ICS65.120

B20

DB22

吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB22/T294—2020

代替DB22/T294-2001

玉米蛋白粉中粗蛋白的摻偽鑒別方法

Adulterationidentificationmethodforcrudeproteincontentincornproteinpowder

2020-10-14發(fā)布2020-10-30實(shí)施

吉林省市場(chǎng)監(jiān)督管理廳發(fā)布

DB22/T294—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)代替DB22/T294-2001《玉米蛋白粉中粗蛋白的摻偽鑒別與快速測(cè)定方法》。與DB22/T

294-2001相比，除編輯性修改外主要技術(shù)變化如下：

——標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為《玉米蛋白粉中粗蛋白的摻偽鑒別方法》；

——?jiǎng)h除規(guī)范性引用文件中引用標(biāo)準(zhǔn)年代號(hào)（見(jiàn)2001年版的2）；

——?jiǎng)h除方法提要，改為原理（見(jiàn)3，2001年版的3）；

——儀器設(shè)備中增加凱氏蒸餾裝置（見(jiàn)5.3）；

——?jiǎng)h除儀器中基爾特克1030自動(dòng)分析儀，改為自動(dòng)凱氏定氮儀（見(jiàn)5.6，2001年版的4）；

——增加實(shí)驗(yàn)步驟中的計(jì)算公式（見(jiàn)7.1.1）；

——?jiǎng)h除摻假率的測(cè)定（見(jiàn)2001年版的7.6）；

——對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)中試驗(yàn)步驟進(jìn)行修改并規(guī)范表述。

本標(biāo)準(zhǔn)由長(zhǎng)春海關(guān)技術(shù)中心提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由長(zhǎng)春海關(guān)歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：長(zhǎng)春海關(guān)技術(shù)中心、吉林大學(xué)。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王岸英、李愛(ài)軍、劉洋、劉博陽(yáng)、李嘉慧。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

——DB22/T294-2001

I

DB22/T294—2020

玉米蛋白粉中粗蛋白的摻偽鑒別方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料用玉米蛋白粉中粗蛋白的摻偽鑒別方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于疑似摻入玉米粉、尿素、三聚氰胺的飼料用玉米蛋白粉的摻偽鑒別。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備

GB/T6432-2018飼料中粗蛋白的測(cè)定凱氏定氮法

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備

3原理

玉米蛋白粉中總氮主要以兩種形式存在，即氨基酸和酰胺。玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣在催化加熱條件下被

分解，產(chǎn)生的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨，堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)

酸的消耗量計(jì)算總氮含量。玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣中酰胺直接堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以鹽酸標(biāo)準(zhǔn)

溶液滴定，得到直接蒸餾法滴定體積。利用總氮含量與酰胺滴定體積的固定比例關(guān)系，建立總氮含量與

直接蒸餾法消耗體積的回歸方程。待測(cè)樣品通過(guò)以上兩種方法蒸餾，得到樣品總氮含量與直接蒸餾法消

耗體積，通過(guò)對(duì)樣品的總氮含量及直接蒸餾法消耗體積與回歸方程的比較進(jìn)行摻偽鑒別。

4試劑和材料

除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水。試劑若無(wú)特別說(shuō)明按

照GB/T603標(biāo)準(zhǔn)要求配制。

4.1硼酸：化學(xué)純。

4.2氫氧化鈉：化學(xué)純。

4.3硫酸：化學(xué)純。

4.4混合催化劑：稱取0.4g五水硫酸銅、6.0g硫酸鉀或硫酸鈉，研磨混勻；或購(gòu)買(mǎi)商品化的凱氏

定氮催化劑片。

4.5玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣：8組蛋白質(zhì)含量不同（40%～70%）的玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣。

4.6硼酸吸收液：稱取20g硼酸，用水溶解并稀釋至1000mL。

4.7氫氧化鈉溶液：稱取40g氫氧化鈉，用水溶解，待冷卻至室溫后，用水稀釋至100mL。

4.8鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液:c（HCl）=0.1mol/L，按GB/T601配制和標(biāo)定。

4.9甲基紅乙醇溶液：稱取0.1g甲基紅，用乙醇溶解并稀釋至100mL。

1

DB22/T294—2020

4.10溴甲酚綠乙醇溶液：稱取0.5g溴甲酚綠，用乙醇溶解并稀釋至100mL。

4.11混合指示劑溶液：將甲基紅乙醇溶液和溴甲酚綠乙醇溶液等體積混合。該溶液室溫避光保存，

有效期3個(gè)月。

5儀器設(shè)備

5.1分析天平：感量0.0001g.

5.2消煮爐或電爐。

5.3凱氏燒瓶：250mL。

5.4消煮管：250mL。

5.5凱氏蒸餾裝置。

5.6定氮儀：以凱氏原理制造的各類型半自動(dòng)、全自動(dòng)定氮儀。

6樣品

按照GB/T6432-2018中6方法進(jìn)行樣品制備。

7試驗(yàn)步驟

7.1摻假鑒別回歸方程的建立

7.1.1總氮含量的測(cè)定

稱取充分混勻的玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣0.1~0.4g(約相當(dāng)于30mg~40mg氮,精確至0.001g),

至消化管中,再加入6.4g混合催化劑及15mL硫酸進(jìn)行消化。當(dāng)消化管中的液體呈綠色透明狀停止

加熱。總氮含量按照GB/T6432-2018中7.2.2方法測(cè)定。同時(shí)做試劑空白,通過(guò)公式（1）計(jì)算得到

總氮含量Yi。

14

(V2V1)c6.25

Y1000100............................(1)

iV'

m

V

式中：

V2——滴定試樣所消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，單位為毫升（mL）；

V1——滴定空白所消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，單位為毫升（mL）；

c——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；

m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；

V——試樣消煮液總體積，單位為毫升（mL）；

V’——蒸餾用消煮液體積，單位為毫升（mL）；

14——氮的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾（g/mol）；

6.25——氮換算成粗蛋白的平均系數(shù)。

每個(gè)試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定，以其算術(shù)平均值為測(cè)定結(jié)果，計(jì)算結(jié)果表示至小數(shù)點(diǎn)后三位。

7.1.2直接蒸餾法消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積的測(cè)定

2

DB22/T294—2020

稱取1.0g(精確至0.001g)試樣于蒸餾管內(nèi)，加入30mL硫酸鈉溶液，充分混合后置于蒸餾管，

按照GB/T6432-2018中7.2.2方法測(cè)定。同時(shí)做試劑空白，得到直接蒸餾法消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積Xi。

7.1.3回歸方程

將所測(cè)得的Yi與Xi列表，利用Yi與Xi的相關(guān)性建立回歸方程，見(jiàn)公式（2），計(jì)算出系數(shù)a，b：

YaXb.......................................(2)

式中：

Y——總氮含量，單位為百分比（%）；

X——直接蒸餾法滴定體積，單位為毫升（mL）。

7.1.4計(jì)算剩余標(biāo)準(zhǔn)差

將上面得到的8組Yi與Xi代入回歸方程得到的Y值按下式計(jì)算，得到剩余標(biāo)準(zhǔn)差S，見(jiàn)公式（3）：

8

2

(YiY)

Si1....................................(3)

6

式中：

Yi——7.1.1中得到的總氮含量

Y——7.1.2中得到的直接蒸餾法消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積Xi代入公式（2）得到的Y值

7.2樣品測(cè)定

將待測(cè)試樣按7.1.1、7.1.2方法測(cè)定,得到總氮含量Y樣與直接蒸餾法消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積X樣

8試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

將試樣測(cè)得總氮含量Y樣值帶入到鑒別公式（4）中，若Y樣值落在下面的控制區(qū)間內(nèi)（一般置信

水平為95%），則說(shuō)明試樣正常；若超出控制區(qū)間說(shuō)明試樣異常。

鑒別結(jié)果計(jì)算見(jiàn)公式（4）：

‘

a(X樣1.96S)bY樣(X樣1.96S)b........................(4)

式中：

a，b——式（2）中得到的系數(shù)；

X樣——試樣得到的直接蒸餾法消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積；

S——式（3）中得到的剩余標(biāo)準(zhǔn)差。

3

DB22/T294—2020

AA

附錄A

（資料性附錄）

建立摻假鑒別回歸方程的參考樣例

按照7.1.1中方法稱取8組玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣，按照7.1建立回歸方程，得到表A.1列出的回歸方程。

表A.1玉米蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)樣建立的回歸方程及相關(guān)系數(shù)

相關(guān)系

回歸

12345678數(shù)

方程

R

直接蒸

餾

2.2822.3182.6172.7073.2043.5093.7054.240

法體積