1T/XXXX—XXXX飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了飼用燕麥誘變方法與參數(shù)，誘變后代種植及選擇等階段的技術(shù)規(guī)程。本文件適用于飼用燕麥誘變突變體表型的鑒定和篩選。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB6142禾本科草種子質(zhì)量分級GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1飼用燕麥forageoat用于生產(chǎn)飼料的栽培燕麥，一年生草本植物，染色體2n=6x=42。根據(jù)籽粒帶皮或裸粒，分為皮燕麥和裸燕麥兩種類型。3.2空間誘變spacemutation空間誘變又稱航天誘變，是利用返回式航天器（如衛(wèi)星、飛船等）將植物材料（如種子、組織、細(xì)胞等）搭載到太空，在太空獨(dú)特的環(huán)境（如微重力、弱地磁、強(qiáng)輻射、高真空、超低溫等）作用下，誘發(fā)植物遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的方法。3.3常壓室溫等離子體誘變atmosphericandroomtemperatureplasma常溫常壓等離子誘變技術(shù)是指利用在常壓、常溫條件下產(chǎn)生的等離子體，作用于生物體（如種子、組織、細(xì)胞等），從而引起生物體遺傳信息的改變的方式。3.4重離子誘變heavyionmutation重離子誘變是指利用加速器將重離子（如碳、氬等原子序數(shù)大于2的原子核）加速到高能狀態(tài)，形成高線性能量轉(zhuǎn)移的射線，照射生物材料（如種子、組織、細(xì)胞使其遺傳物質(zhì)發(fā)生損傷和變異的誘變方式。3.5化學(xué)誘變chemicalmutation化學(xué)誘變是指利用特定的化學(xué)誘變劑（如EMS）等處理生物材料（如種子、花粉、組織培養(yǎng)物等從而誘發(fā)生物材料基因突變的方法。3.6生育期growthperiod燕麥從播種期到成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d。3.7幼苗習(xí)性seedlinghabits2T/XXXX—XXXX幼苗階段生長的姿態(tài)，包括直立、半匍匐、匍匐。3.8乳熟期milk-ripestage50%以上植株的籽粒內(nèi)充滿乳汁，并接近正常籽粒大小的時(shí)期。3.9成熟期maturitystage80%以上穗子的籽粒進(jìn)入蠟熟的日期，以年月日表示。4土地準(zhǔn)備4.1選地選擇地勢平坦、排灌方便、耕層深厚、土質(zhì)疏松、pH的土壤。4.2整地4.2.1施足底肥，有機(jī)肥以22500kg/hm2～30000kg/hm2為宜，肥料使用應(yīng)符合NY/T496規(guī)定。4.2.2施肥后深耕，耕翻深度>20cm，除去草根、石塊等。4.2.3打碎土塊，耙平地面，使土層上虛下實(shí)，深淺一致，達(dá)到地平土碎土細(xì)。5種植5.1種子選擇選擇GB6142Ⅱ級及以上的種子。5.2種子誘變處理空間誘變處理：將飼用燕麥種子搭載在返回式飛行器，利用微重力、高能輻射、高真空等特殊環(huán)境進(jìn)行誘變。等離子誘變處理：誘變條件為功率380W、氣量15SLM，種子處理時(shí)間為10min~300min之間。重離子誘變處理：在碳離子束，能量80MeV/u，傳能線密度34KeV/um條件下，種子處理劑量為100Gy~400Gy之間。EMS誘變處理：EMS濃度為0.5%~1%，種子處理時(shí)間為8h~16h之間。5.3播種M0~M1代：經(jīng)不同誘變源誘變處理后的飼用燕麥種子為M0代，采用單株穴播種植，以未經(jīng)處理的種子作對照。每30個種質(zhì)設(shè)置一個對照。株距20cm~30cm，行距40cm~50cm。M1~M2代：將M1代單株種子，采用單株穴播種植成株系，每個株系種植30個單株，以未經(jīng)處理的種子作為對照。每30個種質(zhì)設(shè)置一個對照。株距20cm~30cm，行距40cm~50cm。M2~M3代：將篩選出的M2代種子種植成小區(qū)，每個小區(qū)種植100個單株，以未經(jīng)處理的種子作為對照。每10個小區(qū)設(shè)置一個對照。株距10cm~20cm，行距20cm~30cm。M3~M4代：將篩選出的M3代種子種植成小區(qū)，每個小區(qū)種植100個單株，以未經(jīng)處理的種子作為對照。每10個小區(qū)設(shè)置一個對照。株距10cm~20cm，行距20cm~30cm。5.4田間管理除草：采用人工方式及時(shí)清除雜草。灌溉：根據(jù)當(dāng)?shù)亟涤昵闆r，及時(shí)灌溉，水質(zhì)應(yīng)符合GB5084要求。病蟲害防治：采用化學(xué)方式防治，農(nóng)藥使用應(yīng)符合GB/T8321和NY/T1276的規(guī)定。6指標(biāo)測定6.1生育期3T/XXXX—XXXX統(tǒng)計(jì)飼用燕麥從播種期到成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d。6.2幼苗習(xí)性幼苗的顏色分為直立、半匍匐、匍匐。6.3株高乳熟期測定植株從地面到穗頂（不含芒）的絕對高度，精確到0.1cm。6.4莖粗乳熟期主莖地上第二節(jié)間中部的粗度，單位0.1mm。6.5分蘗數(shù)乳熟期植株在生長過程中從地面附近或地下莖節(jié)上產(chǎn)生分枝的數(shù)量。6.6有效分蘗數(shù)乳熟期分蘗中結(jié)實(shí)形成產(chǎn)量的分蘗數(shù)。6.7旗葉長乳熟期測定旗葉基部至葉尖的長度，精確到0.1cm。6.8旗葉寬乳熟期測定旗葉最寬處的寬度，精確到0.1cm。6.9穗形成熟期穗子性狀的類型，包括側(cè)緊、側(cè)散、周緊、周散。6.10單株地上生物量M1成熟期收割，風(fēng)干后稱干重。M2、M3乳熟期收割，并稱鮮重，風(fēng)干后稱干重。7突變體篩選7.1篩選標(biāo)準(zhǔn)7.1.1生育期對照品種相比，生育期少7d~14d為早熟、少14d以上為特早熟，生育期長7d~14d為晚熟、長14d以上為特晚熟。7.1.2幼苗習(xí)性對照品種相比，直立、半匍匐、匍匐間發(fā)生變化。7.1.3穗形對照品種相比，側(cè)緊、側(cè)散、周緊、周散間發(fā)生變化。7.1.4株高、莖粗、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)、旗葉長、旗葉寬、單株生物量以對照平均值±3*sck計(jì)算最大閾值、最小閾值，比較誘變突變體性狀測定值與閾值的大小，劃分突變體的變異類型，其中，Sck為對照所測表型性狀標(biāo)準(zhǔn)差。7.2世代篩選方法M0代：飼用燕麥種子經(jīng)誘變處理后即為M0代。M1代：以單株為對象觀測田間農(nóng)藝性狀，成熟后單株收種獲得M1代種子。4T/XXXX—XXXXM2代：M2代是變異的世代也是選擇的世代。以單株為對象觀測田間農(nóng)藝性狀，乳熟期測定株高、分蘗、單株鮮重和干重等指標(biāo)，保留1~2株成熟期單株收種。按照突變體篩選標(biāo)準(zhǔn)獲得具有潛在