù)報告菌數(shù)若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數(shù)（1g、1ml、1貼10cm2品，或<13.MPN取規(guī)定量供試品，按計數(shù)30～35℃3～531g、1ml10cm2需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)（包括真菌菌落數(shù)霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)（數(shù)生物限度要求，可使用含抗生素（如氯霉