ICS65.020.01

CCSB05

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標準

DB15/T3284—2023

北蟲草菌種制作技術(shù)規(guī)程

Technologycodeofpraticeofproductionforcordycepsmilitaris

spawns

2023-12-29發(fā)布2024-01-29實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T3284—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)果蔬標準化技術(shù)委員會（SAM/TC25）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)技術(shù)推廣中心、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學院、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大

學、赤峰市敖漢旗農(nóng)牧局、興安盟農(nóng)牧技術(shù)推廣中心。

本文件主要起草人：李志平、鮑紅春、苑興文、肖強、于傳宗、賀龍、朱玉成、王佐、李文彪、龐

杰、李小雷、賀琪、賈曉東、鄧海峰、閆慶琦、季祥、鄭莎、肖杰、張娜。

I

DB15/T3284—2023

北蟲草菌種制作技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了北蟲草菌種生產(chǎn)要求、菌種制備、檢驗、貯存技術(shù)。

本文件適用于北蟲草各級菌種生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T1731食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

北蟲草cordycepsmilitaris

又名蛹蟲草、北冬蟲夏草，隸屬于子囊菌門、蟲草科、蟲草屬，是一種藥、食用菌。子實體為棒狀

或蝌蚪狀，高45mm～50mm，淡黃色。

菌種spawn

生長在適宜基質(zhì)上具結(jié)實性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。

液體菌種liquidspawn

用液體培養(yǎng)基在生物發(fā)酵罐等容器中，通過深層培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的液體形態(tài)食用菌菌種。

母種stockculture

經(jīng)分離、純化、雜交、誘變等各種方法選育得到的具有結(jié)實性菌絲培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一

級種。

1

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原種preculturespawn

由母種移植、擴大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱為二級種。

栽培種spawn

由原種移植、擴大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱為三級種。

4生產(chǎn)要求

技術(shù)人員

菌種生產(chǎn)的技術(shù)人員是經(jīng)過培訓能夠掌握專業(yè)知識、制作菌種達到相關(guān)技術(shù)要求的。

場地選擇

4.2.1選址

選擇水電和交通便利、通風良好、便于供排水的場地。

4.2.2環(huán)境衛(wèi)生

要求500m之內(nèi)無畜禽養(yǎng)殖場、無垃圾場、無污水和其它污染源，遠離北蟲草種植區(qū)，尤其是遠離

北蟲草栽培廢棄物晾曬場，用水符合GB5749相關(guān)規(guī)定。

設(shè)施、設(shè)備

4.3.1原材料庫

通風、防雨、防潮、防蟲、防鼠、防火、防雜菌污染等。

4.3.2配料室、分裝室

水電便利，通風良好、空間充足，配料室配磅秤、天平、攪拌機，分裝室配分裝器等。

4.3.3滅菌室

水電安全便利、通風良好、空間充足，配有高壓滅菌鍋或滅菌柜、消防等設(shè)施。如果使用煤、天然

氣加熱，要求滅菌設(shè)施的出料門與加熱灶有隔斷設(shè)施。

4.3.4冷卻室及接種室

潔凈、防塵。冷卻室通風良好，配紫外燈；接種室門口設(shè)緩沖間或風淋室，配有超凈工作臺、接種

槍、高壓泵、酒精燈、紫外燈、防火設(shè)備等。

4.3.5培養(yǎng)室

潔凈、水電暢通、通風良好，配有恒溫培養(yǎng)箱或培養(yǎng)架、搖床、發(fā)酵罐、空調(diào)、殺菌設(shè)備等。

4.3.6菌種檢驗室

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DB15/T3284—2023

水電暢通，配有顯微鏡、pH計、菌落計數(shù)器等。

容器

4.4.1母種

玻璃試管（18mm×180mm或20mm×200mm）或平板培養(yǎng)皿，（90mm×90mm），試管塞帶有砂芯

或者不帶砂芯的硅膠塞。

4.4.2原種

耐高溫高壓的透明潔凈搖瓶或聚丙烯塑料瓶。

4.4.3栽培種

耐高溫高壓的帶有透氣蓋（膜）玻璃瓶、聚丙烯塑料瓶或不同容積規(guī)格發(fā)酵罐。

原料

葡萄糖、蛋白胨、硫酸鎂、磷酸二氫鉀等化學試劑，馬鈴薯、小麥、麥麩等要求新鮮、干燥、無蟲、

無霉變。

5菌種制備

培養(yǎng)基制備

5.1.1母種

配方為馬玲薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、瓊脂20g、蛋白胨5g、牛肉膏0.5g、酵母粉5g、磷酸

二氫鉀1g、硫酸鎂0.5g，加水定容1000mL，pH6.5～7.0。分裝至試管中，分裝量掌握在試管長度的

1/4。

5.1.2原種

配方為馬玲薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、蛋白胨5g、牛肉膏0.5g、酵母粉5g、磷酸二氫鉀1g、

硫酸鎂0.5g，加水定容1000mL，pH6.5～7.0。將液體培養(yǎng)基分裝至容器內(nèi)，分裝量不超總?cè)莘e的3/5。

5.1.3栽培種

制備配方和方法同原種，分裝量不超過搖床培養(yǎng)容器或發(fā)酵罐總?cè)莘e的3/5。

滅菌

培養(yǎng)基采用常壓或高壓滅菌，在高壓121℃～123℃（0.11MPa～0.15MPa）條件下滅菌20min～

25min，常壓100℃～105℃滅菌10h～12h，自然冷卻到50℃左右時，取出試管，擺放斜面，原

種和栽培種取出備用。

接種

5.3.1母種

在超凈工作臺上，取一段消毒好的子實體或培養(yǎng)的菌絲體放入試管培養(yǎng)基質(zhì)中間部位，操作過程按

照NY/T1731的規(guī)定執(zhí)行。

3

DB15/T3284—2023

5.3.2原種

每升接入4～5塊（2mm×2mm）母種，迅速置于原種培養(yǎng)基內(nèi)，及時蓋上瓶蓋，所有操作按照NY/T

528的規(guī)定執(zhí)行。

5.3.3栽培種

按栽培培養(yǎng)基體積的2%取原種，迅速放入栽培種培養(yǎng)基內(nèi)，及時蓋上瓶蓋，所有操作按照NY/T528

的規(guī)定執(zhí)行。

培養(yǎng)

5.4.1母種

將接好的試管置于20℃的恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)6d～8d，長至4cm～5cm時使用，或轉(zhuǎn)置于光照

強度為200Lx下培養(yǎng)2d～3d轉(zhuǎn)色后使用。

5.4.2原種和栽培種

置于18℃～22℃、120r/min～150r/min可控溫搖床上或發(fā)酵罐中暗培養(yǎng)5d～7d，當培養(yǎng)基

顏色變?yōu)樽厣螯S白色，且有大量菌絲碎片，不渾濁。

6檢驗

取