警示：T法律提示KatherineJFranz和KevinMSheaRichLDanheiser和TimonthyMSwager教授協(xié)助編寫JHaseltine,KevinMShea和SarahATabacco修改概 教 導 等 日程安 怎樣使用本手 實驗室介 CC“ EE：酸、堿及其互 CC：怎樣對樟腦球進行重結晶 EE：單晶培 CC“ EE：高海拔下應該怎么操作 CC“ EE：設定速 CC“ EE“ Mn(salen)配合物化烯烴的環(huán)氧化反 8.2GC8.3薄層色譜9.29.3CC(CompetentChemist)和EE(ExpertExperimentalist)。要達到每項技（1JamesZubrick（2）J.LLPZubrick編寫的教材可讀性很強，特別適用于剛進入有機化學實驗室的學生使用。它包Zubrick的一些討論或有些陳舊，5.301LLP教材。JLeonardB.LygoG.ProcterZubrick教材居于更高層次的讀者而準備的（正如書名所指Zubrick的不足，紹。LLP不僅可以幫你熟悉教學實驗室，也可以幫你熟悉科研環(huán)境。5.301是必要的，而且可以幫助你成長為一個實驗化學家。JLeonardBLygoGProcter編寫的教材中的有關章節(jié)，在科學圖書館的藏書室里可以找5.301中的大部分內容。在每個實驗階段的開始時，都有一個對當天實驗的簡短講解，Tabacco博士和助教們還IAP中，還會有補充閱讀材料，該導讀內容是希15劑,11－產(chǎn)物,15－萃取和洗滌,18－加熱,19－夾持器,31－實驗室儀表5.301UROP工UROP工作。然度的練習。如果成功地達到第一個技術水平，便獲得“CC二部分練習，便贏得“EE所有技術模塊中，無論是“CC等級”還是“EE5.301CC等級”的實驗和兩個“EE等級”的挑戰(zhàn)。鼓勵你完成全部訓練，但是僅要求兩個“EE等級”的實驗。在開展原創(chuàng)性研究課200415678CC或完成EE12131415或繼續(xù)柱色譜（2天202122Salen配體23制備Mn化劑26#27282~652~6部分中，一個重要內容便是實驗技術清單。每個部分一開始都有一份實驗中將遇在MirceaGheorghiu博士和ScottVirgil確保你熟悉下列安全設備的放置位置和使用方法洗眼器/事件發(fā)生的情況下，不要采取任何可能危害到自己或他人的冒險行動。最重要的是盡快讓雖然從技術上講，收音機和樂器并不存在安全隱患,但仍然不允許將他們帶(包括儀器設備和安全設備)之后，便進入實驗室登記程序了。5.301有機物和無機物——4-酸和堿——4-457溶劑——4-454和4-460天平以下物品可由LS提供（LS=LabSupplies，表示實驗室供應處：濾紙，有17mm51cm和11cm實驗室主任MirceaGheorghiu博士領導，并由一個包括教職員工、助教和學生組成的本科實安全信息可通過多種途徑獲得。每門實驗課程都從嚴格的安全教育開始，同時提供各實驗室中用到的化學品的各種資料都有檔案記錄，可以到heoghu博士辦公室外的資料室實驗室中的細心操作》這本全面的、可讀性強的讀物。（簡稱H（簡稱定，因為這些閾限值能保證一周0個小時連續(xù)置身于含有毒物質的工作場合而不會受到危害。會議推薦的T值在資料室中都能查閱到。 （不要穿涼鞋危險化學藥品核磁共振（NMR）萃取理論：Zubrick第37熔點測定：Zubrick第87-925．反應技巧16．萃取技巧2量筒分液漏斗錐形瓶燒杯圓底燒瓶NMR提純一定量受污染的樣品，記錄純化樣品的1HNMR譜圖，所有操作中要盡量避免不同的1HNMR譜圖：一張是小瓶內混合物的譜圖，其他三張分別是純的3-羥基苯甲酸測定所得樣品的1HNMR將NMR甲酸乙酯。此外，經(jīng)1HNMR分析，此樣品必須足夠純凈。這意味著所得的譜圖上只允根據(jù)pKa與“CC與“CC量筒分液漏斗錐形瓶燒杯圓底燒瓶NMR—6M—1M—————————1選自GilbertJ.C;MartinSF.ExperimentalOrganicChemistry:AMiniscale&MicroscaleApproach;3thed.;Brooks/Cole:PacificGrove,CA93950;p.141.9.(5只，13×100(2×50-mL,1×125-磁力攪拌/(250mL) 要在重結晶純化固體操作中獲得“CC等級”，你應該獲得至少1.30g無色（沒1選自Fieser,L.F.;Williamson,K.L.OrganicExperiments;7thed.;DC.HeathandCompany:Lexington,MA,1992;p.40.合成Cr(acac)3，2玻璃過濾器瓶子（3只大號、4只小號2

2選自：Szafran,Z.;Pike,R.M.;Sing,M.M.MicroscaleInorganicChemistry:AComprehensiveLaboratoryExperience,Wiley:NewYork,1991:“synthesisofMetalAcetylacetonates”p.224-229.

目標配合物Cr(acac)3。最終產(chǎn)物是什么？請計算產(chǎn)率。蒸餾用玻璃儀器及其組裝：Zubrick第20圓底燒瓶（1×25mL,玻璃毛和鋁箔（任選要想在蒸餾純化液體的實驗技術中獲得“CC等級”，你必須至少獲得7.00g的高級實驗要求“高海拔下應該怎么進行操作減壓蒸餾組件（蒸餾頭，多頭接口在0.5torr壓力下的沸點。同時，獲得至少4.00gα-紫羅蘭酮，而且氣相色譜分析純度大TLC柱色譜的原理：Zubrick27TLC－極性/溶劑體系：Zubrick28章，LLP9.3.1硅膠柱的制備：Zubrick29章，LLP11.6氣體流動裝置（塞子，T型閥，螺旋夾，管道100mL試管18×1503.TLC10.你將拿到2mL受少量愈創(chuàng)藍油烴(guaiazulene)污染的4苯基-2丁酮TLC10%乙酸乙酯/TLC記錄Rf10%乙醚/50g（5目）的硅膠，在通風櫥中制備色10mL1mL正戊烷沖洗試樣瓶GCTLC要想在快速色譜柱純化法實驗技術中獲得“CC 和“CC你將拿到20mL內含0.2g愈創(chuàng)藍油烴(guaiazulene)0.2g芴酮(fluorenone)以及0.2gTLC（參見：TLC指南TLC分析洗脫的所有組分，將你的薄層層析板給指導老師檢查，并將層析板計算三個化合物在所選定的TLC混合溶劑中的Rf要在快速柱色譜純化技術實驗中獲得“EE等級”"，你必需用薄板層析（TLC）8Eppendorf你將拿到含有牛心細胞色素CPierceCoomassie?PlusProteinAssay試劑來鑒定樣品中蛋白質的濃度。pH725mMMOPS緩沖溶液。然后再稱取其重量。由于已知水的密度是1.00g/mL，因此，進行簡單的換算就可以知道吸1μL。(蛋白質+G-250Coomassie?→蛋白質-染料配合物（595nm下檢測BSA2.0mg/mLBSA標準溶液的儲備液按下表稀釋，配置一組新鮮的蛋白質標準BSA3次重復實驗。Coomassie?PlusCoomassie?Plus和蛋白1.5mLCoomassie?Plus595nm595nm595nm595nm下的標準曲線，以扣除空白值的標準樣品的吸光度平均值作為縱坐要在蛋白質鑒定和誤差分析實驗中獲得“CC性相關系數(shù)（R）0.930及以上。你所得到的未知樣品的吸光度值的標準偏0.048。最后，你還必須確定未知蛋白質溶液的濃度。Eppendorf管（帶安全扣EppendorfC中鐵的含量。鐵試劑是一種鐵的螯合劑，當它與二價鐵離子(FeⅡ)形成配合物時，在紫外-－FeAA標準溶液（AA為原子吸收－緩沖溶液（25mMMOPS，PH－超純HNO3(5－75mMC－10mM2mLEppendorf管中配制一系列鐵的標準溶液，具體如下表所示。注意每2300μL的蛋白質樣品。30μL超純的硝酸溶液(5M)Eppendorf（耐熱玻璃皿構成）301～2300μL（1020μL60μL75mMC60μL10mM60μL10～15分鐘（此時溶液應該變成紫色A562要在蛋白質鑒定和誤差分析實驗中獲得“EE等級”"，你所制作的標準曲線的0.0355.301中，你的指導教師已經(jīng)仔細觀察到了你的實驗技能的進步。并且確信你可（eq1EricJacobsen指出圖1所示的配合物Mn(saen是非常效的環(huán)氧化反應化（eq1錳配合物Mn(slen)容易制備，因此我們想要研究一系列不同的Mn(saen)衍生物的相對化活性。本實驗室的一個研究生已經(jīng)考察了幾種錳配合物Mn(salen)，但我希望你和你的實驗伙Jacobsen合成一種新的salen配合物(eq2)，并測定1HNMR合成相應的錳配合物Mn(salen)(eq3)和你的實驗伙伴比較一下化劑的分離產(chǎn)率采用Jacobsen報道的實驗方法和你制備的化劑，將1,2-二苯乙烯環(huán)氧化通過1HNMR測定純環(huán)氧化反應產(chǎn)物的1HNMR制備Salen配體(eq乙二胺+反式-1，2-二氨基環(huán)己烷3，5-二-叔丁基-2-乙二胺+乙二胺+制備Mn(salen)配合物(eq一個好的1HNMR10mg左右化合物。樣品溶液中不應存在固體或順磁性的NMR典型的氘代溶劑有氘代氯仿Cl，重水2C6，氘代丙酮33)，氘代乙腈(C)和氘代四氫呋喃(C8)。氘代氯仿是至今最為常用的溶5.1CDC3CDC3時，需要你自己事先準備。在CDCl3可用作NMR熔劑之前，必須完成三個重要的步驟：一、在CDC3中加入數(shù)滴標準物TM（四甲基硅烷42C（一種弱堿CDC3和分5.01CDC3TM，由于我們不會用到對酸敏感的物質，所以沒有加入2C3（注意：不要讓水進入氯仿，盡量縮短盛氯仿的瓶子敞開的時間。只要瓶子敞開，空氣中的水就會溶進NMR）NMR（NMR10mLNMRNMR10mLNMRKimwipeKimwipe填充PasteurPasteur吸管的尖端可以把它塞進相應部位。（10NMRNMR（NMR蓋NMRNMR1-310mg1mLNMR6-8NMRNMRNMR1NMRZubrick252Pasteur10mg1mL揮發(fā)性溶劑（乙醚、乙酸乙酯和戊烷等）1mL10mg1mL3-5的（反相5.301中以及大多數(shù)實驗室實驗中，都將離大小用Rf0～1之間的數(shù)值，它的定義為：化合物距離基線（最LLP145-152Rf0.15~0.85之間。雖然這個條件不一乙酸乙酯/0~30%。但有時較難在旋轉蒸發(fā)儀上完全除去溶劑。乙醚/0~40%的比較常用。在旋轉蒸發(fā)器上非常容易除去。乙醇/5~30%二氯甲烷/己烷或戊烷：5~30%1~2mLUROP用非破壞性技術觀察薄板（UROP。更完整的討論，請參閱：Zubrick第127-138洗滌有機層以除去雜質。洗滌相的體積通常是有機相體積的1/10~1/2。最好重復洗滌2~3（通常用1％l（通常用飽和3或1％H）可以除去酸性雜質。大多數(shù)情況下，當雜質既非酸性又非堿性時，可用蒸餾水洗滌，以除去各種無機雜質。（注意：在搖動分液漏斗中的混合液體時，記住要經(jīng)常排氣，排氣時使分液漏斗上沿口朝下，然后上舉，在防護罩后面打開活塞。這樣可以釋放在搖動液體時產(chǎn)生的氣體壓力。此外，在分液漏斗中放出液體之前，記住首先應打開蓋子。）干燥有機層通常用高效快速的MgSOMgSOa4效率較低，但a4形成團塊。加入的干燥劑要適量，只要有一些干燥劑不再結塊，說明可以不用再加入干燥劑了。（操作過幾次后，你便會很好地掌握了。）持續(xù)15～20參見Zubrick第114-117效的過濾器，其制備方法是：將玻璃毛（甚至可以用面巾紙）Pasture滴管Celite 甲苯/乙醚或戊 水/甲CHCl3/蒸餾在提純試劑及分離粗產(chǎn)品時非常有用。蒸餾可分為兩類：常壓蒸餾和減壓蒸餾。5.01同時你也不想讓它進入你的產(chǎn)品中吧。參見：Zubrick第53-55頁，關于接口真空油脂快速柱色譜(FlashColumnChromatography)是一種快速而且（通常是）容易的分離復雜5.3011g左右的LLP205-214用薄層色譜選取溶劑體系，使Rf0.2～0.3之間，但如果混合物復雜，這可譜分析中，你必需確定哪種溶劑體系將會使不同的點樣處于Rf0.2～0.3的范圍之內。組分在該溶劑體系（通常是戊烷或己烷）中的Rf0。這在多數(shù)情況下是難以實現(xiàn)的，脫液淋洗（1.5mL。5.301中，我們認為短而粗的分離柱會有更好把結論記在筆記本上（這比測量分離柱的直徑方便很多。在5.301中，我們只用一種4（200mL的硅50mL的組分層砂（1cm，這樣可以避免硅膠落入收集瓶中。0.5g/mL，（100g＝200mL1.5倍體積的溶劑，將其制成漿狀，用力振蕩和強烈攪厚度約在2cm左右。這在添加溶劑時起到保護柱子的作用——當溶劑加入過快時，如2cm厚的保護沙層。22)TCL跟蹤柱子的分離進程。一邊收集樣品，一邊進行薄層色譜分析。這一點可（甚