化妝品微生物檢驗(yàn)培訓(xùn)考試試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分。每題只有一個正確答案，請將正確選項(xiàng)字母填入括號內(nèi)）1.化妝品微生物檢驗(yàn)中，用于中和防腐劑殘留最常用的中和劑是（）A.硫代硫酸鈉B.吐溫80+卵磷脂C.氯化鈉D.磷酸鹽緩沖液答案：B2.依據(jù)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2022版，眼部化妝品的霉菌和酵母菌總數(shù)限值為（）A.≤10CFU/gB.≤50CFU/gC.≤100CFU/gD.≤1000CFU/g答案：A3.下列哪種培養(yǎng)基用于銅綠假單胞菌的選擇性增菌（）A.SCDLPB.CNC.TSAD.PDA答案：B4.化妝品供檢樣品經(jīng)1:10稀釋后，若兩個平皿菌落數(shù)分別為28和32，則報告數(shù)為（）A.3.0×101CFU/gB.3.0×102CFU/gC.3.0×103CFU/gD.3.0×10?CFU/g答案：B5.革蘭染色中，脫色時間過短會導(dǎo)致（）A.假陰性B.假陽性C.菌體破裂D.無影響答案：B6.化妝品中不得檢出的特定菌不包括（）A.金黃色葡萄球菌B.銅綠假單胞菌C.白色念珠菌D.大腸埃希氏菌答案：C7.霉菌直接鏡檢時，最適合的染色液是（）A.乳酸酚棉藍(lán)B.結(jié)晶紫C.堿性復(fù)紅D.姬姆薩答案：A8.化妝品微生物檢驗(yàn)中，SCDLP培養(yǎng)基里的“L”代表（）A.LecithinB.LactoseC.LactalbuminD.Lysine答案：A9.驗(yàn)證中和劑有效性時，需設(shè)置的實(shí)驗(yàn)組為（）A.樣品+菌+中和劑B.中和劑+菌C.樣品+中和劑D.僅菌液答案：A10.化妝品供檢樣品若含油包水型乳化劑，最佳均質(zhì)方式為（）A.渦旋3minB.拍擊式均質(zhì)C.超聲10minD.56℃水浴后渦旋答案：B11.銅綠假單胞菌在CN瓊脂上的典型菌落顏色為（）A.綠色B.黃色C.藍(lán)綠色D.無色答案：C12.化妝品微生物檢驗(yàn)中，控制菌檢查培養(yǎng)溫度統(tǒng)一為（）A.30℃±1℃B.35℃±2℃C.37℃±1℃D.25℃±1℃答案：C13.若樣品為噴霧型防曬，采樣量應(yīng)不少于（）A.5mLB.10mLC.20mLD.50mL答案：C14.化妝品中霉菌計數(shù)培養(yǎng)時間為（）A.48hB.72hC.5dD.7d答案：C15.金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗(yàn)陽性結(jié)果判斷時間為（）A.30minB.1hC.4hD.24h答案：C16.化妝品微生物檢驗(yàn)中，用于驗(yàn)證培養(yǎng)基無菌性的對照為（）A.空白對照B.陰性對照C.陽性對照D.試劑對照答案：A17.若1:10稀釋液兩個平皿菌落數(shù)均<10，則最終報告方式為（）A.<1×101CFU/gB.<1×102CFU/gC.0CFU/gD.1×101CFU/g答案：B18.化妝品中檢出大腸埃希氏菌，應(yīng)進(jìn)一步做（）A.IMViCB.耐熱大腸菌群C.β葡萄糖醛酸酶D.所有選項(xiàng)答案：D19.用于化妝品真菌分離的沙氏瓊脂pH應(yīng)調(diào)節(jié)至（）A.5.4±0.2B.6.0±0.2C.7.0±0.2D.7.4±0.2答案：A20.化妝品微生物檢驗(yàn)中，樣品開啟后至檢驗(yàn)完成最長時限為（）A.1hB.2hC.3hD.4h答案：C21.若樣品為粉餅，取樣時需將表面刮去至少（）A.0.5cmB.1cmC.2cmD.無需刮取答案：B22.化妝品中銅綠假單胞菌氧化酶試驗(yàn)結(jié)果為（）A.陰性B.弱陽性C.陽性D.可變答案：C23.化妝品微生物檢驗(yàn)中，用于樣品均質(zhì)的稀釋液滅菌后需添加（）A.吐溫80B.卵磷脂C.硫代硫酸鈉D.氯化鈉答案：A24.若樣品為精油類產(chǎn)品，中和劑應(yīng)額外補(bǔ)充（）A.4%吐溫80B.0.5%卵磷脂C.1%硫代硫酸鈉D.2%氯化鈉答案：A25.化妝品微生物檢驗(yàn)中，陽性對照菌株代次不得超過（）A.2B.3C.4D.5答案：D26.霉菌計數(shù)時，若平皿中菌落蔓延超過1/3，應(yīng)（）A.放棄該皿B.選取未蔓延區(qū)域計數(shù)C.重新稀釋D.報告“蔓延”答案：C27.化妝品中白色念珠菌在選擇性培養(yǎng)基上的典型菌落形態(tài)為（）A.綠色菌落B.藍(lán)綠色菌落C.乳白色酵母樣D.黃色菌落答案：C28.化妝品微生物檢驗(yàn)中，用于樣品表面消毒的酒精濃度為（）A.60%B.70%C.75%D.95%答案：C29.若樣品為凍干粉，復(fù)溶后需靜置的最短時間為（）A.5minB.10minC.15minD.30min答案：C30.化妝品微生物檢驗(yàn)原始記錄保存期限不得少于（）A.1年B.2年C.3年D.5年答案：C二、配伍選擇題（每題1分，共20分。每組試題共用五個備選答案，每題一個最佳答案，備選答案可重復(fù)選用）A.30℃±1℃，48hB.35℃±2℃，24hC.25℃±1℃，5dD.37℃±1℃，48hE.42℃±1℃，24h31.銅綠假單胞菌增菌培養(yǎng)條件（）32.金黃色葡萄球菌選擇性培養(yǎng)條件（）33.霉菌計數(shù)培養(yǎng)條件（）34.酵母菌計數(shù)培養(yǎng)條件（）35.耐熱大腸菌群培養(yǎng)條件（）答案：31B32D33C34C35EA.綠色色素B.金黃色色素C.藍(lán)綠色色素D.乳白色E.紅色色素36.金黃色葡萄球菌在BairdParker平板上菌落顏色（）37.銅綠假單胞菌在CN瓊脂上菌落顏色（）38.白色念珠菌在沙氏瓊脂上菌落顏色（）39.大腸埃希氏菌在VRBA上菌落顏色（）40.黑曲霉在PDA上孢子顏色（）答案：36B37C38D39E40A三、判斷題（每題1分，共10分。正確打“√”，錯誤打“×”）41.化妝品微生物檢驗(yàn)中，若樣品含醇量≥20%，可直接接種無需稀釋。（）答案：×42.霉菌計數(shù)平皿若出現(xiàn)3個不同形態(tài)菌落，應(yīng)分別計數(shù)并累加。（）答案：√43.金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗(yàn)可用兔血漿或人血漿。（）答案：×44.化妝品中檢出耐熱大腸菌群即可判定為不符合規(guī)范。（）答案：√45.樣品為唇膏時，需將整體樣品56℃水浴融化后取樣。（）答案：×46.銅綠假單胞菌氧化酶試驗(yàn)需使用新鮮配制的1%鹽酸四甲基對苯二胺。（）答案：√47.化妝品微生物檢驗(yàn)中，若樣品為一次性包裝且凈含量<1g，可取完整樣品檢驗(yàn)。（）答案：√48.霉菌計數(shù)時，若10?1平皿菌落數(shù)為120，10?2為18，則最終報告為1.8×102CFU/g。（）答案：×49.化妝品微生物檢驗(yàn)報告可使用電子簽名，但需符合CNAS要求。（）答案：√50.樣品儲存條件為20℃，檢驗(yàn)前需在28℃解凍，且不得重復(fù)凍融。（）答案：√四、填空題（每空1分，共20分）51.化妝品微生物檢驗(yàn)中，樣品均質(zhì)比例通常為________（g/mL）。答案：1:1052.銅綠假單胞菌在42℃能否生長是________試驗(yàn)。答案：耐熱生長53.金黃色葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)陽性菌株在血漿中形成________。答案：凝塊54.化妝品中霉菌和酵母菌總數(shù)培養(yǎng)基為________。答案：沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）55.樣品若含甲醛，中和劑需加入________。答案：0.1%硫代硫酸鈉+0.5%卵磷脂+2%吐溫8056.化妝品微生物檢驗(yàn)中，控制菌檢查增菌培養(yǎng)基體積為________mL。答案：10057.若樣品為雙層包裝，取樣前需將外層用________擦拭消毒。答案：75%酒精58.化妝品中大腸埃希氏菌IMViC模式為________。答案：++59.霉菌計數(shù)時，若菌落直徑<________mm可視為同一菌落。答案：0.560.化妝品微生物檢驗(yàn)中，陽性對照菌株接種量應(yīng)控制在________CFU。答案：5010061.樣品為膏霜時，取樣需從________部位挖取。答案：中心+邊緣62.化妝品微生物檢驗(yàn)中，培養(yǎng)基性能驗(yàn)證需使用________代以內(nèi)菌株。答案：363.若樣品為噴霧罐，取樣前需先________。答案：充分搖勻并排空首噴3s64.化妝品中白色念珠菌革蘭染色鏡檢呈________。答案：革蘭陽性卵圓形芽生孢子及假菌絲65.化妝品微生物檢驗(yàn)中，若樣品為固體皂，需________后取樣。答案：刨成薄片66.化妝品微生物檢驗(yàn)報告編號應(yīng)具有________性。答案：唯一67.霉菌計數(shù)平皿若出現(xiàn)水珠，需將平皿________后倒置培養(yǎng)。答案：開蓋干燥15min68.化妝品微生物檢驗(yàn)中，若樣品為凍干球，需用________稀釋液復(fù)溶。答案：含0.1%蛋白胨的磷酸鹽緩沖液69.化妝品中銅綠假單胞菌綠膿菌素試驗(yàn)陽性呈________色。答案：藍(lán)綠70.化妝品微生物檢驗(yàn)原始記錄修改需采用________。答案：杠改+簽名+日期五、簡答題（每題6分，共30分）71.簡述化妝品微生物檢驗(yàn)中“中和劑有效性驗(yàn)證”實(shí)驗(yàn)步驟及判定標(biāo)準(zhǔn)。答案：（1）實(shí)驗(yàn)步驟：a.制備含中和劑的樣品溶液1:10；b.取1mL加入含50100CFU目標(biāo)菌（如銅綠假單胞菌）的試管，混勻；c.同時設(shè)置“菌+中和劑”“菌+稀釋液”“菌+樣品+中和劑”三組；d.分別傾注TSA，37℃培養(yǎng)48h計數(shù)。（2）判定：a.“菌+中和劑”回收率≥70%；b.“菌+樣品+中和劑”回收率≥70%；c.中和劑本身無抑菌作用；d.滿足以上即判定中和劑有效。72.說明化妝品中檢出金黃色葡萄球菌的完整確認(rèn)流程。答案：（1）選擇性增菌：SCDLP+10%氯化鈉，37℃24h；（2）劃線接種BairdParker瓊脂，37℃48h；（3）挑取典型菌落（黑+透明帶+卵磷脂沉淀環(huán)）做革蘭染色（G+球菌）；（4）血漿凝固酶試驗(yàn)：取新鮮兔血漿0.5mL，加菌懸液0.1mL，37℃4h觀察凝塊；（5）結(jié)果凝固酶陽性+革蘭陽性球菌+典型菌落形態(tài)即確認(rèn)檢出。73.列舉化妝品微生物檢驗(yàn)中“樣品前處理”五大關(guān)鍵控制點(diǎn)。答案：（1）包裝表面消毒：75%酒精擦拭2次，紫外照射30s；（2）取樣代表性：固樣中心+邊緣，液樣搖勻，噴霧樣排空首噴；（3）均質(zhì)溫度：水包油≤40℃，油包水≤35℃，避免微生物受熱損傷；（4）中和劑匹配：酚類→吐溫80+卵磷脂；醛類→硫代硫酸鈉；季銨鹽→卵磷脂+吐溫80；（5）時效控制：開啟后3h內(nèi)完成檢驗(yàn)，超時重新取樣。74.說明化妝品霉菌計數(shù)出現(xiàn)“蔓延”時的補(bǔ)救措施及報告原則。答案：（1）立即將蔓延平皿拍照存檔；（2）選取未蔓延區(qū)域計數(shù)，若可區(qū)分單個菌落則分別計數(shù)；（3）若無法區(qū)分，則該稀釋度作廢，取上一稀釋度計數(shù)；（4）若所有稀釋度均蔓延，則報告“菌落蔓延，結(jié)果>最高稀釋度菌落數(shù)”，并建議重新送樣；（5）原始記錄注明“蔓延”及處理過程，不得隨意估算。75.闡述化妝品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室“無菌操作”六項(xiàng)核心細(xì)則。答案：（1）環(huán)境：超凈臺開機(jī)≥15min，紫外關(guān)閉后5min內(nèi)操作；（2）人員：穿戴無菌帽、口罩、滅菌手套，手套每30min更換或75%酒精擦拭；（3）器具：移液管、鑷子等經(jīng)121℃30min滅菌，單用單棄；（4）火焰：瓶口、試管口過火焰3次，直徑23cm，時間23s；（5）稀釋：每換稀釋度必?fù)Q吸管，禁止口吸；（6）時限：樣品開啟到接種完成≤30min，超時需重新環(huán)境消毒。六、綜合應(yīng)用題（每題10分，共40分）76.某品牌眼霜（凈含量15g）微生物檢驗(yàn)結(jié)果如下：10?1平皿菌落數(shù)：TSA68/72；SDA5/7；10?2平皿菌落數(shù)：TSA8/10；SDA0/1；控制菌：銅綠假單胞菌未檢出；金黃色葡萄球菌未檢出；霉菌酵母：白色念珠菌未檢出；請完成：（1）計算菌落總數(shù)并報告；（2）判定是否符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2022版；（3）若客戶要求復(fù)檢，請列出復(fù)檢方案要點(diǎn)。答案：（1）TSA平均（68+72）/2=70，（8+10）/2=9，取70×10=7.0×102CFU/g；SDA平均（5+7）/2=6，（0+1）/2=0.5＜1，取6×10=60CFU/g；菌落總數(shù)7.0×102CFU/g，霉菌酵母60CFU/g。（2）眼霜屬眼部化妝品，規(guī)范限值：菌落總數(shù)≤500CFU/g，霉菌酵母≤10CFU/g；結(jié)果：菌落總數(shù)合格，霉菌酵母超標(biāo)（60>10），判定不符合。（3）復(fù)檢方案：a.雙倍取樣，同一批次另取2盒；b.全程盲樣編號，獨(dú)立實(shí)驗(yàn)員操作；c.增測10?3稀釋度，避免高稀釋度菌落稀少；d.同步做白色念珠菌選擇性培養(yǎng)（含慶大霉素）；e.若復(fù)檢仍超標(biāo)，出具不合格報告并建議企業(yè)溯源生產(chǎn)環(huán)境。77.某防曬噴霧（含乙醇18%）微生物檢驗(yàn)原始記錄顯示：樣品1:10稀釋后，硫代硫酸鈉中和劑回收率42%；請分析：（1）中和劑失敗原因；（2）改進(jìn)措施；（3）設(shè)計驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)確認(rèn)改進(jìn)效果。答案：（1）原因：乙醇與硫代硫酸鈉無中和關(guān)系；高濃度乙醇使菌體蛋白變性，回收率下降。（2）改進(jìn)：改用4%吐溫80+0.5%卵磷脂+1%硫代硫酸鈉復(fù)合中和劑；稀釋比例提高至1:20降低醇濃度。（3）驗(yàn)證：a.設(shè)三組：A菌+稀釋液、B菌+中和劑、C菌+樣品+中和劑；b.接種量50100CFU，傾注TSA，37℃48h；c.回收率≥70%且無顯著差異即確認(rèn)改進(jìn)有效。78.實(shí)驗(yàn)室收到一批次面膜（25mL/片，共10片），需進(jìn)行全項(xiàng)微生物檢驗(yàn)。請制定取樣方案，包括：（1）取樣量及取樣部位；（2）均質(zhì)方式；（3）控制菌增菌策略；（4）留樣量與儲存條件；（5）異常結(jié)果處理流程。答案：（1）隨機(jī)取3片，每片剪取四角+中心共5點(diǎn)，每點(diǎn)1g，合并30g；（2）加入270mL含0.1%吐溫80的