ICS65.020.30

CCSB43

DB50

重慶市地方標準

DB50/T1461—2023

地方豬遺傳材料冷凍保存技術規(guī)范

2023-09-15發(fā)布2023-12-15實施

重慶市市場監(jiān)督管理局?發(fā)布

DB50/T1461—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。

本文件由重慶市農業(yè)農村委員會提出、歸口并組織實施。

本文件起草單位：重慶市畜牧科學院、重慶市畜牧技術推廣總站、上海市農業(yè)科學院、四川省內江

市農業(yè)科學院。

本文件主要起草人：潘紅梅、朱燕、戴建軍、吳彩鳳、何孟纖、張亮、龍熙、陳力、郭宗義、高小

平、周旗、任素碧、涂志、柴捷、查琳。

I

DB50/T1461—2023

地方豬遺傳材料冷凍保存技術規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了地方豬種遺傳材料冷凍保存的基本要求、冷凍精液、冷凍成纖維細胞、冷凍胚胎、入

庫保存及檔案管理的要求。

本文件適用于地方豬精液、成纖維細胞和胚胎的冷凍保存。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T24862畜禽體細胞庫檢測技術規(guī)程

GB/T25172豬常溫精液生產與保存技術規(guī)范

NY/T1674牛羊胚胎質量檢測技術規(guī)程

NY/T1900畜禽細胞與胚胎冷凍保種技術規(guī)范

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

遺傳材料geneticmaterial

含有畜禽基因組、基因等遺傳物質的器官、組織、細胞、精子、卵母細胞和胚胎等的生物樣本。

4基本要求

4.1供體應健康，符合品種特征特性。

4.2可利用后備或淘汰母豬進行胚胎回收。

5冷凍精液

5.1供體數(shù)量

5.1.1系譜清晰的保種群，每個家系宜保存3頭及以上公豬，不足3頭全部保存。保存的公豬精液

應覆蓋所有家系。

5.1.2系譜不清的保種群，宜保存10頭以上公豬，不足10頭全部保存。

5.2質量要求

5.2.1有效精子數(shù)每支不低于5000萬個。

1

DB50/T1461—2023

5.2.2凍精解凍后活力不低于30%。

5.2.3精子畸形率不高于40%。

5.2.4細菌菌落數(shù)不高于1000CFU/mL。

5.2.5每個個體保存0.5mL細管凍精不低于300支。

5.3標識與記錄

5.3.1在細管上標明供體單位、品種、編號、家系和生產日期。

5.3.2記錄公豬精液冷凍信息，公豬精液冷凍記錄表見附錄A.1。

5.4品質檢測

應按照GB/T25172的規(guī)定執(zhí)行。

6冷凍成纖維細胞

6.1供體數(shù)量

6.1.1系譜清晰的保種群，保存的成纖維細胞應覆蓋所有家系。每個家系公豬成纖維細胞宜保存3頭

及以上，不足3頭全部保存。每個家系母豬成纖維細胞宜保存6頭及以上，不足6頭全部保存。

6.1.2系譜不清的保種群，宜保存10頭以上公豬和30頭以上母豬的成纖維細胞，公豬不足10頭、

母豬不足30頭全部保存。

6.2質量要求

6.2.1制作和質量應符合NY/T1900要求。

6.2.2每個個體細胞體外培養(yǎng)至3～4代，冷凍6管細胞，細胞密度為1×105個/mL～5×105個/mL。

6.2.3凍后臺盼藍染色檢查細胞活力80%以上，生長曲線與冷凍前生長曲線相近，核型正常，無病

原菌和支原體污染。

6.3標識與記錄

6.3.1在凍存管上標明供體單位、品種、樣品編號、家系、性別、培養(yǎng)代數(shù)和冷凍日期等。

6.3.2記錄成纖維細胞冷凍信息，成纖維細胞冷凍記錄表見附錄A.2。

6.4品質檢測

應按照GB/T24862的規(guī)定執(zhí)行。

7冷凍胚胎

7.1供體數(shù)量

7.1.1系譜清晰的保種群，用于胚胎收集的母豬和相應的配種公豬應覆蓋所有家系，每個家系的配種

公豬不少于3頭，不足3頭全部參加配種；母豬不少于6頭，不足6頭不宜制作冷凍胚胎。

7.1.2系譜不清的保種群，宜保存25頭母豬的胚胎，其中配種公豬數(shù)宜不少于10頭。群體母豬數(shù)

低于50頭，宜保存淘汰母豬胚胎。

7.2質量要求

2

DB50/T1461—2023

7.2.1回收的胚胎為首次配種后第6d和第7d的桑椹胚和囊胚。

7.2.2胚胎冷凍前的質量要求為A級，檢測方法參照NY/T1674的規(guī)定執(zhí)行。

7.3標識與記錄

7.3.1在胚胎凍存細管上標明供體單位、品種、供體母豬號、與配公豬號、胚胎發(fā)育期、胚胎等級、

冷凍方法、數(shù)量和冷凍日期等。

7.3.2記錄胚胎冷凍信息，胚胎冷凍記錄表見附錄A.3。

8入庫保存

冷凍精液、成纖維細胞和胚胎應符合本文件規(guī)定的質量要求，浸沒于液氮中保存。

9檔案管理

檔案記錄應長期保存。

3

DB50/T1461—2023

附錄A

（規(guī)范性）

遺傳材料冷凍保存的技術資料

A.1公豬精液冷凍記錄表。

表A.1公豬精液冷凍記錄表

品種：制作地點：制作日期：

制

備

公豬原精原精稀釋離心后稀釋平衡凍精作

注

人

耳品采精活力密度稀釋活密度預設稀釋平平解支袋

號種量（%）億/mL倍數(shù)力%億/mL密度量衡衡凍數(shù)數(shù)

/mL億/mLmL時后后

間活活

h力力

%%

記錄人：

4

DB50/T1461—2023

A.2成纖維細胞冷凍記錄表。

表A.2成纖維細胞冷凍記錄表

品種：制作地點：制作日期：

細活細支原體

冷

冷冷胞保力菌污染

凍

家性父母凍凍密存%污

耳號來源管制作人檢測人

系別號號代時度位染

數(shù)

次間個置

支

/ml

記錄人：

5

DB50/T1461—2023

A.3胚胎冷凍記錄表。

表A.3胚胎冷凍記錄表

品種：制作地點：制作日期：

供體母豬處理信息

母豬供體號品種胎次上次分娩日期處理前發(fā)情日期

超排與否超排方法

發(fā)情與配種

發(fā)情日期初配日期配種公豬號配種方式

胚胎回收

回收日期回收方式?jīng)_胚液名稱沖胚人員

黃體數(shù)—左側：右側：卵泡數(shù)—左側：右側：其他：

可用胚胎數(shù)：不可用胚胎數(shù)：未