ICS71.100.70CCSY42HPCIA團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/HPCIA012—2025化妝品用積雪草（Centellaasiatica）相關(guān)原料Centellaasiaticaderivedingredientsforcosmetics2025-12-01發(fā)布 2025-12-01實施廣州開發(fā)區(qū)黃埔化妝品產(chǎn)業(yè)協(xié)會??發(fā)布T/HPCIA012T/HPCIA012—2025PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1基本信息 1技術(shù)要求 3試驗方法 5檢驗規(guī)則 5標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯藏和保質(zhì)期 6附錄A（規(guī)范性） 羥基積雪草酸/積雪草酸含量測定方法 7附錄B（規(guī)范性） 羥基積雪草苷/積雪草苷含量測定方法 9附錄C（規(guī)范性） 積雪草提取物、羥基積雪草酸/積雪草酸生物效應(yīng)評價方法 11附錄D（規(guī)范性） 羥基積雪草苷/積雪草苷生物效應(yīng)評價方法 15前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由廣州開發(fā)區(qū)黃埔化妝品產(chǎn)業(yè)協(xié)會提出。本文件由廣州開發(fā)區(qū)黃埔化妝品產(chǎn)業(yè)協(xié)會歸口。（廣州生本文件主要起草人：趙海山、馬維、于雪峰、李安章、侯森、胡玉冬、高宏旗、曹義苗、桑建梅、T/HPCIA012T/HPCIA012—2025PAGEPAGE10化妝品用積雪草（Centellaasiatica）相關(guān)原料（羥基積雪草苷、積雪草苷、羥基積雪草酸、積雪草酸）。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。化妝品安全技術(shù)規(guī)范GB/T39665 含植物提取物類化妝品中55種禁用農(nóng)藥殘留量的測定GB/T6678 化工產(chǎn)品采樣總則GB/T6680 液體化工產(chǎn)品采樣通則GB/T8170 數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB/T191 包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T43808 植物提取物 術(shù)語T/HPCIA003-2022 化妝品 斑馬魚實驗通用技術(shù)規(guī)范術(shù)語和定義GB/T43808界定的術(shù)語和定義適用于本文件。基本信息積雪草提取物中文名稱：積雪草提取物、積雪草花/葉/莖提取物、積雪草根提取物、積雪草葉提取物。INCI名稱：Centellaasiaticaextract；Centellaasiaticaflower/leaf/stemextract；Centellaasiaticarootextract；Centellaasiaticaleafextract?；钚猿煞郑毫u基積雪草苷、積雪草苷、羥基積雪草酸、積雪草酸。羥基積雪草甙羥基積雪草甙的其他名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：——INCI名稱：Madecassoside?！钚猿煞郑毫u基積雪草苷——CAS：34540-22-2——分子式：C48H78O20——分子量：975.1——結(jié)構(gòu)式：積雪草苷——積雪草苷的其他名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：——INCI名稱：Asiaticoside?！钚猿煞郑悍e雪草苷——CAS：16830-15-2——分子式：C48H78O19——分子量：959.1——結(jié)構(gòu)式：羥基積雪草酸——羥基積雪草酸的其他名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：——INCI名稱：Madecassicacid?！钚猿煞郑毫u基積雪草酸——CAS：18449-41-7——分子式：C30H48O6——分子量：504.7——結(jié)構(gòu)式：積雪草酸——羥基積雪草酸的其他名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：——INCI名稱：Asiaticacid。——活性成分：積雪草酸——CAS：464-92-6——分子式：C30H48O5——分子量：488.7——結(jié)構(gòu)式：B——積雪草苷B的其他名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：——INCI名稱：無。——活性成分：積雪草苷B——CAS：125265-68-1——分子式：C48H78O20——分子量：975.1——結(jié)構(gòu)式：技術(shù)要求根據(jù)原料INCI名，應(yīng)分別符合以下各表的要求。表1 積雪草提取物質(zhì)量指標(biāo)要求項目分級CBA理化指標(biāo)顏色與外觀棕色粉末黃色粉末白色/淡黃色粉末氣味無明顯氣味無明顯氣味無明顯氣味溶解性溶于水或溶于醇溶于水或溶于醇溶于水或溶于醇灰分≤1%≤1%≤1%水分≤5%≤5%≤5%羥基積雪草甙、積雪草苷、積雪草酸和羥基積雪草酸的總量（方法見附錄A和B）≥20%≥50%≥70%生物效應(yīng)評價有效性（方法見附錄C）/≥40%參照品≥100%參照品上表（續(xù)）項目分級CBA重金屬汞，mg/kg符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定砷，mg/kg鉛，mg/kg鎘，mg/kg微生物菌落總數(shù)，CFU/mL霉菌和酵母菌總數(shù)，CFU/mL耐熱大腸菌群銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌農(nóng)殘按照GB/T39665執(zhí)行注：羥基積雪草甙含量包括羥基積雪草苷和積雪草苷B表2 羥基積雪草甙/積雪草苷質(zhì)量指標(biāo)要求項目分級CBA理化指標(biāo)顏色與外觀白色粉末白色粉末白色粉末氣味無明顯氣味無明顯氣味無明顯氣味溶解性溶于水或溶于醇溶于水或溶于醇溶于水或溶于醇灰分≤1%≤1%≤1%水分≤5%≤5%≤5%羥基積雪草甙/（方法見附錄B）≥80%≥90%≥95%生物效應(yīng)評價有效性（方法見附錄/≥50%參照品≥60%參照品重金屬汞，mg/kg符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定砷，mg/kg鉛，mg/kg鎘，mg/kg微生物菌落總數(shù)，CFU/mL霉菌和酵母菌總數(shù)，CFU/mL耐熱大腸菌群銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌農(nóng)殘按照GB/T39665執(zhí)行注：羥基積雪草甙含量包括羥基積雪草苷和積雪草苷B表3 羥基積雪草酸/積雪草酸質(zhì)量指標(biāo)要求項目項目CBA理化指標(biāo)顏色與外觀白色粉末白色粉末白色粉末氣味無明顯氣味無明顯氣味無明顯氣味溶解性溶于醇溶于醇溶于醇灰分≤1%≤1%≤1%水分≤5%≤5%≤5%表3 羥基積雪草酸/積雪草酸質(zhì)量指標(biāo)要求（續(xù)）項目項目CBA羥基積雪草酸和積雪草酸的總含量（方法見附錄A）≥70%≥85%≥90%生物效應(yīng)評價有效性（方法見附錄C）/≥25%參照品≥50%參照品重金屬汞，mg/kg符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定砷，mg/kg鉛，mg/kg鎘，mg/kg微生物菌落總數(shù)，CFU/mL霉菌和酵母菌總數(shù)，CFU/mL耐熱大腸菌群銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌農(nóng)殘按照GB/T39665執(zhí)行試驗方法除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。顏色與外觀在非直射陽光條件下，取樣品進(jìn)行目測。氣味取樣品感官判定，不應(yīng)有異常氣味。B按本標(biāo)準(zhǔn)附錄A與附錄B的方法進(jìn)行檢測。微生物重金屬汞、砷，按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中氫化物原子熒光光度法規(guī)定操作。鉛、鎘，按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中火焰原子吸收分光光度法規(guī)定操作。有效性根據(jù)不同規(guī)格原料，按本標(biāo)準(zhǔn)附錄C或附錄D的方法進(jìn)行檢測。檢驗規(guī)則出廠檢驗（包括羥基積雪草苷和積雪草苷B含量型式檢驗型式檢驗每年不應(yīng)少于2次。型式檢驗的項目為技術(shù)要求中的全部項目，有下列情況之一時，也應(yīng)進(jìn)行型式檢驗:當(dāng)原料、工藝和設(shè)備發(fā)生重大改變時；產(chǎn)品首次投產(chǎn)或停產(chǎn)6個月以上恢復(fù)生產(chǎn)時；出廠檢驗結(jié)果與上次型式檢驗有較大差異時；生產(chǎn)場所改變時；國家質(zhì)量監(jiān)督機(jī)構(gòu)提出進(jìn)行型式檢驗的要求時。1項不符合標(biāo)準(zhǔn)要求，應(yīng)重新自雙倍量的包裝中取樣進(jìn)行復(fù)驗，復(fù)驗結(jié)果仍有指標(biāo)不符合標(biāo)準(zhǔn)要求，即整批產(chǎn)品判定為不合格。若微生物指標(biāo)不符合標(biāo)準(zhǔn)要求，不得復(fù)檢。GB/T6678、GB/T668040g，分為兩份，分別裝入兩個潔凈、干燥的玻璃瓶中，密封、貼上標(biāo)簽，一瓶供檢驗，另一瓶作留樣備查。GB/T8170數(shù)值修約值比較法進(jìn)行。標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯藏和保質(zhì)期標(biāo)志產(chǎn)品銷售包裝圖示標(biāo)志應(yīng)按GB/T191執(zhí)行，標(biāo)注內(nèi)容為：產(chǎn)品名稱、商標(biāo)(如有)、保質(zhì)期(用生產(chǎn)日期、保質(zhì)期或生產(chǎn)批號、限期使用日期等方式組合表示)、生產(chǎn)者名稱、地址、凈含量、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號以及根據(jù)產(chǎn)品特點所應(yīng)標(biāo)注的其他內(nèi)容。包裝產(chǎn)品采用適宜包裝，根據(jù)用戶要求包裝。運(yùn)輸本產(chǎn)品屬于非危險品，任何運(yùn)輸工具可采用，在運(yùn)輸時應(yīng)防火、防熱、防雨淋、防受潮。貯藏常溫通風(fēng)處、干燥密封保存。保質(zhì)期在符合規(guī)定的運(yùn)輸和貯存條件下，產(chǎn)品在包裝完整和未啟封的情況下，保質(zhì)期按銷售包裝標(biāo)注執(zhí)行。原理

附 錄 A（規(guī)范性）羥基積雪草酸/積雪草酸含量測定方法試樣經(jīng)甲醇提取，用高效液相色譜儀測定，外標(biāo)法定量。試劑和材料水：GB/T6682，一級。甲醇：色譜純；乙腈：色譜純。對照物質(zhì)羥基積雪草酸對照CASNo.18449-41-7（純度≥98%）；積雪草酸對照CASNo.464-92-6（純度≥98%）。對照品溶液配制取羥基積雪草酸對照品和積雪草酸對照品各20mg，精密稱定，置同一50ml容量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。有機(jī)濾膜孔徑0.45μm，材質(zhì)為尼龍。儀器設(shè)備高效液相色譜儀（HPLC）紫外檢測器（UV）。分析天平0.0001g。超聲波清洗儀功率不低于250W。測定步驟試樣制備取供試品30mg，精密稱定，置50mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲，使之溶解，并用甲醇定容至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液。每批供試品制備兩份平行樣。測定參考條件——色譜柱：C18柱，300mm×3.9mm（內(nèi)徑），5μm；——流動相：甲醇:乙腈:水(30:30:40)，等度洗脫；——流速：1.3mL/min；——柱溫：28℃；——進(jìn)樣體積：20μL；——檢測波長：214nm。圖A.1HPLC色譜圖測定法取對照品溶液與供試品溶液20μL分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計算含量。兩個平行樣的相對偏差應(yīng)≤0.5％。計算公式：?（??/??）=?樣×?對×?對····························· (A.1)式中：

樣 ?對×100C樣——測得供試品溶液中羥基積雪草酸組分或積雪草酸組分的濃度(mg/mL)A樣——供試品溶液中羥基積雪草酸組分或積雪草酸組分的峰面積；C對——羥基積雪草酸對照品或積雪草酸對照品的濃度(mg/mL)；P對——為羥基積雪草酸對照品或積雪草酸對照品的純度；A對——對照品溶液中羥基積雪草酸組分或積雪草酸組分的峰面積。量%=（?樣羥基+?樣積）×50×100% (A.2)?樣式中：C樣羥基——測得供試品溶液中羥基積雪草酸組分的濃度(mg/mL)；C樣積 ——測得供試品溶液中積雪草酸組分的濃度(mg/mL)；W樣 ——供試品的稱量(mg)。原理

附 錄 B（規(guī)范性）羥基積雪草苷/積雪草苷含量測定方法試樣經(jīng)甲醇提取，用高效液相色譜儀測定，外標(biāo)法定量。試劑和材料水：GB/T6682，一級。甲醇：色譜純；乙腈：色譜純；β-環(huán)糊精：分析純。對照物質(zhì)ASNo.354022-純度≥98ASNo.163015-（98%；BASNo.12265681純度≥98。對照品溶液配制取羥基積雪草苷對照品、積雪草苷對照品和積雪草苷B對照品各20mg，精密稱定，置同一100mL容量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。有機(jī)濾膜孔徑0.45μm，材質(zhì)為尼龍。儀器設(shè)備高效液相色譜儀（HPLC）紫外檢測器（UV）。分析天平0.0001g。超聲波清洗儀功率不低于250W。測定步驟試樣制備取供試品50mg，精密稱定，置50mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲，使之溶解，并用甲醇定容至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液。每批供試品制備兩份平行樣。測定參考條件——色譜柱：18柱，250mm×4.6m內(nèi)徑，5μm；——流動相：乙腈-2mmol/Lβ-環(huán)糊精溶液(24:76)，等度洗脫；——流速：1.0mL/min；——柱溫：35℃；——進(jìn)樣體積：10μL；——檢測波長：205nm。圖B.1HPLC色譜圖測定法取對照品溶液與供試品溶液10μL分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計算含量。兩個平行樣的相對偏差應(yīng)≤0.5％。計算公式：式中：

?（/?）=樣對?對· (.1)樣 ?對×100C樣——測得供試品溶液中羥基積雪草苷組分或積雪草苷B組分或積雪草苷組分的濃度(mg/mL)A樣——供試品溶液中羥基積雪草苷組分或積雪草苷B組分或積雪草苷組分的峰面積；C對——羥基積雪草苷對照品或積雪草苷B對照品或積雪草苷對照品的濃度(mg/mL)；P對——羥基積雪草苷對照品或積雪草苷B對照品或積雪草苷對照品的純度；A對——對照品溶液中羥基積雪草苷組分或積雪草苷B組分或積雪草苷組分的峰面積；量%=（?樣羥基+?樣積）×50×100% (B.2)?樣式中：C樣羥基——測得供試品溶液中羥基積雪草苷組分和積雪草苷B組分的濃度(mg/mL)；C樣積 ——測得供試品溶液中積雪草苷組分的濃度(mg/mL)。W樣 ——為供試品的稱量(mg)；范圍

附 錄 C（規(guī)范性）積雪草提取物、羥基積雪草酸/積雪草酸生物效應(yīng)評價方法本方法規(guī)定了一種積雪草提取物、羥基積雪草酸/積雪草酸生物效應(yīng)的斑馬魚胚胎評價方法，適用于化妝品原料積雪草提取物的快速檢測。方法原理CuSO4誘導(dǎo)斑馬魚胚胎側(cè)線生物模型實驗動物模型及維護(hù)要求應(yīng)符合T/HPCIA003-2022要求。材料試劑斑馬魚胚胎推薦使用帶有中性粒細(xì)胞熒光標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因斑馬魚或野生型斑馬魚。斑馬魚交配盒由玻璃、不銹鋼或其它惰性材料制成，配備網(wǎng)篩（網(wǎng)格大小為2mm×2mm，由不銹鋼或多項材料組成用來保護(hù)魚卵）。實驗用水采用符合GB/T6682規(guī)定的一級水。緩沖水用于空白對照組及胚胎培養(yǎng)，推薦使用Holt-Buffer，E3Buffer等，具體配制見下。Holt-Buffer按照（C.1）2L燒杯中，用超純水定容至2000mL。C.1Holt-Buffer配方成分添加量NaCl7.000gNaHCO30.400gKCl0.100gCaCl20.235g使用真空過濾器（孔徑：0.2μm）過濾。使用高壓滅菌鍋滅菌。E3Buffer60×母液：按照（C.2）2L燒杯中，用超純水定容至2000mL。表C.260×E3Buffer配方表配方成分添加量NaCl34.800gCaCl2·2H2O5.800gKCl1.600gCaCl20.235gpH至7.2。1×E3Buffer：量取16.5mL的601L。二甲基亞砜（DMSO）分析純，CAS號：67-68-5。羥基積雪草酸標(biāo)準(zhǔn)品純度≥98%，CAS號：18449-41-7。儀器設(shè)備斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)生化培養(yǎng)箱分析天平0.0001g。移液器光學(xué)顯微鏡50倍（如連續(xù)變焦體式顯微鏡、熒光顯微鏡等）。實驗室一般常見器材實驗過程樣品前處理造模劑8.0mg5mL純水溶解，輕輕搖晃至完全溶解，配制10mM硫酸銅母液，用Holt-Buffer500倍得到20μM硫酸銅溶液，備用。20μM硫酸銅溶液與Holt-Buffer10μM硫酸銅工作液。參照品羥基積雪草酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液：將20mg羥基積雪草酸標(biāo)準(zhǔn)品粉末加入適量DMSO溶液，振蕩至完100mMHolt-Buffer150μM羥基積雪草酸溶液，備用。將20μM硫酸銅溶液與150μM羥基積雪草酸溶液同體積混合，得到10μM硫酸銅與75μM羥基積雪草酸混合溶液，備用。測試樣品精確稱量測試樣品，使用Holt-Buffer緩沖液將其溶解為3g/L（積雪草提取物）或0.05g/L（羥基積雪草酸/積雪草酸）的工作液，備用。將20μM硫酸銅溶液與不同濃度的測試樣品同體積混合，使得硫酸銅的最終濃度為10μM，積雪草提取物的最終濃度為1.5g/L（積雪草提取物）或0.025g/L（羥基積雪草酸/積雪草酸）。斑馬魚胚胎的獲取實驗前1天下午喂食后1h，選取健康的成年帶中性粒細(xì)胞熒光標(biāo)記斑馬魚或野生型斑馬魚，雌雄各半，置配種缸中，每缸1對，并用隔板將雌雄隔開。次日上午9:00，抽離隔板，自由交配后1h后收集胚胎，挑選發(fā)育正常受精卵于容器中，加入適量緩沖水，置于28.5±0.5℃生化培養(yǎng)箱中孵育。正常胚胎發(fā)育狀態(tài)應(yīng)參考T/HPCIA003-2022《化妝品斑馬魚實驗通用技術(shù)規(guī)范》要求。實驗方法試驗分組與處理隨機(jī)挑選正常發(fā)育的帶有中性粒細(xì)胞熒光標(biāo)記的72hpf斑馬魚胚胎于6孔板，每孔24尾。去除原有Holt-Buffer緩沖液，每孔加入6mL對應(yīng)溶液?！瞻讓φ战M：Holt-Buffer緩沖液?！Ｐ蛯φ战M：10μM硫酸銅溶液?！獏⒄掌方M：含10μM硫酸銅溶液和75μM羥基積雪草酸對照品的混合溶液?！獪y試樣品組：含10μM硫酸銅溶液和測試樣品的混合溶液。28.5±0.550minHolt-Buffer2~3次。C.6.3.2固定2mL10min內(nèi)加入0.5mL的4PFA（通用型組織固定液），在室溫下固定胚胎1小時。染色PFA1mLPBST35minPBST1mL50%3min。0.5mL1移除蘇丹黑染色液，加入1mL70%乙醇洗滌胚胎5min4次。注意：蘇丹黑染色液很難4次后染色仍然很深，可以70%2次。70%PBST250.5mL5min。1mL70%5min1mLPBST3min。PBST0.5mL50%甘油（PBS），室溫放置1h4℃過夜。C.6.3.2 樣本分析用4%甲基纖維素將斑馬魚胚胎固定于載玻片上，呈側(cè)臥位，于熒光正置顯微鏡下對魚胚胎泄殖孔至尾部中性粒細(xì)胞的分布進(jìn)行拍攝。數(shù)據(jù)統(tǒng)計和結(jié)果計算數(shù)據(jù)統(tǒng)計計數(shù)每尾魚胚胎從肛門起四分之三尾部側(cè)線區(qū)域（見圖C.1、圖C.2）的中性粒細(xì)胞數(shù)目。結(jié)果計算計算中性粒細(xì)胞聚集抑制率：率=???×100% (C.1)?式中：T——受試物處理組魚胚胎中性粒細(xì)胞數(shù)目的平均值；M——模型對照組魚胚胎中性粒細(xì)胞數(shù)目的平均值；對受試物處理組魚胚胎中性粒細(xì)胞數(shù)目和模型對照組中性粒細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行雙尾T檢驗，取得p值。試驗有效性驗證測試判定各測試組暴露完成后至少90%魚胚胎存活，否則對應(yīng)測試組結(jié)果無效。測試要求每批次測試須設(shè)置參照組，要求每批次測試參照組魚胚胎中性粒細(xì)胞聚集抑制率為正數(shù)且p<0.05。結(jié)果解讀與判定中性粒細(xì)胞聚集抑制率受試物在對應(yīng)測試濃度下對中性粒細(xì)胞的聚集抑制率。評價評價受試物處理組中性粒細(xì)胞聚集抑制率與參照組中性粒細(xì)胞聚集抑制率的比值，根據(jù)正文表1對積雪草提取物的質(zhì)量進(jìn)行分級，根據(jù)正文表3對羥基積雪草酸/積雪草酸的質(zhì)量進(jìn)行分級。a深色點即為染色的中性粒細(xì)胞，紅色框內(nèi)即為計數(shù)區(qū)域圖C.1野生型斑馬魚胚胎尾部中性粒細(xì)胞代表性圖a綠色點即為帶熒光標(biāo)記的中性粒細(xì)胞，深色區(qū)域即為計數(shù)區(qū)域圖C.2熒光標(biāo)記斑馬魚胚胎尾部中性粒細(xì)胞代表性圖范圍

附 錄 D（規(guī)范性）羥基積雪草苷/積雪草苷生物效應(yīng)評價方法本方法規(guī)定了一種羥基積雪草苷/積雪草苷生物效應(yīng)的斑馬魚胚胎評價方法，適用于化妝品原料羥基積雪草苷/積雪草苷的快速檢測。方法原理市售羥基積雪草苷/積雪草苷質(zhì)量參差不齊，相同的標(biāo)示含量所對應(yīng)的效價各不相同，因此需通過生物效應(yīng)評價客觀評價其活性?，F(xiàn)有研究證明，羥基積雪草苷/積雪草苷具有修護(hù)功效，其機(jī)制可能與生物模型實驗動物模型及維護(hù)要求應(yīng)符合T/HPCIA003-2022《化妝品斑馬魚實驗通用技術(shù)規(guī)范》要求。材料試劑斑馬魚胚胎推薦使用血管內(nèi)皮細(xì)胞熒光標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系。斑馬魚交配盒由玻璃、不銹鋼或其它惰性材料制成，配備網(wǎng)篩（網(wǎng)格大小為2mm×2mm，由不銹鋼或多項材料組成用來保護(hù)魚卵）。實驗用水采用符合GB/T6682規(guī)定的一級水。緩沖水同C.4.4。二甲基亞砜（DMSO）分析純，CAS號：67-68-5。羥基積雪草苷標(biāo)準(zhǔn)品純度≥98%，CAS號：34540-22-2。索拉非尼純度≥99%，CAS號：284461-73-0。儀器設(shè)備斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)生化培養(yǎng)箱分析天平0.0001g。移液器光學(xué)顯微鏡50倍（如連續(xù)變焦體式顯微鏡、熒光顯微鏡等）。實驗室一般常見器材實驗過程樣品前處理造模劑1.02mM-20Holt-Buffer緩沖液將其溶解成4μM的工作液，備用。4μM索拉非尼與Holt-Buffer2μM。參照品Holt-Buffer9g/L的工作液，備用。參照品組造模劑：將4μM索拉非尼和羥基積雪草苷標(biāo)準(zhǔn)品同體積混合，使得索拉非尼最終濃度為2μM，羥基積雪草苷標(biāo)準(zhǔn)品的最終濃度為4.5g/L。9g/L羥基積雪草苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液用Holt-Buffer4.5g/L。羥基積雪草苷/積雪草苷測試樣品精確稱量羥基積雪草苷/積雪草苷測試樣品，使用Holt-Buffer緩沖液將其溶解為6g/L的工作液，備用。測試樣品造模劑：將4μM索拉非尼和羥基積雪草苷/積雪草苷測試樣品同體積混合，使得索拉非尼最終濃度為2μM，羥基積雪草苷/積雪草苷