微生物、潔凈作業(yè)和衛(wèi)生知識(shí)培訓(xùn)試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分）1.潔凈室分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)ISO146441中，靜態(tài)條件下≥0.5μm粒子最大允許濃度為3,520,000個(gè)/m3的等級(jí)是A.ISO5??B.ISO6??C.ISO7??D.ISO8答案：C2.下列哪種微生物屬于革蘭氏陽性、芽孢形成、兼性厭氧菌，常用于滅菌驗(yàn)證指示菌？A.金黃色葡萄球菌??B.枯草芽孢桿菌黑色變種??C.銅綠假單胞菌??D.白色念珠菌答案：B3.采用過氧化氫蒸汽（VHP）對(duì)A級(jí)區(qū)進(jìn)行表面滅菌時(shí)，公認(rèn)的最低殺滅芽孢對(duì)數(shù)值（logreduction）要求是A.≥3??B.≥4??C.≥6??D.≥12答案：C4.潔凈區(qū)內(nèi)傳遞窗自凈時(shí)間驗(yàn)證中，粒子濃度從初始值降至靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)值所需時(shí)間一般不應(yīng)超過A.5min??B.10min??C.15min??D.30min答案：B5.手部消毒后采樣檢測，每手菌落總數(shù)合格標(biāo)準(zhǔn)為A.≤1cfu/手??B.≤3cfu/手??C.≤10cfu/手??D.≤30cfu/手答案：C6.下列哪項(xiàng)不是潔凈室壓差梯度設(shè)計(jì)的基本原則？A.由潔凈度高的區(qū)域向低的區(qū)域遞減??B.相鄰區(qū)域壓差≥12.5Pa??C.所有門開啟時(shí)氣流方向不變??D.回風(fēng)口應(yīng)設(shè)在房間頂部答案：D7.潔凈服清洗后微粒檢測，≥0.5μm粒子數(shù)/ft2限度標(biāo)準(zhǔn)為A.1,000??B.5,000??C.10,000??D.50,000答案：C8.歐盟GMP附錄1（2022版）將“先進(jìn)制造”中連續(xù)監(jiān)測的推薦采樣量定為每立方米A.0.5m3??B.1m3??C.2m3??D.5m3答案：B9.潔凈室高效過濾器（H13級(jí)）的鈉焰法最低效率為A.95%??B.99.95%??C.99.995%??D.99.999%答案：B10.采用接觸碟法對(duì)設(shè)備表面進(jìn)行微生物監(jiān)測，培養(yǎng)時(shí)間通常為A.24h±2h??B.48h±4h??C.72h±4h??D.7d答案：B11.下列哪種消毒劑對(duì)細(xì)菌芽孢無效？A.70%異丙醇??B.2%戊二醛??C.0.2%過氧乙酸??D.1000ppm次氯酸鈉答案：A12.潔凈區(qū)溫濕度驗(yàn)證中，相對(duì)濕度持續(xù)超標(biāo)可能導(dǎo)致的最直接風(fēng)險(xiǎn)是A.高效過濾器霉變??B.靜電積聚??C.產(chǎn)品氧化??D.壓差波動(dòng)答案：A13.潔凈室自凈性能測試時(shí)，粒子濃度衰減曲線需滿足A.單指數(shù)R2≥0.85??B.雙指數(shù)R2≥0.95??C.線性R≥0.98??D.不強(qiáng)制擬合答案：B14.下列哪項(xiàng)不是無菌操作“三要素”？A.環(huán)境控制??B.人員行為??C.物料凈化??D.工藝驗(yàn)證答案：D15.潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測，Φ90mm培養(yǎng)皿暴露4h，A級(jí)區(qū)警戒限（cfu/皿）為A.0??B.1??C.3??D.5答案：B16.采用生物指示劑進(jìn)行濕熱滅菌驗(yàn)證時(shí)，常用菌種為A.嗜熱脂肪芽孢桿菌??B.枯草芽孢桿菌??C.大腸桿菌??D.金黃色葡萄球菌答案：A17.潔凈室送風(fēng)量計(jì)算時(shí)，A級(jí)區(qū)單向流斷面風(fēng)速應(yīng)維持在A.0.1–0.2m/s??B.0.36–0.54m/s??C.0.8–1.2m/s??D.1.5–2.0m/s答案：B18.潔凈區(qū)廢棄物傳出時(shí)，首選的凈化方式是A.紫外照射30min??B.雙層袋密封+表面消毒??C.干熱滅菌180℃2h??D.環(huán)氧乙烷滅菌答案：B19.潔凈室人員最大數(shù)量驗(yàn)證通常采用A.煙霧試驗(yàn)??B.粒子與微生物動(dòng)態(tài)監(jiān)測??C.溫濕度探頭??D.風(fēng)速儀答案：B20.下列哪項(xiàng)不是潔凈室清潔程序“SOP六要素”？A.清潔劑濃度??B.接觸時(shí)間??C.清潔順序??D.清潔人員血型答案：D21.潔凈區(qū)使用的0.2μm除菌級(jí)過濾器，其完整性測試合格標(biāo)準(zhǔn)（水侵入法）為A.≤0.1mL/min??B.≤0.25mL/min??C.≤0.5mL/min??D.≤1.0mL/min答案：B22.潔凈室高效過濾器更換后，需進(jìn)行的確認(rèn)項(xiàng)目不包括A.PAO掃描檢漏??B.風(fēng)量平衡??C.壓差復(fù)核??D.照度測試答案：D23.潔凈區(qū)手套破損后，正確的應(yīng)急流程是A.立即用75%乙醇噴灑→繼續(xù)操作??B.退出→更換→手消毒→重新進(jìn)入??C.用膠帶粘貼破損處??D.加戴一層手套答案：B24.潔凈室監(jiān)測數(shù)據(jù)出現(xiàn)“超行動(dòng)限”時(shí)，首要措施是A.立即停產(chǎn)并通知QA??B.復(fù)測一次確認(rèn)??C.調(diào)整空調(diào)系統(tǒng)??D.更換培養(yǎng)基品牌答案：A25.潔凈區(qū)表面微生物監(jiān)測，接觸碟采樣面積通常為A.5cm2??B.10cm2??C.25cm2??D.100cm2答案：C26.潔凈室更衣程序中，口罩必須覆蓋A.口部??B.口與鼻??C.口、鼻與下頜??D.全臉答案：C27.潔凈室常用的“殺孢子劑”濃度范圍為A.0.1–0.2%過氧乙酸??B.0.5–1%過氧乙酸??C.3–6%過氧化氫??D.0.05%季銨鹽答案：B28.潔凈區(qū)A級(jí)層流工作臺(tái)垂直流型，粒子采樣點(diǎn)距工作面高度為A.10–20cm??B.30–50cm??C.60–80cm??D.100cm答案：B29.潔凈室監(jiān)測用培養(yǎng)基，常用中和劑為A.硫代硫酸鈉??B.卵磷脂+聚山梨酯80??C.檸檬酸??D.EDTA答案：B30.潔凈室人員資格確認(rèn)中，微生物理論知識(shí)考核合格分?jǐn)?shù)為A.60??B.70??C.80??D.90答案：C二、配伍選擇題（每題1分，共20分）A.枯草芽孢桿菌黑色變種??B.嗜熱脂肪芽孢桿菌??C.銅綠假單胞菌??D.白色念珠菌??E.金黃色葡萄球菌31.環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證指示菌答案：A32.濕熱121℃滅菌驗(yàn)證指示菌答案：B33.無菌灌裝線隔離器表面監(jiān)測常用挑戰(zhàn)菌答案：C34.真菌殺滅效果驗(yàn)證代表菌答案：D35.手部衛(wèi)生驗(yàn)證常用指示菌答案：EA.≥0.5μm粒子≤3,520個(gè)/m3??B.≥0.5μm粒子≤35,200個(gè)/m3??C.≥0.5μm粒子≤352,000個(gè)/m3??D.≥0.5μm粒子≤3,520,000個(gè)/m3??E.≥0.5μm粒子≤8,520,000個(gè)/m336.ISO5靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)答案：A37.ISO6靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)答案：B38.ISO7靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)答案：C39.ISO8靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)答案：D40.普通生產(chǎn)區(qū)參考標(biāo)準(zhǔn)答案：EA.0.2–0.5ppm??B.5–10ppm??C.50–100ppm??D.200–300ppm??E.500–1000ppm41.潔凈室臭氧消毒維持濃度答案：D42.紫外燈表面照射強(qiáng)度合格值（μW/cm2）換算為臭氧產(chǎn)量，對(duì)應(yīng)濃度范圍答案：A43.次氯酸鈉日常地面消毒濃度答案：E44.過氧乙酸殺孢子使用濃度答案：C45.潔凈室甲醛熏蒸維持濃度答案：B三、判斷題（每題1分，共20分，正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）46.潔凈室高效過濾器檢漏用PAO氣溶膠質(zhì)量中徑為0.3μm。答案：√47.潔凈區(qū)沉降菌培養(yǎng)溫度30–35℃，時(shí)間48h即可出具報(bào)告，無需再培養(yǎng)至7天。答案：×48.潔凈室人員戴眼鏡時(shí)，可使用普通家用眼鏡布進(jìn)行清潔。答案：×49.潔凈室A級(jí)區(qū)風(fēng)速測試點(diǎn)間距不大于0.6m。答案：√50.潔凈區(qū)消毒劑輪換周期原則上不超過6個(gè)月。答案：√51.潔凈室回風(fēng)口安裝高度越低越有利于微粒排除。答案：×52.潔凈室監(jiān)測用培養(yǎng)基平皿暴露時(shí)間越短越好，與回收率無關(guān)。答案：×53.潔凈室高效過濾器若邊緣掃描發(fā)現(xiàn)0.01%泄漏，可現(xiàn)場修補(bǔ)后無需再檢漏。答案：×54.潔凈區(qū)使用的滅菌袋必須有化學(xué)指示卡和生物指示劑雙重驗(yàn)證。答案：√55.潔凈室人員進(jìn)入B級(jí)區(qū)前需佩戴無菌眼罩。答案：√56.潔凈室清潔工具可采用易脫落纖維的棉布材質(zhì)，只要經(jīng)過滅菌即可。答案：×57.潔凈室壓差突然歸零，應(yīng)立即停產(chǎn)并啟動(dòng)偏差調(diào)查。答案：√58.潔凈區(qū)監(jiān)測數(shù)據(jù)趨勢分析可采用ISO146981推薦的“警告限=均值+2SD”。答案：√59.潔凈室A級(jí)區(qū)允許短時(shí)存放與生產(chǎn)無關(guān)的個(gè)人物品，只要放在層流下游。答案：×60.潔凈室人員每半年需重新進(jìn)行微生物理論及實(shí)操考核。答案：√61.潔凈室臭氧消毒后，需通風(fēng)至殘留濃度≤0.1ppm方可生產(chǎn)。答案：√62.潔凈區(qū)使用的0.1μm過濾器可替代0.2μm除菌級(jí)過濾器。答案：×63.潔凈室清潔驗(yàn)證中，最難清潔部位通常選擇管路焊接點(diǎn)。答案：√64.潔凈室人員可佩戴指甲油，只要顏色淺且不掉屑。答案：×65.潔凈室高效過濾器壽命與運(yùn)行風(fēng)量成反比關(guān)系。答案：√四、填空題（每空1分，共20分）66.潔凈室高效過濾器效率測試常用氣溶膠為________，檢測儀器為________。答案：PAO，光度計(jì)67.潔凈區(qū)A級(jí)區(qū)沉降菌監(jiān)測培養(yǎng)基為________，培養(yǎng)溫度________℃，時(shí)間________h。答案：TSA，30–35，48+4868.潔凈室人員更衣確認(rèn)需進(jìn)行________次連續(xù)無菌操作模擬，結(jié)果菌落總數(shù)≤________cfu/皿。答案：3，069.潔凈區(qū)消毒劑驗(yàn)證需完成________種表面材質(zhì)、________種代表菌、________個(gè)濃度梯度。答案：3，3，370.潔凈室壓差監(jiān)測報(bào)警延遲時(shí)間應(yīng)≤________min，記錄間隔≤________min。答案：5，171.潔凈室B級(jí)區(qū)≥0.5μm粒子動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)上限為________個(gè)/m3，微生物浮游菌警戒限為________cfu/m3。答案：352,000，5072.潔凈室高效過濾器邊框密封膠常用材質(zhì)為________，固化時(shí)間________h。答案：聚氨酯，2473.潔凈區(qū)手套完整性測試采用________法，壓力________kPa，保持________min無氣泡。答案：充氣，20，374.潔凈室清潔驗(yàn)證回收率要求≥________%，RSD≤________%。答案：70，1575.潔凈室A級(jí)區(qū)單向流風(fēng)速不均勻度應(yīng)≤________%，風(fēng)速點(diǎn)偏差±________%。答案：20，10五、簡答題（每題10分，共30分）76.簡述潔凈區(qū)人員進(jìn)入B級(jí)區(qū)的完整更衣流程，并說明關(guān)鍵控制點(diǎn)。答案：1）更鞋：脫一般鞋→穿潔凈區(qū)專用鞋→踩粘塵墊三次；2）脫外衣：脫外衣→放入更衣柜→穿內(nèi)帽→戴口罩；3）手消毒：用75%乙醇噴灑雙手→揉搓至干；4）穿潔凈服：先穿褲腿→上衣→拉鏈至頂→貼門襟→戴外帽→確保頭發(fā)完全包裹；5）戴眼罩：調(diào)整至無縫隙；6）手再消毒：重復(fù)乙醇消毒；7）穿無菌手套：先戴內(nèi)層→噴乙醇→戴外層→噴乙醇；8）風(fēng)淋：進(jìn)入風(fēng)淋室旋轉(zhuǎn)360°30s；9）進(jìn)入緩沖：確認(rèn)壓差≥12.5Pa；關(guān)鍵控制點(diǎn)：更衣順序不可逆、每步手消毒、頭發(fā)完全覆蓋、口罩密合、手套無破損、風(fēng)淋時(shí)間達(dá)標(biāo)、壓差實(shí)時(shí)顯示。77.說明潔凈室高效過濾器PAO掃描檢漏的操作步驟及合格標(biāo)準(zhǔn)。答案：1）準(zhǔn)備工作：停機(jī)→拆除擴(kuò)散板→連接PAO發(fā)生器→上游濃度調(diào)至20–80μg/L；2）上游采樣：光度計(jì)上游讀數(shù)穩(wěn)定后記錄為C0；3）下游掃描：用矩形采樣頭距濾面2–5cm，移動(dòng)速度≤5cm/s，覆蓋整個(gè)濾面及邊框；4）讀數(shù)記錄：局部穿透率P=（下游讀數(shù)/上游讀數(shù)）×100%；5）合格標(biāo)準(zhǔn)：P≤0.01%（H13），邊框及濾材無連續(xù)亮點(diǎn)；6）異常處理：若發(fā)現(xiàn)泄漏≥0.01%，標(biāo)記→補(bǔ)膠→重新掃描→直至合格；7）出具掃描圖、數(shù)據(jù)表、結(jié)論簽字。78.闡述潔凈區(qū)消毒劑輪換策略的制定依據(jù)及實(shí)施要點(diǎn)。答案：依據(jù)：1）微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)趨勢；2）消毒劑對(duì)代表菌的殺滅曲線；3）表面材質(zhì)兼容性；4）法規(guī)要求（EUGMP、FDA、ISO14698）；5）供應(yīng)商變更或新菌株出現(xiàn)。實(shí)施要點(diǎn)：1）建立消毒劑清單，含有效成分、濃度、接觸時(shí)間、使用表面；2）每季度回顧微生物監(jiān)測結(jié)果，若連續(xù)3次接近行動(dòng)限即啟動(dòng)輪換；3）輪換周期：季銨鹽→醇類→次氯酸鈉→過氧乙酸，每3個(gè)月切換；4）驗(yàn)證：輪換前完成現(xiàn)場挑戰(zhàn)試驗(yàn)（log≥4）；5）培訓(xùn)：更新SOP并對(duì)清潔人員重新考核；6）記錄：保存輪換記錄、驗(yàn)證報(bào)告、監(jiān)測數(shù)據(jù)，保存期≥5年。六、案例分析題（每題20分，共40分）79.背景：某無菌制劑車間A級(jí)區(qū)連續(xù)3天沉降菌監(jiān)測結(jié)果為2cfu/皿、3cfu/皿、4cfu/皿，行動(dòng)限為5cfu/皿，警戒限為3cfu/皿。問題：a）判斷是否觸發(fā)偏差；b）列出至少5條可能原因；c）給出糾正與預(yù)防措施（CAPA）。答案：a）第3天結(jié)果等于行動(dòng)限，觸發(fā)偏差；b）可能原因：1）人員無菌操作不規(guī)范，手套破損未更換；2）層流風(fēng)速下降或高效過濾器局部泄漏；3）消毒周期延長，殺孢子劑濃度不足；4）培養(yǎng)基平皿暴露時(shí)受到干擾；5）環(huán)境監(jiān)測培養(yǎng)箱溫度失控；6）清潔工具污染；7）物料外包裝消毒不徹底。c）CAPA：1）立即停產(chǎn)，啟動(dòng)偏差調(diào)查；2）復(fù)測沉降菌并同步浮