演講人：日期:檢驗科-血常規(guī)檢查操作規(guī)范目錄CATALOGUE01操作前準(zhǔn)備02樣本采集規(guī)范03樣本處理流程04檢測操作步驟05質(zhì)量控制體系06報告與文檔管理PART01操作前準(zhǔn)備儀器設(shè)備檢查樣本混勻設(shè)備驗證檢查渦旋混勻器轉(zhuǎn)速穩(wěn)定性（≥3000rpm）及定時功能，確保血液樣本充分混勻且無氣泡產(chǎn)生，避免血小板聚集或細(xì)胞分布不均影響檢測結(jié)果。備用電源與應(yīng)急方案確認(rèn)UPS不間斷電源電量充足，突發(fā)斷電時可維持儀器正常運行15分鐘以上，同時制定手工復(fù)檢預(yù)案（如顯微鏡計數(shù)法）以應(yīng)對設(shè)備故障。血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)與質(zhì)控每日開機前需執(zhí)行儀器校準(zhǔn)，并使用配套質(zhì)控品進行高、中、低值質(zhì)控檢測，確保儀器線性度、精密度和準(zhǔn)確性符合ISO15189標(biāo)準(zhǔn)要求。記錄質(zhì)控數(shù)據(jù)并分析趨勢，偏差超過±2SD需立即排查原因。030201核對試劑批號、有效期及外觀（無沉淀、變色），開瓶后需標(biāo)注啟用日期并在7日內(nèi)使用完畢。每批次新試劑需進行比對試驗，確保WBC分類散點圖與歷史數(shù)據(jù)一致性。試劑與耗材準(zhǔn)備溶血劑與稀釋液質(zhì)量控制采用EDTA-K2真空采血管（紫色頭蓋），驗證其抗凝比例（1.5-2.2mgEDTA/mL血）及真空度，防止凝血或過度抗凝導(dǎo)致細(xì)胞皺縮。抽樣檢測管壁硅化程度，避免血小板黏附?？鼓裳芎弦?guī)性檢查檢查穿刺針（21-23G）、采血針持器及微生物培養(yǎng)皿的滅菌標(biāo)識，確認(rèn)環(huán)氧乙烷殘留檢測報告符合YY/T0615標(biāo)準(zhǔn)，杜絕交叉感染風(fēng)險。一次性耗材無菌認(rèn)證實驗室溫濕度動態(tài)監(jiān)控通過物聯(lián)網(wǎng)傳感器實時記錄環(huán)境溫度（18-25℃）及相對濕度（30-70%），數(shù)據(jù)自動上傳LIS系統(tǒng)。溫度波動超限時啟動HVAC系統(tǒng)調(diào)節(jié)，防止樣本蒸發(fā)或儀器冷凝。生物安全柜性能驗證按NSF/ANSI49標(biāo)準(zhǔn)檢測HEPA過濾器完整性（PAO檢漏法），確保氣流速度≥0.38m/s，操作區(qū)噪聲≤65dB，保護操作者免受氣溶膠暴露危害。電磁干擾屏蔽措施檢測周邊變頻設(shè)備（如離心機）與血細(xì)胞分析儀的間距（≥1.5m），必要時安裝射頻濾波器，避免電磁脈沖導(dǎo)致血小板計數(shù)假性升高或白細(xì)胞分類異常。環(huán)境條件確認(rèn)PART02樣本采集規(guī)范患者準(zhǔn)備要求患者需保持8-12小時空腹?fàn)顟B(tài)，避免高脂飲食影響血液成分檢測結(jié)果，但可適量飲水以維持體液平衡?？崭?fàn)顟B(tài)要求采血前24小時內(nèi)禁止劇烈運動，防止運動導(dǎo)致的紅細(xì)胞壓積、白細(xì)胞計數(shù)等指標(biāo)暫時性升高。采血前需安撫患者情緒，避免緊張導(dǎo)致的血管收縮或應(yīng)激性白細(xì)胞增多現(xiàn)象。避免劇烈運動患者需主動告知近期服用藥物（如抗生素、激素類），部分藥物可能干擾血小板功能或白細(xì)胞分類計數(shù)結(jié)果。藥物影響告知01020403心理狀態(tài)調(diào)整采血技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)1234穿刺部位選擇優(yōu)先選擇肘正中靜脈或貴要靜脈，嬰幼兒可采用足跟或指尖采血，確保血流暢通且不易溶血。使用75%酒精棉球以穿刺點為中心螺旋式消毒，直徑≥5cm，待自然干燥后穿刺以避免假性溶血。消毒程序規(guī)范采血管順序按國際標(biāo)準(zhǔn)先采集血培養(yǎng)管，再采集抗凝管（如EDTA-K2管），最后采集血清管，防止交叉污染。采血量控制成人采血量通常為2-5ml，兒童按體重計算（1-2ml/kg），確?？鼓齽┡c血液比例精確（如EDTA管需1.5-2.2mg/ml血液）。樣本管需粘貼含患者姓名、ID號、條形碼的標(biāo)簽，同時手工標(biāo)注采血時間（精確到分鐘）及采血者工號。采集后室溫下2小時內(nèi)送檢，若延遲需4℃冷藏保存（不超過6小時），血小板功能檢測樣本需在30分鐘內(nèi)處理。出現(xiàn)凝塊、溶血（血漿呈粉紅色）、血量不足（＜標(biāo)示量80%）或標(biāo)識模糊的樣本需拒收并記錄原因。通過LIS系統(tǒng)記錄樣本流轉(zhuǎn)各環(huán)節(jié)（采集、運輸、接收、檢測），確保全程可追溯性，異常情況自動觸發(fā)預(yù)警。樣本標(biāo)識與管理雙重標(biāo)識原則運輸時效要求拒收標(biāo)準(zhǔn)信息化追溯PART03樣本處理流程雙人核對制度對溶血、凝血、脂血或量不足的樣本需單獨登記并標(biāo)注異常類型，及時與臨床溝通是否重新采集，同時在LIS系統(tǒng)中備注拒收原因及處理意見。異常樣本記錄時效性管理記錄樣本接收時間，確保從采集到檢測的時間間隔不超過4小時（特殊項目如血小板計數(shù)需2小時內(nèi)處理），超時樣本需評估是否影響結(jié)果可靠性。接收樣本時需由兩名工作人員同步核對患者信息（姓名、性別、年齡、病歷號）、檢驗項目及樣本類型（如EDTA抗凝全血），確保標(biāo)簽與申請單完全一致，避免樣本混淆或信息錯誤。樣本接收與登記抗凝處理要點抗凝失效處理若發(fā)現(xiàn)樣本中有肉眼可見凝塊，需記錄為“抗凝失敗”并拒檢，同時提示臨床重新采集，避免因纖維蛋白干擾導(dǎo)致細(xì)胞計數(shù)誤差。03采血后立即輕柔顛倒混勻8-10次，確?？鼓齽┡c血液充分接觸，禁止劇烈搖晃以防溶血或血小板激活。02混勻操作規(guī)范抗凝劑選擇嚴(yán)格采用EDTA-K2或EDTA-K3真空采血管（紫頭管），抗凝劑與血液體積比為1:9，避免過量抗凝劑導(dǎo)致細(xì)胞皺縮或不足引起微凝血塊。01離心與分裝步驟離心參數(shù)設(shè)定使用水平離心機，3000rpm離心10分鐘（相對離心力RCF≥1000×g），確保血漿與細(xì)胞層分離清晰，避免紅細(xì)胞壓積（HCT）檢測偏差。質(zhì)量控制措施離心后檢查是否有溶血或脂血干擾，若發(fā)現(xiàn)異常需在報告中備注“樣本狀態(tài)可能影響結(jié)果”，并保存離心后樣本圖像至質(zhì)控數(shù)據(jù)庫備查。分裝標(biāo)準(zhǔn)化操作使用無菌移液槍吸取上層血漿至標(biāo)識清晰的EP管中，避免觸碰白細(xì)胞層（Buffycoat），分裝后立即加蓋防止蒸發(fā)或污染，分裝管標(biāo)注原樣本編號及分裝時間。PART04檢測操作步驟每日開機校準(zhǔn)使用標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)品對血細(xì)胞分析儀進行每日基線校準(zhǔn)，確保儀器光學(xué)系統(tǒng)、流體系統(tǒng)和電子系統(tǒng)的穩(wěn)定性，偏差需控制在±2%以內(nèi)。校準(zhǔn)后需記錄激光電壓、鞘流壓力等關(guān)鍵參數(shù)。儀器校準(zhǔn)方法質(zhì)控品驗證在每批次樣本檢測前運行高、中、低三個濃度水平的質(zhì)控品，驗證儀器線性范圍和重復(fù)性，若質(zhì)控結(jié)果超出允許范圍（如SD>3），需暫停檢測并排查原因。定期維護校準(zhǔn)每月執(zhí)行一次全系統(tǒng)校準(zhǔn)，包括血紅蛋白比色計校準(zhǔn)、白細(xì)胞分類通道校準(zhǔn)及血小板計數(shù)閾值調(diào)整，校準(zhǔn)后需通過第三方質(zhì)控品驗證。血細(xì)胞計數(shù)操作樣本采集與預(yù)處理采用EDTA抗凝真空采血管采集靜脈血2ml，輕柔顛倒混勻8-10次，避免凝血或溶血。樣本需在4小時內(nèi)完成檢測，若延遲需冷藏保存（2-8℃）并復(fù)溫后混勻。030201上機檢測流程將樣本置于自動進樣架，設(shè)置雙盲復(fù)測模式（至少10%樣本復(fù)測），儀器自動完成紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板計數(shù)及血紅蛋白濃度測定，同時生成直方圖和散點圖。異常樣本處理對出現(xiàn)血小板聚集、白細(xì)胞分類異常（如嗜堿性粒細(xì)胞>5%）的樣本，需人工推片染色鏡檢復(fù)核，并在報告中備注“顯微鏡復(fù)檢結(jié)果優(yōu)先”。結(jié)果初步審核數(shù)據(jù)邏輯性檢查核對紅細(xì)胞計數(shù)與血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積的關(guān)聯(lián)性（如MCHC應(yīng)在320-360g/L范圍內(nèi)），若不符需排查儀器故障或樣本異常（如脂血干擾）。臨床相關(guān)性分析結(jié)合患者病史（如化療后需關(guān)注中性粒細(xì)胞絕對值）及臨界值（如WBC<4.0×10?/L提示白細(xì)胞減少），對異常結(jié)果標(biāo)注警示標(biāo)志。報告簽發(fā)前復(fù)核由中級以上檢驗師雙人審核結(jié)果，確保無單位錯誤（如將fL誤寫為pL）或小數(shù)點錯位，審核通過后加蓋電子簽名并上傳LIS系統(tǒng)。PART05質(zhì)量控制體系室內(nèi)質(zhì)控執(zhí)行每天開機后需使用配套質(zhì)控品進行檢測，確保儀器穩(wěn)定性，記錄Levey-Jennings質(zhì)控圖數(shù)據(jù)，偏差超過2SD需立即排查原因并復(fù)測。嚴(yán)格執(zhí)行Westgard多規(guī)則（如1-3s、2-2s、R-4s等規(guī)則），對紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞分類等關(guān)鍵參數(shù)進行交叉驗證，防止系統(tǒng)誤差累積。制定《血常規(guī)操作SOP手冊》，要求檢驗人員統(tǒng)一采血手法（如靜脈血采集需避免溶血）、抗凝劑比例（EDTA-K2濃度為1.5-2.2mg/ml）及混勻次數(shù)（8-10次）。每日質(zhì)控樣本檢測質(zhì)控規(guī)則應(yīng)用人員操作標(biāo)準(zhǔn)化異常結(jié)果處理當(dāng)血小板<50×10?/L或>1000×10?/L、白細(xì)胞異常增高伴核左移、血紅蛋白與紅細(xì)胞壓積不符時，自動觸發(fā)涂片鏡檢和儀器沖洗程序。復(fù)檢規(guī)則觸發(fā)機制臨床溝通流程干擾因素排除對危急值（如HGB<70g/L、WBC>30×10?/L）需15分鐘內(nèi)電話通知臨床科室，記錄接聽人姓名及反饋內(nèi)容，并在LIS系統(tǒng)中標(biāo)注"已報危急值"。針對脂血標(biāo)本導(dǎo)致的血紅蛋白假性升高，需離心后血漿置換；冷凝集樣本需37℃水浴30分鐘后重新檢測。定期校準(zhǔn)計劃儀器分級校準(zhǔn)每日進行光電比色系統(tǒng)光路校準(zhǔn)，每周執(zhí)行鞘流阻抗計數(shù)孔電壓校準(zhǔn)，每季度由廠家工程師進行激光散射角度全參數(shù)校準(zhǔn)。環(huán)境監(jiān)控記錄實驗室需維持18-25℃恒溫環(huán)境，每日記錄溫濕度數(shù)據(jù)，確保血細(xì)胞分析儀在最佳工況下運行，溫度波動超過±2℃需暫停檢測。所有校準(zhǔn)品需具備CNAS認(rèn)可的二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書，血紅蛋白檢測需定期與氰化高鐵血紅蛋白分光光度法進行方法學(xué)比對。溯源體系建立PART06報告與文檔管理標(biāo)準(zhǔn)化模板要求報告需附檢驗醫(yī)師簽名及審核時間，對異常結(jié)果（如白細(xì)胞顯著升高或貧血指標(biāo)異常）應(yīng)添加備注建議（如“建議結(jié)合臨床復(fù)查”或“需排除感染”）。結(jié)果解讀與備注電子與紙質(zhì)雙版本報告需同步生成電子版（通過LIS系統(tǒng)傳輸至臨床科室）和紙質(zhì)版（打印后加蓋檢驗科專用章），確保信息一致性和可追溯性。血常規(guī)報告需采用統(tǒng)一模板，包含患者基本信息（姓名、性別、年齡、病歷號）、樣本編號、檢測日期、檢測項目（如紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞分類、血小板參數(shù)等）、參考值范圍及異常值標(biāo)記（如↑/↓或顏色標(biāo)注）。報告生成格式數(shù)據(jù)記錄要求原始數(shù)據(jù)保存檢測儀器生成的原始數(shù)據(jù)（如細(xì)胞直方圖、散點圖）需完整保存至實驗室信息系統(tǒng)（LIS），保留至少2年，以備復(fù)查或質(zhì)控分析。手工復(fù)檢記錄對儀器報警或異常結(jié)果需進行手工復(fù)檢（如血涂片鏡檢），記錄復(fù)檢方法、操作人員及復(fù)核結(jié)論，確保結(jié)果可靠性。質(zhì)控數(shù)據(jù)歸檔每日室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)（如紅細(xì)胞計數(shù)的CV值）需與患者檢測結(jié)果分開存儲，定期導(dǎo)出備份，符合