1《枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物含量的測(cè)定高效液相色譜法》枸杞葉為茄科植物寧夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥葉，在化學(xué)成分研究森、陳歡、楊玲玲、王玫、付雪艷、楊志剛、李琪、馬金超、楊麗麗、李衛(wèi)兵、2查閱了國(guó)內(nèi)外關(guān)于枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物的定性定量檢測(cè)方法和研究（2）寧夏團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/NAIA0188—2023：枸杞葉及枸杞茶中總黃酮含量的（4）中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20001.4-2015：標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則第4部（5）中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6379.4-2006：測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確（7）中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T10092-2009：數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理和解釋3含量的測(cè)定高效液相色譜法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)的征求意見(jiàn)稿，擬面向全國(guó)征求意見(jiàn)。寧夏枸杞葉已經(jīng)作為地方特色藥材和飲片分別被收載在《寧夏中藥材標(biāo)準(zhǔn)》barbarumL.的干燥葉，“甘，平。歸肝、脾、腎經(jīng)”，具有“滋補(bǔ)肝腎、養(yǎng)血枸杞子資源的需求量劇增。寧夏枸杞葉資源價(jià)值與枸杞子一起發(fā)展，雙輪驅(qū)動(dòng)，4丁、槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物的含量測(cè)定方法是目前枸杞葉研究領(lǐng)域的因此，本實(shí)驗(yàn)建立直接測(cè)定枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物成分含量的是具有鄰二酚羥基或3-羥基-4-羰基、5-羥基-4-羰基等結(jié)構(gòu)的黃酮類(lèi)化合物在弱堿性條件下可與鋁鹽生成螯合物，加入氫氧化鈉溶液后顯色，在波長(zhǎng)510nm測(cè)定吸光度值，在一定濃度范圍內(nèi)，該螯合物的吸光度值與總黃酮含量成正比，在的其他非黃酮類(lèi)化合物，如酚酸、單寧/鞣質(zhì)、花色苷等，在含有鄰二酚羥基等結(jié)構(gòu)的前提下，也能與鋁離子發(fā)生顯色反應(yīng)，從而導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高。同時(shí)，并非所有的黃酮類(lèi)化合物均具有鄰二酚羥基或3-羥基-4-羰基、5-羥基-4-羰基等5新綠原酸、隱綠原酸、蘆丁、槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷、對(duì)香豆酸和山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷等多種成分的HPLC含量測(cè)定方法，解決現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)中本文件規(guī)定了枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物含量的高效液相色譜測(cè)定方蕓香糖-7-O-葡萄糖苷、對(duì)香豆酸、蘆丁和山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷含量的測(cè)綠原酸（Chlorogenicacid，CAS號(hào)327-97-9新綠原酸（Neochlorogenic槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷（quercetin- 6分別吸取適量綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷、對(duì)香豆酸、蘆丁和山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷單標(biāo)儲(chǔ)備溶液，用80%乙醇溶液稀釋至濃度均為100μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，貯存于密閉容量瓶中，703注：1.新綠原酸；2.綠原酸；3.隱綠原酸；4.槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷；89精密吸取一系列不同體積的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別置于適宜規(guī)格的量瓶中，用80%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得一系列梯度濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。取上述系列溶液按表1的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積，以對(duì)照品溶液濃度綠原酸、隱綠原酸、新綠原酸、對(duì)香豆酸、山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷、蘆丁及槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程、相關(guān)系數(shù)及線性峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，確定儀器的精密度。結(jié)果表明（見(jiàn)表6酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物峰面積RSD為0.5%~2.4%，說(shuō)明該儀器方法123456槲皮素-3-O蕓苷方法，測(cè)定枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物的含量(μg/g）。結(jié)果表明（見(jiàn)表7除山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷均未檢測(cè)到外，其余6種成分含量的RSD為123456值槲皮素-3-O蕓密加入綠原酸對(duì)照品儲(chǔ)備液0.4mL、0.8mL、1.2mL各三份，再加80%乙醇溶照供試品溶液制備方法（2.3.3.6）得槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷回收率測(cè)精密加入新綠原酸對(duì)照品儲(chǔ)備液0.4mL、0.8mL、1.2密加入蘆丁對(duì)照品儲(chǔ)備液0.305mL、0.610mL、0.915mL各三份，再加80%乙枸杞葉樣品100mg9份，加入山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷對(duì)照品儲(chǔ)備液0.3類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物峰面積帶入線性方程進(jìn)行成分含量計(jì)算。結(jié)果表明（見(jiàn)表8枸杞葉中綠原酸、槲皮素-3-O-蕓香糖-7-O-葡萄糖苷、隱綠原酸、新綠原酸、蘆丁、對(duì)香豆酸、山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷的回收率平均值分別為101.1%、取混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液和供試品溶液，按照已確定的儀器方法間隔0h、4h、試品溶液放置24h，除山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷在各時(shí)間段均未檢出外，其余6種成分的RSD值為0.3%～2.8%，均<3%。表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。酸酸苷混04804/8//////最低為新綠原酸0.045μg/mL，0.053μg/mL。以上數(shù)據(jù)表明該方法檢測(cè)枸杞葉中酚酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物具有較定量限(μg/mL）檢測(cè)限(μg/mL）柱溫Ⅰ：38℃柱溫Ⅱ：40℃柱溫Ⅲ：42℃溫分離得到的供試品溶液色譜峰分離度良好，新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、酸t(yī)///s/