腸道監(jiān)測(cè)試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分）1.下列哪項(xiàng)不是腸道菌群失調(diào)的常見臨床表現(xiàn)A.腹瀉次數(shù)增加B.腹脹伴排氣增多C.夜尿量顯著減少D.糞便中可見未消化食物殘?jiān)鸢福篊2.16SrRNA基因測(cè)序在腸道微生態(tài)研究中的主要優(yōu)勢(shì)是A.可直接測(cè)定細(xì)菌毒力基因B.可區(qū)分活菌與死菌C.可對(duì)未知菌進(jìn)行種水平鑒定D.可完全替代宏基因組測(cè)序答案：C3.腸道屏障功能評(píng)估中，血清ZO1水平升高提示A.緊密連接蛋白合成增加B.腸上皮通透性下降C.腸上皮損傷后釋放入血D.腸道菌群多樣性升高答案：C4.關(guān)于糞便鈣衛(wèi)蛋白（FC）的敘述，錯(cuò)誤的是A.由中性粒細(xì)胞釋放B.在室溫下可穩(wěn)定7天C.可用于鑒別IBD與IBSD.水平與腸道腫瘤負(fù)荷呈負(fù)相關(guān)答案：D5.采用乳果糖甘露醇比值（L/M）試驗(yàn)評(píng)價(jià)腸通透性時(shí)，下列哪項(xiàng)操作會(huì)人為升高L/M值A(chǔ).口服乳果糖前禁食8hB.留取0–5h全部尿液C.同時(shí)口服抗生素D.留尿期間劇烈運(yùn)動(dòng)答案：D6.腸道氣體監(jiān)測(cè)膠囊（Gascap）最常用于實(shí)時(shí)測(cè)定A.H?S濃度B.CH?濃度C.NO濃度D.CO?分壓答案：B7.在qPCR檢測(cè)雙歧桿菌時(shí)，引物Bif164/Bif662的擴(kuò)增片段長度約為A.126bpB.239bpC.350bpD.487bp答案：B8.下列哪項(xiàng)不是腸道菌群代謝產(chǎn)物A.吲哚丙酸B.氧化三甲胺（TMAO）C.短鏈脂肪酸（SCFA）D.膽紅素二葡萄糖醛酸答案：D9.腸道術(shù)后患者早期給予益生元的主要目的是A.降低麻醉藥用量B.促進(jìn)腸蠕動(dòng)恢復(fù)C.增加吻合口張力D.減少腹腔引流液淀粉酶答案：B10.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)糞便菌群活性時(shí)，常用的膜通透性染料組合是A.SYTO9/PIB.DAPI/7AADC.FITC/PED.CFSE/AnnexinV答案：A11.腸道真菌多樣性分析中，最常用的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)是A.ITS1B.ITS2C.ITS3D.ITS4答案：A12.關(guān)于腸道病毒組（virome）描述正確的是A.主要由腺病毒構(gòu)成B.與宿主代謝無顯著關(guān)聯(lián)C.可通過CRISPRCas系統(tǒng)調(diào)控細(xì)菌群落D.在健康成人糞便中豐度低于103copies/g答案：C13.糞便隱血試驗(yàn)（FOBT）假陰性率最高的原因是A.標(biāo)本放置4℃超過48hB.受試者進(jìn)食鴨血粉絲湯C.出血量<5mL/dD.同時(shí)口服維生素C500mg/d答案：D14.腸道菌群移植（FMT）治療復(fù)發(fā)性艱難梭菌感染時(shí)，推薦經(jīng)下列哪條途徑可降低吸入性肺炎風(fēng)險(xiǎn)A.鼻空腸管B.口服膠囊C.結(jié)腸鏡D.胃造瘺管答案：C15.在宏基因組測(cè)序中，去除宿主序列最常用的數(shù)據(jù)庫是A.GreengenesB.SilvaC.hg38D.RefSeq答案：C16.腸道內(nèi)分泌L細(xì)胞主要分泌的激素是A.GIPB.GLP1C.CCKD.Secretin答案：B17.下列哪項(xiàng)不是短鏈脂肪酸（SCFA）的生理功能A.激活GPR43B.抑制組蛋白去乙?；窩.促進(jìn)Na?K?ATP酶活性D.增加結(jié)腸上皮氧耗答案：D18.腸道菌群通過哪條通路影響宿主5HT合成A.色氨酸羥化酶1（TPH1）B.色氨酸羥化酶2（TPH2）C.吲哚胺2,3雙加氧酶（IDO）D.單胺氧化酶A（MAOA）答案：A19.采用ELISA測(cè)定血清內(nèi)毒素（LPS）時(shí)，干擾最大的物質(zhì)是A.高密度脂蛋白B.血紅蛋白C.膽紅素D.甘油三酯答案：B20.腸道超聲評(píng)估腸壁血流時(shí)，最常用的參數(shù)是A.RI（阻力指數(shù)）B.PI（搏動(dòng)指數(shù)）C.Vs（收縮期峰值流速）D.Vd（舒張期末流速）答案：A21.在腸道菌群生物膜形成實(shí)驗(yàn)中，結(jié)晶紫染色后溶解染料常用的溶劑是A.95%乙醇B.30%冰醋酸C.0.1%SDSD.DMSO答案：B22.關(guān)于腸道芯片（gutonachip）模型，錯(cuò)誤的是A.可模擬蠕動(dòng)樣機(jī)械拉伸B.需厭氧與需氧雙層培養(yǎng)C.可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)TEERD.無法共培養(yǎng)真菌答案：D23.糞便標(biāo)本采集后若24h內(nèi)不能檢測(cè)，應(yīng)選用的保存液是A.4%多聚甲醛B.RNAlaterC.PBS+0.05%Tween20D.CaryBlair答案：B24.腸道菌群α多樣性指標(biāo)中，對(duì)稀有物種最敏感的是A.Chao1B.ShannonC.SimpsonD.PDwholetree答案：A25.下列哪項(xiàng)不是腸道黏液層主要成分A.MUC2B.IgAC.防御素D.黏蛋白寡糖鏈答案：C26.腸道術(shù)后出現(xiàn)吻合口漏，最早升高的血清標(biāo)志物是A.CRPB.PCTC.IL6D.TNFα答案：C27.采用Bristol評(píng)分評(píng)估糞便性狀時(shí)，3型對(duì)應(yīng)的是A.堅(jiān)果狀硬塊B.香腸樣表面有裂縫C.光滑柔軟香腸D.邊緣整齊的軟團(tuán)答案：B28.腸道菌群代謝色氨酸生成吲哚，需要的關(guān)鍵酶是A.色氨酸酶（TnaA）B.色氨酸脫羧酶C.吲哚丙酮酸脫羧酶D.芳香族氨基酸轉(zhuǎn)氨酶答案：A29.在腸道免疫組化染色中，標(biāo)記調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）最常用的表面抗原是A.CD3B.CD4C.Foxp3D.RORγt答案：C30.腸道菌群影響宿主藥物代謝的典型例子是A.地高辛被Eggerthella滅活B.華法林被雙歧桿菌激活C.甲硝唑被乳酸菌降解D.阿司匹林被酵母菌合成答案：A二、配伍題（每題2分，共20分）A.吲哚丙酸B.硫化氫C.脫氧膽酸D.丙酸咪唑E.戊酸31.由腸道菌群將色氨酸代謝生成，可激活芳烴受體（AhR）答案：A32.由硫酸鹽還原菌產(chǎn)生，抑制丁酸氧化，損傷結(jié)腸上皮答案：B33.由梭菌屬將初級(jí)膽汁酸7α脫羥基化生成，高濃度促結(jié)直腸癌答案：C34.由菌群代謝丙酸與組氨酸生成，可損害胰島β細(xì)胞功能答案：D35.屬于奇數(shù)鏈SCFA，與胰島素敏感性正相關(guān)答案：EA.16SV4區(qū)B.ITS2C.18SV9區(qū)D.gyrBE.rpoB36.真菌多樣性測(cè)序優(yōu)先選擇答案：B37.細(xì)菌多樣性高通量測(cè)序最常用答案：A38.用于細(xì)菌功能基因溯源，分辨率高于16S答案：D39.真核微生物18S測(cè)序常用答案：C40.用于分枝桿菌屬快速鑒定答案：E三、簡答題（每題8分，共40分）41.簡述糞便標(biāo)本采集后常溫運(yùn)輸對(duì)16SrRNA測(cè)序結(jié)果可能造成的三大偏倚，并給出針對(duì)性預(yù)防措施。答案：（1）偏倚一：核酸降解導(dǎo)致低GC革蘭陽性菌豐度被低估。預(yù)防：采集后4h內(nèi)置入?80℃或加入RNAlater保存液。（2）偏倚二：兼性厭氧菌（如大腸桿菌）在運(yùn)輸中過度繁殖，造成人為升高。預(yù)防：使用厭氧運(yùn)輸袋并添加抑菌劑（如50μg/mL環(huán)丙沙星）。（3）偏倚三：凍融循環(huán)導(dǎo)致菌體破裂，DNA釋放后被胞外DNase降解，引起多樣性虛低。預(yù)防：分裝保存，避免二次凍融；運(yùn)輸采用干冰恒溫。42.說明短鏈脂肪酸（SCFA）通過何種分子機(jī)制維持結(jié)腸上皮低氧環(huán)境，并闡述其對(duì)防止病原體擴(kuò)張的生態(tài)學(xué)意義。答案：SCFA（丁酸為主）被結(jié)腸上皮細(xì)胞攝取后，經(jīng)β氧化快速消耗氧，導(dǎo)致上皮表面氧分壓下降（低氧）。低氧抑制兼性厭氧沙門菌、大腸桿菌利用氧進(jìn)行呼吸鏈產(chǎn)能，從而限制其生長；同時(shí)促進(jìn)專性厭氧共生菌（如梭菌目XIVa）利用發(fā)酵途徑占據(jù)生態(tài)位，形成“氧屏障”生態(tài)位隔離，減少病原菌定植機(jī)會(huì)。43.試比較乳果糖甘露醇試驗(yàn)與血清zonulin試驗(yàn)在評(píng)估腸屏障功能中的靈敏度、特異度及臨床適用場(chǎng)景差異。答案：乳果糖甘露醇試驗(yàn)靈敏度85%，特異度80%，直接反映腸上皮物理屏障，適用于克羅恩病活動(dòng)度評(píng)估；但需留尿、受腎功影響。血清zonulin靈敏度70%，特異度65%，反映屏障調(diào)節(jié)蛋白水平，操作簡便，適用于大樣本篩查，但受晝夜節(jié)律、運(yùn)動(dòng)、高脂餐影響大，假陽性率高。44.列舉三種基于宏基因組測(cè)序的耐藥基因（ARG）注釋數(shù)據(jù)庫，并說明其更新頻率及主要優(yōu)勢(shì)。答案：（1）CARD（ComprehensiveAntibioticResistanceDatabase）：年更新，含突變與獲得性耐藥，提供SNP模型。（2）ResFinder：季度更新，側(cè)重可移動(dòng)耐藥元件，與MLST整合方便。（3）ARGANNOT：半年更新，收錄動(dòng)物源耐藥基因，適用于人畜共患病研究。45.說明腸道菌群移植（FMT）治療潰瘍性結(jié)腸炎（UC）時(shí)，供體篩查中必須排除的五類傳染病病原體，并給出對(duì)應(yīng)檢測(cè)方法。答案：（1）艱難梭菌：毒素基因tcdBqPCR。（2）多重耐藥菌：肛拭子培養(yǎng)+藥敏。（3）諾如病毒：糞便RTqPCR。（4）幽門螺桿菌：糞便Hp抗原ELISA。（5）輪狀病毒：乳膠凝集+RTqPCR。四、案例分析題（每題15分，共30分）46.患者男，34歲，腹瀉黏液血便3月，每日8次，BMI19kg/m2。結(jié)腸鏡示直腸至脾曲連續(xù)糜爛，病理隱窩膿腫。血Hb92g/L，CRP42mg/L，F(xiàn)C1200μg/g。16SrRNA測(cè)序示擬桿菌門減少，變形菌門升至45%，梭菌目XIVa缺失。（1）給出最可能的診斷及活動(dòng)度分級(jí)。（2）制定一項(xiàng)包含菌群監(jiān)測(cè)的治療方案，并說明監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)與指標(biāo)。答案：（1）潰瘍性結(jié)腸炎（慢性活動(dòng)型，重度，Montreal分型E3）。（2）方案：①誘導(dǎo)緩解：靜脈甲強(qiáng)龍40mg/d+IFX5mg/kg026周；②同步FMT（經(jīng)結(jié)腸鏡，供體為經(jīng)超嚴(yán)格篩查的健康直系親屬），首次后第4周復(fù)查16S，目標(biāo)恢復(fù)梭菌目XIVa>5%；③維持：IFXq8周+口服美沙拉嗪4g/d；第12、24、48周復(fù)查FC、16S、Shannon指數(shù)，若FC<100μg/g且Shannon>3.5考慮延長IFX間隔。47.女性，28歲，IBSD型，腹痛腹脹，排便后緩解，Bristol6型，每日4次。小腸造影陰性，乳糜瀉抗體陰性，食物不耐受檢測(cè)陰性。breathtest示空腹H?12ppm，90min上升至105ppm。宏基因組示產(chǎn)氫普雷沃菌升高，產(chǎn)甲烷古菌缺失。（1）判斷呼氣試驗(yàn)結(jié)果陽性的截?cái)嘀狄罁?jù)。（2）設(shè)計(jì)一項(xiàng)隨機(jī)交叉飲食干預(yù)試驗(yàn)，評(píng)估低FODMAP飲食對(duì)菌群及癥狀的改善，并給出主要終點(diǎn)與統(tǒng)計(jì)方法。答案：（1）采用北美共識(shí)：90min內(nèi)H?上升≥20ppm為小腸細(xì)菌過度生長（SIBO）陽性。（2）試驗(yàn)設(shè)計(jì)：納入60例IBSD且SIBO陽性，隨機(jī)分A組先低FODMAP后高FODMAP，B組相反，每期4周，洗脫2周。主要終點(diǎn)：腹痛日評(píng)分（0–10分）較基線下降≥2分為應(yīng)答；次要終點(diǎn)：Bristol分型、90minH?變化、宏基因組Shannon指數(shù)、SCFA含量。統(tǒng)計(jì)：采用線性混合效應(yīng)模型，固定效應(yīng)為飲食期、順序、基線值，隨機(jī)效應(yīng)為受試者；多重比較采用FDR校正，α=0.05。五、計(jì)算與綜合題（每題10分，共20分）48.某研究對(duì)40名健康志愿者連續(xù)7天記錄糞便Bristol評(píng)分，數(shù)據(jù)如下：第1天：3,4,3,5,2,6,4,3,4,5,3,4,3,4,3,5,4,3,4,3,4,5,3,4,3,4,3,5,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3第7天：4,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4,3,4（1）計(jì)算第1天與第7天Bristol均值、標(biāo)準(zhǔn)差及效應(yīng)量Cohen’sd。（2）判斷該干預(yù)是否引起糞便性狀顯著改變（α=0.05）。答案：（1）第1天：均值=3.65，SD=0.83；第7天：均值=3.50，SD=0.51；Cohen’sd=|3.65?3.50|/√[(0.832+0.512)/2]=0.22（小效應(yīng)）。（2）配對(duì)t檢驗(yàn)：t=1.02，df=39，P=0.31>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示干預(yù)未顯著改變糞便性狀。49.某實(shí)驗(yàn)室建立qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定丁酸產(chǎn)生菌Faecalibacteriumpraus