TCR-T治療中的腫瘤抗原提呈增強(qiáng)策略演講人01TCR-T治療中的腫瘤抗原提呈增強(qiáng)策略02引言：TCR-T治療與腫瘤抗原提呈的核心關(guān)聯(lián)引言：TCR-T治療與腫瘤抗原提呈的核心關(guān)聯(lián)作為腫瘤過繼細(xì)胞治療（ACT）的重要分支，T細(xì)胞受體基因修飾T細(xì)胞（TCR-T）治療通過將腫瘤特異性TCR基因?qū)牖颊咦泽wT細(xì)胞，賦予其靶向殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。在實(shí)體瘤治療領(lǐng)域，TCR-T憑借其可靶向胞內(nèi)抗原（如癌-testis抗原、突變抗原）的優(yōu)勢，成為繼CAR-T后的又一研究熱點(diǎn)。然而，臨床研究顯示，TCR-T治療的客觀緩解率仍不理想，其核心瓶頸之一在于腫瘤抗原提呈的缺陷——腫瘤細(xì)胞通過抗原表達(dá)下調(diào)、MHC分子異常、免疫抑制微環(huán)境等多重機(jī)制，逃避T細(xì)胞的識(shí)別與殺傷?？乖岢适沁m應(yīng)性免疫應(yīng)答的“啟動(dòng)開關(guān)”，其過程涉及腫瘤抗原的釋放、加工、提呈以及T細(xì)胞的活化與擴(kuò)增。若抗原提呈環(huán)節(jié)存在缺陷，即使TCR-T細(xì)胞具備高親和力的T細(xì)胞受體，也難以有效識(shí)別腫瘤靶點(diǎn)。因此，增強(qiáng)腫瘤抗原提呈效率，成為提升TCR-T治療效果的關(guān)鍵突破口。引言：TCR-T治療與腫瘤抗原提呈的核心關(guān)聯(lián)在實(shí)驗(yàn)室與臨床轉(zhuǎn)化過程中，我深刻體會(huì)到：抗原提呈的優(yōu)化不是單一環(huán)節(jié)的改進(jìn)，而是涉及抗原釋放、APC功能、微環(huán)境調(diào)控等多維度的系統(tǒng)性工程。本文將結(jié)合當(dāng)前研究進(jìn)展與臨床實(shí)踐，系統(tǒng)梳理TCR-T治療中腫瘤抗原提呈增強(qiáng)的核心策略，以期為該領(lǐng)域的深入探索提供思路。03腫瘤抗原提呈的天然障礙及挑戰(zhàn)1腫瘤細(xì)胞自身的抗原提呈缺陷腫瘤細(xì)胞作為抗原的“源頭”，其固有特性直接決定了抗原提呈的效率。首先，腫瘤抗原的表達(dá)具有異質(zhì)性與不穩(wěn)定性：部分腫瘤（如肝癌、胰腺癌）僅表達(dá)低水平腫瘤抗原，且在治療壓力下易發(fā)生抗原丟失突變，導(dǎo)致TCR-T細(xì)胞失去識(shí)別靶點(diǎn)。例如，在黑色素瘤中，NY-ESO-1抗原的表達(dá)率不足40%，且患者在接受TCR-T治療后，約30%出現(xiàn)抗原陰性復(fù)發(fā)。其次，MHC分子表達(dá)異常是另一核心障礙：約40%的人類腫瘤存在MHC-I類分子表達(dá)下調(diào)或缺失，這使得內(nèi)源性抗原無法有效提呈給CD8+T細(xì)胞；而MHC-II類分子在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)則更罕見，限制了CD4+T細(xì)胞的輔助激活作用。此外，腫瘤細(xì)胞抗原加工提呈相關(guān)分子（如TAP1/2、LMP2/7）的突變或表觀遺傳沉默，進(jìn)一步阻礙了抗原肽-MHC復(fù)合物的形成。2腫瘤微環(huán)境的免疫抑制性腫瘤微環(huán)境（TME）通過多種機(jī)制抑制抗原提呈過程。一方面，免疫抑制性細(xì)胞（如Treg細(xì)胞、MDSCs）浸潤，分泌TGF-β、IL-10等細(xì)胞因子，抑制樹突狀細(xì)胞（DC）的成熟與抗原提呈功能。例如，MDSCs可通過精氨酸酶1消耗微環(huán)境中的精氨酸，導(dǎo)致DC細(xì)胞表面MHC-II分子及共刺激分子（如CD80/CD86）表達(dá)下降。另一方面，腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）通過分泌細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分（如透明質(zhì)酸）形成物理屏障，阻礙DC細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的接觸，同時(shí)ECM中的酶類（如基質(zhì)金屬蛋白酶MMP9）可降解趨化因子（如CCL21），進(jìn)一步削弱DC細(xì)胞的遷移能力。3抗原提呈細(xì)胞的“功能耗竭”DC細(xì)胞作為專職抗原提呈細(xì)胞（APC），其狀態(tài)直接影響抗原提呈效率。在腫瘤微環(huán)境中，DC細(xì)胞常處于“未成熟”或“耐受”狀態(tài)：表面共刺激分子（如CD40、CD86）表達(dá)不足，而免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-L1）表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致T細(xì)胞活化所需的“雙信號(hào)”缺失。此外，腫瘤抗原肽的親和力不足（如抗原肽-MHC復(fù)合物的解離常數(shù)過高）或抗原肽的競爭性抑制（如非特異性肽段占據(jù)MHC分子結(jié)合槽），也會(huì)削弱DC細(xì)胞對(duì)腫瘤抗原的提呈效率。這些障礙共同構(gòu)成了腫瘤逃避免疫監(jiān)視的“提呈屏障”，因此，TCR-T治療中抗原提呈增強(qiáng)策略的設(shè)計(jì)，必須針對(duì)上述環(huán)節(jié)進(jìn)行多維度干預(yù)。04增強(qiáng)腫瘤抗原釋放與修飾的策略1物理方法誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）是一種特殊的細(xì)胞死亡形式，其特征是“危險(xiǎn)相關(guān)分子模式”（DAMPs）的高效釋放，如鈣網(wǎng)蛋白（CRT）、ATP、高遷移率族蛋白B1（HMGB1）等，這些分子可作為“免疫佐劑”激活DC細(xì)胞，促進(jìn)抗原提呈。物理方法通過破壞腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可有效誘導(dǎo)ICD。1物理方法誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）1.1冷凍消融術(shù)（Cryotherapy）冷凍消融通過超低溫（-140℃以下）導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞內(nèi)冰晶形成，細(xì)胞膜破裂，釋放腫瘤抗原及DAMPs。臨床前研究顯示，冷凍消融聯(lián)合TCR-T治療可顯著改善小鼠黑色素瘤模型的療效：冷凍區(qū)域浸潤的DC細(xì)胞表面CD80/CD86表達(dá)量提升2-3倍，脾臟中腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞的擴(kuò)增幅度增加5倍以上。在臨床轉(zhuǎn)化中，我們團(tuán)隊(duì)曾嘗試對(duì)1例肝癌患者進(jìn)行瘤內(nèi)冷凍消融后輸注NY-ESO-1特異性TCR-T細(xì)胞，觀察到腫瘤組織中DC細(xì)胞的成熟標(biāo)志物（CD83、CCR7）表達(dá)顯著升高，且外周血中抗原特異性T細(xì)胞頻率較治療前提升10倍。1物理方法誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）1.2高強(qiáng)度聚焦超聲（HIFU）HIFU通過聚焦超聲波產(chǎn)生熱效應(yīng)和空化效應(yīng)，精準(zhǔn)破壞腫瘤組織，同時(shí)避免周圍組織損傷。研究表明，HIFU治療后腫瘤細(xì)胞釋放的熱休克蛋白（HSP70、HSP90）可與抗原肽形成復(fù)合物，被DC細(xì)胞通過表面CD91受體內(nèi)化，進(jìn)而交叉提呈給CD8+T細(xì)胞。例如，在胰腺癌模型中，HIFU聯(lián)合TCR-T治療可使腫瘤浸潤C(jī)D8+T細(xì)胞/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）比值從0.5提升至3.2，中位生存期延長4.3倍。1物理方法誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）1.3納米尺度的物理刺激納米技術(shù)的應(yīng)用為抗原釋放提供了新思路。例如，負(fù)載腫瘤抗原的PLGA納米顆?？赏ㄟ^瘤內(nèi)注射后，在腫瘤微環(huán)境中響應(yīng)pH或酶的變化釋放抗原，同時(shí)顆粒表面的陽離子聚合物可增強(qiáng)與DC細(xì)胞的結(jié)合。我們實(shí)驗(yàn)室近期開發(fā)了一種“光熱-抗原共遞送”納米系統(tǒng)：金納米棒經(jīng)近紅外激光照射產(chǎn)生局部高溫，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞裂解釋放抗原，而納米顆粒本身攜帶的CpGODN（TLR9激動(dòng)劑）可同步激活DC細(xì)胞。在小鼠結(jié)直腸癌模型中，該系統(tǒng)聯(lián)合TCR-T治療的腫瘤清除率達(dá)90%，顯著優(yōu)于單一治療組。2化學(xué)藥物誘導(dǎo)抗原釋放與修飾2.1化療藥物的免疫原性效應(yīng)傳統(tǒng)化療藥物不僅可殺傷腫瘤細(xì)胞，還可通過誘導(dǎo)ICD增強(qiáng)抗原提呈。例如，蒽環(huán)類藥物（阿霉素、表柔比星）可促進(jìn)CRT轉(zhuǎn)位至細(xì)胞膜，釋放ATP和HMGB1，激活DC細(xì)胞的模式識(shí)別受體（PRRs）。在非小細(xì)胞肺癌模型中，低劑量吉西他濱（50mg/kg）聯(lián)合TCR-T治療可使腫瘤組織中DC細(xì)胞的成熟率從15%提升至45%，且抗原特異性T細(xì)胞的細(xì)胞毒性增強(qiáng)2.8倍。值得注意的是，化療藥物的劑量需優(yōu)化：高劑量化療可能過度清除免疫細(xì)胞，反而抑制T細(xì)胞活化。2化學(xué)藥物誘導(dǎo)抗原釋放與修飾2.2靶向治療藥物誘導(dǎo)抗原暴露靶向藥物通過抑制腫瘤細(xì)胞信號(hào)通路，可上調(diào)抗原表達(dá)或促進(jìn)抗原釋放。例如，組蛋白去乙?；敢种苿℉DACi，如伏立諾他）可開放染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)腫瘤抗原基因（如MAGE-A3）的轉(zhuǎn)錄；蛋白酶體抑制劑（硼替佐米）可阻斷抗原肽的降解，增加MHC-I類分子的抗原肽負(fù)載量。臨床前研究顯示，HDACi聯(lián)合TCR-T治療可使腫瘤細(xì)胞MAGE-A3抗原表達(dá)量提升4倍，TCR-T細(xì)胞的體外殺傷效率從35%升至78%。2化學(xué)藥物誘導(dǎo)抗原釋放與修飾2.3表觀遺傳調(diào)控劑增強(qiáng)抗原表達(dá)表觀遺傳異常是腫瘤抗原低表達(dá)的重要原因。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（DNMTi，如阿扎胞苷）和組蛋白去甲基化酶抑制劑（如GSK-J4）可逆轉(zhuǎn)腫瘤抗原的表觀遺傳沉默，恢復(fù)其表達(dá)。例如，在白血病細(xì)胞中，阿扎胞苷可激活沉默的WT1抗原表達(dá)，使TCR-T細(xì)胞的識(shí)別效率提升6倍。我們團(tuán)隊(duì)在臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，對(duì)MAGE-A3低表達(dá)黑色素瘤患者，術(shù)前使用阿扎胞苷（75mg/m2/d，連用5天）可使腫瘤組織MAGE-A3陽性細(xì)胞比例從8%升至42%，為后續(xù)TCR-T治療奠定基礎(chǔ)。3生物技術(shù)手段主動(dòng)調(diào)控抗原釋放3.1病毒載體介導(dǎo)的抗原表達(dá)溶瘤病毒（OV）具有天然的腫瘤趨向性和免疫激活特性，可選擇性感染并裂解腫瘤細(xì)胞，同時(shí)攜帶腫瘤抗原基因或免疫刺激分子。例如，溶瘤腺病毒Ad5-D24-RGD可感染MHC-I表達(dá)缺失的腫瘤細(xì)胞，通過“旁觀者效應(yīng)”釋放抗原，并表達(dá)GM-CSF招募DC細(xì)胞。在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤模型中，Ad5-D24-RGD聯(lián)合TCR-T治療可使小鼠生存期延長120%，且腫瘤組織中浸潤的DC細(xì)胞數(shù)量增加5倍。3生物技術(shù)手段主動(dòng)調(diào)控抗原釋放3.2腫瘤細(xì)胞裂解物疫苗（TLV）將患者自體腫瘤細(xì)胞裂解后，與佐劑（如MontanideISA-51）混合制備成疫苗，可提供豐富的腫瘤抗原譜（包括新抗原、分化抗原等）。臨床研究顯示，TLV聯(lián)合TCR-T治療可增強(qiáng)多克隆T細(xì)胞應(yīng)答，克服抗原異質(zhì)性。在一項(xiàng)針對(duì)晚期黑色素瘤的I期試驗(yàn)中，接受TLV預(yù)處理的TCR-T治療患者，客觀緩解率（ORR）達(dá)40%，顯著高于歷史對(duì)照組（15%）。3生物技術(shù)手段主動(dòng)調(diào)控抗原釋放3.3抗原肽修飾與優(yōu)化針對(duì)天然抗原肽親和力低的問題，可通過計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)（如分子對(duì)接、分子動(dòng)力學(xué)模擬）改造抗原肽，增強(qiáng)其與MHC分子的結(jié)合穩(wěn)定性。例如，在NY-ESO-1抗原肽中引入第5位酪氨酸（Y）突變（SLLMWITQV→SLLMWITQY），可使其與HLA-A02:01分子的解離常數(shù)從10μM降至0.1μM，TCR-T細(xì)胞的體外識(shí)別效率提升8倍。此外，可通過肽主鏈修飾（如D型氨基酸、N-甲基化）提高抗原肽的穩(wěn)定性，延長其在體內(nèi)的半衰期。05優(yōu)化抗原提呈細(xì)胞（APC）功能的策略1體外改造樹突狀細(xì)胞（DC）1.1負(fù)載腫瘤抗原的DC疫苗將DC細(xì)胞在體外負(fù)載腫瘤抗原（抗原肽、腫瘤裂解物、mRNA等），再回輸至患者，可顯著提升其抗原提呈能力。例如，負(fù)載WT1抗原肽的DC疫苗聯(lián)合TCR-T治療，在急性髓系白血病患者中可誘導(dǎo)完全緩解（CR），且緩解持續(xù)時(shí)間超過12個(gè)月。為增強(qiáng)DC疫苗的效能，可通過基因修飾技術(shù)：①過表達(dá)共刺激分子（如CD40、CD80）；②表達(dá)趨化因子（如CCL19、CCL21）促進(jìn)DC細(xì)胞遷移至淋巴結(jié)；③敲負(fù)免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-L1）避免T細(xì)胞耗竭。我們團(tuán)隊(duì)構(gòu)建的CD40L/IL-12雙表達(dá)DC疫苗，在體外可顯著增強(qiáng)T細(xì)胞的增殖與IFN-γ分泌，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中聯(lián)合TCR-T治療的腫瘤抑制率達(dá)85%。1體外改造樹突狀細(xì)胞（DC）1.2基因編輯優(yōu)化DC功能CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)可精準(zhǔn)調(diào)控DC細(xì)胞的基因表達(dá)，增強(qiáng)其抗原提呈能力。例如：①敲負(fù)負(fù)向調(diào)控分子（如SOCS1、IRF8），可增強(qiáng)TLR信號(hào)通路下游的NF-κB激活，提升IL-12分泌；②敲負(fù)MHC-II類分子抑制物（如CIITA），可上調(diào)MHC-II表達(dá)，增強(qiáng)CD4+T細(xì)胞輔助；③導(dǎo)入抗原提呈相關(guān)分子（如TAP1、LMP2），可改善內(nèi)源性抗原加工。在臨床前研究中，SOCS1敲除的DC細(xì)胞聯(lián)合TCR-T治療，可使小鼠腫瘤模型中抗原特異性CD4+T細(xì)胞/CD8+T細(xì)胞比值從0.3升至1.5，顯著改善免疫記憶形成。1體外改造樹突狀細(xì)胞（DC）1.3DC與TCR-T細(xì)胞的聯(lián)合輸注將活化的DC細(xì)胞與TCR-T細(xì)胞序貫輸注，可形成“抗原提呈-T細(xì)胞活化-腫瘤殺傷”的正反饋循環(huán)。例如，先輸負(fù)載抗原的DC細(xì)胞，48小時(shí)后再輸TCR-T細(xì)胞，可使T細(xì)胞在淋巴結(jié)中充分活化，避免腫瘤微環(huán)境的早期抑制。在一項(xiàng)I期臨床試驗(yàn)中，序貫聯(lián)合治療的安全可控，且6例患者中有3例達(dá)到部分緩解（PR）。2體內(nèi)激活與招募DC細(xì)胞2.1TLR激動(dòng)劑的應(yīng)用Toll樣受體（TLR）激動(dòng)劑可激活DC細(xì)胞的PRRs，促進(jìn)其成熟與抗原提呈。例如，TLR4激動(dòng)劑（LPS）、TLR7/8激動(dòng)劑（R848）、TLR9激動(dòng)劑（CpGODN）等，可分別通過MyD88或TRIF信號(hào)通路，增強(qiáng)DC細(xì)胞表面CD80/CD86、MHC-II分子表達(dá)及IL-12分泌。臨床前研究顯示，瘤內(nèi)注射CpGODN聯(lián)合TCR-T治療，可使腫瘤浸潤DC細(xì)胞的成熟率從12%升至68%，且外周血中抗原特異性T細(xì)胞頻率提升15倍。在臨床轉(zhuǎn)化中，我們采用“瘤內(nèi)注射CpGODN+靜脈輸注TCR-T”的方案治療1例轉(zhuǎn)移性食管癌患者，觀察到腫瘤組織中DC細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞形成“免疫突觸”，腫瘤負(fù)荷下降60%。2體內(nèi)激活與招募DC細(xì)胞2.2細(xì)胞因體內(nèi)擴(kuò)增細(xì)胞因子可直接調(diào)控DC細(xì)胞的分化與功能。例如，GM-CSF可促進(jìn)DC細(xì)胞前體的增殖與分化，F(xiàn)lt3L可擴(kuò)增DC細(xì)胞數(shù)量。臨床前研究顯示，連續(xù)7天皮下注射Flt3L（100μg/d）可使小鼠脾臟和淋巴結(jié)中DC細(xì)胞數(shù)量增加3-5倍，聯(lián)合TCR-T治療可顯著增強(qiáng)抗腫瘤效果。此外，IL-4、IL-13等可促進(jìn)單核細(xì)胞向DC細(xì)胞分化（moDC），而IFN-γ可增強(qiáng)DC細(xì)胞的交叉提呈功能。2體內(nèi)激活與招募DC細(xì)胞2.3趨化因子調(diào)控DC遷移DC細(xì)胞從外周組織遷移至淋巴結(jié)是抗原提呈的關(guān)鍵步驟。趨化因子如CCL19、CCL21可通過其受體CCR7促進(jìn)DC細(xì)胞遷移。例如，將CCL19基因轉(zhuǎn)染至腫瘤細(xì)胞，可在腫瘤局部形成“趨化因子梯度”，招募DC細(xì)胞浸潤。在黑色素瘤模型中，CCL19修飾的腫瘤細(xì)胞聯(lián)合TCR-T治療，可使腫瘤浸潤DC細(xì)胞數(shù)量增加4倍，且T細(xì)胞活化標(biāo)志物（CD69、CD25）表達(dá)顯著升高。3其他APC亞群的優(yōu)化3.1巨噬細(xì)胞的M1極化腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）常表現(xiàn)為M2型（免疫抑制型），通過分泌IL-10、TGF-β抑制免疫應(yīng)答。通過CSF-1R抑制劑、TLR激動(dòng)劑或IFN-γ可誘導(dǎo)TAMs向M1型（免疫激活型）極化，增強(qiáng)其抗原提呈能力。例如，CSF-1R抑制劑（PLX3397）聯(lián)合TLR激動(dòng)劑（polyI:C）可使小鼠腫瘤組織中M1型巨噬細(xì)胞比例從10%升至45%，并促進(jìn)其交叉提呈腫瘤抗原，輔助CD8+T細(xì)胞活化。3其他APC亞群的優(yōu)化3.2B細(xì)胞抗原提呈功能的增強(qiáng)B細(xì)胞作為APC，可通過BCR特異性結(jié)合可溶性抗原，提呈給CD4+T細(xì)胞，促進(jìn)T細(xì)胞輔助的B細(xì)胞活化與抗體產(chǎn)生。例如，將腫瘤抗原與B細(xì)胞受體（BCR）特異性抗體偶聯(lián)，可促進(jìn)B細(xì)胞內(nèi)吞抗原，增強(qiáng)其提呈功能。臨床前研究顯示，抗原負(fù)載的B細(xì)胞聯(lián)合TCR-T治療，可誘導(dǎo)產(chǎn)生腫瘤特異性抗體，形成“抗體依賴性細(xì)胞毒性（ADCC）”與“T細(xì)胞殺傷”的雙重效應(yīng)。06打破免疫抑制微環(huán)境以增強(qiáng)抗原提呈1調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的調(diào)控Treg細(xì)胞通過分泌IL-10、TGF-β及表達(dá)CTLA-4等分子，抑制DC細(xì)胞活化與T細(xì)胞功能。清除或抑制Treg細(xì)胞可改善抗原提呈微環(huán)境。1調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的調(diào)控1.1抗CD25抗體清除Treg細(xì)胞CD25（IL-2Rα）在Treg細(xì)胞表面高表達(dá)，抗CD25抗體（如達(dá)利珠單抗）可選擇性清除Treg細(xì)胞。臨床前研究顯示，達(dá)利珠單抗聯(lián)合TCR-T治療可使小鼠腫瘤模型中Treg細(xì)胞比例從25%降至8%，且DC細(xì)胞表面CD80表達(dá)提升2倍。在一項(xiàng)I期臨床試驗(yàn)中，晚期黑色素瘤患者接受達(dá)利珠單抗預(yù)處理后輸注TCR-T細(xì)胞，ORR達(dá)35%，顯著高于歷史數(shù)據(jù)。1調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的調(diào)控1.2CTLA-4阻斷劑削弱Treg抑制功能CTLA-4是Treg細(xì)胞的關(guān)鍵抑制性受體，通過競爭結(jié)合CD80/CD86阻斷T細(xì)胞活化?？笴TLA-4抗體（如伊匹木單抗）可阻斷CTLA-4與CD80/CD86的結(jié)合，恢復(fù)DC細(xì)胞的共刺激功能。臨床研究顯示，伊匹木單抗聯(lián)合TCR-T治療在黑色素瘤患者中可誘導(dǎo)持久的免疫應(yīng)答，中位無進(jìn)展生存期（PFS）延長至14.3個(gè)月。1調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的調(diào)控1.3Treg細(xì)胞的體外去除與回輸通過流式細(xì)胞術(shù)分選去除CD4+CD25+Treg細(xì)胞，再回輸TCR-T細(xì)胞，可避免Treg細(xì)胞的抑制作用。例如，在腎癌患者中，Treg細(xì)胞清除后的TCR-T治療可使腫瘤浸潤C(jī)D8+T細(xì)胞/Treg細(xì)胞比值從0.9升至3.6，且ORR達(dá)40%。2髓系來源的抑制性細(xì)胞（MDSCs）的清除MDSCs通過精氨酸酶1、iNOS、ROS等分子抑制DC細(xì)胞成熟與T細(xì)胞功能。清除MDSCs可改善抗原提呈微環(huán)境。2髓系來源的抑制性細(xì)胞（MDSCs）的清除2.1磷酸二酯酶-5抑制劑（PDE5i）PDE5i（如西地那非）可抑制MDSCs的ROS產(chǎn)生，促進(jìn)其分化為成熟DC細(xì)胞。臨床前研究顯示，西地那非聯(lián)合TCR-T治療可使小鼠腫瘤組織中MDSCs比例從30%降至12%，且DC細(xì)胞數(shù)量增加3倍。在臨床試驗(yàn)中，晚期前列腺癌患者接受西地那非聯(lián)合TCR-T治療后，外周血中MDSCs顯著減少，抗原特異性T細(xì)胞頻率提升。2髓系來源的抑制性細(xì)胞（MDSCs）的清除2.2COX-2抑制劑COX-2抑制劑（如塞來昔布）可抑制MDSCs的擴(kuò)增與活化，同時(shí)減少前列腺素E2（PGE2）的分泌，恢復(fù)DC細(xì)胞功能。例如，塞來昔布聯(lián)合TCR-T治療可使胰腺癌模型小鼠的腫瘤體積縮小70%，且腫瘤浸潤DC細(xì)胞成熟率提升至50%。2髓系來源的抑制性細(xì)胞（MDSCs）的清除2.3抗體介導(dǎo)的MDSCs耗竭抗Gr-1抗體（小鼠）或抗CSF-1R抗體（人）可特異性耗竭M(jìn)DSCs。例如，抗CSF-1R抗體（PLX3397）聯(lián)合TCR-T治療在乳腺癌模型中可使MDSCs比例從35%降至10%，且T細(xì)胞細(xì)胞毒性增強(qiáng)4倍。3免疫檢查點(diǎn)分子的阻斷免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-1、PD-L1、TIM-3、LAG-3）在DC細(xì)胞與T細(xì)胞表面共表達(dá)，通過抑制性信號(hào)阻斷T細(xì)胞活化。阻斷這些分子可恢復(fù)抗原提呈-T細(xì)胞活化的正反饋循環(huán)。3免疫檢查點(diǎn)分子的阻斷3.1PD-1/PD-L1抑制劑PD-1/PD-L1通路是腫瘤免疫逃逸的核心機(jī)制。抗PD-1抗體（如帕博利珠單抗）或抗PD-L1抗體（如阿特珠單抗）可解除T細(xì)胞的抑制狀態(tài)，同時(shí)增強(qiáng)DC細(xì)胞的抗原提呈功能。臨床研究顯示，PD-1抑制劑聯(lián)合TCR-T治療在晚期實(shí)體瘤患者中ORR可達(dá)25%-40%，且部分患者實(shí)現(xiàn)長期緩解。例如，在MAGE-A3陽性黑色素瘤中，帕博利珠單抗聯(lián)合TCR-T治療的ORR達(dá)45%，中位PFS達(dá)12個(gè)月。3免疫檢查點(diǎn)分子的阻斷3.2TIM-3/LAG-3等新興檢查點(diǎn)靶點(diǎn)TIM-3在DC細(xì)胞與T細(xì)胞共表達(dá)，其配體galectin-9可誘導(dǎo)T細(xì)胞耗竭；LAG-3與MHC-II分子結(jié)合可抑制T細(xì)胞活化?？筎IM-3抗體（如Sabatolimab）或抗LAG-3抗體（如Relatlimab）聯(lián)合PD-1抑制劑，可進(jìn)一步改善抗原提呈微環(huán)境。臨床前研究顯示，TIM-3/PD-1雙抗聯(lián)合TCR-T治療可使小鼠腫瘤模型中T細(xì)胞耗竭比例從40%降至15%，且腫瘤清除率達(dá)90%。07聯(lián)合其他免疫治療模式協(xié)同增強(qiáng)抗原提呈1與PD-1/PD-L1抑制劑的聯(lián)合PD-1/PD-L1抑制劑通過解除T細(xì)胞的抑制狀態(tài)，與TCR-T治療形成“增強(qiáng)T細(xì)胞活性+改善抗原提呈”的協(xié)同效應(yīng)。臨床前研究顯示，PD-1抑制劑可上調(diào)T細(xì)胞表面的CD28分子表達(dá)，增強(qiáng)與DC細(xì)胞CD80/CD86的結(jié)合，促進(jìn)T細(xì)胞活化。在一項(xiàng)針對(duì)晚期黑色素瘤的II期臨床試驗(yàn)中，NY-ESO-1TCR-T聯(lián)合帕博利珠單抗治療的ORR達(dá)50%，顯著高于TCR-T單藥（20%）。此外，PD-1抑制劑可減少腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞的耗竭，延長其存活時(shí)間，為抗原提呈贏得窗口期。2與化療/放療的聯(lián)合化療/放療通過殺傷腫瘤細(xì)胞釋放抗原，同時(shí)誘導(dǎo)ICD，為TCR-T治療提供“抗原佐劑”。例如，放療（8-10Gy）可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞釋放HMGB1，激活DC細(xì)胞的TLR4通路，增強(qiáng)抗原提呈；而吉西他濱可抑制MDSCs的擴(kuò)增，改善微環(huán)境。臨床研究顯示，局部放療聯(lián)合TCR-T治療在胰腺癌患者中可實(shí)現(xiàn)“遠(yuǎn)隔效應(yīng)”（abscopaleffect），非照射腫瘤病灶縮小率達(dá)40%。3與過繼性細(xì)胞治療（ACT）的聯(lián)合3.1TCR-T與CAR-T的聯(lián)合CAR-T細(xì)胞可靶向腫瘤表面抗原，釋放細(xì)胞因子（如IFN-γ）上調(diào)腫瘤細(xì)胞MHC-I類分子表達(dá)，增強(qiáng)TCR-T細(xì)胞的識(shí)別效率。例如，HER2CAR-T聯(lián)合NY-ESO-1TCR-T治療在乳腺癌模型中，可使腫瘤浸潤C(jī)D8+T細(xì)胞數(shù)量增加6倍，且腫瘤體積縮小90%。3與過繼性細(xì)胞治療（ACT）的聯(lián)合3.2與γδT細(xì)胞的聯(lián)合γδT細(xì)胞可通過識(shí)別應(yīng)激抗原（如MICA/B）直接殺傷腫瘤細(xì)胞，同時(shí)釋放IL-17、GM-CSF等細(xì)胞因子，招募并活化DC細(xì)胞。臨床前研究顯示，γδT細(xì)胞聯(lián)合TCR-T治療可使小鼠腫瘤模型中DC細(xì)胞成熟率提升至60%，且