B41

DB13

唐山市地0方2標(biāo)準(zhǔn)

DB1302/T314—2011

動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)樣品采集技術(shù)規(guī)范

2011-11-01發(fā)布2011-12-01實(shí)施

唐山市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB1302/T314—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由唐山市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：唐山市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張軍劉乃強(qiáng)劉志勇周忠良李穎張子佳張進(jìn)紅劉愛麗

齊靜張寶恩張迎致田亞群王麗華夏潤東姜帥孫繼濤

于冬梅賈雪萍崔廣平王麗英。

DB1302/T314—2011

動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)樣品采集技術(shù)規(guī)范

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)樣品采集原則、采集前的準(zhǔn)備、采集方法、采集數(shù)量、樣品

記錄、送檢及保存等。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于唐山市行政區(qū)域內(nèi)動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)樣品的采集。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本

文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T16550-2008新城疫診斷技術(shù)

GB/T18935-2003口蹄疫診斷技術(shù)

GB/T18936-2003高致病性禽流感診斷技術(shù)

NY/T541-2002動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)采樣方法

《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國務(wù)院令第424號(hào)）

3樣品采集原則和采集前的準(zhǔn)備

3.1樣品采集的一般原則

按NY/T541-2002中第2.1條執(zhí)行。嚴(yán)格遵守《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中生

物安全操作的相關(guān)規(guī)定。

3.2樣品采集前的準(zhǔn)備

3.2.1采集人員

3.2.1.1具有專業(yè)技術(shù)知識(shí)，無感染人畜共患傳染病及有開放性傷口，熟練掌握采樣工作程序和操

作技術(shù)。每次采樣不得少于兩人。

3.2.1.2采集樣品時(shí)做好防護(hù)工作，穿戴防護(hù)服、橡膠手套、口罩、護(hù)眼鏡、膠鞋等。

3.2.2器具

樣品采集箱、保溫箱或保溫瓶、解剖刀、剪子、鑷子、酒精燈、注射器及針頭、試管架、塑料

盒、無菌棉拭子、膠布、封口樣品袋、塑料袋、封口膜、封條、冰袋等。

3.2.3試劑

0.1%肝素、阿氏液、3.8%-4%枸椽酸鈉溶液、磷酸鹽緩沖液、加有抗生素的PBS液等。

3.2.4器械的消毒

按NY/T541-2002中第2.2條執(zhí)行。

4樣品的采集

DB1302/T314—2011

4.1血清樣品的采集

4.1.1采樣方法

采樣和血清制備方法按NY/T541-2002中第3.1.3.2條執(zhí)行。

4.1.2采樣數(shù)量

4.1.2.1養(yǎng)殖場

禽按存欄5000只以上0.5%，5000只以下1%數(shù)量采集，但每場不得少于30份，每份血清樣本

不少于0.5ml。

畜按存欄300頭（只、匹）以上10%，300頭（只、匹）以下15%數(shù)量采集，但每場不得少于

20份。每份血清樣本不少于0.5ml。

4.1.2.2散養(yǎng)戶

以行政村為單位，每個(gè)基層站選擇兩個(gè)行政村，每村不得低于10戶，樣品采集數(shù)量不得少于

20份。每份血清樣本不少于0.5ml。

4.2全血及血漿樣品采集

4.2.1采樣方法

按NY/T541-2002中第3.1.3.1條執(zhí)行。

4.2.2采樣數(shù)量

按本標(biāo)準(zhǔn)第4.1.2條執(zhí)行，每份樣本不少于1.5ml。

4.3組織及實(shí)質(zhì)性器官采集

4.3.1采樣方法

按NY/T541-2002中第3.2.1條執(zhí)行。

4.3.2采樣數(shù)量

根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康拇_定采樣數(shù)量，單純?cè)\斷采集1-3頭（只、匹）病死動(dòng)物組織或?qū)嵸|(zhì)性器官；病

原學(xué)普查時(shí)按本標(biāo)準(zhǔn)第4.1.2條執(zhí)行。

4.4重大動(dòng)物疫病樣品采集

對(duì)于重大動(dòng)物疫病口蹄疫、禽流感和新城疫，樣品采集分別按照GB/T18935-2003、GB/T

18936-2003和GB/T16550-2008執(zhí)行。

5樣品的記錄

5.1每份樣品均須貼上標(biāo)簽，并正確填寫采樣單，包括單位名稱、地址、負(fù)責(zé)人、聯(lián)系方式、采集

情況、免疫情況、發(fā)病情況、采樣人、送樣人、被采樣單位簽字蓋章等。

5.2采樣單為一式三份，隨樣品送實(shí)驗(yàn)室一份，采樣單位一份，被采樣單位一份。采樣單樣式見附

錄A。

6樣品送檢

DB1302/T314—2011

6.1所采集的樣品應(yīng)以最快、最直接的方式送往實(shí)驗(yàn)室。如樣品能在12h內(nèi)送達(dá)，則放于4℃左右的

容器中運(yùn)送；如樣品在12h內(nèi)不能送檢且不影響檢驗(yàn)結(jié)果的情況下，則按照本標(biāo)準(zhǔn)第7章保存。

6.2應(yīng)避免樣品泄漏。裝在試管中的病料密封后裝在冰瓶中運(yùn)送，防止試管和容器傾倒。血清分離

后用滅菌離心管蓋好送樣，病料用滅菌封口袋或帶封口容器密封送樣。

6.3用記號(hào)筆在存放樣品的袋（管）上做好編號(hào)，同時(shí)做好送檢樣品登記記錄。

7樣品保存

7.1血清放－20℃凍存，全血及血漿暫時(shí)放4℃冰箱保存。

7.2供細(xì)菌檢驗(yàn)的樣品應(yīng)4℃保存,或用滅菌后的30%-50%的甘油生理鹽水4℃保存。

7.3供病毒檢驗(yàn)的樣品在0℃以下低溫保存,也可以用滅菌后的30%-50%的滅菌甘油生理鹽水0℃保

存。

7.4血清或液體狀樣本應(yīng)保存于1.5ml帶蓋滅菌離心管中，組織或?qū)嵸|(zhì)性器官樣品應(yīng)保存于滅菌封

口袋或帶蓋容器內(nèi)。

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.附錄A

（資料性附錄）

動(dòng)物疫病樣品采集單

被采樣單位

通訊地址郵編

負(fù)責(zé)人電話傳真

采集情況

棟號(hào)畜（禽）樣品名稱日齡存欄量采樣數(shù)量編號(hào)起止

免疫情況

病種疫苗名稱生產(chǎn)廠家批號(hào)最近免疫時(shí)間免疫劑量

發(fā)病情況

病種發(fā)病時(shí)間發(fā)病數(shù)死亡數(shù)臨床癥狀備注

采樣單位

單位名稱聯(lián)系人

通訊地址郵編

聯(lián)系電話