lacz基因篩選原理試題（附答案）一、選擇題1.在基因工程中，LacZ基因常被用作標(biāo)記基因，其主要原因是（）A.LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶具有催化活性B.LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶在X-gal存在下產(chǎn)生藍(lán)色沉淀C.LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶在IPTG存在下產(chǎn)生藍(lán)色沉淀D.LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶具有抗性2.以下哪種情況會導(dǎo)致LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)白色菌落？（）A.LacZ基因被插入外源基因B.LacZ基因未插入外源基因C.LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶在X-gal存在下產(chǎn)生藍(lán)色沉淀D.LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶在IPTG存在下產(chǎn)生藍(lán)色沉淀3.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，以下哪種物質(zhì)可以用來檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞？（）A.IPTGB.X-galC.抗生素D.抗生素和IPTG4.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，以下哪種方法可以用來檢測目的基因是否成功表達(dá)？（）A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.免疫熒光5.以下哪種限制酶常用于LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中？（）A.EcoRIB.BamHIC.SalID.XbaI二、簡答題1.簡述LacZ基因篩選原理。2.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，如何判斷目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞？3.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，如何判斷目的基因是否成功表達(dá)？4.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，如何判斷目的基因是否發(fā)生突變？三、論述題1.論述LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)在基因工程中的應(yīng)用。2.分析LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問題及解決方法。四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，利用LacZ基因篩選原理，驗(yàn)證目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)步驟：（1）將目的基因克隆到載體上，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中，制備感受態(tài)細(xì)胞。（3）將感受態(tài)細(xì)胞與重組質(zhì)?；旌希M(jìn)行轉(zhuǎn)化。（4）將轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。（5）觀察菌落顏色，判斷目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞。五、試題答案一、選擇題1.B2.A3.D4.C5.A二、簡答題1.LacZ基因篩選原理：利用LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶在X-gal存在下產(chǎn)生藍(lán)色沉淀的特性，通過觀察菌落顏色，篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞。2.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，通過觀察菌落顏色，判斷目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞。若菌落為白色，說明目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞；若菌落為藍(lán)色，說明目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞。3.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，通過觀察菌落顏色，判斷目的基因是否成功表達(dá)。若菌落為白色，說明目的基因成功表達(dá)；若菌落為藍(lán)色，說明目的基因未成功表達(dá)。4.在LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中，通過觀察菌落顏色，判斷目的基因是否發(fā)生突變。若菌落為白色，說明目的基因發(fā)生突變；若菌落為藍(lán)色，說明目的基因未發(fā)生突變。三、論述題1.LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)在基因工程中的應(yīng)用：（1）篩選成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞；（2）檢測目的基因是否成功表達(dá)；（3）檢測目的基因是否發(fā)生突變；（4）研究基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制。2.LacZ基因篩選實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問題及解決方法：（1）問題：轉(zhuǎn)化效率低解決方法：優(yōu)化轉(zhuǎn)化條件，提高轉(zhuǎn)化效率；（2）問題：菌落顏色不明顯解決方法：提高IPTG和X-gal的濃度；（3）問題：假陽性結(jié)果解決方法：重復(fù)實(shí)驗(yàn)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題實(shí)驗(yàn)步驟：（1）將目的基因克隆到載體上，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中，制備感受態(tài)細(xì)胞。（3）將感受態(tài)細(xì)胞與重組質(zhì)?；旌?，進(jìn)行轉(zhuǎn)化。（4）將轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)