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文檔簡(jiǎn)介

單元提優(yōu)小測(cè)綜合提優(yōu)

第3章基因工程

一、選擇題(共15題,每題2分,共30分)

1.質(zhì)粒是基因工程中的“分子運(yùn)輸車“,其結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng),下列說法錯(cuò)誤的

是()

A.質(zhì)??梢詳y帶外源DNA片段進(jìn)入受體細(xì)胞并進(jìn)行自我復(fù)制

B.質(zhì)粒上含有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),便于外源DNA插入

C.質(zhì)粒上常具有某些特殊的標(biāo)記基因

D.目前常用的質(zhì)粒主要來自于噬菌體或動(dòng)植物病毒

2.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)操作方法及原理的敘述,其中錯(cuò)誤的有

()

①香蕉、菜花和雞血細(xì)胞均可作為提取DNA的材料

②可以使用冷卻的酒精初步分離DNA和蛋白質(zhì)

③可使用纖維素酶處理植物細(xì)胞,能更好地提取DNA

@DNA在2mol?L^NaCI溶液中溶解度最低,可用于提取DNA

⑤DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后可觀察到藍(lán)色

A.1項(xiàng)B.2項(xiàng)C.3項(xiàng)D.4項(xiàng)

3.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生及食品工業(yè)等方面得到了廣泛的應(yīng)用。下列敘述

中,沒有應(yīng)用基因工程的是()

A.將蘇云金桿菌的抗蟲基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞得到抗蟲棉

B.可通過構(gòu)建基因工程菌,然后利用發(fā)酵技術(shù)來大量生產(chǎn)淀粉酶和脂肪酶

C.對(duì)微生物或動(dòng)植物細(xì)胞進(jìn)行基因改造,使它們能夠生產(chǎn)細(xì)胞因子、抗體等藥物

D.將具有抗病基因的油菜細(xì)胞和不抗病的甘藍(lán)細(xì)胞融合培養(yǎng)得到抗病的油菜一

甘藍(lán)

4.下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述,正確的是()

A.蛋白質(zhì)工程不需要用到限制酶和DNA連接酶

B.蛋白質(zhì)工程就是根據(jù)人們的需要,直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾

C.蛋白質(zhì)工程能改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),使之更加符合人類需要

D.蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的都是獲得人類需要的蛋白質(zhì),二者沒有區(qū)別

5.下列有關(guān)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()

A.調(diào)查土壤小動(dòng)物的豐富度時(shí),應(yīng)采用標(biāo)記重捕法展開調(diào)查

B.色素提取實(shí)驗(yàn)中,研磨葉片時(shí)應(yīng)加入CaCO3以防止葉綠素被破壞

C.進(jìn)行DNA粗提取與鑒定時(shí),可采用冷酒精作為DNA的溶劑

D.用淀粉、蔗糖、淀粉酶探究酶的專一性時(shí),可用碘液作為檢測(cè)試劑

6.基因工程需要用到多種工具酶。下列有關(guān)敘述正確的是()

A.限制酶能夠在DNA分子的特定部位斷開氫鍵形成黏性末端或平末端

B.利用T4DNA連接酶能夠較高效率的“縫合”雙鏈DNA片段的平末端

C.在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),需要使用解旋酶使DNA雙鏈解開

D.TaqDNA聚合酶能將脫氧核甘酸添加到引物的3'端

7.干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白,某基因公司生產(chǎn)干擾素的過程

如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是()

A.利用酵母菌作為工程菌生產(chǎn)干擾素原因之一是它出芽生殖方式繁殖的速度快

B.從人的淋巴細(xì)胞中提取的干擾素基因?yàn)槟康幕颍康幕蛑饕蔷幋a蛋白質(zhì)

的基因

C.為了使帶干擾素基因的質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌,可以用Ca2+處理酵母菌

D.若選用大腸桿菌作為工程菌,也可以直接獲得有生物活性的干擾素

8.科學(xué)家將0b3/4、Sox2、c-M.vc和K/融基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)

胞,經(jīng)培養(yǎng)后這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài),具有活躍的分裂能力,稱為iPS

細(xì)胞。若將病人的皮膚成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞,可用于疾病治療。下列敘述錯(cuò)

誤的是()

A.在該實(shí)驗(yàn)過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒作為目的基因的載體

B.欲驗(yàn)證iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用,應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的.對(duì)照

C.iPS細(xì)胞用于疾病治療時(shí)一般不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)

D.iPS細(xì)胞用于疾病治療時(shí)不存在分化為腫瘤細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn)

9.下列關(guān)于利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白的敘述,正確的是()

A.需要將編碼藥用蛋白的基因與能在乳腺中特異性表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控

元件重組在一起

B.需要將目的基因?qū)肴橄偌?xì)胞中

C.需要借助于核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)培育出轉(zhuǎn)基因動(dòng)物

D.藥物的生產(chǎn)不會(huì)受到轉(zhuǎn)基因動(dòng)物性別和年齡的限制

10.為了確認(rèn)豬的肝臟細(xì)胞和西蘭花莖的細(xì)胞存在哪些共性,某生物興趣小組進(jìn)

行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),下列關(guān)于結(jié)果預(yù)測(cè)錯(cuò)誤的是()

選結(jié)果

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

項(xiàng)豬肝臟細(xì)胞西蘭花

A提取DNA出現(xiàn)白色絲狀物出現(xiàn)白色絲狀物

B利用光學(xué)顯微鏡觀察是否有細(xì)胞核是

C利用光學(xué)顯微鏡觀察是否有葉綠體否

D利用光學(xué)顯微鏡觀察是否進(jìn)行減數(shù)分裂否

11.某重組病毒疫苗的制備原理是將該病毒S蛋白受體結(jié)合區(qū)(RBD)基因通過

基因工程技術(shù)重組到中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞內(nèi),在體外大量表達(dá)出RBD二

聚體,提取后制備成疫苗。下列敘述正確的是()

A.CHO細(xì)胞作為該病毒的宿主細(xì)胞,提供病毒所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

B.該病毒的基因重組到CHO細(xì)胞的DNA分子上需要限制酶和熱穩(wěn)定的DNA聚

合酶的參與

C.體外培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)需添加適量的干擾素防止雜菌污染

D.要檢測(cè)RBD基因在CHO細(xì)胞中成功表達(dá),可用抗原一抗體雜交方法

12.棉花產(chǎn)業(yè)在我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的發(fā)展中占有舉足輕重的地位,為了抵抗蟲害,我

國(guó)育成了擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,棉丑生態(tài)環(huán)境得到改善。相關(guān)敘述

錯(cuò)誤的是()

A.通過觀察害蟲吃轉(zhuǎn)基因棉葉是否死亡屬于分子水平的檢測(cè)

啟動(dòng)為

插入基因

\\抗生素〃券[卜孑

復(fù)制原R抗性歲因/八,

衣達(dá)載體

A.基因表達(dá)載體中堿基A+C的數(shù)量與T+G的數(shù)量相等

B.構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟

C抗生素抗性基因等標(biāo)記基因有利于對(duì)重組DNA分子進(jìn)行篩選

D.終止子位于目的基因下游,可以使翻譯在所需要的地方停下來

二、不定項(xiàng)選擇題(共5題,每題3分,共15分)

16.(2023?江蘇揚(yáng)州中學(xué)校考)BcJ2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因,可以利用PCR

技術(shù)檢測(cè)其轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系,下圖為

克隆豬的培育及Bcl2基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程。下列有關(guān)敘述正確的是()

產(chǎn)統(tǒng)重組細(xì)胞早期胚胎一。受體子宮一*克隆豬

良種豬f陶胞/Sw

總mRNA耳cDNA43r增產(chǎn)物

A.圖示過程說明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞仍具有發(fā)育的全能性

B.在早期胚胎發(fā)育的不同時(shí)期提取的總mRNA存在差異

C.圖中過程X表示逆轉(zhuǎn)錄,獲得的cDNA可用于克隆豬基因組的測(cè)序

D.利用(Bcl2cDNA)/cDNA的比值可初步檢測(cè)Bc/2基因的轉(zhuǎn)錄水平

17.基因啟動(dòng)子中胞喀咤甲基化與生物的表觀遺傳密切相關(guān)。甲基化特異性PCR

(MSP)技術(shù)是測(cè)定基因是否甲基化的常用方法,其主要原理及過程如下圖。下

列有關(guān)敘述正確的是(:)

5,...—A—c—G一叫?一C—A…3'

3'…—T—G-raC-G-G-A--5r

I亞硫酸鈉處理

5'…一A—U—G一叫2—17—A…3'

3,...—T—G-mC-G-G-A--5r

PCR、產(chǎn)物分析

注:mC代表甲基化胞喀咤

A.基因啟動(dòng)子中胞咤甲基化造成基因堿基序列的改變

B.MSP過程中應(yīng)根據(jù)亞硫酸鈉處理前后的堿基序列設(shè)計(jì)兩對(duì)引物

C.PCR過程中甲基化組的退火溫度比非甲基化組的高

D.PCR完成后,可采用瓊脂糖凝膠電泳或紫外分光光度計(jì)對(duì)MSP產(chǎn)物進(jìn)行鑒定

分析

18.控制哺乳動(dòng)物的性別對(duì)于畜牧業(yè)生產(chǎn)具有十分重要的意義。SRY基因是Y染

色體上決定雄性性別的基因,SRY—PCR胚胎性別鑒定技術(shù)是現(xiàn)階段進(jìn)行胚胎性

別鑒定最準(zhǔn)確和最有效的方法。下列說法正確的是()

A.哺乳動(dòng)物的Y染色體比X染色體大而長(zhǎng),從而對(duì)胚胎性別進(jìn)行控制

B.從Y染色體DNA分子上獲取SRY基因,可用SRY基因的部分核甘酸序列作

引物

C.SRY—PCR胚胎性別鑒定技術(shù)中,要用到SRY基因特異性探針進(jìn)行檢測(cè)

D.利用PCR經(jīng)過3次循環(huán),理論上獲得的SRY基因占擴(kuò)增產(chǎn)物的一半

19.(2023?江西九江統(tǒng)考)反義基因能用于基因治療,即通過反義基因產(chǎn)生的反

義RNA分子,與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)來阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成,

從而達(dá)到治療疾病的目的。研究發(fā)現(xiàn)抑癌基因(圖中抗癌基因)的?個(gè)鄰近基因

能指導(dǎo)合成反義RNA,其作用機(jī)理如圖所示。下列相關(guān)說法正確的是(:

抗癌基因鄰近基因

mRNA-反義RNA

A.反義RNA與抗癌基因的mRNA堿基配對(duì),可抑制抗癌基因的表達(dá)

B.人類基因需要通過轉(zhuǎn)錄形成mRNA并以此為模板來合成蛋白質(zhì)

C.若患者接受該類基因治疔,則患者體內(nèi)的病變基因不能翻譯

D.將反義基因?qū)胭|(zhì)粒的啟動(dòng)子上游,有利于反義基因的表達(dá)

20.瓊脂糖凝膠電泳常月于檢測(cè)不同大小的DNA片段,電泳圖譜中DNA片段越

小,距離起點(diǎn)越遠(yuǎn)。科研人員利用EcoR\和Sma\兩種限制酶處理DNA分子甲,

得到如下圖所示的圖譜,其中1號(hào)泳道是DNA標(biāo)準(zhǔn)品(含有若干種長(zhǎng)度已知的

DNA樣品,通過與之比較可粗略判斷待測(cè)DNA樣品的長(zhǎng)度)的電泳結(jié)果,2號(hào)

、3號(hào)、4號(hào)是分別用EcoRi單獨(dú)處理、Sma\單獨(dú)處理、EcoRi和Snial共同處

理DNA分子甲后的電泳結(jié)果。下列說法正確的是()

A.據(jù)圖可知,B端是電泳的起始端

B.DNA分子甲最可能為環(huán)狀DNA分子

C.在DNA分子甲中,EcoR}和Sma\的酶切位點(diǎn)相距約200bp

D.F.coR]和切DNA分子甲后產(chǎn)生了不同的黏性末端

三、非選擇題(共5大題,55分)

21.高危型HPV持續(xù)感染人體可導(dǎo)致宮頸癌,常用HPV抗體檢測(cè)血清中的HPV

含量,進(jìn)行宮頸癌的臨床診斷。如圖所示的是HPV單克隆抗體的制備流程示意圖

。回答下列問題:

B淋巴培養(yǎng)骨

基因細(xì)胞髓瘤細(xì)胞

重冢1@慶商1提取.

XbaI質(zhì)粒廣I拜笛瓦礦消融舞總產(chǎn)

?AscI

BamHI

SalI雜交瘤細(xì)胞

______依)

單克隙抗體|3471

(1)若①過程表示擴(kuò)增HPV基因,則采用的技術(shù)手段是技術(shù),該過程

可以在中自動(dòng)完成,常采用來鑒定PCR的產(chǎn)物。

(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),為確保HPV基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接,可采用的限制醐為—

;過程②一般先用處理大腸桿菌細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種—

的生理狀態(tài),然后再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中。

(3)誘導(dǎo)能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的常用方法有

,③表示過程,獲得的C細(xì)胞的特點(diǎn)是o

22.人血清白蛋白(HISA)在臨床上的需求量大,由于其來源有限和有生物污染

的風(fēng)險(xiǎn),重組人血清白蛋白(rHSA),成為其重要的替代品??蒲腥藛T將"SA基

因轉(zhuǎn)入酵母菌細(xì)胞,獲得了重組人血清白蛋白。圖為酵母困基因改造以及工業(yè)化

發(fā)酵生產(chǎn)rHSA的過程示意圖,其中I、II、1【[、IV是四種不同的限制酶,各自

識(shí)別的酶切位點(diǎn)如表所示。請(qǐng)回答:

限制酶InniIV

1I

GGATCCTGATCAGTACAGCTT

識(shí)別序列及切割位點(diǎn)

CCTAGGACTAGTCATGTTCGAA

t?t

(1)工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)rHSA的過程一般包括菌種的選育,擴(kuò)大培養(yǎng)、、

接種、發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面,其中,是該工程的中心環(huán)節(jié)。

(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因需要引物,設(shè)計(jì)引物的原則是

o(答出兩點(diǎn)即可)

(3)科研人員將HSA基因插入質(zhì)粒中時(shí),最好選擇限制酶進(jìn)行共同切

割,原因是(答出2點(diǎn)即可)。

(4)構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要使用酵母菌蛋白基因的啟動(dòng)子AOX,原因是

____________________________________________________________o將受體酵母

菌置于含有的涪養(yǎng)基中進(jìn)行篩選培養(yǎng),以獲得能表達(dá)HSA的細(xì)胞。

23.(2023?陜西西安??迹┙陙恚侵挢i瘟(ASF)在我國(guó)多地蔓延,給家豬

養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大損失。目前控制該病主要依靠快速、準(zhǔn)確的診斷方法,盡早發(fā)

現(xiàn)、處理,防止擴(kuò)散。某研究團(tuán)隊(duì)通過相關(guān)生物學(xué)技術(shù)制備了非洲豬瘟病毒(ASFV

)核心蛋白p54的單克隆抗體。相關(guān)實(shí)驗(yàn)過程如圖,回答下列問題:

GenBank*中查詢①ASFVPCRASFV

P54基因一P54基因.雪大腸桿曲里■空溢

ASFVp54基因序歹ij-

pET28a載體I?

B細(xì)胞注入小取

黑克鼠體q小鼠腹水

—雜交痛細(xì)胞■

I骨髓痛細(xì)胞

?GenBank是一博因數(shù)據(jù)陳名稱。

(1)步驟①中獲取0的基因的方法是。若ASFVp54基因

序列中無限制酶切位點(diǎn),為確保AS尸勿54基因與pET28a載體正確連接,在步驟

中應(yīng)該o

(2)步驟②操作中大腸桿菌可被稱為o步驟④處理是為了

(3)利用ASFVp54單克隆抗體能快速、準(zhǔn)確診斷ASF是因?yàn)槠?/p>

24.(2023?山東淄博期末)玉米是重要的糧食作物,其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一

種水通道蛋白,由P基因編碼,在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中對(duì)水分的吸收具有重要的

調(diào)節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米,回答下列問題。

5,P基因y

AU±ULULLLLUJC

___B??-口[11[?D____

3'圖15,

P

對(duì)

達(dá)

(1)利用PCR技術(shù)以圖1中的DNA片段為模板擴(kuò)增P基因,需要的引物有

(從A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇)。上述過程中,至少經(jīng)過

次循環(huán)后會(huì)產(chǎn)生雙鏈等長(zhǎng)的P基因片段,循環(huán)4次共需要的引物數(shù)為

(2)研究人員利用PCR技術(shù)獲得了P基因,有關(guān)該過程的敘述正確的有

(不定項(xiàng))。

A.需要了解P基因的全部堿基序列

B.新鏈的合成只能從3―5,

C.反應(yīng)體系加入的酶需具有熱穩(wěn)定性

D.G/C含量高的引物在與模板鏈結(jié)合時(shí),靈性的溫度較高

(3)圖2中強(qiáng)啟動(dòng)子是的結(jié)合位點(diǎn),可驅(qū)動(dòng)基因的表達(dá)。在P基因表

達(dá)過程中,轉(zhuǎn)錄所需的原料是

(4)培育超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米過程中所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切

位點(diǎn)如圖2所示。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá),應(yīng)優(yōu)先選用酶組合

,理由是;不選用圖中其它限制酶

的原因是0

(5)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入一

(填“潮霉素”“卜那霉素”或“潮霉素或k那霉素”〉進(jìn)行篩選,篩選出的愈

傷組織經(jīng)________形成叢芽,最終獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(6)P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖3所示,可作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉

米的生理特性研究實(shí)驗(yàn)材料的有。

25.新冠病毒核酸檢測(cè)是目前篩查新冠感染者最精準(zhǔn)、有效、低成本的技術(shù)方式。

核酸檢測(cè)主要用熒光定量RT-PCR技術(shù),這種技術(shù)是RT-PCR技術(shù)與熒光定量

PCR技術(shù)的結(jié)合。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是通過熒光信

號(hào),對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期,模板的Ct值和該

模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,所以成為定量的依據(jù),Ct值是產(chǎn)物熒光強(qiáng)度

首次超過設(shè)定閾值時(shí)PCR所需的循環(huán)次數(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR所使用的熒光物

質(zhì)可分為兩種:熒光染料和熒光探針,在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒

光染料,SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻

入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與

PCR產(chǎn)物的增加完全同步。為了進(jìn)一步確保熒光檢測(cè)的就是靶DNA序列,人們

又設(shè)計(jì)了TaqMan探針。TaqMan探針是一小段單鏈DNA,并且該單鏈DNA的

5利3,端帶有短波長(zhǎng)和長(zhǎng)波長(zhǎng)兩個(gè)不同熒光基團(tuán)。這兩個(gè)熒光基團(tuán)由于距離過近,

在熒光共振能量轉(zhuǎn)移作用下發(fā)生了熒光淬滅,因而檢測(cè)不到熒光。PCR反應(yīng)開始

后,發(fā)生一系列變化,熒光基因在激光下發(fā)出熒光(熒光探針檢測(cè)過程如圖)。

引物

(1)在檢測(cè)過程中,先采用RT-PCR技術(shù)將新冠病毒的核酸(填寫

過程)為對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核酸,再采用熒光定量PCR技術(shù)。

(2)利用熒光染料SYBR可以檢測(cè)PCR反應(yīng)中獲得的全部雙鏈DNA,PCR產(chǎn)

物的產(chǎn)量由來反映;此方法的缺點(diǎn)是O

(3)利用TaqMan探針檢測(cè),TaqMan探針的設(shè)計(jì)依據(jù)是。

熒光基因發(fā)出熒光的原因是每擴(kuò)增一條D

NA鏈,就有個(gè)熒光分子形成。

(4)新冠病毒檢測(cè)除了利用核酸檢測(cè)以外,還可以通過抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè),

其中核酸檢測(cè)和抗原檢測(cè)都可以通過鼻咽拭子采樣,而抗體檢測(cè)常通過_______

采樣。

參考答案

1.D【解析】質(zhì)粒可以攜帶外源DNA片段進(jìn)入受體細(xì)胞并進(jìn)行自我復(fù)制,因

此其可作為基因工程的載體,A正確;質(zhì)粒上含有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),

便于外源DNA插入,B正確;質(zhì)粒上常具有某些特殊的標(biāo)記基因(如抗性基因)

,以便于重組后重組DNA的篩選,C正確;常用的載體包括質(zhì)粒、噬菌體的衍

生物、動(dòng)植物病毒,質(zhì)粒主要來自細(xì)菌和真菌,D錯(cuò)誤。

2.A【解析】理論上只要含有DNA的生物組織均可作為該實(shí)驗(yàn)的材料,因此

,香蕉、菜花和雞血細(xì)胞均可作為提取DNA的材料,①正確;DNA不溶于酒精

溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精,因此提取DNA時(shí)加入預(yù)冷的、體積分

數(shù)為95%的酒精溶液可以初步分離DNA和蛋白質(zhì),②正確;可使用纖維素酶處

理植物細(xì)胞,能更好地提取DNA,可使用纖維素酶處理植物細(xì)胞,能更好地提

取DNA,③正確:DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14

moILNaCl溶液中溶解度最低,在2moiL」NaCl溶液中溶解度最高,故可使用

2mo卜UNaCI溶液對(duì)DNA進(jìn)行溶解,④錯(cuò)誤;利用DNA與二苯胺沸水浴加熱

呈藍(lán)色的特征,可用于DNA的鑒定,DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷

卻后可觀察到藍(lán)色,⑤正確。故選A。

3.D【解析】我國(guó)科學(xué)家將蘇云金桿菌的"抗蟲基因轉(zhuǎn)入普通棉花細(xì)胞內(nèi),

成功在植株中檢測(cè)到Bt抗蟲蛋白,該蛋白對(duì)棉鈴蟲等害蟲具有顯著毒性,該技

術(shù)利用了基因工程,A不符合題意;可通過目的基因的序列與質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建

重組表達(dá)載體,再經(jīng)過細(xì)菌轉(zhuǎn)化、篩選及鑒定,即可建立能穩(wěn)定生產(chǎn)淀粉酶和脂

肪酶基因工程菌,B不符合題意;對(duì)微生物或動(dòng)植物的細(xì)胞進(jìn)行基因改造,使它

們能夠生產(chǎn)藥物,是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域,C不符合題

意;將具有抗病基因的油菜細(xì)胞和不抗病的甘藍(lán)細(xì)胞融合培養(yǎng)得到抗病的油菜一

甘藍(lán)利用的是植物體細(xì)胞雜交技術(shù),不涉及基因工程,D符合題意。

4.C【解析】蛋白質(zhì)工程最終是通過基因修飾或基因合成來實(shí)現(xiàn)的,用到限制

酶和DNA連接酶,A錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程的直接操作對(duì)象是基因,B錯(cuò)誤;蛋白

質(zhì)工程可以改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),產(chǎn)生自然界中不存在的蛋白質(zhì),能制造新的

蛋白質(zhì),C正確;蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的均是獲得人類需要的蛋白質(zhì),但

基因工程只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋臼質(zhì),而蛋臼質(zhì)工程可對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行

改造,從而制造一種新的蛋白質(zhì),D錯(cuò)誤。

5.B【解析】調(diào)查土壤小動(dòng)物的豐富度時(shí),應(yīng)采用取樣器取樣法展開調(diào)查,A

錯(cuò)誤;色素提取實(shí)驗(yàn)中,研磨葉片時(shí)應(yīng)加入Ca83以中和有機(jī)酸,防止葉綠素

被破壞,B正確;DNA不溶于酒精,因此在進(jìn)行DNA粗提取與鑒定時(shí),采用冷

酒精是為了析出DNA,而不是作為溶劑溶解DNA,C錯(cuò)誤;蔗糖不與碘液反應(yīng)

呈藍(lán)色,蔗糖分解產(chǎn)物也不與淀粉反應(yīng)呈藍(lán)色,因此不能用碘液來檢測(cè)蔗糖是否

被淀粉酶催化水解,D錯(cuò)誤。

6.D【解析】限制酶能識(shí)別特定的脫氧核甘酸序列,并在特定位點(diǎn)進(jìn)行切割,

斷開磷酸二酯鍵,A錯(cuò)誤;利用T4DNA連接酶能夠“縫合”雙鏈DNA片段的平

末端,但效率較低,B錯(cuò)誤;在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),不需要使用解旋酶使DNA雙

鏈解開,而是需要高溫變性過程使氫鍵斷裂,C錯(cuò)誤;根據(jù)子鏈的延伸方向,

TaqDNA聚合酶能將脫氧核甘酸添加到引物的甲瑞,且該酶具有耐高溫的特性,

D正確。

7.D【解析】利用酵母菌作為工程菌生產(chǎn)干擾素原因之一是酵母菌為真核生物

,細(xì)胞中具備蛋白質(zhì)加工的結(jié)構(gòu),且可利用出芽生殖快速繁殖,A正確;圖中目

的基因的獲取方法是從人的淋巴細(xì)胞中提取的,該目的基因能編碼干擾素,B正

確;為了使帶干擾素基因的質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌,可以用Ca2+處理酵母菌,進(jìn)而提高

轉(zhuǎn)化效率,C正確;若選用大腸桿菌作為工程菌,由于大腸桿菌為原核生物,細(xì)

胞中不具有加[:蛋白質(zhì)所需要的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體結(jié)構(gòu),因而不能直接獲得有生

物活性的干擾素,D錯(cuò)誤。

8.D【解析】逆轉(zhuǎn)錄病毒可以通過逆轉(zhuǎn)錄合成DNA,并且將合成的DNA整合

到宿主細(xì)胞的DNA上,通過題干信息可知,逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是作為載體,能

將外源基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因送入小鼠成纖維細(xì)胞中,A正確;

欲驗(yàn)證iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由丁外源基因的作用,外源基因的有無是自變量,因此

應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的對(duì)照組,B正確;因?yàn)樵谡T導(dǎo)轉(zhuǎn)化的過程中細(xì)胞的遺傳

物質(zhì)沒有發(fā)生變化,理論上產(chǎn)生的還是“自體”細(xì)胞,所以不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)

,C正確;由于iPS細(xì)胞擁有分化為各種細(xì)胞的潛能,因此存在分化成腫瘤細(xì)胞

的風(fēng)險(xiǎn),D錯(cuò)誤。

9.A【解析】要使藥用蛋白基因在奶牛乳腺中特異性表達(dá),應(yīng)將藥用蛋白基因

與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起,保證相關(guān)基因正常轉(zhuǎn)錄和翻譯

,A正確;需要將目的基因?qū)胧芫阎校珺錯(cuò)誤;乳腺生物反應(yīng)器的培育過程

中不涉及核移植技術(shù),c錯(cuò)誤;由于乳腺生物反應(yīng)器需要利用動(dòng)物產(chǎn)生的乳汁進(jìn)

行藥物生產(chǎn),故藥物的生產(chǎn)受到轉(zhuǎn)基因動(dòng)物性別和年齡的限制,要求選擇合適的

雌性個(gè)體,D錯(cuò)誤。

10.C【解析】豬肝臟細(xì)胞和西蘭花莖細(xì)胞的遺傳物質(zhì)均為DNA,提取DNA實(shí)

驗(yàn)中都會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物,A正確;豬肝臟細(xì)胞和西蘭花莖細(xì)胞均為真核細(xì)胞,

可在光學(xué)顯微鏡下觀察到細(xì)胞核,B正確;豬肝臟細(xì)胞中不含葉綠體,西蘭花莖

細(xì)胞含有葉綠體,C錯(cuò)誤;減數(shù)分裂發(fā)生在生殖細(xì)胞中,肝臟細(xì)胞和西蘭花莖細(xì)

胞都不是生殖細(xì)胞,在光學(xué)顯微鏡下都觀察不到減數(shù)分裂,D正確。

H.D【解析】CHO細(xì)胞是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞的簡(jiǎn)稱,是用來制作基因工程疫

苗的一種細(xì)胞工具,由中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CH3)細(xì)胞是基因工程的受體細(xì)胞,不

是該病毒的宿主細(xì)胞,A錯(cuò)誤;DNA重組需用限制酶和DNA連接酶,B錯(cuò)誤;

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需添加適量的抗生素,其目的是防止雜菌污染,C錯(cuò)誤;可用抗

原一抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)出蛋白質(zhì)。D正確。

12.A【解析】通過觀察害蟲吃轉(zhuǎn)基因棉葉是否死亡,屬于個(gè)體水平上的鑒定,

A錯(cuò)誤;檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因,可以使用DNA分

子雜交技術(shù),因此通過抗原抗體雜交可檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出抗蟲蛋白,B

正確;

通過PCR等技術(shù)檢測(cè)受體細(xì)胞染色體DNA上是否插入了目的基因或檢測(cè)目的基

因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,故利用通過PCR等技術(shù)可以檢測(cè)到棉花體細(xì)胞中細(xì)菌的

抗蟲基因,C、D正確,

13.B【解析】都應(yīng)遵循A配T、C配G的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,A錯(cuò)誤;PCR

技術(shù)可用丁基因診斷、法醫(yī)鑒定、判斷親緣關(guān)系,B正確;其中DNA兩條故的

解旋過程不需要解旋酶的催化,利用高溫打開雙鏈,C錯(cuò)誤;PCR過程中通過高

溫使DNA變性,則需要耐高溫的DNA聚合酶催化DNA雙鏈復(fù)制,D錯(cuò)誤。

14.C【解析】由圖可知,修復(fù)過程中需要將損傷部位的序列切斷,因此需要限

制酶的參與,同時(shí)修復(fù)過程中,單個(gè)的脫氧核甘酸需要依次連接,要借助DNA

聚合酶,A正確;填補(bǔ)缺口時(shí),新鏈即子鏈的延伸方向?yàn)镾到3,的方向進(jìn)行,B

正確;DNA有害損傷發(fā)生后,在細(xì)胞增殖中進(jìn)行修復(fù),保證DNA復(fù)制的正確進(jìn)

行,對(duì)細(xì)胞最有利,C錯(cuò)誤;癌癥的發(fā)生是多個(gè)基因累積突變的結(jié)果,隨年給增

長(zhǎng),XP患者幾乎都會(huì)發(fā)生皮膚癌的原因,可用突變累積解釋,D正確。

15.D【解析】基因表達(dá)載體是目的基因與質(zhì)粒組成的,其本質(zhì)仍是雙鏈DNA

分子,雙鏈DNA分子中A-T、G-C,故基因表達(dá)載體中堿基A+C的數(shù)量與T+G

的數(shù)量相等,A正確;構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟,其目的是使目

的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠

表達(dá)和發(fā)揮作用,B正確;抗生素抗性基因等標(biāo)記基因有利于對(duì)重組DNA分子

進(jìn)行篩選,方法是將待篩選的重組質(zhì)粒等接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中,觀察其

生長(zhǎng)情況,C正確;終止子位于基因的下游,使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止下來,

D錯(cuò)誤。

16.RD【解析】供體細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中,能發(fā)育成有克隆動(dòng)物,這說

明分化的動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有發(fā)育的全能性,A錯(cuò)誤;細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因

的選擇性表達(dá),在早期胚胎發(fā)育的不同時(shí)期,細(xì)胞分化程度不同,提取的總mRNA

存在差異,B正確;通過逆轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA只是克隆豬DNA的一部分,且不

含啟動(dòng)子、內(nèi)含子等,因此不可用于克隆豬基因組的測(cè)序,C錯(cuò)誤;cDNA是由

細(xì)胞中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得,不同胚胎時(shí)期細(xì)胞的(Bcl2cDNA)/cDNA比值

一定程度上可代表a12基因的轉(zhuǎn)錄水平,D正確。

17.BCD【解析】甲基化不會(huì)造成基因堿基序列的改變,A錯(cuò)誤;結(jié)合分析可

知,MSP過程中根據(jù)亞硫酸鈉處理前后的堿基序列設(shè)計(jì)甲基化引物和非甲基化

引物,從而分別擴(kuò)增甲基化片段和非甲基化片段,B正確;甲基化程度低的基因

MSP產(chǎn)物中的G-C堿基對(duì)變成了U-A堿基對(duì),因而其中氫鍵的數(shù)目減少、熱穩(wěn)

定性會(huì)較低,因此PCR過程中甲基化組的退火溫度比非甲基化組的高,C正確;

PCR完成后,由丁兩種MSP產(chǎn)物的堿基序列存在差異,可采用瓊脂糖凝膠電泳

或紫外分光光度計(jì)對(duì)其進(jìn)行鑒定分析,D正確。

18.BC【解析】由于人類的Y染色體比X染色體短小,故含Y精子DNA含量

比含X精子低,根據(jù)該差異可以篩選兩種精子,實(shí)現(xiàn)對(duì)胚胎性別的控制。At音誤

;從Y染色體DNA分子上獲取SRY基因,然后用SRY基因的部分核甘酸序列

作引物進(jìn)行擴(kuò)增,B正確;SRY-PCR胚胎性別鑒定技術(shù)中,要用到放射性同位

素標(biāo)記的SRY基因特異性探針進(jìn)行檢測(cè),C正確;因?yàn)榻?jīng)過3次循環(huán)之后才能出

現(xiàn)目的基因的片段,故利用PCR經(jīng)過3次循環(huán),理論上獲得的SRY基因占擴(kuò)增

產(chǎn)物1/4,D錯(cuò)誤。

19.ABC【解析】由圖可知,抗癌基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄形成的mRNA可以和鄰近基因轉(zhuǎn)

錄形成的反義RNA堿基配對(duì),則抗癌基因的mRNA無法與核糖體結(jié)合進(jìn)行翻譯

,A正確;基因表達(dá)蛋白質(zhì)的過程包括基因的轉(zhuǎn)錄和mRNA的翻譯,因此人類

基因需要通過轉(zhuǎn)錄形成mRNA并以此為模板來合成蛋白質(zhì),B正確;利用反義

基因轉(zhuǎn)錄出的反義RNA與病變基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行堿基配對(duì),則病變基因

轉(zhuǎn)錄的mRNA無法與核糖體結(jié)合進(jìn)行翻譯,C正確;啟動(dòng)子與RNA聚合酶結(jié)合

從而啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,但是若將反義基因?qū)胭|(zhì)粒的啟動(dòng)子上游,不利于反義基因的表

達(dá),應(yīng)該將反義基因?qū)胭|(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間,D錯(cuò)誤。

?ORC【解析】由題意可知,電泳圖譜中DNA片段越小,距離起點(diǎn)越遠(yuǎn),說

明A端為起始端,A錯(cuò)誤;由題可知,當(dāng)僅用一種限制酶切割載體時(shí),僅產(chǎn)生

一種長(zhǎng)度的DNA片段,因此該載體最有可能為環(huán)狀DNA分子,B正確;由題

知,兩種限制酶同時(shí)切割時(shí)則產(chǎn)生800bp和200bp兩種長(zhǎng)度的DNA片段,所

以兩種限制酶的酶切位點(diǎn)至少相距20()bp,C正確:由于不知道氏oRISma

I的酶切位點(diǎn),且用EcoRi單獨(dú)處理、導(dǎo)陷I單獨(dú)處理產(chǎn)生的片段一樣長(zhǎng),則

無法判斷是否能產(chǎn)生相同的黏性末端,D錯(cuò)誤。

21.(1)PCRPCR擴(kuò)增儀(PCR儀)瓊脂糖凝膠電泳

(2)AscI和BamHICa”能吸收周圍環(huán)境中DNA分子

(3)PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)既能

無限增殖,又能分泌專一性抗體

【解析】(1)PCR是一項(xiàng)體外擴(kuò)增DNA分子的技術(shù),若①過程表示擴(kuò)增HPV

基因,則采用的技術(shù)手段是PCR技術(shù);PCR過程可以在PCR擴(kuò)增儀(PCR儀)

中自動(dòng)完成;PCR擴(kuò)增完成后,可通過瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)來鑒定PCR的產(chǎn)物。

(2)據(jù)圖可知,圖中XhaI和Sail限制酶會(huì)分別破壞啟動(dòng)子和終止子,故不能

選擇,同時(shí)為了避免自身環(huán)化和反向連接,需要月兩種酶進(jìn)行切割,故選用的限

制酶是Asci和及〃〃HI;過程②將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞(大腸桿菌細(xì)胞)

時(shí),一般先用鈣離子處理大腸桿菌細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA

分子的狀態(tài),然后再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中。(3)誘導(dǎo)能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴

細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法(化學(xué)方法),電融合法(物理

方法)和滅活病毒誘導(dǎo)法(生物方法);據(jù)圖可知,③是單克隆抗體制備過程中

的第二次篩選,即對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),最終獲得的雜交瘤

細(xì)胞是既能無限增殖,乂能分泌專一性抗體。

22.(1)培養(yǎng)基的配制、滅菌發(fā)酵

(2)與模板鏈堿基互補(bǔ)配對(duì)、引物之間或引物內(nèi)部不能互補(bǔ)配對(duì);引物長(zhǎng)度通

常為20-30個(gè)核苜酸

(3)II.N質(zhì)粒上沒有限制酶HI的識(shí)別位點(diǎn);使用限制酶I會(huì)使質(zhì)粒的啟動(dòng)

子丟失或標(biāo)記基因被破壞;使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質(zhì)粒反向

連接

(4)AQX有利于HAS基因在酵母菌細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)四環(huán)素

【解析】(1)發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、擴(kuò)大培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制、滅菌、

接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純(生物分離工程)等方面,發(fā)酵工程的中心環(huán)

節(jié)是發(fā)酵過程。(2)PCR過程需要兩種引物,能分別與目的基因兩條鏈的3,瑞通

過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合,引物是?小段能與DNA母鏈的?段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的

短單鏈核酸。引物之間或引物內(nèi)部不能互補(bǔ)配對(duì),用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為

20?30個(gè)核首酸;引物使DNA聚合酶能夠從引物的3,端開始連接脫氧核苜酸。

(3)圖中四環(huán)素抗性基因中含有酶切位點(diǎn)I,氨芳青霉素抗性基因中含有I、II

、IV三種酶切位點(diǎn),質(zhì)粒上沒有限制酶HI的識(shí)別位點(diǎn);使用限制酶I會(huì)使質(zhì)粒的

啟動(dòng)子丟失或標(biāo)記基因被破壞;使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質(zhì)粒

反向連接,因此將"SA基因插入質(zhì)粒中時(shí),最好選擇限制酶H、IV進(jìn)行共同切

割。

(4)啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合的位點(diǎn),是啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的位點(diǎn),在構(gòu)建基

因表達(dá)載體時(shí)添加酵母菌蛋白基因的啟動(dòng)子AOX,有利于目的基因(HSA基因)

在酵母菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。將"SA基因插入質(zhì)粒中時(shí),最好選擇限制酶H、IV進(jìn)行共

同切割,氨芳青霉素抗性基因被破壞,四環(huán)素抗性基因未被破壞,故篩選時(shí)可將

受體酵母菌置于含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中進(jìn)行飾選培養(yǎng),以獲得能表達(dá)HSA的細(xì)

胞。

23.(I)人工(化學(xué))合成在ASFVp54基因編碼區(qū)兩側(cè)加入pET28a載體上存

在的兩種限制酶識(shí)別序列

(2)受體細(xì)胞誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗ASFVp54抗體的B淋巴細(xì)胞

(3)特異性強(qiáng)靈敏度高

【解析】(1)步驟①利用查詢出的基因序列合成ASFV^54基因,屬于

人工合成法中的化學(xué)合成法。應(yīng)該用相同的限制酶對(duì)目的基因和運(yùn)載體進(jìn)行酶切,

以便進(jìn)行正確的連接,故若ASFVp54基因序列中無限制酶切位點(diǎn),為確保

ASFVp54基因與pET28a載體正確連接,在目的基因的合成過程中應(yīng)該在

ASFVp54基因編碼區(qū)兩側(cè)加入pET28a載體上存在的兩種限制酶識(shí)別序列.[2)

接受基因表達(dá)載體的細(xì)胞為受體細(xì)胞,將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞(受體

細(xì)胞)的常用方法是感受態(tài)細(xì)胞制備法,即用CM+處理大腸桿菌細(xì)胞,使之處于

易于吸收環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)。過程④將ASFVp54蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為

了誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗ASFVp54抗體的B淋巴細(xì)胞。(3)單克隆抗體具有

特異性強(qiáng),靈敏度高的特點(diǎn),故利用ASFVp54單克隆抗體能有針對(duì)性的找到抗

原,從而快速、準(zhǔn)確診斷ASF。

23.(1)BC330

(2)CD

(3)RNA聚合酶核糖核甘酸

(4)BamHI和I能將P基因和強(qiáng)啟動(dòng)子完整切割,且在與Ti質(zhì)粒連接的

過程中可避免自身環(huán)化等問題EcoRI和NotI會(huì)破壞P基因,HindHI會(huì)將強(qiáng)

啟動(dòng)子和P基因分離

(5)潮霉素再分化

(6)ai>az>a3

【解析】(I〉已知DNA的合成方向總是從子鏈的3端向3,端延伸,由圖1可知,

5,端對(duì)應(yīng)的引物分別是B和C。一般需要獲得的基因是有一定長(zhǎng)度的,而模板長(zhǎng)

度很長(zhǎng),設(shè)計(jì)的引物決定了擴(kuò)增產(chǎn)物的長(zhǎng)度。第一個(gè)循環(huán),引物與模板互補(bǔ),此

時(shí)變成兩個(gè)模板,但因?yàn)槟0搴荛L(zhǎng),沒有什么終止擴(kuò)

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