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團 體 標 準T/GAIA035—2025βDeterminationofβ-ecdysteroneinshrimpandcrabfeedsHighperformanceliquidchromatography2025-12-11發(fā)布 2025-12-18實施會 發(fā)布T/GAIA035T/GAIA035—2025II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由廣東省分析測試協(xié)會提出并歸口。T/GAIA035T/GAIA035—202511蝦蟹類飼料中β-蛻皮甾酮的測定 高效液相色譜法范圍本文件描述了蝦蟹類飼料中β-蛻皮甾酮的高效液相色譜測定方法。本文件適用于蝦蟹類飼料中β-蛻皮甾酮的測定。（GB/T6682GB/T20195動物飼料試樣的制備本文件沒有需要界定的術語和定義。原理試樣中的β-蛻皮甾酮經40%甲醇溶液提取后，高效液相色譜分離，紫外檢測器檢測，以保留時間定性，外標法定量。40%400mL1000βS287479β（20gL1000140%50mL40%46β200g00.200mg/L、0.500mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L10.0mg/L42T/GAIA035T/GAIA035—2025220.1mg。0.01mg。40kHz500W4000r/min。按照GB/T20195制備試樣，至少200g，粉碎使其通過0.425mm孔徑的分析篩，充分混勻，裝入密閉容器中，備用。1.0（01β0.1mL30mL的40%20min，4000r/min550mL15mL的40%500.45μm尼龍微膜過濾，上機測試。注：根據試樣溶液中β-蛻皮甾酮的濃度高低，可進行適當的稀釋，確保上機濃度在標準曲線的線性范圍內。色譜參考條件如下：C18柱(250mm×4.6mm,5μm)B1；1.0mL/min；d)35℃；20μL；246nm。33表1梯度洗脫條件時間流動相A%流動相B%07030115951559515-定性以保留時間定性，試樣溶液中β-蛻皮甾酮保留時間應與標準系列工作液(濃度相當)中β-蛻皮甾酮的保留時間一致，其相對偏差在士2.5%之內。定量以β-0.99。β-40%將β-按照上述步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。試樣中β-蛻皮甾酮的含量按照公式（1）計算。X=c×V×k (1)??式中：X ——β-(mg/kg)；c ——β-,(mg/L)；T/GAIA035T/GAIA035—202544V 樣液容積，位毫升(mL)；k ——樣液釋數；m g。計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數字。在重復性條件下，兩次獨立測定結果與其算術平均值的絕對差值不大于該算術平均值的10%。10檢出限與定量限當稱樣量為1g時，檢出限為3mg/100g，定量限為10mg/100g。T/GAIA035T/GAIA035—202555附錄A（資料性）β-圖1β-廣東省分析測試協(xié)會團體標準蝦蟹類飼料中β相色譜法T/GA