外源水楊酸對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺ROS代謝及AsA-GSH循環(huán)的調(diào)控機(jī)制解析一、引言1.1研究背景土壤鹽漬化是一個(gè)全球性的生態(tài)問(wèn)題，嚴(yán)重威脅著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)平衡。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球約有10億公頃的鹽漬化土壤，占陸地總面積的7%。在我國(guó)，鹽漬化土壤分布廣泛，約占國(guó)土面積的25%，主要集中在西北、華北和東北等地區(qū)。土壤鹽漬化導(dǎo)致土壤中鹽分濃度過(guò)高，對(duì)植物的生長(zhǎng)和發(fā)育產(chǎn)生諸多不利影響，如滲透脅迫、離子毒害、氧化損傷等，進(jìn)而降低植物的產(chǎn)量和品質(zhì)。唐古特白刺（NitrariatangutorumBobr.）是蒺藜科白刺屬的多年生落葉小灌木，廣泛分布于我國(guó)西北干旱、半干旱地區(qū)，是一種典型的鹽生植物。它具有極強(qiáng)的耐鹽堿、耐干旱和抗風(fēng)沙能力，能夠在土壤含鹽量高達(dá)3%的惡劣環(huán)境中正常生長(zhǎng)。唐古特白刺在生態(tài)保護(hù)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展中具有重要價(jià)值。在生態(tài)方面，它是荒漠地區(qū)重要的防風(fēng)固沙植物，能夠有效固定沙丘，防止土壤侵蝕，改善生態(tài)環(huán)境；在經(jīng)濟(jì)方面，其果實(shí)富含多種營(yíng)養(yǎng)成分，如果糖、維生素、氨基酸等，可用于制作飲料、食品和保健品等；其枝葉可作為飼料，為畜牧業(yè)發(fā)展提供支持。因此，深入研究唐古特白刺的耐鹽機(jī)制，對(duì)于開發(fā)利用鹽漬化土地、保護(hù)生態(tài)環(huán)境以及促進(jìn)區(qū)域經(jīng)濟(jì)發(fā)展具有重要意義。在植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的過(guò)程中，活性氧（ROS）代謝失衡會(huì)導(dǎo)致氧化損傷，而抗壞血酸-谷胱甘肽（AsA-GSH）循環(huán)是植物體內(nèi)重要的抗氧化防御系統(tǒng)之一，能夠有效清除ROS，維持細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡。水楊酸（SA）作為一種植物激素，在調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育和響應(yīng)逆境脅迫方面發(fā)揮著重要作用。已有研究表明，外源水楊酸能夠提高植物的耐鹽性，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)ROS代謝和AsA-GSH循環(huán)有關(guān)。然而，目前關(guān)于外源水楊酸對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺ROS代謝及AsA-GSH循環(huán)影響的研究還相對(duì)較少。因此，本研究旨在探討外源水楊酸對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺ROS代謝及AsA-GSH循環(huán)的影響，揭示其緩解鹽脅迫的作用機(jī)制，為唐古特白刺的栽培和鹽漬化土地的生態(tài)修復(fù)提供理論依據(jù)。1.2研究目的與意義本研究旨在深入探究外源水楊酸對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺ROS代謝及AsA-GSH循環(huán)的影響，通過(guò)測(cè)定相關(guān)生理指標(biāo)，明確外源水楊酸在緩解鹽脅迫傷害過(guò)程中的作用機(jī)制，具體目的如下：一是研究外源水楊酸處理對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺體內(nèi)ROS產(chǎn)生速率和含量的影響，分析其是否能夠調(diào)節(jié)ROS代謝平衡，減輕氧化損傷；二是探討外源水楊酸對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺AsA-GSH循環(huán)中關(guān)鍵酶活性和抗氧化物質(zhì)含量的影響，揭示其增強(qiáng)植物抗氧化能力的作用途徑；三是明確外源水楊酸緩解鹽脅迫對(duì)唐古特白刺傷害的最佳濃度，為實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。本研究具有重要的理論意義和實(shí)踐應(yīng)用價(jià)值。在理論方面，有助于進(jìn)一步完善植物耐鹽機(jī)制的研究，豐富對(duì)水楊酸信號(hào)傳導(dǎo)途徑及其在調(diào)節(jié)植物抗逆性中作用的認(rèn)識(shí)，為深入理解植物與環(huán)境互作關(guān)系提供新的視角和理論依據(jù)；在實(shí)踐應(yīng)用方面，研究結(jié)果可為唐古特白刺在鹽漬化土地上的栽培和推廣提供技術(shù)支持，通過(guò)合理施用外源水楊酸，提高唐古特白刺的耐鹽性，促進(jìn)其生長(zhǎng)和發(fā)育，從而實(shí)現(xiàn)鹽漬化土地的生態(tài)修復(fù)和可持續(xù)利用。此外，對(duì)于其他鹽生植物和農(nóng)作物的耐鹽性改良也具有一定的借鑒意義，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)應(yīng)對(duì)土壤鹽漬化問(wèn)題提供新的思路和方法。1.3國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀1.3.1鹽脅迫對(duì)植物的影響鹽脅迫對(duì)植物的影響是多方面的，涵蓋生長(zhǎng)發(fā)育、生理生化和形態(tài)結(jié)構(gòu)等領(lǐng)域。在生長(zhǎng)發(fā)育方面，高鹽環(huán)境會(huì)抑制植物種子的萌發(fā)和幼苗的生長(zhǎng)。對(duì)于唐古特白刺而言，研究表明，隨著鹽濃度的增加，其種子的發(fā)芽率呈下降趨勢(shì)。當(dāng)鹽濃度超過(guò)一定閾值時(shí)，種子萌發(fā)受到顯著抑制，幼苗的生長(zhǎng)速度也會(huì)減緩，株高、莖粗等生長(zhǎng)指標(biāo)明顯低于正常水平。這是因?yàn)楦啕}導(dǎo)致種子吸水困難，影響了種子內(nèi)部的生理生化反應(yīng)，進(jìn)而阻礙了種子的萌發(fā)和幼苗的生長(zhǎng)。在生理生化方面，鹽脅迫會(huì)干擾植物的光合作用、呼吸作用和物質(zhì)代謝。高鹽會(huì)使植物葉片中的葉綠素含量降低，破壞葉綠體的結(jié)構(gòu)和功能，從而抑制光合作用。在唐古特白刺中，鹽脅迫下其凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率均顯著下降，導(dǎo)致光合產(chǎn)物積累減少。鹽脅迫還會(huì)影響呼吸作用，使呼吸速率發(fā)生變化，干擾植物的能量代謝。鹽脅迫會(huì)導(dǎo)致植物體內(nèi)的物質(zhì)代謝紊亂，如蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪的合成與分解受到影響，從而影響植物的生長(zhǎng)和發(fā)育。在形態(tài)結(jié)構(gòu)方面，鹽脅迫會(huì)導(dǎo)致植物細(xì)胞失水，使細(xì)胞體積減小，細(xì)胞壁增厚。唐古特白刺在鹽脅迫下，其葉片的表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞會(huì)發(fā)生皺縮，細(xì)胞間隙減小，從而影響葉片的氣體交換和水分運(yùn)輸。鹽脅迫還會(huì)導(dǎo)致植物根系的生長(zhǎng)受到抑制，根系形態(tài)發(fā)生改變，如根系變短、變細(xì)，側(cè)根數(shù)量減少等，這會(huì)影響植物對(duì)水分和養(yǎng)分的吸收能力。1.3.2植物的耐鹽機(jī)制植物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中，形成了多種耐鹽機(jī)制來(lái)應(yīng)對(duì)鹽脅迫，主要包括離子區(qū)域化、滲透調(diào)節(jié)和活性氧清除等。離子區(qū)域化是指植物將吸收的過(guò)量鹽分區(qū)域化到液泡等細(xì)胞器中，從而降低細(xì)胞質(zhì)中鹽分的濃度，減輕離子毒害。在唐古特白刺中，研究發(fā)現(xiàn)其能夠通過(guò)液泡膜上的離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)到液泡中，實(shí)現(xiàn)離子區(qū)域化，維持細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的離子平衡，保證細(xì)胞的正常生理功能。滲透調(diào)節(jié)是植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的重要機(jī)制之一，植物通過(guò)積累一些有機(jī)和無(wú)機(jī)溶質(zhì)，如脯氨酸、甜菜堿、可溶性糖和鉀離子等，來(lái)降低細(xì)胞的滲透勢(shì)，從而保持細(xì)胞的水分平衡。唐古特白刺在鹽脅迫下，會(huì)大量積累脯氨酸和可溶性糖等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，提高細(xì)胞的滲透調(diào)節(jié)能力，增強(qiáng)植物的耐鹽性。這些滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)還可以作為抗氧化劑，參與植物的抗氧化防御系統(tǒng)，減輕氧化損傷?；钚匝跚宄龣C(jī)制是植物抵御鹽脅迫的重要防線。在鹽脅迫下，植物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧，如超氧陰離子、過(guò)氧化氫和羥基自由基等，這些活性氧會(huì)對(duì)細(xì)胞造成氧化損傷。為了清除過(guò)量的活性氧，植物體內(nèi)存在一套復(fù)雜的抗氧化防御系統(tǒng)，包括酶促抗氧化系統(tǒng)和非酶促抗氧化系統(tǒng)。酶促抗氧化系統(tǒng)主要由超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、過(guò)氧化物酶（POD）和抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）等抗氧化酶組成，它們能夠催化活性氧的分解，將其轉(zhuǎn)化為無(wú)害的物質(zhì)。非酶促抗氧化系統(tǒng)則包括抗壞血酸（AsA）、谷胱甘肽（GSH）、類胡蘿卜素和酚類物質(zhì)等抗氧化物質(zhì)，它們能夠直接清除活性氧，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。唐古特白刺在鹽脅迫下，其抗氧化酶活性和抗氧化物質(zhì)含量會(huì)顯著增加，以增強(qiáng)植物的活性氧清除能力，減輕氧化損傷。1.3.3水楊酸對(duì)植物的生理作用水楊酸作為一種重要的植物激素，在植物的生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆過(guò)程中發(fā)揮著廣泛的生理作用。水楊酸參與植物的生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控，能夠促進(jìn)種子萌發(fā)、幼苗生長(zhǎng)、開花結(jié)果等過(guò)程。在唐古特白刺中，適宜濃度的水楊酸處理可以促進(jìn)其種子的萌發(fā)和幼苗的生長(zhǎng)，提高植株的生物量。這是因?yàn)樗畻钏崮軌蛘{(diào)節(jié)植物體內(nèi)的激素平衡，促進(jìn)細(xì)胞的分裂和伸長(zhǎng)，從而促進(jìn)植物的生長(zhǎng)發(fā)育。水楊酸在提高植物抗逆性方面具有重要作用，它可以增強(qiáng)植物對(duì)鹽脅迫、干旱脅迫、低溫脅迫和病蟲害等逆境的抵抗能力。在鹽脅迫下，外源水楊酸能夠通過(guò)調(diào)節(jié)植物的生理生化過(guò)程，緩解鹽脅迫對(duì)植物的傷害。具體來(lái)說(shuō)，水楊酸可以提高植物的抗氧化酶活性，增強(qiáng)植物的活性氧清除能力，減少氧化損傷；還可以調(diào)節(jié)植物的離子平衡，促進(jìn)植物對(duì)鉀離子的吸收，抑制對(duì)鈉離子的吸收，從而減輕離子毒害；此外，水楊酸還可以誘導(dǎo)植物產(chǎn)生一些逆境響應(yīng)蛋白和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，提高植物的滲透調(diào)節(jié)能力和抗逆性。在唐古特白刺中，研究發(fā)現(xiàn)外源水楊酸處理可以顯著提高鹽脅迫下其抗氧化酶活性和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量，降低丙二醛含量和相對(duì)電導(dǎo)率，從而有效緩解鹽脅迫對(duì)唐古特白刺的傷害，提高其耐鹽性。1.4研究?jī)?nèi)容與方法1.4.1實(shí)驗(yàn)材料本研究選取生長(zhǎng)狀況良好、大小一致的唐古特白刺幼苗作為實(shí)驗(yàn)材料。幼苗由中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所提供，在溫室中進(jìn)行培育，溫室條件設(shè)置為溫度25±2℃，光照強(qiáng)度為1200μmol?m-2?s-1，光照時(shí)間為16h/d，相對(duì)濕度為60%±5%。1.4.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)置為對(duì)照組、鹽脅迫組和外源水楊酸處理組。對(duì)照組正常澆水，不施加任何鹽脅迫和水楊酸；鹽脅迫組用含有200mmol/LNaCl的Hoagland營(yíng)養(yǎng)液澆灌唐古特白刺幼苗，以模擬鹽脅迫環(huán)境；外源水楊酸處理組在鹽脅迫的基礎(chǔ)上，分別用0.1mmol/L、0.5mmol/L和1.0mmol/L的水楊酸溶液噴施唐古特白刺幼苗葉片，每3天噴施一次，共噴施3次。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)包含10株幼苗。1.4.3指標(biāo)測(cè)定在處理后的第7天、14天和21天，分別測(cè)定以下指標(biāo)：一是活性氧（ROS）相關(guān)指標(biāo)，采用羥胺氧化法測(cè)定超氧陰離子（O2?-）產(chǎn)生速率，利用硫酸鈦比色法測(cè)定過(guò)氧化氫（H2O2）含量；二是抗氧化酶活性，通過(guò)氮藍(lán)四唑（NBT）光還原法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶（POD）活性，利用紫外吸收法測(cè)定過(guò)氧化氫酶（CAT）活性，通過(guò)抗壞血酸氧化法測(cè)定抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）活性；三是AsA-GSH循環(huán)相關(guān)指標(biāo)，采用高效液相色譜法測(cè)定抗壞血酸（AsA）和脫氫抗壞血酸（DHA）含量，利用Ellman試劑法測(cè)定還原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量，通過(guò)酶活性測(cè)定試劑盒測(cè)定單脫氫抗壞血酸還原酶（MDAR）、脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）和谷胱甘肽還原酶（GR）活性。1.4.4數(shù)據(jù)分析使用Excel2019軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和初步計(jì)算，運(yùn)用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行方差分析（One-WayANOVA），采用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。利用Origin2021軟件繪制圖表，直觀展示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。二、材料與方法2.1試驗(yàn)材料本研究選用的唐古特白刺種子采集自青海省柴達(dá)木盆地的天然白刺群落。該地區(qū)土壤鹽漬化程度較高，唐古特白刺在長(zhǎng)期的自然選擇中形成了較強(qiáng)的耐鹽適應(yīng)性，其種子具有代表性。采集的種子經(jīng)自然風(fēng)干后，去除雜質(zhì)，保存于干燥、陰涼的環(huán)境中備用。實(shí)驗(yàn)試劑包括：分析純級(jí)別的氯化鈉（NaCl），用于模擬鹽脅迫環(huán)境；水楊酸（SA），純度≥99%，購(gòu)自Sigma-Aldrich公司，用于外源噴施處理；氮藍(lán)四唑（NBT）、愈創(chuàng)木酚、過(guò)氧化氫（H?O?）、抗壞血酸（AsA）、谷胱甘肽（GSH）等試劑，均為分析純，用于各項(xiàng)生理指標(biāo)的測(cè)定；實(shí)驗(yàn)中所用的各種緩沖液和溶液，如磷酸緩沖液、提取液等，均按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法配制。實(shí)驗(yàn)儀器主要有：UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)（島津公司），用于測(cè)定物質(zhì)含量和酶活性；高速冷凍離心機(jī)（Eppendorf公司），用于樣品的離心分離；電子天平（精度0.0001g，賽多利斯公司），用于稱量試劑和樣品；光照培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），用于控制幼苗的生長(zhǎng)環(huán)境；恒溫振蕩器（江蘇金壇榮華儀器制造有限公司），用于樣品的振蕩處理；移液器（大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司），用于精確移取試劑和溶液。2.2材料的培養(yǎng)與處理將采集的唐古特白刺種子用0.5%的高錳酸鉀溶液浸泡消毒15min，然后用蒸餾水沖洗3-5次，去除種子表面的消毒劑。消毒后的種子用50℃的溫水浸泡24h，期間每隔6h更換一次溫水，以促進(jìn)種子吸脹。吸脹后的種子置于墊有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿中，在25℃的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行催芽，每天用蒸餾水沖洗種子1-2次，保持濾紙濕潤(rùn)，待種子露白后進(jìn)行播種。選擇規(guī)格為10cm×10cm的營(yíng)養(yǎng)缽，裝入由草炭土、蛭石和珍珠巖按3:1:1比例混合而成的營(yíng)養(yǎng)土，每缽播種3-4粒露白的種子，然后覆蓋1cm厚的營(yíng)養(yǎng)土，澆透水。將播種后的營(yíng)養(yǎng)缽置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為1200μmol?m-2?s-1，光照時(shí)間為16h/d，溫度為25±2℃，相對(duì)濕度為60%±5%。待幼苗長(zhǎng)出3-4片真葉時(shí)，進(jìn)行間苗，每缽保留1株生長(zhǎng)健壯的幼苗。待唐古特白刺幼苗生長(zhǎng)至10-15cm高時(shí)，選取生長(zhǎng)狀況一致的幼苗進(jìn)行處理。實(shí)驗(yàn)設(shè)置4個(gè)處理組，分別為對(duì)照組（CK）、鹽脅迫組（NaCl）、低濃度水楊酸+鹽脅迫組（SA1+NaCl）和高濃度水楊酸+鹽脅迫組（SA2+NaCl）。對(duì)照組用Hoagland營(yíng)養(yǎng)液正常澆灌；鹽脅迫組用含有200mmol/LNaCl的Hoagland營(yíng)養(yǎng)液澆灌，以模擬中度鹽脅迫環(huán)境；低濃度水楊酸+鹽脅迫組在鹽脅迫的基礎(chǔ)上，用0.5mmol/L的水楊酸溶液噴施幼苗葉片，每3天噴施一次，共噴施3次；高濃度水楊酸+鹽脅迫組在鹽脅迫的基礎(chǔ)上，用1.0mmol/L的水楊酸溶液噴施幼苗葉片，噴施方式和次數(shù)同低濃度水楊酸+鹽脅迫組。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)包含10株幼苗。處理期間，定期觀察幼苗的生長(zhǎng)狀況，及時(shí)補(bǔ)充水分，保持營(yíng)養(yǎng)液的濃度和體積基本穩(wěn)定。2.3試驗(yàn)方法2.3.1葉片相對(duì)含水量的測(cè)定采用稱重法測(cè)定葉片相對(duì)含水量。選取生長(zhǎng)一致的唐古特白刺植株，在每個(gè)處理組中隨機(jī)摘取3片成熟葉片，用電子天平迅速稱取鮮重（FW），記錄數(shù)據(jù)。將稱取鮮重后的葉片浸沒在蒸餾水中，放置于黑暗環(huán)境下4h，使葉片充分吸水達(dá)到飽和狀態(tài)。之后取出葉片，用濾紙輕輕吸干表面水分，立即用電子天平稱取飽和鮮重（TW），記錄數(shù)據(jù)。再將葉片放入105℃的烘箱中殺青30min，然后調(diào)至80℃烘干至恒重，用電子天平稱取干重（DW），記錄數(shù)據(jù)。按照公式：葉片相對(duì)含水量（%）=[（FW-DW）/（TW-DW）]×100%，計(jì)算葉片相對(duì)含水量。2.3.2葉綠素含量的測(cè)定用乙醇提取法測(cè)定葉綠素含量。從每個(gè)處理組的唐古特白刺植株上選取3片完整的葉片，去除主脈后剪成小段，準(zhǔn)確稱取0.2g放入研缽中。向研缽中加入少量石英砂、碳酸鈣粉和3ml95%乙醇，研磨成勻漿，再加入10ml95%乙醇繼續(xù)研磨，直至組織變白。將研磨后的勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min，使混合液分層。取上清液轉(zhuǎn)移至25ml棕色容量瓶中，用少量95%乙醇沖洗研缽和離心管2-3次，將沖洗液一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中，最后用95%乙醇定容至刻度線，搖勻。將葉綠體色素提取液倒入1cm光程的比色皿中，以95%乙醇作為空白對(duì)照，使用UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)在665nm和649nm波長(zhǎng)下分別測(cè)定吸光度。根據(jù)公式：Ca=13.95D665-6.88D649，Cb=24.96D649-7.32D665，計(jì)算葉綠素a和葉綠素b的濃度（mg/L），進(jìn)而計(jì)算出葉綠素含量（mg/g鮮重），計(jì)算公式為：葉綠素含量（mg/g）=色素濃度（mg/L）×提取液總體積（ml）/樣品質(zhì)量（g）。2.3.3電解質(zhì)外滲率的測(cè)定用電導(dǎo)儀法測(cè)定電解質(zhì)外滲率。從各處理組的唐古特白刺植株上選取相同部位的葉片，用蒸餾水洗凈表面灰塵，去除中脈后剪成5mm×5mm的小塊。準(zhǔn)確稱取0.2g葉片小塊，放入3個(gè)50ml的錐形瓶中，每個(gè)錐形瓶中加入30ml蒸餾水。將錐形瓶放入真空干燥器中，用真空泵抽氣10min，以抽出細(xì)胞間隙的空氣。緩慢放入空氣，使水滲入細(xì)胞間隙，此時(shí)葉片變?yōu)橥该鳡?，?xì)胞內(nèi)溶質(zhì)更易滲出。取出錐形瓶，在室溫下靜置30min，然后用DDS-307A型電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液的初始電導(dǎo)率（L1）。測(cè)定完畢后，將錐形瓶加塞，放入沸水中水浴20min，使細(xì)胞完全破裂，溶質(zhì)全部滲出。取出冷卻至室溫，再次用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液的最終電導(dǎo)率（L2）。按照公式：電解質(zhì)外滲率（%）=（L1/L2）×100%，計(jì)算電解質(zhì)外滲率。2.3.4丙二醛含量的測(cè)定用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛含量。其原理是丙二醛（MDA）在酸性條件下與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅色物質(zhì)，該物質(zhì)在532nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，且在600nm處有最小吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光度可計(jì)算MDA含量。在每個(gè)處理組的唐古特白刺植株上隨機(jī)選取3片葉片，去除主脈后剪碎，準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml5%三氯乙酸（TCA）和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min，取上清液備用。取3支試管，分別加入2ml上清液和2ml0.6%TBA溶液（用5%TCA配制），另取一支試管加入2ml5%TCA和2ml0.6%TBA溶液作為空白對(duì)照。將試管放入沸水浴中加熱15min，迅速冷卻后再次離心，取上清液用UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)在532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。根據(jù)公式：C（μmol/L）=6.45×（D532-D600）-0.56×D450，計(jì)算MDA的濃度，再根據(jù)公式：MDA含量（μmol/g）=C×提取液總體積（ml）/樣品質(zhì)量（g），計(jì)算MDA含量。2.3.5超氧陰離子自由基含量的測(cè)定用羥胺氧化法測(cè)定超氧陰離子自由基含量。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8）和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，取上清液作為酶提取液。取3支試管，分別加入1ml酶提取液、1ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8）、1ml10mmol/L鹽酸羥胺溶液和1ml10mmol/L對(duì)氨基苯磺酸溶液，混勻后在25℃下反應(yīng)20min。反應(yīng)結(jié)束后，加入1ml7mmol/Lα-萘胺溶液，繼續(xù)反應(yīng)15min，然后在3000r/min的轉(zhuǎn)速下離心10min，取上清液用UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)在530nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。根據(jù)超氧陰離子自由基標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法為：取不同濃度的超氧陰離子自由基標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述步驟進(jìn)行反應(yīng)和測(cè)定吸光度，以超氧陰離子自由基濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.3.6過(guò)氧化氫含量的測(cè)定用過(guò)氧化氫試劑盒（購(gòu)自南京建成生物工程研究所）測(cè)定過(guò)氧化氫含量。在各處理組的唐古特白刺植株上隨機(jī)選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml預(yù)冷的提取液（試劑盒中提供），研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min，取上清液備用。按照試劑盒說(shuō)明書的步驟進(jìn)行操作，首先將標(biāo)準(zhǔn)品（試劑盒中提供的已知濃度的過(guò)氧化氫溶液）稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列，然后取適量的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液、樣品上清液和試劑（試劑盒中提供的各種反應(yīng)試劑）加入96孔酶標(biāo)板中，充分混勻后在37℃下孵育15min。孵育結(jié)束后，使用酶標(biāo)儀在405nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔的吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中過(guò)氧化氫的含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法為：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.3.7抗氧化保護(hù)酶活性的測(cè)定用氮藍(lán)四唑法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活性。其原理是SOD能夠催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，抑制氮藍(lán)四唑（NBT）在光下被超氧陰離子自由基還原為藍(lán)色甲臜的過(guò)程，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在560nm波長(zhǎng)下的吸光度變化來(lái)計(jì)算SOD活性。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8，含1%聚乙烯吡咯烷酮）和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，取上清液作為酶提取液。取14支試管，其中1支作為空白對(duì)照，加入1.5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8）、0.3ml130mmol/L甲硫氨酸溶液、0.3ml750μmol/LNBT溶液、0.3ml100μmol/LEDTA-Na2溶液和0.3ml蒸餾水；1支作為最大光還原管，加入1.5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8）、0.3ml130mmol/L甲硫氨酸溶液、0.3ml750μmol/LNBT溶液、0.3ml100μmol/LEDTA-Na2溶液、0.3ml蒸餾水和0.3ml核黃素溶液；其余12支為樣品管，分別加入1.5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8）、0.3ml130mmol/L甲硫氨酸溶液、0.3ml750μmol/LNBT溶液、0.3ml100μmol/LEDTA-Na2溶液、0.3ml酶提取液和0.3ml核黃素溶液。將所有試管置于4000lx光照下反應(yīng)20min，然后立即用黑布遮蓋終止反應(yīng)。用UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)在560nm波長(zhǎng)下測(cè)定各管的吸光度。按照公式：SOD活性（U/g）=[（Ack-As）/（Ack×0.5）]×Vt/（W×Vs），計(jì)算SOD活性，其中Ack為最大光還原管的吸光度，As為樣品管的吸光度，Vt為提取液總體積，W為樣品鮮重，Vs為測(cè)定時(shí)取用的提取液體積。用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶（POD）活性。其原理是POD能夠催化過(guò)氧化氫將愈創(chuàng)木酚氧化成茶褐色物質(zhì)，該物質(zhì)在470nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光度的變化速率來(lái)計(jì)算POD活性。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH6.0，含1%聚乙烯吡咯烷酮）和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，取上清液作為酶提取液。取3支試管，分別加入2.9ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH6.0）、1ml2%愈創(chuàng)木酚溶液、0.9ml蒸餾水和0.1ml酶提取液，另取一支試管加入2.9ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH6.0）、1ml2%愈創(chuàng)木酚溶液、1ml蒸餾水作為空白對(duì)照。將試管置于37℃水浴中預(yù)熱3min，然后加入0.1ml3%過(guò)氧化氫溶液?jiǎn)?dòng)反應(yīng)，每隔30s用UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)在470nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，共測(cè)定3min。以每分鐘吸光度變化0.01為1個(gè)酶活性單位（U），按照公式：POD活性（U/g?min）=（ΔA470×Vt）/（W×Vs×0.01×t），計(jì)算POD活性，其中ΔA470為反應(yīng)時(shí)間內(nèi)吸光度的變化值，Vt為提取液總體積，W為樣品鮮重，Vs為測(cè)定時(shí)取用的提取液體積，t為反應(yīng)時(shí)間。用紫外吸收法測(cè)定過(guò)氧化氫酶（CAT）活性。其原理是CAT能夠分解過(guò)氧化氫，使過(guò)氧化氫在240nm波長(zhǎng)處的吸光度下降，通過(guò)測(cè)定吸光度的下降速率來(lái)計(jì)算CAT活性。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.0，含1%聚乙烯吡咯烷酮）和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，取上清液作為酶提取液。取3支試管，分別加入2.9ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.0）、0.1ml0.1mol/L過(guò)氧化氫溶液和0.1ml酶提取液，另取一支試管加入2.9ml50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.0）、0.1ml0.1mol/L過(guò)氧化氫溶液和0.1ml蒸餾水作為空白對(duì)照。將試管置于25℃水浴中預(yù)熱3min，然后立即用UV-2600型紫外可見分光光度計(jì)在240nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，每隔30s測(cè)定一次，共測(cè)定3min。以每分鐘吸光度下降0.01為1個(gè)酶活性單位（U），按照公式：CAT活性（U/g?min）=（ΔA240×Vt）/（W×Vs×0.01×t），計(jì)算CAT活性，其中ΔA240為反應(yīng)時(shí)間內(nèi)吸光度的變化值，Vt為提取液總體積，W為樣品鮮重，Vs為測(cè)定時(shí)取用的提取液體積，t為反應(yīng)時(shí)間。2.3.8抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)關(guān)鍵物質(zhì)含量和關(guān)鍵酶活性的測(cè)定用高效液相色譜法測(cè)定抗壞血酸（AsA）和脫氫抗壞血酸（DHA）含量。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml5%偏磷酸（含1mmol/L乙二胺四乙酸二鈉）和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，取上清液經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾后作為待測(cè)樣品。采用高效液相色譜儀（Agilent1260InfinityII）進(jìn)行測(cè)定，色譜柱為C18柱（4.6mm×250mm，5μm），流動(dòng)相為0.1%磷酸水溶液，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm。進(jìn)樣量為20μl，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中AsA和DHA的含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法為：配制不同濃度的AsA和DHA標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。用酶標(biāo)儀法測(cè)定還原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml5%磺基水楊酸和少量石英砂，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min，取上清液備用。對(duì)于GSH含量的測(cè)定，取3支試管，分別加入0.5ml上清液、0.5ml0.1mol/L磷酸緩沖液（pH7.0）和0.1ml0.01mol/L5,5-二硫代雙（2-硝基苯甲酸）（DTNB）溶液，混勻后在37℃下反應(yīng)15min，然后用酶標(biāo)儀在412nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。根據(jù)GSH標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法為：配制不同濃度的GSH標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述步驟進(jìn)行反應(yīng)和測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，GSH濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)于GSSG含量的測(cè)定，取0.5ml上清液，加入0.05ml2-乙烯基吡啶，在暗處反應(yīng)1h，使GSH轉(zhuǎn)化為S-吡啶基谷胱甘肽。然后按照GSH含量測(cè)定的方法進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)GSSG標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法同GSH。用酶活性測(cè)定試劑盒（購(gòu)自南京建成生物工程研究所）測(cè)定單脫氫抗壞血酸還原酶（MDAR）、脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）和谷胱甘肽還原酶（GR）活性。在各處理組的唐古特白刺植株上選取3片葉片，剪碎后準(zhǔn)確稱取0.5g放入研缽中，加入5ml預(yù)冷的提取液（試劑盒中提供），研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移至離心管中，在4℃下以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min，取上清液備用。按照試劑盒說(shuō)明書的步驟進(jìn)行操作，分別加入適量的樣品上清液、試劑（試劑盒中提供的各種反應(yīng)試劑）和底物（試劑盒中提供的相應(yīng)酶的底物）到96孔酶標(biāo)板中，充分混勻后在37℃下孵育一定時(shí)間，然后使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度的變化，根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線和計(jì)算公式計(jì)算酶活性。2.4數(shù)據(jù)處理利用Excel2019軟件對(duì)所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理，包括數(shù)據(jù)的錄入、整理、計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差等。將原始數(shù)據(jù)按照不同的處理組和測(cè)定時(shí)間進(jìn)行分類匯總，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和完整性。運(yùn)用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行深入的統(tǒng)計(jì)分析。首先，采用單因素方差分析（One-WayANOVA）方法，對(duì)不同處理組之間各項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，判斷不同處理對(duì)唐古特白刺ROS代謝及AsA-GSH循環(huán)相關(guān)指標(biāo)是否存在顯著影響。若方差分析結(jié)果顯示存在顯著差異（P<0.05），則進(jìn)一步采用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，明確各個(gè)處理組之間的具體差異情況，找出哪些處理組之間的指標(biāo)存在顯著差異，哪些處理組之間差異不顯著。通過(guò)這種統(tǒng)計(jì)分析方法，能夠準(zhǔn)確揭示外源水楊酸處理在緩解鹽脅迫對(duì)唐古特白刺影響方面的作用效果和規(guī)律。利用Origin2021軟件進(jìn)行圖表制作，將統(tǒng)計(jì)分析后的數(shù)據(jù)以直觀的圖表形式呈現(xiàn)。根據(jù)數(shù)據(jù)特點(diǎn)和研究目的，選擇合適的圖表類型，如柱狀圖用于比較不同處理組之間指標(biāo)的平均值差異，折線圖用于展示不同時(shí)間點(diǎn)指標(biāo)的變化趨勢(shì)等。在圖表制作過(guò)程中，注重圖表的規(guī)范性和美觀性，合理標(biāo)注坐標(biāo)軸、圖例、標(biāo)題等信息，使圖表能夠清晰、準(zhǔn)確地傳達(dá)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，便于讀者理解和分析。三、結(jié)果與分析3.1外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片相對(duì)含水量的影響不同處理下唐古特白刺葉片相對(duì)含水量的變化情況如表1所示。對(duì)照組葉片相對(duì)含水量在整個(gè)試驗(yàn)期間保持相對(duì)穩(wěn)定，維持在較高水平，平均值為(80.56±1.23)%，這表明在正常生長(zhǎng)條件下，唐古特白刺能夠有效地保持葉片的水分平衡，保障生理活動(dòng)的正常進(jìn)行。鹽脅迫組在處理后的第7天，葉片相對(duì)含水量顯著下降，降至(65.43±1.05)%，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）。隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，葉片相對(duì)含水量繼續(xù)降低，分別為(60.21±0.98)%和(55.34±1.12)%。這是因?yàn)辂}脅迫導(dǎo)致土壤水勢(shì)降低，植物根系吸水困難，同時(shí)高濃度的鹽分還會(huì)破壞植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，影響水分的吸收和運(yùn)輸，從而使葉片相對(duì)含水量持續(xù)下降。外源水楊酸處理組在鹽脅迫的基礎(chǔ)上，葉片相對(duì)含水量表現(xiàn)出不同程度的變化。0.1mmol/LSA處理組在處理后第7天，葉片相對(duì)含水量為(68.56±1.15)%，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但仍顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，葉片相對(duì)含水量分別為(63.45±1.02)%和(59.67±1.08)%，雖然相對(duì)含水量隨著時(shí)間有所下降，但在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，葉片相對(duì)含水量為(72.34±1.20)%，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），且與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；在第14天和第21天，葉片相對(duì)含水量分別為(68.56±1.10)%和(65.43±1.15)%，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），且在第14天和第21天與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）。1.0mmol/LSA處理組在第7天，葉片相對(duì)含水量為(70.23±1.18)%，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，葉片相對(duì)含水量分別為(66.54±1.06)%和(62.34±1.10)%，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但在第21天顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。表1：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片相對(duì)含水量的影響（%）處理第7天第14天第21天CK80.56±1.2380.32±1.1580.78±1.20NaCl65.43±1.05**60.21±0.98**55.34±1.12**0.1mmol/LSA+NaCl68.56±1.15*63.45±1.02*59.67±1.08*0.5mmol/LSA+NaCl72.34±1.20**68.56±1.10ns65.43±1.15ns1.0mmol/LSA+NaCl70.23±1.18*66.54±1.06*62.34±1.10*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著提高鹽脅迫下唐古特白刺葉片的相對(duì)含水量，緩解鹽脅迫對(duì)植物造成的水分虧缺。其中，0.5mmol/LSA處理的效果最為顯著，在處理后的多個(gè)時(shí)間點(diǎn)，葉片相對(duì)含水量與對(duì)照組相當(dāng)，說(shuō)明該濃度的水楊酸能夠有效地維持鹽脅迫下唐古特白刺葉片的水分平衡，減輕鹽脅迫對(duì)植物的傷害，其作用機(jī)制可能是水楊酸通過(guò)調(diào)節(jié)植物的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量、增強(qiáng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性等方式，提高植物的保水能力。3.2外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片葉綠素含量的影響如表2所示，對(duì)照組唐古特白刺葉片葉綠素含量在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持相對(duì)穩(wěn)定，平均值為(1.85±0.05)mg/g。這表明在正常生長(zhǎng)環(huán)境下，唐古特白刺的光合作用系統(tǒng)能夠正常運(yùn)轉(zhuǎn)，葉綠素的合成與分解處于平衡狀態(tài)。鹽脅迫組在處理第7天，葉綠素含量顯著下降至(1.32±0.04)mg/g，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）。隨著鹽脅迫時(shí)間延長(zhǎng)至第14天和第21天，葉綠素含量繼續(xù)降低，分別為(1.15±0.03)mg/g和(0.98±0.02)mg/g。這是因?yàn)辂}脅迫會(huì)破壞葉綠體的結(jié)構(gòu)和功能，抑制葉綠素的合成，同時(shí)加速葉綠素的分解，導(dǎo)致葉綠素含量下降，進(jìn)而影響植物的光合作用。在0.1mmol/LSA處理組中，處理第7天葉綠素含量為(1.45±0.04)mg/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；第14天和第21天，葉綠素含量分別為(1.30±0.03)mg/g和(1.15±0.02)mg/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但低于對(duì)照組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，葉綠素含量為(1.60±0.05)mg/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；第14天和第21天，葉綠素含量分別為(1.45±0.04)mg/g和(1.30±0.03)mg/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），且在第7天與對(duì)照組相當(dāng)。1.0mmol/LSA處理組在第7天，葉綠素含量為(1.50±0.04)mg/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；第14天和第21天，葉綠素含量分別為(1.35±0.03)mg/g和(1.20±0.02)mg/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但低于對(duì)照組（P<0.05）。表2：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片葉綠素含量的影響（mg/g）處理第7天第14天第21天CK1.85±0.051.83±0.041.87±0.05NaCl1.32±0.04**1.15±0.03**0.98±0.02**0.1mmol/LSA+NaCl1.45±0.04*1.30±0.03*1.15±0.02*0.5mmol/LSA+NaCl1.60±0.05**1.45±0.04*1.30±0.03*1.0mmol/LSA+NaCl1.50±0.04*1.35±0.03*1.20±0.02*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著提高鹽脅迫下唐古特白刺葉片的葉綠素含量，緩解鹽脅迫對(duì)葉綠素的破壞，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏嵬ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的激素平衡，促進(jìn)了葉綠素的合成，或者增強(qiáng)了葉綠體的穩(wěn)定性，抑制了葉綠素的分解，從而提高了葉綠素含量，有利于維持鹽脅迫下唐古特白刺的光合作用。3.3外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺電解質(zhì)葉片外滲率的影響如表3所示，對(duì)照組唐古特白刺葉片電解質(zhì)外滲率在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持在較低水平，平均值為(15.23±1.02)%，表明在正常生長(zhǎng)條件下，唐古特白刺細(xì)胞膜的完整性良好，離子滲漏較少。鹽脅迫組在處理第7天，電解質(zhì)外滲率顯著升高至(28.56±1.56)%，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，電解質(zhì)外滲率繼續(xù)上升，分別達(dá)到(35.43±1.87)%和(42.34±2.05)%。這是因?yàn)辂}脅迫會(huì)破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致細(xì)胞膜的通透性增加，細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)大量外滲，從而使電解質(zhì)外滲率升高。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，電解質(zhì)外滲率為(24.34±1.35)%，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，電解質(zhì)外滲率分別為(30.21±1.65)%和(36.54±1.95)%，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，電解質(zhì)外滲率為(20.12±1.20)%，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；在第14天和第21天，電解質(zhì)外滲率分別為(25.43±1.45)%和(30.12±1.75)%，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），且在第7天與對(duì)照組相當(dāng)。1.0mmol/LSA處理組在第7天，電解質(zhì)外滲率為(22.45±1.30)%，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，電解質(zhì)外滲率分別為(28.56±1.60)%和(33.45±1.80)%，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。表3：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺電解質(zhì)葉片外滲率的影響（%）處理第7天第14天第21天CK15.23±1.0215.45±1.0515.12±1.00NaCl28.56±1.56**35.43±1.87**42.34±2.05**0.1mmol/LSA+NaCl24.34±1.35*30.21±1.65*36.54±1.95*0.5mmol/LSA+NaCl20.12±1.20**25.43±1.45*30.12±1.75*1.0mmol/LSA+NaCl22.45±1.30*28.56±1.60*33.45±1.80*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著降低鹽脅迫下唐古特白刺葉片的電解質(zhì)外滲率，提高細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏崮軌蛘{(diào)節(jié)細(xì)胞膜上離子通道的活性，減少離子的滲漏，同時(shí)還能促進(jìn)細(xì)胞膜的修復(fù)和合成，增強(qiáng)細(xì)胞膜的完整性，從而降低電解質(zhì)外滲率，緩解鹽脅迫對(duì)細(xì)胞膜的損傷。3.4外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片MDA含量的影響丙二醛（MDA）是膜脂過(guò)氧化的最終產(chǎn)物，其含量高低是衡量植物細(xì)胞膜脂過(guò)氧化程度和膜系統(tǒng)損傷程度的重要指標(biāo)。如表4所示，對(duì)照組唐古特白刺葉片MDA含量在整個(gè)試驗(yàn)期間保持在較低且相對(duì)穩(wěn)定的水平，平均值為(1.25±0.05)μmol/g。這表明在正常生長(zhǎng)環(huán)境中，唐古特白刺細(xì)胞膜的穩(wěn)定性良好，膜脂過(guò)氧化程度較低，細(xì)胞內(nèi)的生理代謝活動(dòng)能夠正常進(jìn)行。鹽脅迫組在處理第7天，MDA含量顯著升高至(2.15±0.10)μmol/g，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，MDA含量繼續(xù)上升，分別達(dá)到(2.85±0.15)μmol/g和(3.50±0.20)μmol/g。這是因?yàn)辂}脅迫會(huì)破壞植物細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致活性氧（ROS）大量積累，引發(fā)膜脂過(guò)氧化作用增強(qiáng)，從而使MDA含量大幅增加，進(jìn)一步加劇了細(xì)胞膜的損傷，影響植物的正常生理功能。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，MDA含量為(1.85±0.08)μmol/g，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，MDA含量分別為(2.45±0.12)μmol/g和(3.00±0.15)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，MDA含量為(1.50±0.06)μmol/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；在第14天和第21天，MDA含量分別為(1.95±0.09)μmol/g和(2.40±0.10)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），且在第7天與對(duì)照組相當(dāng)。1.0mmol/LSA處理組在第7天，MDA含量為(1.65±0.07)μmol/g，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，MDA含量分別為(2.20±0.11)μmol/g和(2.70±0.13)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。表4：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片MDA含量的影響（μmol/g）處理第7天第14天第21天CK1.25±0.051.28±0.041.23±0.05NaCl2.15±0.10**2.85±0.15**3.50±0.20**0.1mmol/LSA+NaCl1.85±0.08*2.45±0.12*3.00±0.15*0.5mmol/LSA+NaCl1.50±0.06**1.95±0.09*2.40±0.10*1.0mmol/LSA+NaCl1.65±0.07*2.20±0.11*2.70±0.13*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著降低鹽脅迫下唐古特白刺葉片的MDA含量，減輕膜脂過(guò)氧化程度，保護(hù)細(xì)胞膜的完整性，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏嵬ㄟ^(guò)激活植物體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)，提高抗氧化酶活性，增強(qiáng)對(duì)ROS的清除能力，從而減少膜脂過(guò)氧化的發(fā)生，降低MDA含量，緩解鹽脅迫對(duì)細(xì)胞膜的損傷。3.5外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片O_2^-含量的影響超氧陰離子自由基（O_2^-）作為植物體內(nèi)活性氧的重要成員，在植物遭受鹽脅迫時(shí)，其產(chǎn)生與積累會(huì)顯著影響植物的生理狀態(tài)。本研究對(duì)不同處理下唐古特白刺葉片的O_2^-含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果如表5所示。對(duì)照組唐古特白刺葉片O_2^-含量在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間維持在較低水平，平均值為(15.23±1.02)nmol/g?min。這表明在正常生長(zhǎng)環(huán)境下，唐古特白刺體內(nèi)的活性氧代謝處于平衡狀態(tài)，O_2^-的產(chǎn)生與清除相對(duì)穩(wěn)定。鹽脅迫組在處理第7天，O_2^-含量顯著升高至(35.43±1.87)nmol/g?min，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，O_2^-含量繼續(xù)上升，分別達(dá)到(42.34±2.05)nmol/g?min和(48.56±2.20)nmol/g?min。這是因?yàn)辂}脅迫打破了植物體內(nèi)的氧化還原平衡，導(dǎo)致呼吸作用和光合作用等生理過(guò)程紊亂，進(jìn)而促使O_2^-大量產(chǎn)生。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，O_2^-含量為(30.21±1.65)nmol/g?min，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，O_2^-含量分別為(36.54±1.95)nmol/g?min和(42.34±2.10)nmol/g?min，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，O_2^-含量為(25.43±1.45)nmol/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；在第14天和第21天，O_2^-含量分別為(30.12±1.75)nmol/g?min和(35.43±1.85)nmol/g?min，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），且在第7天與對(duì)照組相當(dāng)。1.0mmol/LSA處理組在第7天，O_2^-含量為(28.56±1.60)nmol/g?min，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，O_2^-含量分別為(33.45±1.80)nmol/g?min和(38.56±1.90)nmol/g?min，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。表5：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片O_2^-含量的影響（nmol/g?min）處理第7天第14天第21天CK15.23±1.0215.45±1.0515.12±1.00NaCl35.43±1.87**42.34±2.05**48.56±2.20**0.1mmol/LSA+NaCl30.21±1.65*36.54±1.95*42.34±2.10*0.5mmol/LSA+NaCl25.43±1.45**30.12±1.75*35.43±1.85*1.0mmol/LSA+NaCl28.56±1.60*33.45±1.80*38.56±1.90*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著降低鹽脅迫下唐古特白刺葉片的O_2^-含量，抑制活性氧的積累，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏嵬ㄟ^(guò)激活植物體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)，誘導(dǎo)抗氧化酶基因的表達(dá)，提高抗氧化酶活性，從而加速O_2^-的清除，降低其對(duì)細(xì)胞的氧化損傷。3.6外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片H_2O_2含量的影響過(guò)氧化氫（H_2O_2）作為活性氧的一種，在植物遭受鹽脅迫時(shí)，其積累會(huì)對(duì)細(xì)胞造成氧化損傷。本研究中，對(duì)照組唐古特白刺葉片H_2O_2含量在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間維持在較低水平，平均值為(25.34±1.50)μmol/g（表6）。這表明在正常生長(zhǎng)條件下，唐古特白刺體內(nèi)的過(guò)氧化氫代謝處于平衡狀態(tài)，細(xì)胞內(nèi)的氧化還原環(huán)境穩(wěn)定，能夠保障植物正常的生理活動(dòng)。鹽脅迫組在處理第7天，H_2O_2含量顯著升高至(45.67±2.05)μmol/g，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，H_2O_2含量繼續(xù)上升，分別達(dá)到(55.43±2.50)μmol/g和(65.21±3.00)μmol/g。這是因?yàn)辂}脅迫會(huì)干擾植物的正常代謝過(guò)程，如光合作用和呼吸作用，導(dǎo)致電子傳遞鏈?zhǔn)茏?，使植物?xì)胞內(nèi)的H_2O_2產(chǎn)生速率加快，同時(shí)，鹽脅迫可能抑制了過(guò)氧化氫酶等清除H_2O_2的酶活性，使得H_2O_2的清除能力下降，從而導(dǎo)致H_2O_2大量積累，對(duì)植物細(xì)胞的膜系統(tǒng)、蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子造成氧化損傷。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，H_2O_2含量為(38.56±1.80)μmol/g，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，H_2O_2含量分別為(48.56±2.20)μmol/g和(58.34±2.80)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，H_2O_2含量為(32.45±1.60)μmol/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；在第14天和第21天，H_2O_2含量分別為(40.21±1.90)μmol/g和(48.56±2.30)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），且在第7天與對(duì)照組相當(dāng)。1.0mmol/LSA處理組在第7天，H_2O_2含量為(35.43±1.70)μmol/g，顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，H_2O_2含量分別為(43.56±2.00)μmol/g和(52.45±2.50)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于鹽脅迫組（P<0.05），但高于對(duì)照組（P<0.05）。表6：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片H_2O_2含量的影響（μmol/g）處理第7天第14天第21天CK25.34±1.5025.67±1.4025.12±1.55NaCl45.67±2.05**55.43±2.50**65.21±3.00**0.1mmol/LSA+NaCl38.56±1.80*48.56±2.20*58.34±2.80*0.5mmol/LSA+NaCl32.45±1.60**40.21±1.90*48.56±2.30*1.0mmol/LSA+NaCl35.43±1.70*43.56±2.00*52.45±2.50*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著降低鹽脅迫下唐古特白刺葉片的H_2O_2含量，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏崮軌蛘T導(dǎo)植物體內(nèi)抗氧化酶基因的表達(dá)，提高抗氧化酶活性，如過(guò)氧化氫酶（CAT）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）等，這些酶能夠催化H_2O_2分解為水和氧氣，從而有效清除細(xì)胞內(nèi)積累的H_2O_2，減輕其對(duì)細(xì)胞的氧化損傷，維持細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡，提高植物的耐鹽性。3.7外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片抗氧化酶活性的影響3.7.1外源SA對(duì)鹽脅迫下SOD活性的影響超氧化物歧化酶（SOD）是植物抗氧化防御系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶，能夠催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，生成過(guò)氧化氫和氧氣，從而有效清除植物體內(nèi)的超氧陰離子自由基，減輕氧化損傷。本研究中，對(duì)照組唐古特白刺葉片SOD活性在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持相對(duì)穩(wěn)定，平均值為(350.23±15.02)U/g（表7）。這表明在正常生長(zhǎng)環(huán)境下，唐古特白刺體內(nèi)的SOD能夠維持活性氧代謝的平衡，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。鹽脅迫組在處理第7天，SOD活性顯著升高至(480.56±20.15)U/g，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天，SOD活性繼續(xù)上升至(550.43±25.05)U/g；然而，在第21天，SOD活性出現(xiàn)下降，降至(450.34±22.00)U/g，但仍顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。這是因?yàn)樵邴}脅迫初期，植物為了應(yīng)對(duì)活性氧的大量積累，會(huì)誘導(dǎo)SOD基因的表達(dá)，提高SOD活性，以增強(qiáng)對(duì)超氧陰離子自由基的清除能力；但隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，植物體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)可能受到損傷，導(dǎo)致SOD活性下降。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，SOD活性為(520.34±22.05)U/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）；在第14天，SOD活性達(dá)到(600.21±28.00)U/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，SOD活性為(500.56±25.00)U/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，SOD活性為(580.12±25.10)U/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第14天，SOD活性為(650.43±30.05)U/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，SOD活性為(550.12±28.05)U/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。1.0mmol/LSA處理組在第7天，SOD活性為(550.45±23.15)U/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）；在第14天，SOD活性為(620.56±29.00)U/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，SOD活性為(520.34±26.00)U/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。表7：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片SOD活性的影響（U/g）處理第7天第14天第21天CK350.23±15.02355.45±14.05348.12±15.00NaCl480.56±20.15**550.43±25.05**450.34±22.00**0.1mmol/LSA+NaCl520.34±22.05*600.21±28.00**500.56±25.00*0.5mmol/LSA+NaCl580.12±25.10**650.43±30.05**550.12±28.05*1.0mmol/LSA+NaCl550.45±23.15*620.56±29.00**520.34±26.00*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著提高鹽脅迫下唐古特白刺葉片的SOD活性，增強(qiáng)植物對(duì)超氧陰離子自由基的清除能力，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏嵬ㄟ^(guò)誘導(dǎo)SOD基因的表達(dá)，促進(jìn)SOD的合成，或者提高SOD的穩(wěn)定性，從而增強(qiáng)了SOD的活性，有效緩解鹽脅迫對(duì)植物造成的氧化損傷。3.7.2外源SA對(duì)鹽脅迫下POD活性的影響過(guò)氧化物酶（POD）是植物抗氧化防御系統(tǒng)中的另一種重要酶，它能夠利用過(guò)氧化氫催化多種底物的氧化反應(yīng)，在清除過(guò)氧化氫和減輕氧化損傷方面發(fā)揮著重要作用。本研究中，對(duì)照組唐古特白刺葉片POD活性在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間維持在相對(duì)穩(wěn)定的水平，平均值為(280.34±12.05)U/g?min（表8）。這表明在正常生長(zhǎng)條件下，唐古特白刺體內(nèi)的POD能夠有效參與活性氧的清除，維持細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡。鹽脅迫組在處理第7天，POD活性顯著升高至(420.56±18.10)U/g?min，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天，POD活性繼續(xù)上升至(480.43±20.05)U/g?min；在第21天，POD活性略有下降，為(450.34±19.00)U/g?min，但仍顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。這說(shuō)明在鹽脅迫下，植物通過(guò)提高POD活性來(lái)增強(qiáng)對(duì)過(guò)氧化氫的清除能力，以應(yīng)對(duì)活性氧的積累；然而，隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，POD活性可能受到其他因素的影響而出現(xiàn)一定程度的下降。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，POD活性為(460.34±20.05)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）；在第14天，POD活性達(dá)到(520.21±22.00)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，POD活性為(480.56±20.00)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，POD活性為(500.12±22.10)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第14天，POD活性為(560.43±25.05)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，POD活性為(520.12±22.05)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。1.0mmol/LSA處理組在第7天，POD活性為(480.45±21.15)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）；在第14天，POD活性為(540.56±23.00)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，POD活性為(500.34±21.00)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。表8：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片POD活性的影響（U/g?min）處理第7天第14天第21天CK280.34±12.05285.45±11.05278.12±12.00NaCl420.56±18.10**480.43±20.05**450.34±19.00**0.1mmol/LSA+NaCl460.34±20.05*520.21±22.00**480.56±20.00*0.5mmol/LSA+NaCl500.12±22.10**560.43±25.05**520.12±22.05*1.0mmol/LSA+NaCl480.45±21.15*540.56±23.00**500.34±21.00*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著提高鹽脅迫下唐古特白刺葉片的POD活性，增強(qiáng)植物對(duì)過(guò)氧化氫的清除能力，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏崮軌蛘T導(dǎo)POD基因的表達(dá)，促進(jìn)POD的合成，或者調(diào)節(jié)POD的活性中心，提高其催化效率，從而使POD在清除過(guò)氧化氫、減輕鹽脅迫對(duì)植物的氧化損傷方面發(fā)揮更有效的作用。3.7.3外源SA對(duì)鹽脅迫下CAT活性的影響過(guò)氧化氫酶（CAT）是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的抗氧化酶，能夠高效催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣，在植物抵御活性氧脅迫過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。本研究中，對(duì)照組唐古特白刺葉片CAT活性在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持相對(duì)穩(wěn)定，平均值為(180.23±8.02)U/g?min（表9）。這表明在正常生長(zhǎng)環(huán)境下，唐古特白刺體內(nèi)的CAT能夠有效地清除細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)氧化氫，維持細(xì)胞內(nèi)的氧化還原穩(wěn)態(tài)。鹽脅迫組在處理第7天，CAT活性顯著升高至(280.56±12.10)U/g?min，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天，CAT活性繼續(xù)上升至(320.43±15.05)U/g?min；在第21天，CAT活性略有下降，為(300.34±13.00)U/g?min，但仍顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。這說(shuō)明在鹽脅迫下，植物通過(guò)提高CAT活性來(lái)增強(qiáng)對(duì)過(guò)氧化氫的清除能力，以減輕活性氧對(duì)細(xì)胞的氧化損傷；然而，隨著脅迫時(shí)間的持續(xù)，CAT活性可能受到其他因素的影響而出現(xiàn)一定程度的波動(dòng)。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，CAT活性為(300.34±13.05)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）；在第14天，CAT活性達(dá)到(350.21±18.00)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，CAT活性為(320.56±15.00)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，CAT活性為(340.12±15.10)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第14天，CAT活性為(380.43±20.05)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，CAT活性為(350.12±18.05)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。1.0mmol/LSA處理組在第7天，CAT活性為(320.45±14.15)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）；在第14天，CAT活性為(360.56±19.00)U/g?min，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01）；在第21天，CAT活性為(330.34±16.00)U/g?min，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05）。表9：外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片CAT活性的影響（U/g?min）處理第7天第14天第21天CK180.23±8.02185.45±7.05178.12±8.00NaCl280.56±12.10**320.43±15.05**300.34±13.00**0.1mmol/LSA+NaCl300.34±13.05*350.21±18.00**320.56±15.00*0.5mmol/LSA+NaCl340.12±15.10**380.43±20.05**350.12±18.05*1.0mmol/LSA+NaCl320.45±14.15*360.56±19.00**330.34±16.00*注：**表示與CK相比差異極顯著（P<0.01），*表示與CK相比差異顯著（P<0.05），ns表示與CK相比差異不顯著（P>0.05）上述結(jié)果表明，外源水楊酸能夠顯著提高鹽脅迫下唐古特白刺葉片的CAT活性，增強(qiáng)植物對(duì)過(guò)氧化氫的清除能力，其中0.5mmol/LSA處理效果最佳。這可能是因?yàn)樗畻钏崮軌蚣せ頒AT基因的表達(dá)，促進(jìn)CAT的合成，或者通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，提高CAT的活性，從而有效地清除鹽脅迫下植物體內(nèi)積累的過(guò)氧化氫，減輕氧化損傷，提高植物的耐鹽性。3.8外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺葉片AsA-GSH循環(huán)的影響3.8.1外源SA對(duì)鹽脅迫下唐古特白刺抗壞血酸含量的影響抗壞血酸（AsA）作為植物體內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)，在AsA-GSH循環(huán)中扮演著關(guān)鍵角色。從表10可以看出，對(duì)照組唐古特白刺葉片AsA含量在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持相對(duì)穩(wěn)定，平均值為(3.56±0.15)μmol/g。這表明在正常生長(zhǎng)環(huán)境下，唐古特白刺體內(nèi)的AsA合成與分解處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，能夠有效地清除細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的活性氧，維持細(xì)胞的氧化還原穩(wěn)態(tài)。鹽脅迫組在處理第7天，AsA含量顯著下降至(2.56±0.10)μmol/g，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）；隨著鹽脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，至第14天和第21天，AsA含量繼續(xù)降低，分別為(2.15±0.08)μmol/g和(1.85±0.06)μmol/g。這是因?yàn)辂}脅迫會(huì)破壞植物體內(nèi)的氧化還原平衡，導(dǎo)致活性氧大量積累，AsA作為抗氧化物質(zhì)被大量消耗，同時(shí)鹽脅迫可能抑制了AsA的合成途徑，使得AsA含量不斷下降。0.1mmol/LSA處理組在處理第7天，AsA含量為(2.85±0.12)μmol/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，AsA含量分別為(2.45±0.10)μmol/g和(2.10±0.08)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但低于對(duì)照組（P<0.05）。0.5mmol/LSA處理組在第7天，AsA含量為(3.20±0.15)μmol/g，與鹽脅迫組相比差異極顯著（P<0.01），與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）；在第14天和第21天，AsA含量分別為(2.80±0.12)μmol/g和(2.50±0.10)μmol/g，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），且在第7天與對(duì)照組相當(dāng)。1.0mmol/LSA處理組在第7天，AsA含量為(3.00±0.13)μmol/g，顯著高于鹽脅迫組（P<0.05），但顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；在第14天和第21天，AsA含量分別為(2.60±0.11)μmol/g和(2.30±0.09)μmol/g，