《NY/T544-2025豬流行性腹瀉診斷技術(shù)》(2026年)實(shí)施指南目錄一

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為何《

NY/T544-2025》

是未來五年生豬疫病防控的核心標(biāo)準(zhǔn)？

專家視角剖析標(biāo)準(zhǔn)修訂背景與行業(yè)迫切需求二

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豬流行性腹瀉病毒特性與致病機(jī)制有何新認(rèn)知？

標(biāo)準(zhǔn)中病毒學(xué)基礎(chǔ)內(nèi)容的深度解讀與實(shí)踐關(guān)聯(lián)三

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如何精準(zhǔn)選擇診斷方法？

標(biāo)準(zhǔn)涵蓋的臨床診斷

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實(shí)驗(yàn)室檢測方法對比及適用場景分析四

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實(shí)驗(yàn)室檢測關(guān)鍵操作有哪些規(guī)范要點(diǎn)？

標(biāo)準(zhǔn)對樣本采集

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處理及保存流程的嚴(yán)格要求解讀五

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分子診斷技術(shù)在標(biāo)準(zhǔn)中如何應(yīng)用？

RT-

PCR

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實(shí)時(shí)熒光

RT-

PCR

等技術(shù)的操作標(biāo)準(zhǔn)與結(jié)果判定六

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血清學(xué)診斷方法的有效性如何保障？

標(biāo)準(zhǔn)中

ELISA

等方法的操作步驟

、質(zhì)量控制及結(jié)果解讀七

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診斷結(jié)果的判定與報(bào)告有哪些嚴(yán)格要求？

標(biāo)準(zhǔn)對結(jié)果準(zhǔn)確性

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報(bào)告規(guī)范性的詳細(xì)規(guī)定八

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標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施過程中可能遇到哪些難點(diǎn)？

常見問題解析及專家給出的應(yīng)對策略九

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標(biāo)準(zhǔn)與國際先進(jìn)診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)有何差異？

對比分析及對我國生豬行業(yè)國際化發(fā)展的影響十

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未來豬流行性腹瀉診斷技術(shù)將如何發(fā)展？

基于標(biāo)準(zhǔn)的趨勢預(yù)測及行業(yè)應(yīng)對建議、為何《NY/T544-2025》是未來五年生豬疫病防控的核心標(biāo)準(zhǔn)？專家視角剖析標(biāo)準(zhǔn)修訂背景與行業(yè)迫切需求當(dāng)前我國生豬養(yǎng)殖業(yè)面臨怎樣的豬流行性腹瀉疫情形勢？01近年來，豬流行性腹瀉疫情時(shí)有發(fā)生，對生豬養(yǎng)殖業(yè)造成較大沖擊。部分地區(qū)出現(xiàn)病毒變異情況，傳統(tǒng)防控手段效果減弱，疫情傳播速度加快，給養(yǎng)殖場帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，亟需新的診斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)對。01（二）舊版標(biāo)準(zhǔn)存在哪些不足，難以滿足當(dāng)前行業(yè)需求？舊版標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布時(shí)間較久，部分診斷方法滯后，無法精準(zhǔn)檢測變異病毒，且操作規(guī)范不夠細(xì)致，導(dǎo)致不同實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果一致性差，不能為疫情防控提供及時(shí)、準(zhǔn)確的技術(shù)支撐，修訂標(biāo)準(zhǔn)勢在必行。0102（三）未來五年生豬行業(yè)發(fā)展對疫病診斷標(biāo)準(zhǔn)有哪些新要求？隨著生豬養(yǎng)殖規(guī)?；⒓s化發(fā)展，以及消費(fèi)者對豬肉安全要求提高，行業(yè)需更快速、精準(zhǔn)、便捷的診斷技術(shù)，標(biāo)準(zhǔn)需與產(chǎn)業(yè)發(fā)展適配，助力提升疫病防控效率，保障產(chǎn)業(yè)鏈安全。專家如何看待該標(biāo)準(zhǔn)在生豬疫病防控體系中的核心地位？專家認(rèn)為，該標(biāo)準(zhǔn)整合了當(dāng)前先進(jìn)診斷技術(shù)，明確操作規(guī)范與結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，能統(tǒng)一檢測方法，提高診斷準(zhǔn)確性，為疫情早發(fā)現(xiàn)、早處置提供關(guān)鍵技術(shù)支持，是未來五年疫病防控的重要技術(shù)依據(jù)。0102、豬流行性腹瀉病毒特性與致病機(jī)制有何新認(rèn)知？標(biāo)準(zhǔn)中病毒學(xué)基礎(chǔ)內(nèi)容的深度解讀與實(shí)踐關(guān)聯(lián)豬流行性腹瀉病毒的分子結(jié)構(gòu)有哪些關(guān)鍵特征？標(biāo)準(zhǔn)中如何描述？豬流行性腹瀉病毒屬于冠狀病毒科，標(biāo)準(zhǔn)指出其基因組為單鏈正鏈RNA，包含多個(gè)開放閱讀框，編碼的刺突蛋白是病毒入侵宿主細(xì)胞的關(guān)鍵，且明確了刺突蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，為診斷技術(shù)研發(fā)提供分子基礎(chǔ)。12（二）病毒的流行毒株有哪些變異趨勢？標(biāo)準(zhǔn)對變異毒株的診斷有何考慮？近年來病毒毒株出現(xiàn)一定變異，標(biāo)準(zhǔn)關(guān)注到這一趨勢，在診斷方法設(shè)計(jì)上，兼顧傳統(tǒng)毒株與變異毒株，選取保守區(qū)域設(shè)計(jì)檢測靶點(diǎn)，確保能準(zhǔn)確檢測不同變異類型，避免漏檢。（三）病毒的致病機(jī)制有哪些新發(fā)現(xiàn)？與診斷技術(shù)選擇有何關(guān)聯(lián)？新發(fā)現(xiàn)顯示，病毒不僅侵襲腸道上皮細(xì)胞，還可能對其他組織產(chǎn)生影響，且致病過程中存在免疫逃逸現(xiàn)象。這一認(rèn)知促使標(biāo)準(zhǔn)在診斷時(shí)，注重檢測靈敏度，選擇能早期發(fā)現(xiàn)病毒的方法，為防控爭取時(shí)間。12標(biāo)準(zhǔn)中病毒學(xué)基礎(chǔ)內(nèi)容如何指導(dǎo)實(shí)際診斷操作？標(biāo)準(zhǔn)中對病毒特性的描述，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室選擇合適的樣本類型，如針對腸道病變特點(diǎn)，優(yōu)先采集腸道組織樣本；依據(jù)病毒對環(huán)境的抵抗力，確定樣本保存條件，確保診斷順利開展。、如何精準(zhǔn)選擇診斷方法？標(biāo)準(zhǔn)涵蓋的臨床診斷、實(shí)驗(yàn)室檢測方法對比及適用場景分析01臨床診斷方法有哪些核心要點(diǎn)？標(biāo)準(zhǔn)如何規(guī)范其操作？02臨床診斷主要依據(jù)豬的癥狀，如腹瀉、嘔吐、精神萎靡等，標(biāo)準(zhǔn)明確了不同日齡豬的典型癥狀，要求診斷人員結(jié)合飼養(yǎng)管理情況綜合判斷，避免僅憑單一癥狀誤判。（二）實(shí)驗(yàn)室檢測方法包含哪些類型？各方法的原理與特點(diǎn)是什么？實(shí)驗(yàn)室檢測有分子診斷、血清學(xué)診斷等。分子診斷基于病毒核酸檢測，靈敏度高；血清學(xué)診斷檢測抗體，可評估免疫效果。標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)闡述各方法原理，幫助使用者了解其優(yōu)勢與局限。（三）不同診斷方法的準(zhǔn)確性、時(shí)效性、成本有何差異？標(biāo)準(zhǔn)如何建議權(quán)衡選擇？01分子診斷準(zhǔn)確性高、時(shí)效性強(qiáng)，但成本較高；血清學(xué)診斷成本低，但檢測周期較長。標(biāo)準(zhǔn)建議根據(jù)疫情緊急程度、檢測目的選擇，如疫情暴發(fā)時(shí)優(yōu)先用分子診斷，免疫評估可用血清學(xué)診斷。01在不同場景（如養(yǎng)殖場日常監(jiān)測、疫情暴發(fā)應(yīng)急診斷）下，如何依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)選擇最優(yōu)診斷方法？日常監(jiān)測可結(jié)合血清學(xué)診斷進(jìn)行定期篩查，及時(shí)掌握群體免疫狀況；疫情暴發(fā)時(shí)，采用分子診斷快速確定病原，為后續(xù)防控措施制定提供依據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)對不同場景的方法選擇給出明確指引。、實(shí)驗(yàn)室檢測關(guān)鍵操作有哪些規(guī)范要點(diǎn)？標(biāo)準(zhǔn)對樣本采集、處理及保存流程的嚴(yán)格要求解讀樣本采集的對象、部位、時(shí)間有哪些明確規(guī)定？標(biāo)準(zhǔn)為何如此嚴(yán)格要求？樣本采集對象包括發(fā)病豬、同群可疑豬，部位根據(jù)診斷方法確定，如分子診斷采集腸道、糞便，血清學(xué)診斷采集血液。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定采集時(shí)間為發(fā)病初期，此時(shí)病毒含量高，能提高檢測準(zhǔn)確性，避免樣本質(zhì)量不佳影響結(jié)果。12（二）樣本處理過程中需要注意哪些無菌操作要求？標(biāo)準(zhǔn)如何防范交叉污染？樣本處理需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用無菌器械，操作前后對臺面、器械消毒。標(biāo)準(zhǔn)要求不同樣本分開處理，使用一次性耗材，定期對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行微生物監(jiān)測，有效防范交叉污染。（三）不同類型樣本（如糞便、血液、組織）的保存條件與保存期限是怎樣的？標(biāo)準(zhǔn)有何具體要求？糞便樣本需冷藏保存，保存期限不超過24小時(shí)；血液樣本分離血清后冷藏，可保存7天；組織樣本需冷凍保存，長期保存需置于-70℃以下。標(biāo)準(zhǔn)明確各樣本保存條件與期限，確保樣本在檢測前保持良好狀態(tài)。樣本運(yùn)輸過程中如何保障質(zhì)量？標(biāo)準(zhǔn)對運(yùn)輸包裝、溫度控制有哪些規(guī)定？樣本運(yùn)輸需使用保溫包裝，加入冰袋維持低溫，包裝需密封、防泄漏。標(biāo)準(zhǔn)要求運(yùn)輸過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測溫度，確保溫度符合保存要求，避免運(yùn)輸過程中樣本變質(zhì)影響檢測結(jié)果。、分子診斷技術(shù)在標(biāo)準(zhǔn)中如何應(yīng)用？RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光RT-PCR等技術(shù)的操作標(biāo)準(zhǔn)與結(jié)果判定RT-PCR操作包括RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增。標(biāo)準(zhǔn)要求RNA提取使用合格試劑盒，逆轉(zhuǎn)錄溫度控制在42-50℃,PCR擴(kuò)增的退火溫度根據(jù)引物確定，確保各步驟參數(shù)精準(zhǔn)，提高擴(kuò)增效率。RT-PCR技術(shù)的操作流程包含哪些關(guān)鍵步驟？標(biāo)準(zhǔn)對各步驟參數(shù)有何要求？010201（二）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR技術(shù)相比傳統(tǒng)RT-PCR有哪些優(yōu)勢？標(biāo)準(zhǔn)如何規(guī)范其操作與結(jié)果分析？實(shí)時(shí)熒光RT-PCR可實(shí)時(shí)監(jiān)測擴(kuò)增過程，無需電泳檢測，更快速、靈敏。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范了熒光探針選擇、反應(yīng)體系配制，要求根據(jù)Ct值判定結(jié)果，Ct值≤37為陽性，Ct值＞40為陰性，確保結(jié)果判定統(tǒng)一。（三）分子診斷過程中如何進(jìn)行質(zhì)量控制？標(biāo)準(zhǔn)對陽性對照、陰性對照、空白對照的設(shè)置有何要求？標(biāo)準(zhǔn)要求每次檢測設(shè)置陽性對照、陰性對照、空白對照。陽性對照確保實(shí)驗(yàn)有效，陰性對照監(jiān)測污染，空白對照排除試劑污染。若對照出現(xiàn)異常，需重新實(shí)驗(yàn)，保障檢測結(jié)果可靠。分子診斷結(jié)果出現(xiàn)疑似或不確定情況時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)建議采取哪些進(jìn)一步驗(yàn)證措施？結(jié)果疑似或不確定時(shí)，可重新提取RNA進(jìn)行檢測，或更換不同引物、試劑盒驗(yàn)證，也可結(jié)合其他診斷方法如血清學(xué)診斷綜合判斷，標(biāo)準(zhǔn)為結(jié)果驗(yàn)證提供了清晰的操作路徑。、血清學(xué)診斷方法的有效性如何保障？標(biāo)準(zhǔn)中ELISA等方法的操作步驟、質(zhì)量控制及結(jié)果解讀ELISA方法的操作步驟有哪些核心環(huán)節(jié)？標(biāo)準(zhǔn)對試劑選擇、反應(yīng)條件有何規(guī)定？01ELISA操作包括包被、封閉、加樣、孵育、顯色、讀數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)要求使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的試劑盒，孵育溫度控制在37℃,孵育時(shí)間根據(jù)試劑說明確定，確保各環(huán)節(jié)操作規(guī)范，保障檢測有效性。02（二）血清學(xué)診斷過程中如何進(jìn)行質(zhì)量控制？標(biāo)準(zhǔn)對標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品的使用有何要求？標(biāo)準(zhǔn)要求使用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)檢測系統(tǒng)，每次檢測設(shè)置質(zhì)控品，質(zhì)控品結(jié)果需在規(guī)定范圍內(nèi)。若質(zhì)控品結(jié)果異常，需查找原因并糾正，確保血清學(xué)診斷結(jié)果準(zhǔn)確可靠。（三）如何解讀ELISA檢測中的OD值、陽性判定值（CO）等指標(biāo)？標(biāo)準(zhǔn)有何明確指引？OD值反映樣本中抗體含量，CO值為陽性判定閾值。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定OD值≥CO值為陽性，OD值＜CO值為陰性，同時(shí)對灰區(qū)結(jié)果的處理給出建議，避免誤判。血清學(xué)診斷結(jié)果與分子診斷結(jié)果出現(xiàn)不一致時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)建議如何綜合判斷？當(dāng)結(jié)果不一致時(shí)，需結(jié)合臨床癥狀、樣本采集情況等綜合分析。若臨床癥狀典型，可重新采集樣本進(jìn)行檢測；也可采用其他診斷方法進(jìn)一步驗(yàn)證，標(biāo)準(zhǔn)為綜合判斷提供了科學(xué)依據(jù)。、診斷結(jié)果的判定與報(bào)告有哪些嚴(yán)格要求？標(biāo)準(zhǔn)對結(jié)果準(zhǔn)確性、報(bào)告規(guī)范性的詳細(xì)規(guī)定診斷結(jié)果判定需遵循哪些基本原則？標(biāo)準(zhǔn)如何避免主觀因素影響？診斷結(jié)果判定需遵循客觀、公正、科學(xué)的原則，標(biāo)準(zhǔn)明確了不同診斷方法的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，如分子診斷的Ct值范圍、血清學(xué)診斷的OD值與CO值關(guān)系，減少主觀因素干擾，確保判定結(jié)果一致。（二）如何確保診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性？標(biāo)準(zhǔn)對重復(fù)檢測、結(jié)果復(fù)核有何要求？標(biāo)準(zhǔn)要求對疑似陽性或陰性結(jié)果進(jìn)行重復(fù)檢測，若兩次結(jié)果一致，方可出具報(bào)告；若結(jié)果不一致，需進(jìn)行復(fù)核，復(fù)核可更換檢測方法或由第三方實(shí)驗(yàn)室檢測，保障結(jié)果準(zhǔn)確。（三）診斷報(bào)告應(yīng)包含哪些核心內(nèi)容？標(biāo)準(zhǔn)對報(bào)告格式、信息完整性有何規(guī)定？診斷報(bào)告需包含樣本信息、檢測方法、檢測結(jié)果、結(jié)果判定依據(jù)、檢測日期、檢測人員等內(nèi)容。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了報(bào)告的統(tǒng)一格式，要求信息完整、清晰，便于使用者理解和后續(xù)追溯。診斷報(bào)告的審核與簽發(fā)有哪些流程？標(biāo)準(zhǔn)對審核人員、簽發(fā)人員的資質(zhì)有何要求？診斷報(bào)告需經(jīng)審核人員審核，審核人員需具備相關(guān)專業(yè)資質(zhì)，審核內(nèi)容包括檢測流程、結(jié)果判定等；審核通過后，由具備相應(yīng)資質(zhì)的簽發(fā)人員簽發(fā)，標(biāo)準(zhǔn)確保報(bào)告的權(quán)威性和嚴(yán)肅性。、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施過程中可能遇到哪些難點(diǎn)？常見問題解析及專家給出的應(yīng)對策略基層實(shí)驗(yàn)室在設(shè)備、人員資質(zhì)方面可能存在哪些不足？如何依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)逐步完善？01基層實(shí)驗(yàn)室可能存在設(shè)備老化、檢測設(shè)備不全，人員專業(yè)水平不高的問題。標(biāo)準(zhǔn)建議基層實(shí)驗(yàn)室逐步更新設(shè)備，選派人員參加專業(yè)培訓(xùn)，提升操作技能，同時(shí)可與上級實(shí)驗(yàn)室合作，逐步達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。02（二）在樣本采集環(huán)節(jié)，養(yǎng)殖場工作人員可能遇到哪些操作難題？標(biāo)準(zhǔn)如何提供解決方案？養(yǎng)殖場工作人員可能對樣本采集部位、方法掌握不準(zhǔn)確，導(dǎo)致樣本質(zhì)量差。標(biāo)準(zhǔn)提供了詳細(xì)的樣本采集操作指南，可通過現(xiàn)場培訓(xùn)、發(fā)放操作手冊等方式，幫助工作人員規(guī)范操作，解決采集難題。01（三）診斷結(jié)果出現(xiàn)假陽性、假陰性時(shí)，可能的原因有哪些？標(biāo)準(zhǔn)及專家如何建議排查與解決？02假陽性可能因交叉污染導(dǎo)致，假陰性可能因樣本采集不當(dāng)、試劑失效等引起。標(biāo)準(zhǔn)建議排查樣本處理過程、試劑質(zhì)量、操作步驟等，專家建議定期對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量控制考核，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決問題。不同地區(qū)、不同規(guī)模養(yǎng)殖場在實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)時(shí)可能面臨哪些差異化問題？如何針對性應(yīng)對？小規(guī)模養(yǎng)殖場可能面臨成本壓力大、技術(shù)人員缺乏的問題，可采用與第三方檢測機(jī)構(gòu)合作的方式；大規(guī)模養(yǎng)殖場可建立自有實(shí)驗(yàn)室，配備專業(yè)人員。標(biāo)準(zhǔn)鼓勵(lì)根據(jù)實(shí)際情況靈活實(shí)施，確保標(biāo)準(zhǔn)落地。12、標(biāo)準(zhǔn)與國際先進(jìn)診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)有何差異？對比分析及對我國生豬行業(yè)國際化發(fā)展的影響與OIE（世界動物衛(wèi)生組織）相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)相比，我國標(biāo)準(zhǔn)在技術(shù)指標(biāo)、操作規(guī)范上有哪些異同？01在技術(shù)指標(biāo)上，我國標(biāo)準(zhǔn)與OIE標(biāo)準(zhǔn)的靈敏度、特異性要求基本一致；操作規(guī)范上，OIE標(biāo)準(zhǔn)更注重國際通用性，我國標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合國內(nèi)養(yǎng)殖實(shí)際，在樣本采集、處理等環(huán)節(jié)更貼合國內(nèi)情況，更具實(shí)操性。02（二）與歐美等發(fā)達(dá)國家的診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)相比，我國標(biāo)準(zhǔn)在哪些方面存在優(yōu)勢，哪些方面需要改進(jìn)？我國標(biāo)準(zhǔn)在適應(yīng)國內(nèi)病毒流行毒株特點(diǎn)方面有優(yōu)勢，能更精準(zhǔn)檢測國內(nèi)常見毒株；但在診斷技術(shù)創(chuàng)新、自動化檢測設(shè)備應(yīng)用等方面，與歐美發(fā)達(dá)國家存在差距，需進(jìn)一步改進(jìn)以提升技術(shù)水平。（三）這些差異對我國生豬及豬肉產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易有何影響？標(biāo)準(zhǔn)如何助力突破貿(mào)易技術(shù)壁壘？部分發(fā)達(dá)國家以我國標(biāo)準(zhǔn)與國際標(biāo)準(zhǔn)存在差異為由設(shè)置貿(mào)易壁壘。我國標(biāo)準(zhǔn)在關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)上與國際接軌，同時(shí)明確檢測方法和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，可向貿(mào)易伙伴提供透明、可追溯的檢測數(shù)據(jù)，助力突破技術(shù)壁壘。未來我國豬流行性腹瀉診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)如何進(jìn)一步與國際接軌？對行業(yè)國際化發(fā)展有何推動作用？未來可加強(qiáng)與國際組織、發(fā)達(dá)國家的技術(shù)交流，借鑒先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)，在技術(shù)創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)制定等方面開展合作。接軌后的標(biāo)準(zhǔn)能提升我國生豬疫病診斷水平，增強(qiáng)我國豬肉產(chǎn)品國際競爭力，推動行業(yè)國際化發(fā)展。、未來豬流行性腹瀉診斷技術(shù)將如何發(fā)展？基于標(biāo)準(zhǔn)的趨勢預(yù)測及行業(yè)應(yīng)對建議從標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容來看，未來豬流行性腹瀉診斷技術(shù)將朝著哪些方向發(fā)展（如快速化、智能化、便攜化）？從標(biāo)