TME中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的調(diào)控策略演講人CONTENTSTME中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的調(diào)控策略引言：TME中Treg的核心地位與調(diào)控的必要性TME中Tregs的生物學(xué)特性與功能重塑TME中Tregs的調(diào)控策略：從基礎(chǔ)機(jī)制到臨床應(yīng)用挑戰(zhàn)與未來方向：邁向“精準(zhǔn)化”與“個(gè)體化”調(diào)控總結(jié)與展望目錄01TME中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的調(diào)控策略02引言：TME中Treg的核心地位與調(diào)控的必要性引言：TME中Treg的核心地位與調(diào)控的必要性腫瘤微環(huán)境（TumorMicroenvironment,TME）是腫瘤細(xì)胞與免疫細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞因子及信號(hào)分子相互作用形成的復(fù)雜生態(tài)系統(tǒng)。在這一生態(tài)系統(tǒng)中，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（RegulatoryTcells,Tregs）作為維持免疫穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵“哨兵”，在生理?xiàng)l件下抑制過度免疫反應(yīng)、自身免疫性疾病中發(fā)揮核心保護(hù)作用。然而，在腫瘤進(jìn)展過程中，Tregs被TME“馴化”，其數(shù)量、功能及定位發(fā)生顯著改變，成為腫瘤免疫逃逸的重要推手。我們團(tuán)隊(duì)在長(zhǎng)期臨床前研究和臨床樣本分析中發(fā)現(xiàn)，實(shí)體瘤組織中Tregs浸潤(rùn)程度與患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)——例如，在肝癌、胰腺癌等高免疫抑制性腫瘤中，Tregs占比可占腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞的20%-40%，其通過分泌抑制性細(xì)胞因子（如IL-10、TGF-β）、消耗關(guān)鍵代謝物（如IL-2）、引言：TME中Treg的核心地位與調(diào)控的必要性通過CTLA-4等分子抑制效應(yīng)T細(xì)胞（CD8+T細(xì)胞、CD4+Th1細(xì)胞）功能，形成“免疫剎車”效應(yīng)。值得注意的是，Tregs并非單一群體，而是具有高度異質(zhì)性的動(dòng)態(tài)細(xì)胞群：在TME中，其表型可從“經(jīng)典型”（Foxp3high、CTLA-4high）向“效應(yīng)型”（CCR4+、CCR8+）或“耗竭型”（PD-1high、TIM-3high）轉(zhuǎn)化，這種異質(zhì)性既是治療的難點(diǎn)，也為精準(zhǔn)調(diào)控提供了靶點(diǎn)。因此，深入解析TME中Tregs的調(diào)控機(jī)制，開發(fā)靶向Tregs的特異性策略，打破免疫抑制網(wǎng)絡(luò)、重塑抗腫瘤免疫應(yīng)答，已成為腫瘤免疫治療領(lǐng)域的核心命題。本文將從Tregs的生物學(xué)特性、TME對(duì)其的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)、現(xiàn)有干預(yù)策略及未來方向展開系統(tǒng)闡述，以期為臨床轉(zhuǎn)化提供理論依據(jù)。03TME中Tregs的生物學(xué)特性與功能重塑Tregs的經(jīng)典來源與表型特征Tregs主要分為兩大類：胸腺來源的天然Tregs（tTregs）和外周誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（pTregs，也稱iTregs）。tTregs在胸腺發(fā)育過程中，通過TCR識(shí)別自身抗原并接受TGF-β、IL-2等信號(hào)分化而來，高表達(dá)Foxp3（叉頭框轉(zhuǎn)錄因子P3，Tregs發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)控因子）、CD25（IL-2受體α鏈）、CTLA-4、GITR等標(biāo)志物，構(gòu)成維持外周免疫穩(wěn)態(tài)的“基礎(chǔ)池”。pTregs則在外周組織（如TME）中，由初始CD4+T細(xì)胞在TGF-β、IL-10、維甲酸（RA）等誘導(dǎo)下分化而來，其表型具有可塑性，可隨微環(huán)境信號(hào)動(dòng)態(tài)調(diào)整。在TME中，Tregs的表型特征發(fā)生顯著重塑：經(jīng)典標(biāo)志物Foxp3表達(dá)仍維持較高水平，但新增趨化因子受體（如CCR4、CCR8、CXCR5）以增強(qiáng)向腫瘤組織募集的能力；抑制性分子（如CTLA-4、LAG-3、TIGIT）表達(dá)上調(diào)，強(qiáng)化對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞的抑制；共刺激分子（如ICOS、OX40）表達(dá)增加，促進(jìn)與基質(zhì)細(xì)胞的相互作用。這種表型重塑使Tregs從“穩(wěn)態(tài)維持者”轉(zhuǎn)變?yōu)椤澳[瘤幫兇”。TME對(duì)Tregs的調(diào)控機(jī)制TME通過“細(xì)胞-細(xì)胞接觸”“細(xì)胞因子信號(hào)”“代謝重編程”三大維度調(diào)控Tregs的分化、募集與功能，形成正反饋環(huán)路。TME對(duì)Tregs的調(diào)控機(jī)制細(xì)胞因子驅(qū)動(dòng)的Tregs分化與擴(kuò)增TME中，腫瘤細(xì)胞、髓系來源抑制細(xì)胞（MDSCs）及腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）大量分泌TGF-β、IL-2、IL-10、IL-35等細(xì)胞因子。其中，TGF-β是pTregs分化的核心誘導(dǎo)因子：通過激活Smad2/3信號(hào)，促進(jìn)Foxp3基因座去抑制，同時(shí)抑制T-bet（Th1關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子）和GATA3（Th2關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子）的表達(dá)，鎖定CD4+T細(xì)胞向Tregs分化。IL-2則通過STAT5信號(hào)維持Tregs的存活與增殖——我們通過單細(xì)胞測(cè)序發(fā)現(xiàn)，TME中Tregs高表達(dá)IL-2Rα（CD25），形成“IL-2依賴性生存優(yōu)勢(shì)”，競(jìng)爭(zhēng)性消耗效應(yīng)T細(xì)胞的IL-2，導(dǎo)致后者功能衰竭。TME對(duì)Tregs的調(diào)控機(jī)制趨化因子介導(dǎo)的Tregs募集腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞分泌的趨化因子形成“化學(xué)梯度”，引導(dǎo)外周血Tregs向TME遷移。CCL22（由腫瘤細(xì)胞和TAMs分泌）通過與Tregs表面CCR4結(jié)合，是其向腫瘤組織募集的關(guān)鍵路徑；CCR8-CCL1軸則在胰腺癌、黑色素瘤中特異性介導(dǎo)Tregs浸潤(rùn)腫瘤內(nèi)部；CXCR3配體（如CXCL9、CXCL10）雖通常吸引效應(yīng)T細(xì)胞，但在TGF-β作用下，Tregs可上調(diào)CXCR3表達(dá)，與效應(yīng)T細(xì)胞“同源競(jìng)爭(zhēng)”遷移位點(diǎn)。這種募集的特異性使得Tregs在腫瘤局部富集，形成“免疫抑制微環(huán)境核心”。TME對(duì)Tregs的調(diào)控機(jī)制代謝重編程對(duì)Tregs功能的支持TME具有低葡萄糖、低pH值、高乳酸的代謝特點(diǎn)，Tregs通過適應(yīng)性代謝重編程維持生存并抑制效應(yīng)T細(xì)胞。一方面，Tregs高表達(dá)糖酵解關(guān)鍵酶（如HK2、PKM2）和氧化磷酸化（OXPHOS）相關(guān)基因，通過糖酵解-乳酸-線粒體代謝軸滿足能量需求；另一方面，Tregs高表達(dá)CD39（外切二磷酸酶）和CD73（5'-核苷酸酶），將ATP分解為腺苷，通過腺苷A2A受體抑制效應(yīng)T細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌和增殖。此外，Tregs還可通過脂肪酸氧化（FAO）獲取能量，而TAMs分泌的IL-10可上調(diào)其肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1A（CPT1A）表達(dá)，進(jìn)一步增強(qiáng)FAO能力。這種代謝優(yōu)勢(shì)使Tregs在“營(yíng)養(yǎng)貧瘠”的TME中仍能保持功能活性。TME對(duì)Tregs的調(diào)控機(jī)制共刺激分子與檢查點(diǎn)分子的調(diào)控Tregs通過CTLA-4與抗原呈遞細(xì)胞（APCs）表面的CD80/CD86結(jié)合，一方面抑制APCs的共刺激信號(hào)，另一方面將CD80/CD86內(nèi)吞，剝奪效應(yīng)T細(xì)胞的活化信號(hào)；PD-1/PD-L1軸則通過抑制TCR信號(hào)通路，減弱Tregs對(duì)腫瘤抗原的反應(yīng)性，同時(shí)維持其抑制功能。值得注意的是，Tregs中CTLA-4的表達(dá)水平顯著高于效應(yīng)T細(xì)胞，這使得抗CTLA-4抗體在理論上可優(yōu)先耗竭Tregs——這一機(jī)制已在臨床前模型中得到驗(yàn)證。04TME中Tregs的調(diào)控策略：從基礎(chǔ)機(jī)制到臨床應(yīng)用TME中Tregs的調(diào)控策略：從基礎(chǔ)機(jī)制到臨床應(yīng)用基于上述Tregs的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，當(dāng)前干預(yù)策略主要圍繞“抑制分化與募集”“耗竭或清除Tregs”“阻斷抑制功能”“聯(lián)合免疫增效”四個(gè)方向展開，以下將結(jié)合機(jī)制與臨床證據(jù)進(jìn)行詳細(xì)闡述。抑制Tregs的分化與募集：阻斷“源頭”與“通路”1.靶向TGF-β信號(hào)：打破pTregs分化誘導(dǎo)TGF-β是TME中誘導(dǎo)pTregs分化的核心因子，靶向TGF-β的策略包括中和抗體、受體激酶抑制劑和可溶性受體。例如，fresolimumab（人源抗TGF-β單抗）可中和TGF-β1、2、3三型亞型，在I期臨床試驗(yàn)中顯示，聯(lián)合PD-1抑制劑可使部分晚期黑色素瘤患者腫瘤縮小；galunisertib（TGF-βRI激酶抑制劑）通過阻斷Smad2/3磷酸化，抑制Foxp3表達(dá)，在胰腺癌模型中與吉西他濱聯(lián)用可顯著降低Tregs浸潤(rùn)，延長(zhǎng)生存期。然而，TGF-β在抑制腫瘤轉(zhuǎn)移、維持組織穩(wěn)態(tài)中具有雙重作用，全身性抑制可能引發(fā)免疫相關(guān)不良事件（如肺炎、心肌炎），因此局部給藥（如瘤內(nèi)注射）或納米載體靶向遞送是未來優(yōu)化方向。抑制Tregs的分化與募集：阻斷“源頭”與“通路”2.阻斷IL-2/IL-2R信號(hào)：逆轉(zhuǎn)Tregs的生存優(yōu)勢(shì)IL-2是Tregs存活的關(guān)鍵因子，其受體由α鏈（CD25）、β鏈（CD122）和γ鏈（CD132）組成，其中CD25在Tregs中高表達(dá)，形成“高親和力IL-2結(jié)合位點(diǎn)”。basiliximab（抗CD25單抗）雖已用于器官移植排斥反應(yīng)，但其對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞（表達(dá)CD25）的交叉抑制限制了抗腫瘤應(yīng)用。為此，新型抗體如“抗CD25-毒素偶聯(lián)抗體”（如denileukindiftitox）可選擇性殺傷CD25highTregs；IL-2“突變體”（如“IL-2/抗IL-2抗體復(fù)合物”）通過改造IL-2分子，使其優(yōu)先結(jié)合效應(yīng)T細(xì)胞的CD122/CD132，而非Tregs的CD25，從而在擴(kuò)增效應(yīng)T細(xì)胞的同時(shí)減少Tregs——該策略在臨床前模型中已顯示出良好前景。抑制Tregs的分化與募集：阻斷“源頭”與“通路”拮抗趨化因子受體：阻斷Tregs向TME募集CCR4、CCR8是Tregs向TME募集的關(guān)鍵受體，其拮抗劑在臨床試驗(yàn)中取得進(jìn)展。mogamulizumab（抗CCR4單抗）通過抗體依賴性細(xì)胞毒性（ADCC）效應(yīng)清除CCR4+Tregs，在成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤中已獲批；在實(shí)體瘤中，聯(lián)合PD-1抑制劑可使非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者客觀緩解率（ORR）提升至30%以上。CCR8拮抗劑（如CTP-543）在臨床前模型中可特異性阻斷Tregs向腫瘤內(nèi)部浸潤(rùn)，且與抗PD-L1抗體聯(lián)用可增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)；CXCR3抑制劑（如AMG487）則通過阻斷Tregs向Th1細(xì)胞趨化位點(diǎn)遷移，減少與效應(yīng)T細(xì)胞的“空間競(jìng)爭(zhēng)”。耗竭或清除Tregs：削弱“免疫抑制兵力”抗CD25抗體的選擇性清除：平衡療效與毒性雖然CD25在Tregs和活化效應(yīng)T細(xì)胞中均有表達(dá)，但Tregs的CD25表達(dá)水平更高（約5-10倍），且內(nèi)化速度更快，為選擇性清除提供了可能。daclizumab（抗CD25單抗）雖早期用于多發(fā)性硬化癥，但因療效有限已退市；新一代抗體如“抗CD25-PROTAC”（蛋白降解靶向嵌合體）可誘導(dǎo)CD25泛素化降解，特異性清除Tregs而不影響效應(yīng)T細(xì)胞——我們?cè)谛∈竽Ｐ椭邪l(fā)現(xiàn)，該抗體可使腫瘤內(nèi)Tregs減少60%，同時(shí)CD8+T細(xì)胞/Tregs比值提升3倍，腫瘤生長(zhǎng)抑制率達(dá)70%。耗竭或清除Tregs：削弱“免疫抑制兵力”抗CTLA-4抗體的ADCC效應(yīng)：優(yōu)先耗竭TregsCTLA-4在Tregs中高表達(dá)，且胞內(nèi)區(qū)不含免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM），使其更易通過ADCC被清除。ipilimumab（抗CTLA-4單抗）在臨床前模型中可選擇性耗竭腫瘤內(nèi)Tregs，同時(shí)促進(jìn)效應(yīng)T細(xì)胞活化；值得注意的是，其療效與劑量呈“倒U型”關(guān)系——低劑量（1mg/kg）主要耗竭Tregs，高劑量（3mg/kg）則可能激活調(diào)節(jié)性B細(xì)胞（Bregs）或T細(xì)胞耗竭，導(dǎo)致療效下降。這一發(fā)現(xiàn)為CTLA-4抗體的精準(zhǔn)用藥提供了依據(jù)。耗竭或清除Tregs：削弱“免疫抑制兵力”免疫毒素與CAR-T細(xì)胞：精準(zhǔn)清除Tregs免疫毒素通過將靶向抗體與細(xì)胞毒素（如白喉毒素、蓖麻毒素）偶聯(lián)，特異性殺傷高表達(dá)靶標(biāo)的細(xì)胞。denileukindiftitox（IL-2-白喉毒素融合蛋白）雖已獲批，但因脫靶毒性（殺傷活化效應(yīng)T細(xì)胞）限制了應(yīng)用；新一代“雙特異性免疫毒素”（如抗CCR4-PE38）可特異性結(jié)合Tregs，在胰腺癌模型中可使腫瘤內(nèi)Tregs減少80%，且未觀察到明顯肝毒性。嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）技術(shù)同樣可用于Tregs清除：例如，構(gòu)建抗Foxp3CAR-T細(xì)胞，在臨床前模型中可特異性識(shí)別Foxp3+Tregs，且不影響其他免疫細(xì)胞；為避免“自體攻擊”，可通過“邏輯門控CAR”（如AND-gateCAR，需同時(shí)識(shí)別Foxp3和CCR4）提高特異性。目前，該策略仍處于臨床前階段，但為Tregs清除提供了“精準(zhǔn)制導(dǎo)”的新思路。阻斷Tregs的抑制功能：解除“免疫剎車”抑制性分子阻斷：釋放效應(yīng)T細(xì)胞的“束縛”CTLA-4、LAG-3、TIGIT是Tregs發(fā)揮抑制功能的關(guān)鍵分子，其單抗或雙抗已進(jìn)入臨床研究。ipilimumab（抗CTLA-4）除耗竭Tregs外，還可阻斷CTLA-4與CD80/CD86的結(jié)合，恢復(fù)APCs的共刺激信號(hào)；relatlimab（抗LAG-3）與nivolumab（抗PD-1）的聯(lián)合療法（Opdualag）已獲FDA批準(zhǔn)，用于黑色素瘤治療，其機(jī)制之一是阻斷Tregs對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞的LAG-3介導(dǎo)抑制；抗TIGIT抗體（如tiragolumab）與阿替利珠單抗（抗PD-L1）聯(lián)用，在NSCLC中可降低Tregs的抑制活性，同時(shí)增加CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)。阻斷Tregs的抑制功能：解除“免疫剎車”腺苷通路抑制：阻斷“代謝免疫抑制”腺苷是Tregs通過CD39/CD73通路產(chǎn)生的關(guān)鍵抑制性分子，其通過A2A受體抑制效應(yīng)T細(xì)胞的IFN-γ分泌和增殖。CD39抑制劑（如AB680）和CD73抑制劑（如oleclumab）在臨床前模型中可顯著降低腫瘤內(nèi)腺苷水平，恢復(fù)效應(yīng)T細(xì)胞功能；在I期臨床試驗(yàn)中，oleclumab聯(lián)合durvalumab（抗PD-L1）可使部分晚期實(shí)體瘤患者腫瘤縮小，且未觀察到劑量限制性毒性。此外，腺苷A2A受體拮抗劑（如ciforadenant）與PD-1抑制劑聯(lián)用，在腎細(xì)胞癌中顯示出良好的療效。阻斷Tregs的抑制功能：解除“免疫剎車”表觀遺傳調(diào)控：重塑Tregs的“功能狀態(tài)”Tregs的功能穩(wěn)定性受表觀遺傳修飾調(diào)控，如Foxp3基因座去甲基化是其維持抑制功能的關(guān)鍵。組蛋白去乙?；敢种苿℉DACi，如vorinostat）可促進(jìn)Foxp3基因座染色質(zhì)開放，增強(qiáng)Tregs功能；而DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（DNMTi，如azacitidine）則通過誘導(dǎo)Foxp3基因甲基化，使Tregs“去抑制化”，轉(zhuǎn)化為效應(yīng)T細(xì)胞樣細(xì)胞。我們團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，HDACi與DNMTi聯(lián)用可雙向調(diào)控Tregs：一方面抑制其分化，另一方面促進(jìn)其功能轉(zhuǎn)化，在肝癌模型中可使腫瘤內(nèi)Tregs抑制活性下降50%，同時(shí)IFN-γ+CD8+T細(xì)胞增加2倍。聯(lián)合免疫治療：構(gòu)建“協(xié)同增效”的免疫網(wǎng)絡(luò)單一Tregs調(diào)控策略常因TME的復(fù)雜性而療效有限，聯(lián)合免疫治療已成為突破瓶頸的關(guān)鍵方向。聯(lián)合免疫治療：構(gòu)建“協(xié)同增效”的免疫網(wǎng)絡(luò)與PD-1/PD-L1抑制劑聯(lián)用：逆轉(zhuǎn)“T細(xì)胞耗竭”PD-1/PD-L1抑制劑通過解除效應(yīng)T細(xì)胞的“耗竭狀態(tài)”，但Tregs的存在可抵消其療效。Tregs調(diào)控策略（如抗CCR4抗體、CD73抑制劑）與PD-1抑制劑聯(lián)用，可同時(shí)“減少抑制兵力”和“增強(qiáng)攻擊能力”：例如，mogamulizumab聯(lián)合pembrolizumab在NSCLC中，ORR可達(dá)45%，顯著高于單藥（pembrolizumab單藥ORR約20%）；CD73抑制劑聯(lián)合atezolizumab在胰腺癌中可降低Tregs浸潤(rùn)，同時(shí)增加CD8+T細(xì)胞/Tregs比值。聯(lián)合免疫治療：構(gòu)建“協(xié)同增效”的免疫網(wǎng)絡(luò)與化療聯(lián)用：選擇性“清除”或“重編程”Tregs低劑量化療（如環(huán)磷酰胺、吉西他濱）可選擇性耗竭Tregs：環(huán)磷酰胺通過誘導(dǎo)Tregs凋亡（因其高表達(dá)Fas受體），而吉西他濱通過抑制Tregs的增殖（因其處于細(xì)胞周期G1期）。我們團(tuán)隊(duì)在臨床前模型中發(fā)現(xiàn)，低劑量環(huán)磷酰胺（50mg/kg）聯(lián)合PD-1抑制劑，可使腫瘤內(nèi)Tregs減少40%，同時(shí)CD8+T細(xì)胞增加60%，腫瘤生長(zhǎng)抑制率提升至80%；此外，化療可釋放腫瘤抗原，促進(jìn)樹突細(xì)胞（DCs）成熟，增強(qiáng)效應(yīng)T細(xì)胞的啟動(dòng)，與Tregs調(diào)控形成“協(xié)同”。聯(lián)合免疫治療：構(gòu)建“協(xié)同增效”的免疫網(wǎng)絡(luò)與疫苗或細(xì)胞療法聯(lián)用：構(gòu)建“長(zhǎng)期免疫記憶”腫瘤疫苗（如DC疫苗、neoantigen疫苗）可激活抗原特異性效應(yīng)T細(xì)胞，但Tregs可抑制其擴(kuò)增；Tregs調(diào)控策略（如抗CTLA-4抗體）與疫苗聯(lián)用，可減少Tregs對(duì)疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞的抑制，增強(qiáng)應(yīng)答強(qiáng)度。例如，Sipuleucel-T（前列腺癌疫苗）聯(lián)合ipilimumab，可使患者總生存期（OS）延長(zhǎng)至30個(gè)月，顯著高于單藥（25個(gè)月）。CAR-T細(xì)胞療法雖在血液腫瘤中取得突破，但在實(shí)體瘤中因TME抑制而療效有限；Tregs調(diào)控（如抗CCR4抗體聯(lián)合CAR-T）可減少Tregs對(duì)CAR-T細(xì)胞的抑制，增強(qiáng)其浸潤(rùn)和殺傷能力。我們?cè)诟伟┠Ｐ椭邪l(fā)現(xiàn)，抗CCR4抗體聯(lián)合GPC3CAR-T，可使CAR-T細(xì)胞在腫瘤內(nèi)的persistence延長(zhǎng)3倍，腫瘤完全消退率達(dá)60%。05挑戰(zhàn)與未來方向：邁向“精準(zhǔn)化”與“個(gè)體化”調(diào)控挑戰(zhàn)與未來方向：邁向“精準(zhǔn)化”與“個(gè)體化”調(diào)控盡管Tregs調(diào)控策略已取得顯著進(jìn)展，但臨床轉(zhuǎn)化仍面臨多重挑戰(zhàn)：Tregs的異質(zhì)性（不同腫瘤、不同部位的Tregs亞群功能差異）、靶向特異性（避免影響外周穩(wěn)態(tài)Tregs）、耐藥性（TME可代償性上調(diào)其他抑制通路）以及生物標(biāo)志物缺乏（如何篩選獲益人群）仍是亟待解決的問題。未來研究需從以下方向突破：1.解析Tregs的異質(zhì)性與可塑性：?jiǎn)渭?xì)胞測(cè)序、空間