高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用高效液相色譜法（HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC），又稱“高壓液相色譜法”或“高速液相色譜法”，是20世紀(jì)60年代末，在經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上引入氣相色譜的理論與實(shí)驗(yàn)方法，并加以改進(jìn)而發(fā)展起來(lái)的一種重要分離分析方法。HPLC采用了高壓輸液泵，高效固定相和高靈敏度在線檢測(cè)器等技術(shù)，具有分離效能高、分析速度快、靈敏度高、色柱可以反復(fù)使用、流動(dòng)相可選擇范圍寬、流出組容易收集、適用范圍廣和安全等優(yōu)點(diǎn)，特別適合揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的高分子化合物以及離子型化合物的分離分析測(cè)試，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、生化、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、環(huán)保、商檢和法檢等科學(xué)領(lǐng)域。近年來(lái)，高效液相色譜法在藥物分析中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用，主要是鑒別相關(guān)物質(zhì)、檢查藥物中有關(guān)物質(zhì)的含量限度以及測(cè)定有效成分或主要成分含量，世界各國(guó)已將該法收載于藥典。本文就高效液相色譜法在藥物分析研究中的應(yīng)用綜述如下。一、高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用（一）高效液相色譜法在藥物鑒別中的應(yīng)用在HPLC法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)，可用于藥物的鑒別。如中國(guó)藥典收載的藥物頭孢羥氨芐的鑒別項(xiàng)下規(guī)定：在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品主峰的保留時(shí)間一致。頭孢拉定、頭孢噻酚鈉等頭孢類藥物以及地西泮注射液、曲安奈德注射液等多種藥物均采用HPLC法進(jìn)行鑒別。王維劍reF_ref291536030rh*MerGeForMAT[1]王維劍,張軍仁,龐華.替莫唑胺含量測(cè)定方法的研究[J].藥物分析雜志,2003,23(5):344.等以O(shè)DS柱，甲醇-0.5%乙酸(1:9)為流動(dòng)相，DVD檢測(cè)器，波長(zhǎng)329nm測(cè)定了一種新型抗腫瘤藥替莫唑胺(temzolo-mide)，為申報(bào)新藥提供了數(shù)據(jù)。崔靜茹reF_ref291536038rh*MerGeForMAT[2]崔靜茹,杜智敏.半夏止咳糖漿的制備與鑒別[J].實(shí)用新鬧肺血管病雜志.2008,16(7):61-63.等以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，分別以甲醇-冰乙酸-水(30∶4∶66)和以乙腈-0·1%磷酸液(9∶91)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)分別為283nm、207nm，對(duì)半夏止咳糖漿中的陳皮、麻黃進(jìn)行鑒別，方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，可用于控制此中藥制劑的內(nèi)在質(zhì)量。王小平reF_ref291536045rh*MerGeForMAT[3]王小平，林勵(lì)，白吉慶．HPLC指紋圖譜法鑒別蜂膠和樹(shù)膠[J]．陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，55(3)：133—135．等還采用HPLC指紋圖譜法對(duì)蜂膠和樹(shù)膠進(jìn)行鑒別。這些應(yīng)用無(wú)疑為進(jìn)一步完善、開(kāi)發(fā)藥物鑒別的方法提供了一種新的思路。（二）高效液相色譜法在含量測(cè)定中的應(yīng)用用高效液相色譜法測(cè)定含量可以消除藥物中的雜質(zhì)，制劑中的附加劑及共存的藥物對(duì)測(cè)定的干擾，因此藥物成分含量測(cè)定中HPLC法應(yīng)用廣泛。杜洪光reF_ref291536052rh*MerGeForMAT[4]杜洪光,賴宇宏,王麗等.HPLC法測(cè)定苯甲酸雌二醇貼片中藥物的含量及其體外透皮釋放量[J].北京化工大學(xué)學(xué)報(bào).2004,31(2):110-112.等采用HPLC法測(cè)定苯甲酸雌二醇貼片中苯甲酸雌二醇(EB)的含量，李立reF_ref291536062rh*MerGeForMAT[5]李立,許軍,王如意等.正清風(fēng)痛寧口崩片制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥.2008,19(5):1195-1196.等用HPLC法測(cè)鹽酸青藤堿含量，操作簡(jiǎn)便，回收率高，快速準(zhǔn)確。劉娜reF_ref291536063rh*MerGeForMAT[6]劉娜,趙朝群,王萌.舒冠膠囊的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].甘肅中醫(yī).2008,21(4):47-49.等以HPLC法測(cè)定2,3,5,4'-四羥基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷的含量，可用于舒冠膠囊的質(zhì)量控制。此外，張小華等應(yīng)用RP-HPLC法成功測(cè)定了阿莫西林-鹽酸環(huán)丙沙星可溶性粉的含量。李妮等采用RP-HPLC法測(cè)定鹽酸齊拉西酮的含量。胡云珍等采用RP-HPLC法測(cè)定佐米曲普坦的含量，并對(duì)其純度進(jìn)行考察。（三）高效液相色譜法在添加違禁藥物檢查中的應(yīng)用近年來(lái)，食品、藥品、保健品以及動(dòng)物飼料等各方面頻頻出現(xiàn)非法添加違禁藥物的事件，這類成分往往對(duì)患者造成病情不受控制、藥物中毒等不良反應(yīng)，嚴(yán)重者甚至威脅到患者生命。高效液相色譜法對(duì)添加違禁藥物的日常檢驗(yàn)工作提供了有力的技術(shù)支持。薛恒躍reF_ref291536099rh*MerGeForMAT[7]薛恒躍,王玉蘭,于黎明等.中藥制劑中添加化學(xué)藥品苯巴比妥的檢測(cè)方法研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥.2006,17(2):216-217.等建立化學(xué)官能團(tuán)專屬性鑒別方法和高效液相色譜法對(duì)抗癲癇類中藥制劑中添加化學(xué)藥品苯巴比妥進(jìn)行初步確認(rèn)，用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)以對(duì)照品比對(duì)做最終確認(rèn)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。高青reF_ref291536106rh*MerGeForMAT[8]高青,張韶,車寶泉.6種抗高血壓藥物液相色譜鑒別方法的研究[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào).2005,36(4):330-333.等采用氰基(25cm×4.6mm)色譜柱，以0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液(用20%磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.7)-乙腈(7∶3)為流動(dòng)相，柱溫35℃，流速1mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，265nm。在此色譜條件下，中藥制劑中非法添加的6種化學(xué)合成降壓藥（比索洛爾、吲達(dá)帕胺、硝苯地平、尼群地平、非洛地平及利血平）有很好的分離度，檢測(cè)靈敏度及最小檢出量均為2ng；連續(xù)5針進(jìn)樣色譜圖中各組分保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于1.0%。車寶泉reF_ref291536111rh*MerGeForMAT[9]車寶泉,張喆,黃曉君等.液質(zhì)聯(lián)用檢查中藥制劑及保健食品中減肥類藥物[J].藥物分析雜志.2009,29(4):633-635.等采用UtimatesXB-C18色譜柱，梯度洗脫：流動(dòng)相A為含0.1%醋酸的20mmol·L-1醋酸銨溶液，流動(dòng)相B為甲醇,流速為1mL·min-1。選擇正負(fù)離子全掃描方式檢測(cè)臨床常用的10種減肥藥，利用質(zhì)譜解析軟件研究了上述化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律，通過(guò)比較樣品峰與對(duì)照品峰的一級(jí)質(zhì)譜、二級(jí)質(zhì)譜質(zhì)荷比，確定樣品中是否摻雜了化學(xué)藥物。結(jié)果各色譜峰間分離度良好，質(zhì)譜分辨率符合要求，最小檢出量為2ng至100ng。二、結(jié)束語(yǔ)高效液相色譜法是現(xiàn)代藥物分析中最高效、快捷的方法之一，具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)，既可用于藥物分離，也可用于定性定量分型，適用范圍廣因此在藥物成分的分離與測(cè)定方面能夠充分發(fā)揮其它分析方法無(wú)與倫比的優(yōu)勢(shì)。而且隨著計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、專家系統(tǒng)的應(yīng)用、檢測(cè)手段的進(jìn)步、各種聯(lián)用技術(shù)的出現(xiàn)以及其他一些相關(guān)問(wèn)題的解決，HPLC將稱為今后質(zhì)量規(guī)范化，國(guó)際化的重要途徑之一。參考文獻(xiàn)[1]王維劍,張軍仁,龐華.替莫唑胺含量測(cè)定方法的研究[J].藥物分析雜志,2003,23(5):344.[2]崔靜茹,杜智敏.半夏止咳糖漿的制備與鑒別[J].實(shí)用新鬧肺血管病雜志.2008,16(7):61-63.[3]王小平，林勵(lì)，白吉慶．HPLC指紋圖譜法鑒別蜂膠和樹(shù)膠[J]．陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，55(3)：133—135．[4]杜洪光,賴宇宏,王麗等.HPLC法測(cè)定苯甲酸雌二醇貼片中藥物的含量及其體外透皮釋放量[J].北京化工大學(xué)學(xué)報(bào).2004,31(2):110-112.[5]李立,許軍,王如意等.正清風(fēng)痛寧口崩片制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥.2008,19(5):1195-1196.[6]劉娜,趙朝群,王萌.舒冠膠囊的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].甘肅中醫(yī).2008,21(4):47-49.[7]薛恒躍,王玉蘭,于黎明等.中藥制劑中添加化學(xué)藥品苯巴比妥的檢測(cè)方法研