醫(yī)療機(jī)構(gòu)無(wú)菌操作規(guī)程指南一、引言醫(yī)療機(jī)構(gòu)的無(wú)菌操作是預(yù)防醫(yī)院感染、保障診療安全的核心環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到患者預(yù)后、醫(yī)療質(zhì)量及醫(yī)院感染防控成效。規(guī)范、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臒o(wú)菌操作流程，既能降低手術(shù)切口感染、介入操作相關(guān)感染等風(fēng)險(xiǎn)，也能維護(hù)醫(yī)療團(tuán)隊(duì)的職業(yè)安全。本指南結(jié)合臨床實(shí)踐與感染防控標(biāo)準(zhǔn)，從環(huán)境、人員、器械、操作等維度梳理關(guān)鍵規(guī)程，為醫(yī)療機(jī)構(gòu)提供可落地的實(shí)操指引。二、環(huán)境準(zhǔn)備：構(gòu)建無(wú)菌操作的“安全場(chǎng)域”（一）區(qū)域劃分與功能定位醫(yī)療機(jī)構(gòu)需明確劃分清潔區(qū)、潛在污染區(qū)、污染區(qū)，并通過(guò)物理屏障（如緩沖間、傳遞窗）或空間布局實(shí)現(xiàn)功能隔離。例如，手術(shù)室的“限制區(qū)（無(wú)菌手術(shù)間）-半限制區(qū)（器械準(zhǔn)備間）-非限制區(qū)（更衣區(qū)）”三級(jí)分區(qū)，需嚴(yán)格遵循“從潔到污”的動(dòng)線設(shè)計(jì)，避免交叉污染。（二）清潔與消毒流程1.日常清潔：采用“濕式清潔”，使用含氯消毒劑（如500mg/L有效氯）或?qū)Ｓ们鍧崉础坝缮现料?、由里到外、由潔到污”順序擦拭物表（如治療臺(tái)、器械車），地面需先清掃再拖拭，遇血液、體液污染時(shí)，應(yīng)先用吸濕材料去除污染物，再用2000mg/L有效氯消毒劑消毒。2.終末消毒：診療操作結(jié)束后（如術(shù)后、感染患者使用后），需對(duì)環(huán)境進(jìn)行徹底消毒。以手術(shù)室為例，術(shù)后應(yīng)關(guān)閉手術(shù)間空調(diào)系統(tǒng)，采用紫外線照射（≥1.5W/m3，照射時(shí)間≥30分鐘）或過(guò)氧化氫霧化消毒，同時(shí)對(duì)手術(shù)床、無(wú)影燈手柄等高頻接觸表面進(jìn)行擦拭消毒。（三）空氣凈化管理Ⅰ類環(huán)境（如層流手術(shù)室）需維持百級(jí)/千級(jí)潔凈度，通過(guò)高效過(guò)濾器（HEPA）持續(xù)凈化空氣，開(kāi)機(jī)運(yùn)行時(shí)間應(yīng)提前30分鐘以上，術(shù)中保持正壓通風(fēng)；Ⅱ類環(huán)境（如普通病房治療室）可采用紫外線循環(huán)風(fēng)消毒機(jī)或動(dòng)態(tài)空氣消毒器，每日至少運(yùn)行2次，每次≥1小時(shí)，避免在有人狀態(tài)下使用紫外線直接照射。三、人員準(zhǔn)備：無(wú)菌操作的“第一防線”（一）著裝規(guī)范1.基礎(chǔ)著裝：進(jìn)入無(wú)菌操作區(qū)域（如手術(shù)室、導(dǎo)管室）前，需更換清潔的工作鞋、洗手衣，佩戴一次性帽子（覆蓋全部頭發(fā)）、醫(yī)用外科口罩（完全遮蓋口鼻，每4小時(shí)更換或污染時(shí)更換）。2.無(wú)菌操作著裝：實(shí)施侵入性操作（如手術(shù)、中心靜脈置管）時(shí)，需加穿無(wú)菌手術(shù)衣（采用閉合式穿法，避免手部觸碰衣外表面）、戴無(wú)菌手套（選擇無(wú)粉、滅菌手套，采用“無(wú)接觸式”戴手套法，防止手套污染），必要時(shí)佩戴護(hù)目鏡或面屏（如可能發(fā)生體液飛濺時(shí)）。（二）手衛(wèi)生管理嚴(yán)格遵循“兩前三后”原則（接觸患者前、清潔/無(wú)菌操作前，接觸患者后、接觸患者周圍環(huán)境后、接觸血液體液后），根據(jù)場(chǎng)景選擇洗手或手消毒：流動(dòng)水洗手：當(dāng)手部有可見(jiàn)污染時(shí)，使用洗手液（皂）按“七步洗手法”操作（內(nèi)、外、夾、弓、大、立、腕，每步≥15秒），流水沖凈后用一次性干手巾擦干；手消毒：手部無(wú)可見(jiàn)污染時(shí)，取足量速干手消毒劑（如含醇類或胍類制劑）揉搓至干燥，重點(diǎn)覆蓋指縫、指尖、腕部。四、器械與物品管理：從清洗到使用的全流程無(wú)菌保障（一）清洗與預(yù)處理使用后的重復(fù)使用器械（如手術(shù)器械、內(nèi)鏡）需立即進(jìn)行預(yù)處理：去除可見(jiàn)污染物（用酶液或中性清潔劑浸泡，避免干涸），然后通過(guò)“手工清洗+機(jī)械清洗”結(jié)合的方式處理：手工清洗：在流動(dòng)水下沖洗，用毛刷（專用、一用一消毒）去除管腔、齒槽等隱蔽部位的污垢；機(jī)械清洗：放入清洗消毒機(jī)，選擇適配的清洗程序（含酶清洗、漂洗、終末漂洗、消毒），確保器械表面無(wú)殘留有機(jī)物。（二）滅菌與監(jiān)測(cè)1.滅菌方法選擇：耐高溫、耐濕器械（如金屬手術(shù)器械）首選壓力蒸汽滅菌（溫度134℃，時(shí)間3分鐘；或121℃，時(shí)間15分鐘）；不耐熱器械（如光學(xué)內(nèi)鏡、導(dǎo)管）采用環(huán)氧乙烷滅菌（溫度50-60℃，濕度60%-80%，滅菌時(shí)間≥6小時(shí)）或低溫等離子滅菌（適用于電子器械，滅菌時(shí)間約55分鐘）；玻璃器皿、油劑類物品可選用干熱滅菌（溫度160℃，時(shí)間2小時(shí)）。2.滅菌監(jiān)測(cè)：物理監(jiān)測(cè)：記錄滅菌設(shè)備的溫度、壓力、時(shí)間參數(shù)，確保符合滅菌程序要求；化學(xué)監(jiān)測(cè)：每包器械放置化學(xué)指示卡（如壓力蒸汽滅菌用包內(nèi)卡、包外卡），滅菌后觀察顏色變化，確認(rèn)達(dá)到滅菌條件；生物監(jiān)測(cè)：每周進(jìn)行一次，將嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片放入滅菌包中心，滅菌后培養(yǎng)48小時(shí)，若無(wú)菌生長(zhǎng)則判定滅菌合格（植入物滅菌需每批次監(jiān)測(cè)）。（三）無(wú)菌物品儲(chǔ)存與發(fā)放儲(chǔ)存區(qū)需干燥、通風(fēng)、防塵，無(wú)菌物品應(yīng)存放于離地≥20cm、離墻≥5cm、離頂≥50cm的貨架，按“先進(jìn)先出”原則發(fā)放；無(wú)菌包外需標(biāo)注滅菌日期、失效期、滅菌批次、操作者等信息，有效期遵循：棉布包裝≤14天（潮濕地區(qū)≤7天），一次性紙塑包裝≤6個(gè)月，醫(yī)用無(wú)紡布包裝≤6個(gè)月。五、操作過(guò)程：無(wú)菌技術(shù)的“動(dòng)態(tài)執(zhí)行”（一）無(wú)菌區(qū)域維護(hù)操作前需確認(rèn)無(wú)菌臺(tái)/區(qū)域的有效性：無(wú)菌包在有效期內(nèi)、包裝無(wú)破損，鋪臺(tái)時(shí)采用“雙層鋪巾法”，上層無(wú)菌巾下垂邊緣≥30cm，操作過(guò)程中保持無(wú)菌巾干燥、無(wú)移動(dòng)；操作中，操作者身體（如肩部以下、腰部以上為無(wú)菌區(qū)）、無(wú)菌器械、物品的位置需固定，避免跨越無(wú)菌區(qū)（如手術(shù)時(shí)，器械護(hù)士的手臂不可低于腰部或伸向?qū)?cè)）。（二）無(wú)菌物品取用取用無(wú)菌物品時(shí)，需使用無(wú)菌持物鉗（干燥保存的持物鉗4小時(shí)更換，浸泡保存的持物鉗每周更換2次，液面需浸沒(méi)鉗端1/2-2/3），鉗端向下，不可觸及容器邊緣或無(wú)菌包外表面；打開(kāi)無(wú)菌溶液時(shí)，先消毒瓶塞，倒液時(shí)瓶簽朝向掌心，剩余溶液不可倒回原瓶，開(kāi)啟后有效期≤24小時(shí)（密閉保存的無(wú)菌溶液除外）。（三）感染防控細(xì)節(jié)對(duì)患者實(shí)施操作前，需確認(rèn)皮膚消毒效果：采用碘伏（有效碘含量0.5%-1%）或氯己定醇溶液，以穿刺/切口為中心，由內(nèi)向外螺旋式消毒，直徑≥15cm，待干后再行操作；術(shù)中若無(wú)菌手套破損、無(wú)菌巾被污染，需立即更換或加蓋無(wú)菌巾，不可繼續(xù)使用污染的器械/物品。六、監(jiān)測(cè)與質(zhì)量控制：無(wú)菌安全的“閉環(huán)管理”（一）過(guò)程監(jiān)測(cè)每日檢查滅菌設(shè)備的運(yùn)行參數(shù)（如壓力蒸汽滅菌器的壓力表、溫度傳感器），確保設(shè)備性能穩(wěn)定；定期抽查無(wú)菌物品的儲(chǔ)存環(huán)境（溫度、濕度），避免因環(huán)境超標(biāo)導(dǎo)致無(wú)菌包提前失效。（二）效果監(jiān)測(cè)每月對(duì)手衛(wèi)生依從性進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)觀察，統(tǒng)計(jì)洗手/手消毒的正確率（≥95%為達(dá)標(biāo)）；每季度開(kāi)展環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)：Ⅰ類環(huán)境空氣采樣（平皿暴露法，5分鐘），細(xì)菌菌落數(shù)≤10cfu/m3；物表采樣（5cm×5cm規(guī)格板），細(xì)菌菌落數(shù)≤5cfu/cm2。（三）不良事件處理若發(fā)生滅菌失?。ㄉ锉O(jiān)測(cè)陽(yáng)性），需立即召回同批次滅菌物品，追溯使用記錄，對(duì)已使用的器械/物品評(píng)估感染風(fēng)險(xiǎn)，必要時(shí)通知患者并采取補(bǔ)救措施；出現(xiàn)醫(yī)院感染聚集性事件（如同一手術(shù)團(tuán)隊(duì)短期內(nèi)發(fā)生2例以上同類感染），需啟動(dòng)溯源調(diào)查，排查無(wú)菌操作各環(huán)節(jié)的漏洞（如器械清洗不徹底、環(huán)境消毒不到位等）。七、應(yīng)急處理：突發(fā)污染的“快速響應(yīng)”（一）滅菌物品污染若發(fā)現(xiàn)無(wú)菌包破損、潮濕或過(guò)期，需立即停止使用，將物品重新清洗、滅菌；若已用于患者操作，需評(píng)估感染風(fēng)險(xiǎn)，建議患者完善感染相關(guān)檢查（如血常規(guī)、病原學(xué)檢測(cè)），并加強(qiáng)后續(xù)隨訪。（二）職業(yè)暴露處理當(dāng)操作者被污染器械刺傷/劃傷時(shí)，需立即擠出傷口血液，用肥皂水和流動(dòng)水沖洗，再用75%乙醇或碘伏消毒，報(bào)告院感科并評(píng)估暴露源（如患者是否為HBV、HIV感染者），必要時(shí)采取預(yù)防性用藥（如乙肝暴露后24小時(shí)內(nèi)注射乙肝免疫球蛋白）。（三）突發(fā)污染事件如手術(shù)中發(fā)生大量血液體液潑灑，需立即用吸水材料覆蓋，再用含氯消毒劑（2000mg/L）噴灑消毒，處理過(guò)程中需佩戴手套、口罩，避免直接接觸污染物，處理后徹底洗手并更換污染的防護(hù)用品。